CC BY
17
С in о м а 11 г о л о г i я дишячого в i к у
УДК 616. 314.18-002.2-07 О. В. Шешукова
СП0С1Б Р03ШИРЕН01 Д1АГНОСТИКИ ХРОН1ЧНОГО ПЕРЮДОНТИТУ ТИМЧАСОВИХ ЗУБ1В
ВДНЗ Укрэши «Укра'/нська медична стоматологЫна академ 'ш»
1нфекц1йна етюлопя хвороб перюдонта на сучасному етап! загальновизнана [3]. MiKpo6Hi па-родонтопатогени, зокрема анае-робж мкрооргатзми {Streptococcus sanguis, Streptococcus milleri, Fusobacterium spp., Prevotella spp. , Actinomyces spp., Porphyromonas gingivalis, P. endodontalis, Prevotella intermedia.. Treponema denticoia) , BiflirpaiOTb значну роль у розвитку запалення пер1одонта, призводять до перебудови неспецифмноТ та специф!чноТ реактивное^ оргажз-му при деяких формах запалення i, в1дпов(дно, до розвитку Р13НИХ тканинних реакц1й у nepioflomi [2, 6, 8].
Hauii попередн! дошдження дозволили з'ясувати, що характер мкробноТ ¡нвази при перюдонти-тах тимчасових зуб!в безпосеред-ньо впливае на стан nepianka/ibHoT грануляц1ЙноТ тканини, яка форму-еться у вщповщь на д1ю певного спектра м1крооргажзм!в [4, 7, 9] та веде до ¡нфтьтрац» прикореневоТ грануляцтноТ тканини основними субпопуляц1ями л!мфоципв i ден-дритних клггин [5]. Визначення цих особливостей патогенезу захво-рювання важливе для фомування остаточного д!агнозу, а значить, i для побудови стратеги лкування.
Мета досл!дження - розроби-ти cnociö диагностики xpoHi4«oro перюдонтиту тимчасових зуб!в шляхом установления ¡мунних вщ-хилень ¡з боку основних ¡муноци-TiB, локал13ованих у прикореневм грануляцмжй тканин!, визначення етюлопчних мкробних чинник!в - пародонтопатогенних мкроор-гажзм!в, що е необхщною умовою для устшноТ ерадикацн ¡нфекцп.
Матерели i методи досл!-джекня
Для досягнення поставлено! мети i вир)шення завдань проведено кл!жчж, рентгенолопчн!, ¡му-нопстолопчж та мкробюлопчж досшдження за доломогою полЬ меразноТланцюговоТ реакци (ПЛР). Обстежено 35 д1тей bIkom вщ 2 до 10 pOKiB ¡з захворюваннями nepio-донта тимчасових зуб|в, як? зверта-лися по допомогу в дитячу стомз-толопчну полклшку м, Полтави. Попереджй Д!агноз установлю-вали на шдстав! з'ясування скарг, анамнезу, результате об'ективного обстеження, рентгенографп та достижения бюлтату грануляцмноТ тканини, яка локалЬувалася в дн лянц! деструкцм та видалялася разом ¡3 причинним зубом. Дшгноз визначали за мЬкнародною класи-ф!кац1ею стоматолопчних хвороб на основ! МКХ-10, залучаючи кла-сифкац1ю перюдонтилв у д1тей за Т. Ф. Виноградовою (1968).
1мунопстолопчж доетдження основних ¡муноцит!в здмснювали на тканинних крюстатних зрЬах тов-щиною 5-7 мкм за допомогою мо-ноклональних антитш (мкАТ) проти HLA-DR-, CD3-, CD4-, CD8-, CD20-антиген!в ¡муноцитге («Сорбент», Ро-сш) для визначення антигенпрезен-туючих дендритних Ытин (HLA-DR" ДК), загальноТ Т-кл!тинноУ популяцп (CD3"), ТЧгпмфоцитш- хелпер1в (CD4*) , цитотоксичних лшфоцилв (CD8*) i В-кл1тин (CD20*). В1дпов1дно оцшю-вали основ™ юитини-представники ¡ндуктивноТ та ефекторноТ ланок ¡мунтету [1]. 1мунопстох1мнним методом були доЫджеж прикоре-Hesi грануляцГ/ (38 бюптатш, а з кож-ними мкАИ - анти-HLA-DR, CD3, CD4, CD8, CD20 усього було дост-джено &льше 190 препаралв).
Для як!СНОГО визначення паро-донтопатогенних м)кроорган1зм1в у кореневих каналах тимчасових моляров методом ПЛР проводили В1дб|р матер1алу з каналш за допомогою стерильного лаперово-го ендодонтичного штифта. Пот!м переносили штифт до епендорф1в 31 стерильним забуференим ф1з1о-лог1чним розчином для транспор-тування i збер1гання BifliöpaHoro матер1алу. У раз! нерозкритоТ пуль-повоТ камери пробу з кореневого каналу отримували п(сля видален-ня зуб!в з ап1кального отвору.
Отримаж проби з кореневих каналш протягом 1 год. при температур! 2-4°С (у repMOci з кригою) транспортували в лаборатор1ю, де проводили ПЛР для визначення ДНК 5 основних пародонто-патогенних м!крооргашзмш (Porphyromonas gingivaüs, Prevotella intermedia, Bacteroides forsythus, Treponema denticoia, Actinomyces actinomycetemcomitans) за допомогою комерфйного набору ре-агенлв для яюсного визначення ДНК (ООО НПФ „ГЕНТЕХ") за стандартною методикою [1]. За результатами доонджень патенту з хро-н1чним перюдонтитом тимчасових зуб!в визначають метод терапп. Для визначення д!евосп проведе-ного л!кування проводять повтор-не ПЛР-досл(дження на 5 основних перюдонтопатоген!в безпосеред-ньо перед поспйною обтурац1ею кореневих канал1в.
Для визначення зв'язку м!ж на-явн1стю того чи ¡ншого MiKpoopra-н1зму в кореневому канал), визна-чених методом ПЛР, та наявжстю ¡нфщьтрацм ¡мунними кл1тинами був проведений непараметричний кореляцтний статистичний анал1з ¡з визначенням коефщкнлв Kendall Tau i Gamma.
© УКРАТНСЬКИЙ СТОМАТОЛОГМНИЙ АЛЬМАНАХ №3 2010 73
Стоматология дитячого вгку
Результати досл!дження
За ступенями активное» кариесу в обстежених Д1тей видьляли: „компенсовану форму" - в 15, 8+4, 2% випадю'в; „субкомпенсовану" -в 39, 5+5, 6 %; „декомпенсовану"
- в 44, 7+5, 7%, тобто переважма 61яьш1сть обстежених д!тей мали юлька уражених KapiecoM та його ускладненнями тимчасових зуб!в, що в такому вщ! опосередковано св1дчить про низьку резистентжсть организму. Стан слизовоТ оболонки в д1лянц1 причинного зуба показав наявжеть ппереми з ценозом i пастозжстю - в 52, 6+5, 7% ви-падюв; наявжеть абсцесу, нориць ¡з видменням ексудату - в 31, 6+5, 3%.
При визначенж мкробного продлю в 10 oeiö (28, 5+7. 6%) не було виявлено жодного з паро-донтопатогежв, що визначзлися, Можливо, в ряд] випадюв хрожч-ний перюдонтит тимчасових зу&в мае асептичний характер або ви-кликаеться ¡ншим профилем мкро-оргажзмт.
По одному з Ыфекцгйних агентов виявлено у 12 {34, 3+8, 0%) випад-ках ¡з 35: серед них Р. intermedia
- 2 (5, 7+3, 9%) , Т. denticola та В. forsythus - по 3 випадки (8, б± 4, 7% BiflnoeiflHO) i Р. gingivalis - 4 (11, 4±5, 3%) випадюв. Даж нашого доел ¡дження св!дчать, що Р. gingivalis досить часто зустрмався окремо в(д ¡нших збудникш, що узгоджу-еться з ведомостями про його ви-соку вфулентжеть.
Асоц1ац1ю збудниюв (бтьше 1 пародонтопатогена) визначено в 13 (37, 1±5, 7%) пац!ент1в, причо-му А. actinomycetemcomitans ви-явлений винятково в поеднанж з ¡ншими збудниками (8 випадюв
- 22, 8+7, 09%}. В|ДП0В1ДН0, в поеднанж з В. forsythus - у 2-х пац!ент!в; у решт! випадюв за наяаносп А. actinomycetemcomitans виявляли
8 KtJoci/lii ССрС^Ц ПИЛ,
по 2 рази - ¡з В. forsythus i Т. denticola та з В. forsythus, Т. denticola й Р. intermedia; по 1 разу - В. forsythus i Р. intermedia та Р. intermedia i Т. denticola. А. actinomycetemcomitans у поеднанж з Р. gingivalis не зу-стр1чався жодного разу. Отже,
найчаепше виявили acoqiauiio А. actinomycetemcomitans з В. forsythus, яю були разом у 7 випадках (53, 8+8, 4%). Ще одна з acou,iau,iii - це поеднання Р. intermedia та 6. forsythus, виявлене в 4-х ¡з 13 випадюв (30,7+7,8%). I в 1 випадку ми видмили асоцющю Р. intermedia з Т. denticola.
За результатами дошдження з'ясовано, що пародонтопатогенж асощацп, до складу яких входить В. forsythus, е найчаепшими при хрожчному перюдонтил тимчасових зу&в (виявлеж в 11 з 13 випадюв). Про значку етюлопчну роль Т. denticola св!дчить и наявнкть у склад! асоц1ац|'1' в б випадках (46, 2+13, 8%).
Пщсумовуючи, можна зробити висновок, що при хрожчжй ¡нфек-ци кореневих канал!в найчаепше виявлявся В. forsythus - 40+8, 2% (3 випадки ~ при моношфекцп кореневих канал!в i 11 з 13 випадюв бактер1альних асоц(ац!Й). На другому М1сц| - Т. denticola, яка ви-явлена у 25, 7+7, 4% досшджень. Кореляц;йний анализ пгдтвердив припущення, що для хрошчного перюдонтиту тимчасових зубш характерна мкробна асоц1ац1я з на-явжетю В. forsythus. Так, позитивна к0реляи,!я встановлена м!ж Bacte-roides forsythus i Prevotella intermedia (Kendall Tau= 0, 410792, p=0, 040709).
Ми встановили позитиеж ко-релящйж зв'язки для В. forsythus i CD3+ клггинно!' популяц» в гра-нуляцшх (Kendall Tau= 0, 458131, р=0, 022471) та для Р. gingivalis i CD20+ В-кл1тин, зосереджених локально (Kendall Tau=0, 421637, р=0, 035684).
За цими даними ми можемо простежити переважано CD3* oi-тиннулокальну реакц!ю при ¡нфек-цм В. forsythus i CD20* В-кл1гинну -при Р. gingivalis. Щодо Р. gingivalis,
ТО ВщОМО, ЩС цбИ 3 буДНИ К ЗДЗТИИИ
локально модулювати профиль iMyHHOl'BiflnOBifli [10].
KpiM того, в нашому доапдженж ми отримали найвиразжшу CD3"-кл1тинну ¡нф1льтрац1ю при ¡нфекцц кореневих канал1в В. forsythus, що дозволяе зробити припущення,
що цей мкрооргажзм, очевидно, найб!льшою м1рою локально ¡н-дукуе Т-кл1тинно-опосередковану Biflnoßiflb, що cnocTepira€Tbcs у ви-гляд) СОЗ+ Т-кл1тинноУ шф|'льтраци i, зокремз, ¡нфшьтраци CD8+ цито-токсичними лимфоцитами грануля-ц!йн01"тканини.
Негативн! зв'язки виявлеж м!ж Р. intermedia i CD3* кл!тинною ¡нф!ль-трац1ею (Kendall Tau= - 0, 416667, р=0, 037918) , що може вдобра-жати жший, н\ж CD3* опосеред-кований, тип ¡мунноТ реакци на ¡нфекц)ю Р. intermedia. 1мов|рно, що цей м(кроорган13м зокрема ви-явив здатжеть диерегулювати або пригнгчувати саме CD3* кл1тини in locus morbi при доанджуважй патологи. Ц1 результати демонстру-ють переважно Т-кл1тинну ¡мунну реакц1ю, яка може розвиватися в тканинах пародонта у в1дповщь на пародонтопатогенну ¡нфекц!ю, i в(дображають р(зн! процеси при р1зних хворобах перюдонта.
За результатами досл1дження ми д|йшли висновку про доц!льн1сть ззстосування способу дгзгностики хрон!чних nepi0A0HTHTiB шляхом установления ¡мунних в!дхилень 1з боку основних ¡муноцилв, ло-кал1зованих у прикоренев(й гра-нуляц1йн!й тканин!, та визначення елолог!чних м!кробних чинник1в, зокрема пародонтопатогежв.
Для ¡люстра uii застосування способу наводимо кглька прикла-Д1в.
Приклад 1. Дитин( 5 роюв установлено д1агноз „декомленсована форма Kapiecy, загострення хрожч-ного гранулюючого пер1одонтиту 84" за результатами загальноприй-нятих клжко-шетрументальних MeTOfliß. Kapio3Ha порожнина 84 не слолучаеться з порожниною зуба. На рентген-зжмку: прогре-суюча резорбц(Я корешв, вогнище деструкцм' альвеоли локал1зова-
riG о ^у'р'У^Зи^], KOWHoKTHS
пластина зачатка постойного зуба залучена в процес. Видалено зуб тд 81дпов1дним знеболюванням, отримано бюптат прикореневих грануляцм розм1ром 2-3 мм. Bifli-брано пробу для ПЛР-д!агностики з верх1вки кореневого каналу ви-
74 ©УКРАТНСЬКИЙ СТОМАТОЛОГ1ЧИИЙ АЛЬМАНАХ №3 2010
CmoMamoAozin дитячого ßiuy
далекого зуба. ПЛР-д1агностика показала наявжсть 2-х пародон-топатогенних мкрооргажзмт: Р. intermedia та В. forsythus. Резуль-тати ¡MyH0ricT0xiMi4H0r0 доетдження показали жтенсивну ¡н-фтьтрац(ю HLA-DR*, CD3* та CD8* осинами i noMipну - CD4+ та CD204.
Приклад 2. У пацкнтки М. , б роюв, установлено дгёгноз „де-компенсована форма Kapiecy, за-гострення хрожчного гранулюю-чого перюдонтиту 84. Хрошчний гранулюючий перюдонтит 74" за результатами загальноприй-нятих клтко-Ыструментальних метод'ш. На рентген-зшмку 84: прогресуюча резорбц'/я корен/в, вогмище деструкцм альвеол я рноТ юстки з неч)ткими межами, локаль зоване в дишнц) фуркацита щ1чно-медшьного корен я; компактна пластина зачатка поспйного зуба резорбована на 1 мм у дтянц1
верх!вки щ1чно-мед1ального ко-реня. Видалено зуб 84 тд в1дпо-вщним знеболюванням, отримано бюптат прикореневих грануляцж дтметром 2-3 мм. Вобрано пробу для ПЛР-д¡агностики з BepxiB-ки кореневого каналу видаленого зуба. ПЛР-д ("агностика показала наявжсть 2-х пародонтопатоген-них м1крооргажзм(в: P. intermedia та В. forsythus. Результати ¡мунопс-тохшчного доетдження показали ¡нтенсивну ¡нфгпьтрац1ю HLA-DR+, CD3+ та CD8* кл^инами i пом1рну - CD4* та CD20* . У наступне в1д-
в!дування ) на основ1 отриманих результате проведено лкування хрожчного перюдонтиту 74 за схемою: розкриття порожнини зуба, мехажчна й медикаментозна об-робка розчином хлоргексидину б!глюконату 0, 05%, обробка кореневих канал!в, тимчасоаа обтура-Ц|я кореневих канал ¡в „ЭндАсепт" („Владмива", Рооя) на 5 д1б пц герметичну пов'язку. Поспйнэ об-турацж кореневих канал'т евгено-ловою пастою, ¡золююча прокладка - „Адгезор", пломба - „Керамфт Моляр".
Висновки.
Отже, наведен! результати дослщжень евщчать про можливнггь розширення шформативно! д¿агностики па-родонтопатогенних мшрооргашзм1в та локальних 1муы-них розлад!в in locus morbid за застосувания запропо-нованого способу, що е необх1дною умовою для ycniiiiHoi ерадикацп тфекцп та проф1лактики.
6. Gomes B. P. F. A. Association of endodontic symptoms and signs with particular combinations of specific bacteria / B. P. F. A. Gomes, J. D. Lilley, D. B. Drucker// Int. Endod. J. -1996. -Vol. 29. -P. 69-75.
7. Clinical, microbiological and immunological features of subjects with destructive periodontal diseases / A. 0. Haffajee, S. S. Socransky, J. L. Dzink [et al.] // J. Clin. Periodontal. -1988. -Vol. 15. -P. 240-246.
8. Coldero L. G. Reduction in intracanal bacteria during root canal preparation with and without apical enlargement /L G. Coldero, S. Mchung, D, MacKenzie, W. P. Saunders// Int. Endod. J. -2002. -Vol. 35, N5. -P. 437-446.
9. van Winkelhoff A. J. Porphyromonas gingivalis, Bacteroides forsythus and other putative periodontal pathogens in subjects with and without periodontal destruction / A. J. van Winkelhoff, B. G. Loos, W. A. van der Reijden, U. van der Velden // J. Clin. Periodontol. -2002. -Vol. 29, N11.-P. 1023-1028.
10. Yun P. L. Hydrolysis of interleukin-12 by Porphiromonas gingivalis major cysteine proteinases may affect local gamma interferon accumulation and the Thl or Th2 T-cell phenotype in periodontitis / P. L. Yun, A. A. Decarlo, C. Collyer, N. Hunter // Infect. Immunol. -2001. -Vol. 69, N9. -P. 5650-5660.
CmammfJ Hadiuui/ia 12.04. 2010 p.
Л|тература
1. Методи клЫнних та експериментальних дост-джень в медициж / [Л. В. Беркало, О. В. Бобович, Н. О. Боброва та ¡н.]; за ред. I. П. Кайдашева - Полтава, 2003. -320 с.
2. Царев В. Н. Применение иммуноферментно-го анализа для диагностики анаэробной инфекции челюстно-лицевой области / В. Н. Царев, Н. Е. Ястребова, Н. П. Ванеева, А. И. Калинин // Стоматология. -1995. -№1. -С. 38-40.
3. Этиопатогенетические факторы развития воспалительных заболеваний периодонта / [В. Н. Царев, Р. В. Ушаков, Е. Я. Ясникова, А. В. Митронин] // Стоматолог. -2005. -N86. -С. 16-23.
4. Шешукова О. В. Зв'язок мЬк наявжетю пародон-топатогенноТ ¡нфекцм у кореневих каналах \ пстоло-пчними особливостями грануляц(йно'|' тканини при хрожчному перюдонтит) тимчасових зу61в / О. В. Шешукова, I. П. Кайдашев, В. I. Шинкевич //Вкник проблем бюлогГГ I медициии. -2006. -№2. -С. 413-416.
5. Шешукова О. В. Характеристика ¡мунних кл1тин прикореневоТ грануляЫйноТ тканини при перюдонти-тах тимчасових зубш у д1тей / О. В. Шешукова //Весник проблем бюлоги I медицини. -2009. -№2. -С. 208-211
©УКРА1НСЫСИЙ СТОМАТОЛОПЧНИЙ АЛЬМАНАХ №3 2010 75
CmoMamoAoein дишячого в(ку
Резюме
В статье представлено применение способа диагностики хронических периодонтитов временных зубов путем регистрации иммунных отклонений со стороны основных иммуноцитов, локализованных в околокореневой грануляционной ткани, определения этиологических микробных факторов, особенно опасных в аспекте развития одонтогенных осложнений. Применение способа даёт возможность достигнуть расширенной информативной диагностики пародонтопатогенных микроорганизмов и является необходимым условием для успешной эрадикации инфекции, профилактики воспалительных заболеваний тканей пародонта и мягких тканей челюсгно-лицевой области у детей.
Ключевые слова: периодонтиты временных зубов, иммуноциты, пародонтопатогены.
Summary
The application of diagnostics method of chronic periodontitis of temporary teeth is presented in the article. It is conducted by registration of immune deviations on the basis of the main immunocytes localized in periapical granular tissue, and determination of etiological microbe factors especially dangerous in the development of odontogenic complications.
The application of the suggested method allows attaining wide informative diagnostics of par-odontopathogenic microorganisms that is required for successful infection eradication, and prevention of inflammatory diseases of parodentium tissues and soft tissues of maxillo-facial area at children.
Key words: periodontitis of temporary teeth, immunocytes, parodontopathogens.
76
© УКРА'1'НСЬКИЙ СТОМАТОАОПЧНИЙ АЛЬМАНАХ №3 2010
