CC BY
0
I ГЕМАТОЛОГИЯ ИТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2024; TOM69; №2 |
реакции «трансплантат против хозяина» (РТПХ) (Мо18е^ 1.8. еЬ а1., ТСТ, 2021), но отмечалась значительная токсичность такого режима, поэтому для снижения токсичности мы провели пилотное одноцен-тровое исследование профилактики реакции «трансплантат против хозяина» (РТПХ) комбинацией циклофосфамида с бендамустином при рефрактерных миелоидных новообразованиях.
Цель работы. Оценить клиническую эффективность и безопасность нового режима профилактики РТПХ.
Материалы и методы. Завершено включение 50 пациентов (таблица 1) в проспективное исследование (N0X04943757). Критерии включения: миелоидные неоплазии, наличие донора,>5% клональных бластов на момент кондиционирования, рефрактерность по крайней мере к одному курсу индукционной терапии. Основные критерии исключения: отсутствие неконтролируемой инфекции и тяжелой сопутствующей патологии. Протокол включал назначение бендамусти-на 50 мг/кг/день в дни +3, +4, циклофосфамида 25 мг/кг/день в дни +3,+4 (ПТБЦ), такролимуса 0,03 мг/кг с дня +5 по день +100 и микофе-нолата мофетил 30 мг/кг/сут в дни 5—35. Пациенты получили режим кондиционирования ЕВ2 или ЕВЗ в зависимости от соматического статуса. Исследование поддержано грантом РНФ № 23-15-00327.
Результаты и обсуждение. Кумулятивная частота приживления составила 86%. Только 1 пациент умер до оценки приживления. Медиана до восстановления лейкоцитов составила 18 дней (диапазон 2—35), тромбоцитов — 14 дней (диапазон 9—104). Ремиссия достигнута у 88% пациентов, у 76% — без минимальной остаточной болезни (МОЕ). Общая выживаемость (ОБ) составила 33% (95%ДИ 19-48%), бессобытийная (БВ) — 21% (95%ДИ 10—35%). Безрецидивная летальность (БРЛ) составила 19% (95%ДИ 9—31%), кумулятивная частота рецидивов — 60% (95%ДИ 43—74%). Токсичность включала развитие СВЦ у 30% пациентов, включая 2 пациентов с СВЦ 4—5-й степени. Наиболее частота наблюдались проявления СВЦ со стороны печени (24% пациентов). Кумулятивная частота острой РТПХ 2—4 составила 20% (95%ДИ 10-33%), 3-4-й степени - 18% (95%ДИ 7-31%), хронической РТПХ средней и тяжелой степени 18% (95%ДИ 8—31%). РТПХ
2—4 наблюдалось преимущественно у пациентов с СВЦ 2—5-й степени (50% против 21%, ^=0,02). Анализ субпопуляций лейкоцитов показал, что основным механизмом толерантности является экспансия РБ-1Ь+ моноцитов с высоким содержанием С08+ эффекторных клеток (5,1±7,1% от N0) и СБ8+ эффекторных клеток памяти (0,4±0,62% от N0). Субанализ выживаемости показал, что только трансплантация от неродственного или гаплоидентичного донора ассоциированы с лучшей ОВ (^=0,008, Рисунок 1).
Заключение. Разработана перспективная платформа для лечения рефрактерных миелоидных неоплазий с приемлемой токсичностью. Трансплантация от родственного совместимого донора в данном исследовании имела значимо меньшую эффективность.
Таблица 1. Характеристика группы пациентов
Диагноз N=50
Острый миелоидныйлейкоз 37
Миелодиспластический синдром 9
Хронический миелолейкоз 4
Хронический миелолейкоз
Атипичный хронический миелолейкоз
Возраст, медиана (диапазон) 48(18-69)
Индекс Карновского, медиана (диапазон) 80 (60-90)
Мужчины 34
Женщины 16
Родственный совместимый донор 10
Неродственный совместимый донор 26
Родственный гаплоидентичный донор 14
Кондиционирование без бусульфана 4
Кондиционирование РВ2 33
Кондиционирование РВЗ 13
Антибактериальная терапия на момент АТГСК 20
Повторная АТГСК 4
Первичная рефрактерность 26
Вторичная рефрактерность 24
Комплексный кариотип 10
Мутации в генах высокого риска 22
Количество бластов на моментАТГСК, медиана (диапазон) 12% (5-86)
Мохаммад А., Дианов Д. В., Фефелова Е. И., Симонян Т. Р., Иванова Н. О., Боголюбова А. В.
ОПТИМИЗАЦИЯ СТРУКТУРЫ УНИВЕРСАЛЬНОГО ХИМЕРНОГО АНТИГЕННОГО РЕЦЕПТОРА (CAR) ДЛЯ НУЖД ИММУНОТЕРАПИИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ КРОВИ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Универсальные CAR-T платформы разрабатываются с целью преодоления одного из ограничений классической CAR-T терапии — специфичности к одному антигену. Каждая платформа состоит из пула растворимых антиген-распознающих модулей и универсального рецептора, передающего сигнал внутрь клетки. Взаимодействие между рецептором и растворимым модулем обеспечивается системой адаптерных молекул. Благодаря таким платформам можно воздействовать на несколько антигенов опухоли с помощью клеток, несущих на своей поверхности один CAR, и нескольких растворимых модулей.
Цель работы. Получение и оптимизация универсальной CAR-T платформы на основе адаптерных лейциновых застежек с улучшенными эффекторными свойствами и минимальной иммуногенностью.
Материалы и методы. Дизайн рецептора zipCAR и растворимого модуля zipFv был разработан in silico в программе Geneious. Конструкции клонировали в векторы pLABE-pEl и pmCAG-2T с помощью сборки методом GoldenGate и проверяли методом се-квенирования по Сэнгеру. Для наработки zipFv использовали клеточную линию Expi293F. Очистку zipFv осуществляли аффинной хроматографией с использованием Ni-сефарозы в качестве носителя. В качестве системы доставки конструкта zipCAR использовали лентивирусный вектор третьего поколения. Эффективность транс-дукции и взаимодействия zipCAR с zipFv проверяли на репортерной Т-клеточной линии Jurkat 76—TPR.
Результаты и обсуждение. Мы разработали универсальную платформу CAR, основанную на высокоаффинных взаимодействиях между парами лейциновых застежек. Платформа состоит
из двух частей: универсального рецептора (zipCAR) и растворимого модуля (zipFv). zipCAR состоит из костимуляторного и сигнального внутриклеточных доменов, связанных через трансмембранный домен с внеклеточной лейциновой застежкой Fos. ZipFv — это слитый белок, состоящий из одноцепочечного вариабельного фрагмента (scFv) и лейциновой застежки (JunD), взаимодействующей с zipCAR через Fos. Поскольку лейциновые застежки являются частью транскрипционных факторов, они имеют низкую иммуногенность, что является преимуществом для потенциального использования zipCAR в клинической практике. В ходе работы мы сконструировали различные варианты zipCAR, исходя из опыта работы нашей лаборатории с анти-С019 CAR-T-клетками. Мы рассмотрели варианты с двумя костимуляторными доменами: CD28 и 4—1ВВ. Параллельно была проведена оптимизация внеклеточной части zipCAR с использованием различных линкеров между JunD и трансмембранным доменом с целью улучшения взаимодействия между zipCAR и zipFv. В дальнейшем планируется изучение влияния внутриклеточных доменов на сигнальную и цитотоксическую активность универсальных CAR-Т-клеток, а также создание на базе универсальной платформы CAR-Т-клеток, несущих CAR с дополнительными функциональными внутриклеточными доменами.
Заключение. Разработанная универсальная платформа является многообещающей для использования в терапии злокачественных новообразований крови с перспективой создания на ее базе CAR-T-клеток новых поколений с улучшенными функциональными свойствами за счет модификации внутриклеточной структуры рецептора.
