CC BY
0
При л о ж ен и е 1
чувствительности были использованы критерии EUCAST (2023) — чувствительные (Ч), чувствительные приувели-ченной экспозиции (У) и резистентные (Р). Детекция генов карбапенемаз (групп ЫаОХА-48, ЫаКРС, UaVIM, blaNDM, Ыа1МР) была проведена методом ПЦР в режиме реального времени с использованием коммерческих наборов.
Результаты и обсуждение. В таблице представлены результаты чувствительности К. pneumoniae с продукцией карбапенемаз. Чувствительность цефтазидима/ авибактама в отношении К. pneumoniae ОХА-48 была абсолютной (100%) в сравнении с колистином (74,1%) и имипене-
мом (62,1%), и существенно выше в сравнении с остальными антибиотиками. Все К. pneumoniae с продукцией КРС были чувствительными только к цефтазидиму/авибактаму и 73,7% — к колистину. Штаммы К. pneumonia с продукцией NDM. имели относительно высокую чувствительность только к колистину (85,7%). Значения МПК90 цефтази-дима/авибактама у К. pneumoniae с продукцией ОХА-48 и КРС были наиболее низкими (0,25 мкг/мл для обоих) по сравнению с другими антибиотиками, в то вре- s мя как с продукцией NDM крайне высокие, составили более 128 мкг/мл (рис. 1). Среди Р. aeraginoöa чувствительность к цефтазидиму/авибактаму составила (79%) и была сопоставимой с амикацином (79,7%), но ниже, чем к колистину (99,7%), табл. Резистентными к меропе-нему были 27,3% (я=82) P. aeruginoöa, к имипенему 32,3% ; (п=97), причем чувствительность к цефтазидиму/авибактаму сохранили 27 из 82 (32,9%) меропенем-резистент-ных и 39 из 97 (40,2%) имипенем-резистентных штаммов. а Гены приобретенных карбапенемаз были обнаружены у 17,7% (/?=53) Р. aeruginosa. Среди Р. aeraginoöa без продукции карбапенемаз чувствительность к цефтазиди- i му/авибактаму составила 94,3% и была сопоставимой с колистином (99,6%) и амикацином (89,9%). Значение
Рис
Таблица 2. Чувствительность P. aeruginosa к цефтазидиму/авибактаму i вомикробным препаратам
сравнении с другими проти-
Противомикробный препарат P. aeruginosa, п=300 P. aeruginosa безпродукции карбапенемаз, п=247 P. aeruginosa с продукции карбапенемаз, п=53
Ч,% У, % Р,% MnKj0, мкг/мл Ч,% У, % Р,% MnKj0, мкг/мл Ч,% У, % Р,% MnKj0, мкг/мл
Цефтазидим/авибактам 79 - 21 32 94,3 - 5,7 4 7,5 - 92,5 32
Колистин 99,7 - 0,3 1 99,6 - 0,4 1 100 - 0 0,5/1
Амикацин 79,7 - 20,3 128 89,9 - 10,1 32 32,1 - 67,9 >128
Меропенем 65,7 7 27,3 64 79,8 8,1 12,1 16 0 1,9 98,1 128
Левофлоксацин - 74,6 25,4 32 - 89 11 4 - 0 100 128
Цефепим - 74,3 25,7 16 - 89,5 10,5 16 - 3,8 96,2 32
Пиперациллин/тазобактам - 71,3 28,7 64 - 85,8 14,2 32 - 3,8 96,2 128
Имипенем - 6 7,7 32,3 128 - 82,2 1^8 16 - 0 100 >128
Цефтазидим - 67,3 32,7 32 - 81,8 18,2 16 - 0 100 64
'8,9
МПК90 цефтазидима/авибактама (4 мкг/мл) было существенно ниже, чем амикацина (32 мкг/мл).
Заключение. Определена максимальная активность in vitro цефтазидима/авибактама в отношении К. pneumoniae с продукцией ОХА-48 и КРС и высокая у P. aeruginosa без продукции карбапенемаз в сравнении с другими антибиотиками.
К. pneumoniae ОХА-48, п=1 / 6 ■ К. pneumoniae КРС, п=19 ШК, pneumoniae NDM, п-35 ш p. aeruginosa без продукцииКарбапепеша, п=247 шр aeruginosa с продукцией карбапенемаз, п=53
Sm ш
I J
1
1,9
I2S МПК
Финякина М. Н., Никифорова К. А., Капранов Н. М., Суримова В. А., Чавынчак Р. Б., Гальцева И. В., Лукина Е. А.
ОЦЕНКА СУБПОПУЛЯЦИОННОГО СОСТАВА Т-ЛИМФОЦИТОВ У ПАЦИЕНТОВ С ПАРОКСИЗМАЛЬНОИ НОЧНОЙ
ГЕМОГЛОБИНУРИЕЙ (ПНГ)
ФГБУ«НМИЦгематологии» Минздрава России
Введение. В основе патогенеза ПНГ лежит комплемент-опосредованный лизис эритроцитов вследствие приобретенного генетического дефекта поверхностных мембран эритроцитов. Фенотипический спектр заболевания, клиническое течение и ответ на патогенетическую терапию ингибиторами комплемента характеризуется исключительной вариабельностью, не имеющей до настоящего времени удовлетворительного объяснения. Система комплемента — важный механизм врожденного иммунитета, имеет тесные связи
Рис. 1
с эффекторами приобретенного иммунного ответа, что дает основание предположить, что оценка состояния Т-клеточного звена иммунного ответа может предоставить ценную информацию для изучения патогенеза ПНГ.
Цель работы. Изучение субпопуляционного состава Т-лимфоцитов периферической кровиу больных ПНГ.
Материалы и методы. Иммунофенотипический анализ различных субпопуляций Т-лимфоцитов периферической крови проведен
Рис. 2
I ГЕМАТОЛОГИЯ ИТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2024; TOM69; №2 |
у 18 больных ПНГ («=18), из них у 8 диагноз, в соответствии с национальными клиническими рекомендациями, установлен впервые (группа нелеченых больных), остальные получали патогенетическую терапию ингибитором С5-компонента комплемента более 6 месяцев, в том числе 3 пациента — более 12 месяцев. Соотношение мужчин и женщин составило 10:8, медиана возраста — 42 года (20—69 лет). Контрольная группа включала 40 доноров крови, в возрасте от 20 до 60 лет, медиана — 37 лет (м/ж 28:12). Иммунофенотипирование лимфоцитов крови проводили методом проточной цитометрии с использованием панели моноклональных антител к Т-хелперам общим (ТН, СШ+С04+), Т-регуляторным клеткам (Тге§, СОЗ+С04+С025Ы£ЬС01271о"^), а также Тге§, несущим иммунофено-типы Т-хелперов 17 типа (Тге§ТН17, СОЗ+С04+С025Ы£ЬС01271о"^С СК6+ССК4+ССК10+) и Т-хелперов 22 типа (Тге^ТН22, СШ+С04+С02 5Ы£ЬС01271о"^ССК.6+ССК4+ССК10~). Статистическая обработка результатов выполнена с помощью /'-критерия Стьюдента.
Результаты и обсуждение. Анализ субпопуляционного состава Т-лимфоцитов показал, что абсолютное число Тге§ТН17 и Тге§ТН22 у больных ПНГ было достоверно ниже, чем в контрольной группе (^<0,0001 и ^2<0,0001). Графики распределения данных показателей для пациентов и контрольной группы представлены ниже. Однофакторный анализ изученных лабораторных показателей у нелеченых больных ПНГ и пациентов, получающих патогенетическую терапию, достоверных различий не выявил (^>0,05).
Заключение. Выявленные изменения в субпопуляционном составе Т-лимфоцитов у больных ПНГ могут свидетельствовать о дефиците регуляторной функции специализированных субпопуляций Т-лимфоцитов, ответственных за контроль иммунной толерантности к собственным антигенам, что обосновывает целесообразность дальнейшего изучения взаимосвязи выявленных нарушений с особенностями течения ПНГ и ответом на патогенетическую терапию.
Хабибуллин Н. Р., Мальчикова А. О., Хрульнова С. А., Коваль Н. О., Ликольд Е. Б., Клясова Г. А. ИДЕНТИФИКАЦИЯ РЕДКИХ ВИДОВ ASPERGILLUS sPP. ПРИ ИНВАЗИВНОМ АСПЕРГИЛЛЕЗЕ ЛЕГКИХ
ФГБУ«НМИЦгематологии» Миздрава России
Введение. Основными возбудителями НАЛ являются Aspergillus fumigatus, A. flav&d и -A. nigerr однако за последние годы наблюдается увеличение других видов Aspergillus spp., включая штаммы с природ-нойустойчивостью к противогрибковым препаратам. Так, природной резистентностью к амфотерицину В обладают A. nidulans, A. terreus и .A. alUaceus, а к вориконазолу — -A. lentulus иА. calidouatua.
Цель работы. Провести с помощью таргетного ДНК-секвенирования верификацию до вида штаммов Aspergillus spp., которые на основании морфологической идентификации (микроскопии) были отнесены к категории штаммов с природной резистентностью к противогрибковым препаратам.
Материалы и методы. В исследование были включены штаммы Aspergillus spp., выделенные из жидкости бронхоальвеолярного лава-жа (БАЛ) от больных ФГБУ «НМИЦ гематологии» с НАЛ и гематологическими заболеваниями (2000—2022 гг). КультуруА^л////«^ spp. получали на среде Чапека или Сабуро с декстрозой. Идентификацию Aspergillus spp. проводили на основании микроскопии с использованием атласа (de Hoog G.S. et al., 2021). Во всех случаях одновременно проводили идентификацию методом MALDI-TOF масс спектрометрии (МВТ Filamentous Fungi Library 2.0, Bruker). В качестве критерия надежной идентификации мицелиальных грибов использовали коэффициент совпадения (КС)>1,9, если два и более результата идентификации совпадали по виду, или КС>1,2 при совпадении по виду четырех первых идентификаций микроорганизмов. В качестве стандарта идентификации Aspergillus spp. использовали таргетное ДНК секвенирование фрагментов генов внутреннего транскрибируемого спейсера (ITS), (3-тубулина, кальмодулина и актина.
Результаты и обсуждение. Было проведено исследование 8 Aspergillus spp. (A. nidulans n=3, A.terreus n=3 и А. alllaceus n=2), которые по результатам морфологической идентификации были отнесены к категории штаммов с природной резистентностью к амфотерицину В (табл.). Несоответствие между морфологической идентификацией и секвенированием наблюдалось по 5 (62,5%) из 8 Aspergillus spp.,
между результатами масс-спектрометрии и таргетным ДНК секвенированием — по 3 (37,5%) из 8 штаммов. Всеми использованными методами была подтверждена только видовая принадлежность A. nidulans (n=S). Все штаммы, исходно идентифицированные на основании микроскопии как Л. terreus (n=3) иА. alllaceus (n=2), имели другую видовую принадлежность на основании таргетного ДНК секвенирования. При сравнении MALDI-TOF MS с таргетным ДНК секвенированием было совпадение по 5 штаммам (A. nidulans n=3, A. tamarii n=2), в то время как A tnicronesiensis U.A. chevalieri не удалось идентифицировать с помощью масс спектрометрии, a A. citrinoterre^ был идентифицирован как A terreus.
Заключение. Отмечено совпадение результатов идентификации разными методами только для A. nidulans, в то время как по другим видам Aspergilli^ spp. выявлены несоответствия, особенно при сравнении морфологической идентификации и идентификации с помощью таргетного ДНК секвенирования. Безусловно, исследование необходимо продолжать, но для истинной идентификации редких видов Aspergillus spp. и проведения адекватной терапии следует применять таргетное ДНК-секвенирование.
Таблица. Результаты видовой идентификации Aspergillus spp. с природной устойчивостью к антимикотикам
№ штамма Идентификация Aspergillus spp.
Морфологическая (микроскопия) MALDI-TOF MS Таргетное ДНК-секвенирование
Вид Коэффициент совпадения
A. nidulans A. nidulans 2,0 A. nidulans
2 A. nidulans A. nidulans 2,0 A. nidulans
3 A. nidulans A. nidulans 1,8 A. nidulans
4 A. ferreus A. ferreus 17 A. clfrinoferreus
5 A. ferreus A. tamarii 1,5 А. tamarü
6 A. ferreus Не идентифицирован A. mlcronesiensls
7 A. alllaceus Не идентифицирован A. chevalieri
A. alllaceus A. tamarü 1,4 А. tamarü
Хабибуллин Н. Р.1, Мальчикова А. О.1, Ветохина А. В.2, Хрульнова С. А.1, Ликольд Е. Б.1, Коваль Н. О.1, Клясова Г. А.1 МУТАЦИИ В ГЕНЕ Ш У САШЮА ОЬАБЯАТА'. ПЕРВОЕ СООБЩЕНИЕ В РОССИИ
1ФГБУ «НМИЦ гематологии» Миздрава России, 2ГБУЗ «Иркутская ордена «Знак Почета» областная клиническая больница»
Введение. Candu)aglabrata входит в число ведущих возбудителей инвазивного кандидоза. Препаратами выбора в лечении инвазив-ного кандидоза, вызванного С. glabrata, являются эхинокандины. Доказано, что мутации в высококонсервативных «bot spot»y4acTKax генов FKS являются причиной неэффективного лечения эхинокан-динами.
Цель работы. Выявить мутационные изменения в «hot spot» участках генов FKS среди С. glabratar выделенных из гемокультуры и других стерильных в норме образцов.
Материалы и методы. Проведено изучение штаммов С. glabrata, выделенных из стерильных в норме образцов от больных с инвазивным кандидозом в рамках многоцентрового проспективного исследования (2005—2022 гг.). Все штаммы были идентифицированы методом М.ALDI TOF масс-спектрометрии на анализаторе Microflex (Bruker Daltonics, Германия) в отделе микробиологии и антимикробной терапии ФГБУ «НМИЦ гематологии» МЗ РФ. Чувствительность к эхинокандинам исследовали методом серийных микроразведений в бульоне RPMI-1640 (Sigma Aldrich, США) согласно рекомендациям Института
