CC BY
29
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Аутоиммунные заболевания Autoimmune diseases
связи с цитокинами весьма немногочисленны. Исследования в этом направлении целесообразны как с точки зрения уточнения механизмов развития кожных и системных форм красной волчанки, так и в практическом отношении в плане дифференциации этих заболеваний.
Цель и задачи. Изучение кислородзависимых и кис-лороднезависимых функций моноцитов (Мн), а также их связей с провоспалительными цитокинами у больных ДКВ и СКВ.
Материалы и методы. Обследован 121 человек в возрасте от 20 до 60 лет (54 больных СКВ, 34 — ДКВ, 33 здоровых лица). Исследовали кислородзависимые функции Мн — спонтанную и индуцированную хемилюминесцен-цию (ХЛ), кислороднезависимый метаболизм — кислую фосфатазу (КФ) и катионные белки (КБ) спектрофото-метрическими методами, активность лизосом с помощью лизосомального теста (ЛТ), уровень ДНК микроцитоф-люориметрическим методом, провоспалительные сывороточные цитокины (ГИр, Ш-6, ТОТа) иммунофер-ментным методом.
Результаты. Только при СКВ констатировано увеличение спонтанной продукции активных форм кислорода в сХЛ Мн (2,1±1,8 х 104 имп/мин, а при ДКВ и в контроле — соответственно 1,1±1,0 и 0,7±0,6 х 104 имп/мин) на фоне уменьшения индуцированной продукции (до 1,3±1,36 х 104 имп/мин) со снижением резервных функций Мн (0,8±0,8) по сравнению с данными больных ДКВ (2,5±4,8) и здоровых лиц (2,5±1,8). Установлено достоверное повышение (р < 0,05) спонтанной люми-нолзависимой хемилюминесценции моноцитов при антифосфолипидном синдроме и у больных с кожным синдромом.
Уровень ДНК в Мн (5,56±2,45 шУ) у больных СКВ был существенно снижен по сравнению с данными пациентов с ДКВ (8,36±1,55 му, р < 0,05) и доноров (8,85±2,42 шУ). Содержание ДНК в Мн при ДКВ не отличалось от показателей группы контроля (р > 0,05). С нарастанием активности СКВ отмечено уменьшение содержания ДНК в Мн (с 5,28±1,67 до 4,25±2,2 шУ, р < 0,05). Анализ взаимозависимостей исследованных показателей показал наличие прямой корреляционной связи между содержанием ДНК Мн и ХЛ Мн при СКВ.
Изменений кислороднезависимых функций циркулирующих моноцитов при ИКВ по данным определения уровней КФ (171±41,8 ОD х 10-3) и КБ (65,3±20,5 ОD х 10-3) в сравнении с данными группы контроля (КФ - 173,1±49,8 ОD х 10-3, КБ - 61,7±18,0 ОD х 10-3) не было установлено. У больных СКВ, в отличие от здоровых лиц и больных ИКВ, наблюдалось существенное увеличение в моноцитах спонтанной и индуцированной продукции КФ (227,7±89,9; 247,3±127,7 ОD х 10-3) и КБ (136,2±38,6; 167,3±112,5 ОD х 10-3; р < 0,05). Повышение продукции КБ в Мн ассоциировалось при СКВ с наличием у пациентов сосудистых поражений. Показатели лизо-сомального теста Мн у больных СКВ (4,12±1,06) и ДКВ (4,1±1,0) существенно не отличались от значений здоровых лиц (4,02±1,3; р > 0,05 при всех сравнениях).
У больных ДКВ по сравнению с данными здоровых лиц констатировано достоверное увеличение уровней ГЬ-ф — (45,4±31,9 пкг/мл), у больных СКВ — Ш-ф — (113,7±125,3 пкг/мл), Ш-6 — (15,8±24,3 пкг/мл), ТОТа — (88,9±122,9 пкг/мл), а в контроле, соответственно, ГЬ-1р — (9,4±11,7 пкг/мл), IL-6 — (2,8±2,9 пкг/мл), ТОТа — (5,5±8,4 пкг/ мл, р < 0,05). При наличии у больных СКВ кожного синдрома, антифосфолипидного синдрома, синдрома Рейно
выявлено существенное повышение содержания IL-ip, легочного синдрома — IL-4, антифосфолипидного синдрома — TNFa. Показана корреляционная связь при СКВ между IL-ip и TNFa.
Заключение. Выполненные исследования указывают на активацию как кислородзависимых, так и кислород-независимых функций Мн на фоне снижения уровня ДНК фагоцитов и увеличения содержания всех сывороточных провоспалительных цитокинов исключительно при СКВ, тогда как у больных ДКВ констатировано лишь избирательное повышение IL-ip. Эти данные указывают на существенный вклад моноцитов в развитии системного процесса, определяя эти клетки в качестве мишени для терапевтического воздействия, а также на возможность использования определения указанных показателей в качестве дополнительных лабораторных тестов с целью дифференциации ДКВ и СКВ.
РОЛЬ ОТДЕЛЬНЫХ КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КАК МАРКЕРОВ СИСТЕМНОГО ВОСПАЛЕНИЯ У ПАЦИЕНТОВ С АУТОИММУННЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ
Журавлева Ю.А.1, Гусев ЕЮ.1 2
1ФГБУН «Институт иммунологии и физиологии» УрО РАН, Екатеринбург, Россия 2 Уральский федеральный университет им. первого Президента России Б.Н. Ельцина, Екатеринбург, Россия
В настоящее время доказана существенная роль хронического системного воспаления (ХрСВ) в патогенезе ряда системных аутоиммунных заболеваний. Установлены основные составляющие этого типового патологического процесса (системная воспалительная реакция, системное микротромбообразование, дистресс-реакция нейроэндокринной системы, системная альтерация), а также разработан интегральный критерий его диагностики — шкала ХрСВ (Гусев Е.Ю. и соавт.). Однако ее использование в повседневной врачебной деятельности затруднено в связи с высокой стоимостью лабораторных диагностических тест-систем. Поэтому является актуальным поиск отдельных диагностических маркеров ХрСВ, эффективных при отдельных заболеваниях.
Цель. Оценка диагностической эффективности отдельных показателей ХрСВ при системной красной волчанке и ревматоидном артрите.
Материалы и методы. В исследование были включены пациенты с ревматоидным артритом (РА, n = 26) и системной красной волчанкой (СКВ, n = 49). Методом иммуно-хемилюминесценции (Immulite) в плазме крови определяли уровни интерлейкинов (IL)-6, 8, 10, фактора некроза опухоли a (TNFa), C-реактивного белка, кортизола, ми-оглобина, тропонина I, D-димеров. На основании этих показателей по оригинальной методике (шкала ХрСВ) высчитывался интегральный балл ХрСВ. В качестве дополнительных маркеров ХрСВ, не включенных в шкалу ХрСВ определялись уровни р2-микроглобулина, липопо-лисахарид-связывающего белка и эозинофильного кати-онного белка. Определение активности заболеваний проводилось общепринятыми методами: по шкале DAS28 (РА) и SLEDAI (СКВ). Оценка диагностической эффективности (ДЭ) показателей проводилась c путем построения ROC-кривых с определением их площадей — AUC (SPSS). Критерием разделения пациентов на подгруппы служило наличие ХрСВ (более 3 баллов по шкале ХрСВ).
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Результаты. ХрСВ было выявлено у 38,5% пациентов с РА и у 75,5% — с СКВ. Сопоставив диагностическую эффективность отдельных показателей в отношении развития ХрСВ путем сравнения площадей под ROC-кривыми (АиС), мы выявили, что она отличается при каждой нозологии (табл.). Так, отличной (АиС > 0,9) и очень хорошей (АиС > 0,8) ДЭ при РА обладали TNFa, кортизол и D-димеры, а при СКВ — ГЬ-8, ГЬ-6, ТОТа. Следует отметить, что ДЭ С-реактивного белка, повышение которого выше нормальных значений зачастую рассматривается в качестве критерия системного воспаления, была невысокой. Среди дополнительных маркеров ХрСВ очень хорошей ДЭ при СКВ обладал липополисахарид-связы-вающий белок. ДЭ шкал DAS28 и SLEDAI в отношении развития ХрСВ оказалась низкой, что свидетельствует об их эффективности при оценке отдельных клинических проявлений заболеваний, но не системной патогенетической картины этих заболеваний.
ТАБЛИЦА. ЗНАЧЕНИЯ AUC ИССЛЕДУЕМЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ (К ТЕЗИСАМ ЖУРАВЛЕВОЙ Ю.А. И ДР.)
Показатель РА СКВ
С-реактивный белок 0,678 0,652
IL-6 0,684 0,995
IL-8 0,791 0,986
TNFa 0,881 0,869
Миоглобин 0,650 0,477
Кортизол 0,825 0,470
D-димеры 0,825 0,715
Липополисахарид-связываю-щий белок 0,594 0,846
р2-микроглобулин 0,603 0,556
Эозинофильный катионный белок 0,611 -
DAS28/ SLEDAI 0,600 0,363
Заключение. Проявления ХрСВ не стабильны и зависят как от особенностей развития основного заболевания, так и от эффективности патогенетической терапии, что определяет целесообразность диагностики ХрСВ с помощью интегральной шкалы ХрСВ. Однако для мониторинга выраженности ХрСВ при каждой конкретной нозологии могут быть использованы отдельные показатели.
ГОРМОНАЛЬНАЯ И ЦИТОКИНОВАЯ РЕГУЛЯЦИЯ В ИММУНОПАТОГЕНЕЗЕ АУТОИММУННОГО ТИРЕОИДИТА
Здор В.В., Маркелова Е.В., Гельцер Б.И.
ФГБОУ ВО «Тихоокеанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ,, Владивосток, Россия Дальневосточный федеральный университет, Владивосток, Россия
Многие аспекты иммунопатогенеза аутоиммунного тиреоидита (АИТ) до сих пор требуют прояснения, т.к. лечение заболевания сводится к заместительной терапии
тиреоидными гормонами (ТГ) при манифестации гипотиреоза (Ganesh B.B., 2011; Kristensen B., 2016).
Целью работы явилось изучение взаимосвязей ТТГ, тиреоидных гормонов (св.ТЗ, св.Т4) и Treg, Th1-, Th2-, Th17-, 1Ь22-маркерных цитокинов, объема щитовидной железы (ЩЖ) у пациентов с АИТ и гипотиреозом разной степени тяжести.
Результаты исследования. У 103 пациентов (женщин, n = 67; мужчин, n = 35) с АИТ, подтвержденного гормонально, иммунологически, ультрасонографией и/или морфологически оценивались показатели сывороточного уровня цитокинов IL-1a, IL-ф, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-13, IL-17, IL-22, TGF-P1, TGF-P3, IFNy TNFa и рецепторов TNFa sRI, TNFa sRII методом твердофазного ИФА с помощью диагностических наборов R&D Diagnostics Inc. исходно и через 3, 6 месяцев гормональной заместительной терапии левотироксином натрия (1,6-1,8 мкг/кг массы тела). Для проверки достоверности и специфичности изменений маркеров использовали ROC-анализ. У пациентов с АИТ в дебюте заболевания выявлена избыточная продукция Th1-, Th2- и Tregs маркерных цитокинов при дефиците TGF-P1 (р < 0,05), ассоциированных со степенью тяжести аутоиммунного гипотиреоза. Концентрации IL-ф до начала терапии ТГ нарастала в группах прямо пропорционально увеличению степени тяжести гипотиреоза и коррелировала с объемом ЩЖ (r = 0,79; р < 0,01). Высокое содержание в сыворотке крови IL-4 и IL-13 в дебюте АИТ было сопряжено с тяжестью патологического процесса, но при этом доли цитокинов в общем балансе цитокинов были достоверно снижены и при АИТ преобладал 1Ы-ответ. Установлена дисфункция Treg клеток в дебюте АИТ, что подтверждается относительной и абсолютной гиперпродукцией IL-2 и IFNy (р < 0,05), но достоверным снижением баланса Treg / Th17 маркерных цитокинов в дебюте АИТ на фоне многократно повышенного IL-6 (р < 0,01), достоверно низкого TGF-P1 (р < 0,05), что способствовало преобладанию 1Ы7-клеток и относительной гипофункции Treg. Повышение IFNy (3 38,5 пг/мл по данным ROC-анализа) и IL-2 (> 20 пг/мл) свидетельствует о высокой степени активности эффекторной фазы иммунного ответа при АИТ, и являются одними из основных факторов, определяющих возможное прогрессирование патологического процесса. Прямые сильные корреляции показателей IL-10 с ТТГ (r = 0,76; р < 0,01) и с объемом ЩЖ (r = 0,94; р < 0,05) предполагают негативную роль IL-10 в патогенезе АИТ, которая может заключаться в индукции диффе-ренцировки Treg в 1Ы7-клетки последующим снижением числа Treg (Козлов В.А., 2016). Это подтверждено корреляциями тяжести течения аутоиммунного гипотиреоза с системными уровнями IL-10 и IL-17. Высокое содержание TNFa и TNFa sRI, TNFa sRII прямо коррелировало с тяжестью течения АИТ (r = 0,56; р < 0,05), что согласуется с данными о негативной роли цитокина в патогенезе заболевания за счет подавления им активности T-reg клеток и активации апоптоза тиреоцитов. ROC-анализ установил критическое значение для TNFa (> 22 пг/мл), при этом точность маркера составила 0,988; прогностическая ценность — 1,0; чувствительность — 0,976; специфичность — 1,0, что позволяет рекомендовать данный маркер для оценки активности аутоиммунного процесса в дебюте АИТ. Показатели TGF-P1 обратно коррелировали с тяжестью течения АИТ и объемом ЩЖ (r = - 0,61; р < 0,01),
