CC BY
3РНК-мишеней в составе экзосом был проведен с помощью баз данных DIANA и STRING. После выделения РНК и проведения обратной транскрипции уровень экзосомальных микроРНК оценивали методом ПЦР в режиме реального времени. Полученные уровни miR-101 и miR-24 нормировали на уровень miR-16.
Результаты
Впервые выявлена взаимосвязь между генами ADCY3, ADCY6, ADCY7, IGF1R, MAP2K1, MAPK1, MAPK3, PRKACA, регулируемыми микроРНК miR-101 и -24-3p, причем они меняют экспрессию при РЯ, что может указывать на участие этих микроРНК в канцегоренезе и диссеминации РЯ. Выявлено достоверное изменение уровней miR-24 и miR-101 в составе экзосом плазмы крови при РЯ по сравнению с нормой, а также достоверная корреляция их уровней в плазме крови и асцитической жидкости больных РЯ (R=0,7995, />=0,0001 и R=0,9983, /=0,0001). Выявлена достоверная корреляция между уровнем miR-101 в экзосомах асцитической жидкости со стадией FIGO (>=0,03).
Выводы
Полученные результаты подтверждают перспективность miR-24 и miR-101 в качестве диагностических маркеров жидкой биопсии и предикторов агрессивного течения РЯ.
Список литературы
1. Ding H., Zhang J . , Zhang F. et al . Nanotechnological approaches for diagnosis and treatment of ovarian cancer: a review
of recent trends . Drug Deliv 2022;29(1):3218-3232 . PMID: 36259505 . D0l:10.1080/10717544 . 2022 . 2132032 . 2 . Tenchov R ., Sasso JM . , Wang X . et al . Exosomes-Nature's Lipid Nanoparticles, a Rising Star in Drug Delivery and Diagnostics . ACS Nano 2022;16(11):17802-17846. PMID: 36354238. PMCID: PMC9706680 . D0I:10 ,1021/acsnano . 2c08774.
Разработка подхода к определению лекарственной чувствительности клеток колоректального рака in vitro с использованием опухолевых слайсов
Авторы:
(1) Дружкова Ирина Николаевна, [email protected], ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава России, Нижний Новгород
(2) Комарова Анастасия Денисовна, [email protected], ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава России, Нижний Новгород
(3) Можеров Артем Михайлович, [email protected], ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава России, Нижний Новгород
(4) Лукина Мария Максимовна, [email protected], ФГБУ «Федеральный научно-клинический центр физико-химической медицины им. академика Ю.М. Лопухина ФМБА», Москва
(5) Терехов Виталий Михайлович, [email protected], ГБУЗ НО «Нижегородский областной онкологический диспансер», Нижний Новгород
(6) Загайнова Елена Вадимовна, [email protected], ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава России, Нижний Новгород
(7) Ширманова Марина Вадимовна, [email protected], ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава России, Нижний Новгород
Ключевые слова
персонализированная медицина, лекарственная чувствительность, FLIM
Актуальность
Основными методами лечения рака по-прежнему остается хирургическое лечение и лекарственная терапия, а «золотым стандартом» для определения тактики ведения пациентов являются результаты гистологических исследований. Однако сохраняется высокая частота рецидивов и метастазирования, в то же время ежегодно от осложнений специальной противоопухолевой терапии в России погибает более 700 человек [1]. Поэтому выбор наиболее эффективной терапии до начала лечения является актуальной задачей.
Цель
Разработка методики прямой оценки лекарственной чувствительности колоректальных опухолей пациентов для прогнозирования эффективности терапии на основе пациент-специфической модели опухолевых слайсов.
Материалы и методы
• Клеточные линии колоректального рака человека (НТ29, НСТ116, СаСо-2). • Переживающие тканевые культуры, полученные из образцов опухолей пациентов.
• Препараты оксалиплатин, 5-фторурацил и цетуксимаб.
• Мыши линии nude.
• Лазерный сканирующий микроскоп LSM880 (Carl Zeiss, Германия) с FLIM-модулем на основе время-коррелированного счета одиночных фотонов TCSPC.
• МТТ-тест, окрашивание на живое и мертвое с помощью флуоресцентных красителей и анализ колони-еобразования для оценки выживаемости и активности клеток.
• Патоморфологический анализ и иммуноцитохимический анализ.
Результаты
В ходе исследования была проанализирована возможность использования тонких срезов опухолей пациента (слайсов) для определения чувствительности к основным лекарственным препаратам, применяемым для лечения колоректального рака. Слайсы являются перспективной моделью для исследования, поскольку при их использовании существенно повышается количество опухолей, пригодных для тестирования in vitro, при этом сохраняется специфическое окружение опухолевых клеток, способное вносить свой вклад в ответ опухоли на терапию. Предварительная валидация методики была проведена с использованием клеточных линий НСТ116 и НТ29, обладающих разной чувствительностью к препаратам, in vivo. Была показана корреляция изменения метаболизма опухолевых клеток в составе тканевых слайсов, результатов окрашивания на живые и мертвые клетки и маркер пролиферации ki-67 с ответом опухолей мышей in vivo. Анализ этих же показателей в 15 образцах колоректального рака пациентов также выявил соответствие метаболических изменений, зарегистрированных с помощью FLIM, и результатов оценки жизнеспособности. Все пациенты находятся под наблюдением для установления корреляции исхода лечения с полученными лабораторными данными.
Выводы
Показана возможность прямой оценки лекарственной чувствительности опухолевых клеток в составе переживающих срезов опухолей пациентов.
Работа поддерживается грантом РНФ № 23-15-00294.
Использованная литература
1. Состояние онкологической помощи населению . А .Д . Каприн, В . В . Старинский, А . О . Шахазадова . М .: МНИОИ им .
П А. Герцена - филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России, 2020 . илл . 239 с . ISBN 978-5-85502-255-1.
Ингибирующее влияние йодированного молочного сывороточного белка на индуцированный канцерогенез предстательной железы
у крыс
Авторы:
(1) Ермакова Елена Дмитриевна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, ФГАОУ ВО «Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого», Санкт-Петербург
(2) Тындык Маргарита Леонидовна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(3) Радецкая Екатерина Андреевна, [email protected], «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(4) Туманян Ирина Акоповна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(5) Соловьев Иван Викторович, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(6) Вон Юлия Дюсековна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(7) Круглов Антон Сергеевич, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
