ОПТИМИЗАЦИЯ КОНСТРУКЦИИ ХИМЕРНОГО АНТИГЕННОГО РЕЦЕПТОРА, НАПРАВЛЕННОГО НА B-КЛЕТОЧНЫЙ АНТИГЕН CD19 Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

I ГЕМАТОЛОГИЯ ИТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2024; TOM69; №2 |

день после введения CAR-T клетки с CAR CD28-CD3^YFF контролировали рост опухолевой массы на том жеуровне или лучше Т-клеток с CAR классической архитектуры.

Заключение. Из 4 тестируемых конструкций CAR вариант с архитектурой CD8H/TM-CD28CD3^mut продемонстрировал

оптимальный баланс функциональных свойств 1п у'йго и 1п сохранение потенциала к пролиферации, цитотоксичности и секреции ци-токинов 'т у&го, подавлению роста опухолевой массы ¿п ^¿ро науровне CAR классической архитектуры, при этом обладая сниженным потенциалом к активации.

Сердюк А. И., Дианов Д. В., Кузнецова В. С., Давыдова В. Д., Корнеев К. В., Лебедева В. О., Боголюбова А. В. ОПТИМИЗАЦИЯ КОНСТРУКЦИИ ХИМЕРНОГО АНТИГЕННОГО РЕЦЕПТОРА, НАПРАВЛЕННОГО НА В-КЛЕТОЧНЫЙ АНТИГЕН СБ19

ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России

Введение. На протяжении последнего десятилетия активно развивается направление терапии злокачественных заболеваний крови с использованием Т-лимфоцитов, модифицированных химерным антигенным рецептором (CAR). Показано, что для различных мишеней на поверхности опухолевых клеток лучше подходят разные комбинации антиген-распознающих и костимуляторных доменов в составе CAR, и конструирование новых последовательностей CAR не теряет своей актуальности.

Цель работы. Изучить силу активации Т-клеток при использовании различных вариантов антиС019 CAR конструкта.

Материалы и методы. С помощью методов молекулярного клонирования были созданы конструкции, кодирующие анти-С019 CAR и имеющие в структуре различные регуляторные элементы, антиген-распознающий, костимуляторный и цитокиновый домены. Посредством лентивирусной трансдукции были получены стабильные линии репортерных клеток Jurkat Е6-1 TPR, несущие исследуемые CAR и гены флуоресцентных белков под промоторами транскрипционных факторов NFAT, NF В и АР-1. Степень активации определяли методом проточной цитометрии после кокультивации с клетками-мишенями, несущими на поверхности антиген CD19.

Результаты и обсуждение. В работе были выявлены элементы конструкции, необходимые для получения CART-клеточного

продукта, демонстрирующего сильную активацию в ответ на предъявление антигенного стимула. Так, наиболее эффективным промотором являлся полноразмерный EF-la. Также было проведено сравнение человеческого сигнального пептида GM-CSFR с сигнальным пептидом мышиного Igk и показано, что активация CAR сильнее при наличии GM-CSFR. В качестве антигенраспознающего домена рассматривали scFv FM.C63 и XS6, причем большийуровень активации наблюдали при использовании последнего. В то же время, длина линкера между цепями scFv не влияла на силу активации. Кроме того, было показано, что костимуляторный домен CD28 вызывал более сильную активацию, что может потенциально приводить к приобретению клетками истощенного фенотипа при длительной кокультивации с клетками-мишенями.

Заключение. Представленные результаты расширяют понимание роли различных доменов в составе CAR конструктов и возможностях их применения в клинической практике. Следующий этап работы с использованием CAR-T-клеток, полученных из Т-лимфоцитов периферической крови здоровых доноров, позволит изучить способность различных CAR-T-клеточных продуктов к элиминации опухолевых клеток. Использование же в конструкции CAR генов провоспали-тельных цитокинов потенциально позволит увеличить эффективность подобной иммунотерапии.

Синяев А. А., Попова М. О., Рогачева Ю. А., Власова Ю. Ю., Смирнова А. Г., Бондаренко С. Н., Моисеев И. С., Кулагин А. Д.

КОЛОНИЗАЦИЯ ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫМИ БАКТЕРИЯМИ С МНОЖЕСТВЕННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТЬЮ

ПРИ ОСТРОЙ РЕАКЦИИ «ТРАНСПЛАНТАТ ПРОТИВ ХОЗЯИНА«

НИИ ДОГиТ им. Р. М. Горбачевой

Введение. РТПХ увеличивает риск и тяжесть инфекционных осложнений (ИО). Колонизация грамотрицательными (ГО) бактериями с множественной лекарственной устойчивостью (ЖЛУ) коррелирует с более высокой частотой ИО.

Цель работы. Изучить колонизацию ГО бактериями с МЛУу пациентов с острой РТПХ: эпидемиологию, влияние на частоту ИО, а также влияние на исходы.

Материалы и методы. В нашем центре мы провели анализ ИО у пациентов с РТПХ. Ретроспективное исследование включен 131 взрослый пациентов (табл.) с острой РТПХ после алло-ТГСК со медианой наблюдения 513 дней (22—2688). Анализ проводился в соответствии со статистическими рекомендациями ЕВМГ.

Результаты и обсуждение. Кумулятивная частота (КЧ) бактериальных инфекций (БИ) составила 39,6% (95%ДИ 31,3—47,9). В многофакторном анализе поражение ЖКТ при острой РТПХ увеличивает риск БИ: ОР 2,8 (95%ДИ 1,4—5,4), p<0,01. А среди всех ИО, только БИ в группе оРТПХ значимо влияли на общую выживаемость: ОР 2,9 (95%ДИ l,5-5,5),p<0,01. Частота колонизации ESBL-продуцирующими ГО бактериями составила 75,5% (я=99), СРЕ — 32% (я=42). Преимущественно представлена К. pneumoniae (я=52, 53%) и Е. coll (я=15, 15%). КЧ ГО бактериальных инфекций 28,2% (95%ДИ 20,8—36,1), основной возбудитель — К.pneumoniae (n=17, 71%). Колонизация ESBL-продуцентами значимоувеличивает КЧ ГО бактериальных инфекций: 33,3% (95%ДИ 24,3—42,6) против 12,5% (ДИ 95% 3,9-26,2),p=0,0192. Также как и колонизация СРЕ: 42,9% (95%ДИ 27,8-57,1) против 21,3% (95%ДИ 13,5-30,3), Р<0,01. КЧ ГО инфекций кровотока (ИК) составила 12,9% (95%ДИ 7,9—19,3). Влияния колонизации ESBL (p=0,18) и СРЕ (р=0,16) на КЧ ИК не обнаружено. Этиология представлена К. pneumoniae (я=14, 82%), P. aeruginosa (я=2, 12%), Acinetobacter sp. (я=1, 6%). Среди пациентов с ИК (я=17, 100%):

совпадение по культуре между возбудителем и колонизацией в 10 из 17 случаев (59%); совпадение механизма резистентности: 8 из 17 (47%); смерть от сепсиса в 16 из 17 случаев (94%). Колонизация СРЕ значительно увеличивает 1-годичную безрецидивную летальность:

38,4% (95%ДИ 23,9-52,8) против 20,3% (95%ДИ 12,7-29,3),р=0,0286.

Заключение. Колонизация ГО бактериями с МЛУ значимо влияет на КЧ ГО бактериальных инфекций, но не влияет на КЧ ИК; колонизация СРЕ значимоувеличивает 1годичную безрецидивную летальность.

Таблица. Характеристика пациентов

Группа острой РТПХ (п=131)

N %

Возраст, медиана 37(18-67]

Мужчины Женщины 64 67 48,9 51,1

Стандарт Терапия «спасения» 85 46 64,9 35,1

Донор Haplo MRD MUD MMUD 24 17 53 37 18,3 13 40,5 28,2

Источник СК PBSC ВМ 100 31 76,3 23,7

Режим кондиционирования RIC MAC 114 17 87 13

Степень РТПХ 2 3 4 63 55 13 48 42 10

Follow-up, медиана 513 дней (22 - 2688]