CC BY
3Материалы и методы
• Клеточные линии колоректального рака человека (НТ29, НСТ116, СаСо-2). • Переживающие тканевые культуры, полученные из образцов опухолей пациентов.
• Препараты оксалиплатин, 5-фторурацил и цетуксимаб.
• Мыши линии nude.
• Лазерный сканирующий микроскоп LSM880 (Carl Zeiss, Германия) с FLIM-модулем на основе время-коррелированного счета одиночных фотонов TCSPC.
• МТТ-тест, окрашивание на живое и мертвое с помощью флуоресцентных красителей и анализ колони-еобразования для оценки выживаемости и активности клеток.
• Патоморфологический анализ и иммуноцитохимический анализ.
Результаты
В ходе исследования была проанализирована возможность использования тонких срезов опухолей пациента (слайсов) для определения чувствительности к основным лекарственным препаратам, применяемым для лечения колоректального рака. Слайсы являются перспективной моделью для исследования, поскольку при их использовании существенно повышается количество опухолей, пригодных для тестирования in vitro, при этом сохраняется специфическое окружение опухолевых клеток, способное вносить свой вклад в ответ опухоли на терапию. Предварительная валидация методики была проведена с использованием клеточных линий НСТ116 и НТ29, обладающих разной чувствительностью к препаратам, in vivo. Была показана корреляция изменения метаболизма опухолевых клеток в составе тканевых слайсов, результатов окрашивания на живые и мертвые клетки и маркер пролиферации ki-67 с ответом опухолей мышей in vivo. Анализ этих же показателей в 15 образцах колоректального рака пациентов также выявил соответствие метаболических изменений, зарегистрированных с помощью FLIM, и результатов оценки жизнеспособности. Все пациенты находятся под наблюдением для установления корреляции исхода лечения с полученными лабораторными данными.
Выводы
Показана возможность прямой оценки лекарственной чувствительности опухолевых клеток в составе переживающих срезов опухолей пациентов.
Работа поддерживается грантом РНФ № 23-15-00294.
Использованная литература
1. Состояние онкологической помощи населению . А .Д . Каприн, В . В . Старинский, А . О . Шахазадова . М .: МНИОИ им .
П А. Герцена - филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России, 2020 . илл . 239 с . ISBN 978-5-85502-255-1.
Ингибирующее влияние йодированного молочного сывороточного белка на индуцированный канцерогенез предстательной железы
у крыс
Авторы:
(1) Ермакова Елена Дмитриевна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, ФГАОУ ВО «Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого», Санкт-Петербург
(2) Тындык Маргарита Леонидовна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(3) Радецкая Екатерина Андреевна, [email protected], «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(4) Туманян Ирина Акоповна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(5) Соловьев Иван Викторович, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(6) Вон Юлия Дюсековна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(7) Круглов Антон Сергеевич, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(8) Зайцева Мария Анатольевна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(9) Лянгинен Лидия Васильевна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(10) Семенов Александр Леонидович, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Ключевые слова
йодированный молочный сывороточный белок, канцерогенез, предстательная железа, крыса
Актуальность
Предполагается, что одним из факторов риска развития рака предстательной железы (РП) является доброкачественная гиперплазия предстательной железы (ДГПЖ), однако взаимосвязь двух патологий не изучена [1]. Неясно, есть ли у профилактических препаратов, эффективных в отношении ДГПЖ, ингибирующее влияние на РП. Доказана эффективность йодированного сывороточного молочного белка — биойода на модели индуцированной ДГПЖ у крыс [2].
Цель
В данном исследовании проведена оценка ингибирующего влияния биойода на индуцированный рак предстательной железы у крыс.
Материалы и методы
Исследование проведено на 94 самцах крыс Wistar. 62 животных хирургически кастрировали, 32 составили группу интактного контроля (1ИК). Далее через 22 дня крысам последовательно вводили нагрузочную дозу тестостерона (833 мг/кг), а через 3 дня вводили 50 мг/кг канцерогена — Ы-нитрозо-Ы-метилмочевины. Далее еженедельно до конца опыта крысам вводили поддерживающую дозу тестостерона (16,7 мг/кг). Группа 2РП (n=31) ежедневно интрагастрально получала носитель (воду), а 3БЙ — биойод (0,2 мг/кг). На 372-й день эксперимента животных эвтаназировали. На аутопсии изымали предстательную железу (ПЖ), определяли массу органа, фиксировали для гистологической оценки и расчета частоты опухолей. Вели учет гибели животных для расчета выживаемости.
Результаты
Как и в опыте на модели ДГПЖ, массовый коэффициент ПЖ в группе интактного контроля был значимо ниже, чем у крыс с индуцированной патологией (2,7±0,1 vs 11,3±0,9, p <0,0001, ANOVA). Применение биойода в модели РП значимо снижало этот показатель до 9,3±0,5 (vs 2РП, p <0,01, ANOVA). Выживаемость в 2РП значимо снижалась в сравнении с 1ИК (p <0,05, log rank), а использование биойода способствовало нормализации этого показателя (p >0,05, log rank). В группе 1ИК 90,3% животных дожили до 372-го дня опыта, в 2РП — 59,4% (p <0,01, точный критерий Фишера). Значимых различий по данному показателю между интактным контролем и животными, получавшими биойод, не было (70,97%, p=0,11, точный критерий Фишера). У интактных животных не было обнаружено опухолей ПЖ. В опытных группах частота возникновения новообразований всех отделов ПЖ суммарно значимо повышалась до 37% в 2РП и 17% в 3БЙ. В дорсолатеральном отделе предстательной железы новообразования возникали в 30% у крыс группы 2РП, тогда как в группе 5БЙ наблюдалось значимое подавление канцерогенеза этой локализации до 7% (p=0,042, точный критерий Фишера). Злокачественные опухоли ПЖ у животных с индукцией РП преимущественно были аденокарциномами умеренной или высокой степени дифференцировки.
Выводы
На основании полученных результатов установлено, что использование йодированного молочного сывороточного белка тормозило канцерогенез предстательной железы у крыс.
Исследование поддержано грантом РНФ (№ 20-65-47025).
Список литературы
1. Dai X . et al . Benign prostatic hyperplasia and the risk of prostate cancer and bladder cancer: a meta-analysis of observational studies //Medicine . 2016 . Т 95 . № . 18 . 2 . Alexandrov V A . et al . Therapeutic effect of iodised serum milk protein, lycopene and their combination on benign prostatic
hyperplasia induced in rats //Andrologia . 2021. Т 53 . № 9 . С . e14173 .
