CC BY
0
При л о ж ен и е 1
Саломашкина В. В.1, Пшеничникова О. С.1, Перина Ф. Г.2, Сурин В. Л.1 СЛУЧАЙ ТЯЖЕЛОЙ ФОРМЫ ГЕМОФИЛИИ А, ВЫЗВАННОЙ ВСТАВКОЙ МОБИЛЬНОГО ЭЛЕМЕНТА В ЭКЗОН 14 ГЕНА Е8
1ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, Москва, 2ОДКБ № 1, Екатеринбург
Введение. Патогенные варианты, вызывающие гемофилию А (ГА), в основном представляют собой уникальные события де по^о, чаще всего это однонуклеотидные замены. Случаи крупных инсер-ций при ГА редки, а случаев вставки мобильных элементов до сих пор не было описано.
Цель работы. Подробная характеристика мобильного элемента, встроившегося в кодирующую область гена^^.
Материалы и методы. ДНК выделяли из цельной крови стандартным фенол-хлороформным методом. Проверка распространённых инверсий 1^22 и проводилась с использованием ранее описанных праймеров (Bagna.ll еЪ а1., 2006; Bagna.ll еЪ а1., 2002). Секвенирование по Сэнгеру всех функционально важных участков гена Г8 проводили с использованием праймеров, разработанных ранее в нашей лаборатории (8а1отазЬк1па еЪ а1., 2022).
Результаты и обсуждение. Пациент с тяжелой формой ГА (Г'УН1:С<1%, отсутствие ингибиторов в анамнезе) был направлен в наш центр для генетической консультации. В ход поиска мутации у него не было обнаружено инверсий, однонуклеотидных вариантов или делеций, однако было замечено устойчивое отсутствие амплификации фрагмента 14-го экзона между позициями с.2940 и с.3183. После измененияусловий амплификации сучетом возможной вставки ГЦ-богатого фрагмента и при использовании ПЦР-системы для длинных фрагментов был амплифицирован экзон 14 гена целиком. Полученный фрагмент был примерно на 1500 п.н. длиннее, чем ожидалось. После секвенирования по Сэнгеру мы идентифицировали вставку человеческого ретротранспозона 81МЕ-У^ТК.-А1и (ЭУА) семейства
Е между нуклеотидами с.3117 и с. 3118, фланкированную дупликацией целевой последовательности длиной 15 п.н. (нуклеотиды с.3103—3117). Точную длину вставленного мобильного элемента невозможно определить из-за сложной повторяющейся структуры ЭУА и длинного поли-А-хвоста, которые препятствуют секвенированию. Мобильные элементы ДНК распространены по всему геному человека и обычно их называют «мусорной» ДНК. В тех случаях, когда они встраиваются в кодирующие области, они приводят к большим делециям, сдвигу рамки считывания, преждевременной терминации трансляции или аберрантному сплайсингу (см. синдром Барде — Бидля, синдром Линча, нейрофиброматоз типа 1 и т. д.). Есть сообщение о вставке 8УА_Г в экзон гена^-Р, вызвавшей гемофилию В, однако до сих пор не было сообщений о подобных событиях для гена ДО. В нашем случае 8УА_Е был вставлен в антисмысловой ориентации — характерный хвост — поли-Т-тракт, расположенный за позицией с.3117, содержит как минимум 54 последовательных тимина. Вставка вырожденного мобильного элемента такой длины неизбежно должна приводить к тяжелой форме ГА, что соответствует клинической картине пациента. Ни один из известных ЭУА элементов в геноме человека не был полностью идентичен описываемой нами вставке, однако в двух ЭУА, расположенных на хромосомах 12 и 22, гомологичные фрагменты отличались от нее на один нуклеотид. Таким образом, мы не можем точно установить, из какой части генома происходит мобильный элемент, вставившийся в экзон 14 гена .ДО.
Заключение. Впервые обнаружена и подробно охарактеризована инсерция мобильного элемента ЭУА в кодирующую последовательность гена Г8, приводящая к тяжелой форме гемофилии А.
Самойлова Е. В., Миронова Т. П., Давыдкин И. Л., Наумова К. В., Степанова Т. Ю., Кривова С. П. ВЗАИМОСВЯЗЬ ГЕНОТИПОВ Ьу8198А8п ЕОШ г85370 И УРОВНЯ ЭНДОТЕЛИНА-1 У БОЛЬНЫХ МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМОЙ
ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России
Введение. Эндотелин-1 (ЭТ-1) — мощный сосудосуживающий пептид, продуцируемый эндотелиальными клетками. Следствием его повышенной продукции может стать развитие окислительного стресса и воспалительного процесса в сосудистой стенке с последующим развитием эндотелиальной дисфункции. Эндотелиальная дисфункция и сосудистый окислительный стресс — предикторы прогрессирования атеросклероза и связаны с повышением частоты сердечно-сосудистых событий. В связи с вышесказанным становится актуальным изучение генетической предрасположенности кувеличе-нию сывороточного ЭТ-1. Известно о нескольких единичных нуклео-тидных полиморфизмах гена ЭТ-1, но только два из них считаются наиболее тесно связанным с патофизиологией сердечно-сосудистых заболеваний — rs5370 и rsl0478694. rs5370 содержит замену (G/T) и (Lys/Asn) в кодоне 198 экзона 5 ЭТ-1. Генотип GG — дикий тип, ТТ — мутантный тип и GT -гетерозигота.
Цель работы. Оценить влияние генотипов Lysl98Asn EDN1 rs5370 на уровень сывороточного ЭТ-1 у пациентов с впервые выявленной множественной миеломой (ММ) до начала противоопухолевой терапии.
Материалы и методы. В проспективное исследование были включены 42 пациента с MM IIA стадии по Durie-Salmon в сочетании с артериальной гипертензией (АГ) 1 степени, образовавшие исследуемую группу и 44 пациента с АГ 1 степени, вошедших в контрольную группу, сопоставимых по полу и возрасту. Проводилась оценка содержания сывороточного ЭТ-1 и однонуклеотидного полиморфизма Lysl98Asn EDN1 rs5370 на основании данных метода ИФА и ПЦР Исследования проводили с помощью лабораторного набора «СЕА482Ни, Cloud-Clone Corp.» (США) и «SNP-Экспресс-Кардиогенетика» (Россия), соответственно.
Протокол исследования одобрен Этическим комитетом ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России. У всех пациентов получено письменное информированное согласие.
Результаты и обсуждение. При анализе концентрации сывороточного ЭТ-1 в сравниваемых группах, были установлены существенные различия 0,001). В основной группе концентрация ЭТ-1 составила 305,86 ± 90,21 пг/мл [95%; 276,03 — 329,68], в то время как в контрольной группе данный параметр составил 227,21 ± 87,85 пг/мл [95%; 200,81 — 253,51], что значительно ближе к референсным значениям (8,5-45,1 пг/мл). В результате анализа генотипов исследуемых групп на наличие полиморфизма в гене ЭТ-1 (Еуэ^вАэп ЕОМ1 гэ5370) были выявлены статистически значимые различия (^=0,040). В исследуемой группе распределение генотипов было следующим: дикий тип составил 14,29%, мутантный тип-28,57%, гетерозигота — 57,14%. В то время как в контрольной группе оно выглядело иначе: 38,64%, 25,00% и 36,36%, соответственно. При анализе зависимости
Исследуемая группа
Контрольная группа
25%
' LysLys ■ LysAsn ■ AsnAsn
i LysLys ■ LysAsn ■ AsnAsn
Рис. Концентрация ЭТ-1 в зависимости от генотипа Lysl98Asn EDN1 rs5370.
| ГЕМАТОЛОГИЯ ИТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF НЕМАТОLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2024; ТОМ69; №2 |
сывороточной концентрации ЭТ-1 от генотипа Lysl98Asn EDNI rs5370 были выявлены статистически значимые различия (^=0,00018). Дикому типу соответствовала концентрация ЭТ-1 204,77 ± 91,05 пг/мл [95%; 162,15 - 247,39], мутантному типу - 320,94 ± 83,84 пг/мл [95%; 277,33 - 356,54] игетерозиготе - 261,02 ± 90,73 [95%; 234,13 - 290,92].
Заключение. У больных ММ наблюдается более высокая концентрация сывороточного ЭТ-1 при сравнении с пациентами без ММ, что соответствует превалированию мутантного и гетерозиготного типа Lysl98Asn EDNI rs5370.
Таблица 1. Концентрации сывороточного ЭТ-1
Категория Исследуемаягруппа, п=42 Контрольная группа, п=44 Р
ЭТ-1, пг/мл
M±SD 305,86 ± 90,21 22^21 ±87,85 <0,001*
95%ДИ 276,03-329,68 200,81-253,51
Примечание. Количественные показатели, имеющие нормальное распределение, описывались с помощью сред-нихарифметическихвеличин [М] и стандартных отклонений (Бй), границ 95%доверительного интервала (95% ДИ), р — значимостьотличий в показателяхмежду пациентами в исследуемых группах, ЭТ-1 — эндотелин-1. * — различия показателей статистически значимы (р<0,05)
Таблица 2. Распределение генотипов Lys198Asn EDNI rs.5370 в исследуемых группах
Показатель Категории Наличие ММ Р
Контрольная группа, п=44 Исследуемая группа, п=42
Lysl98Asn EDNI rs5370 LysLys 17 (38,64] 6(14,29] 0,040*
LysAsn 16(36,36] 24(5^14]
AsnAsn 11 (25,00] 12 (28,57]
* — различия показателей статистически значимы (р<0,05).
Таблица 3. Концентрация ЭТ-1 в зависимости от генотипа Lys198Asn EDNI rs5370
Показатель Категории Эндотелин-1 (пг/мл) P
M±SD 95%ДИ
Lysl98Asn EDNI rs5370 LysLys 204,77±91,05 162,15-247,39 0,00018* pAsnAsn - LysAsn=0,027000 pAsnAsn - LysLys=0,001000
LysAsn 261,02 ± 90,73 234,13-290,92
AsnAsn 320,94 ± 83,84 27^33-356,54
* — различия показателей статистически значимы (р<0,05).
Санникова С. С., Савинова М. Т., Дресвянникова Э. Э.
ОПЫТ ОДНОГО ЦЕНТРА: ТЕРАПИЯ ПАЦИЕНТОВ С РЕФРАКТЕРНО-РЕЦИДИВИРУЮЩЕЙ ФОРМОЙ ОМЛ КОМБИНАЦИЕЙ
ВЕНЕТОКЛАКСА С ГИПОМЕТИЛИРУЮЩИМИ АГЕНТАМИ
ГАУЗ ГКБ 16
Введение. Прогноз рефрактерно-рецидивирующих формы ОМЛ является наиболее неблагоприятным, и лечение представляет сложную задачу, предпочтительной опцией терапией является проведение высокодозных режимов химиотерапии и дальнейшее проведение алло-ТГСК. Однако не для каждого пациента возможно проведение агрессивных схем химиотерапии, учитывая возраст и ко-морбидный статус пациента. Проведенные исследования (VIALE-C, VIALE-A и другие) показали возможность применения комбинации Венетоклакса — ингибитора BCL-2 с ГМА/НДЦ не только у пожилых/коморбидных пациентов с впервые выявленным ОМЛ, но и со вторичным ОМЛ и неблагоприятным цитогенетическим риском. Данные заключения говорят о возможности применения опции терапии — сочетание Венетоклакса с ГМА и НДЦ, для пациентов с рефрактерно-рецидивирующими формами ОМЛ при невозможности проведения высокодозных режимов химиотерапии, и имеют подтверждение в нескольких проведенных исследованиях.
Исходы
Рис. 1. Пациент ОМЛ из МДС РАИБ (67 лет) моносомия 7, ранний рецидив, смерть; 1 пациент ОМЛ из МДС РАИБ (78 лет) рефрактерность, проведена индукция 28 дней), 1 пациент очень ранний рецидив ОМЛ М-5 вариант (72 г.) проведен курс индукции 21 день, 1 пациент поздний рецидив ОМЛ М1 вариант, получает терапию сО.5.2023 г. (69 лет), рецидив 2 от 24.10.23 г. на МДЦВен 2 пациента ОМЛ, Ранний рецидив после ал-ло-ТГСК (65 лет), 1 пациент поздний рецидив ОМЛ, Комплексный карио-тип, единственный кандидат на алло-ТГСК (20 лет).
Цель работы. Ретроспективный анализ эффективности и переносимости комбинированной терапии гипометилирующим агентом и ве-нетоклаксомурефрактерно-рецидивирующих пациентов с ОМЛ.
Материалы и методы. Проведена схема терапии комбинации Венетоклакса с ГМА, наблюдение и ретроспективный анализ 7 пациентов с рефрактерно-рецидивирующими формами ОМЛ. Основная доля пациентов составляла от 60 до 70 лет — 42,9% (3 пациента), младше 60 лет и от 70 до 80 лет — равная доля 28,55% (по 2 пациента). Варианты ОМЛ у данной группы пациентов представлены следующими формами — ОМЛ, трансформированный из МДС — 28,6% (2 пациента), ОМЛ, рецидив ранний — 14,3% (1 пациент); ранний рецидив ОМЛ, после проведенной алло-ТГСК — 28,6% (2 пациента); ОМЛ, поздний рецидив — 28,6% (2 пациента). Цитогенетические и молекулярные поломки, выявленные у пациентов — 100% пациентов ГЬТ-З негативные, кариотип 47 ХУ, ¿е1(20)(^12) — 14,3%, моносомия 7 — 14,3%, комплексный кариотип — 14,3%, нормальный кариотип — 28,6%, нетданных — 28,6%.
Результаты и обсуждение. Полная ремиссия — 42,9% (3 пациента), у данных пациентов после достижения ремиссии трансфу-зионная независимость; полная ремиссия с неполным гематологическим восстановлением — 28,6% (2 пациента): 1 пациент нуждается в заместительной трансфузионной терапии после 2 курсов, 1 пациент — приживление донорского трансплантата; нет данных — 14,3%
Таблица 1
Возраст Количество
Менее 60 лет 2
От 60 до 70 3
От 70до80 лет 2
Таблица 2
Цитогенетическое и молекулярное исследование Количество
Кариотип 4^ХУЛ1(20](Ч12] 1
моносомия 7 1
Нетданных 2
Комплексный кариотип 1
Нормальный кариотип 2
ЕИЗ+ 0
Вариант ОМЛ Количество
ОМЛ/МДС 2
ОМЛ 4
Ранний рецидив ОМЛ 1
Поздний рецидив ОМЛ 2
Ранний рецидив ОМЛ после алло-ТГСК 2
Ранний рецидив ОМЛ/МДС 1
Рефрактерный ОМЛ/МДС 1
