CC BY
36
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
23
цифелина может быть достигнуто за счет снижения количества хирального балласта (стереоизомер 1Ь). С этой целью нами разработан метод получения субстанции цифелина, основанный на использовании процесса ДКР. Процесс основан на быстром превращении исходного соединения 2 в оксазолон 3, катализируемом основанием, с последующим стереоселективным образованием
дипептида 1а. Содержание целевого дипептида в смеси по данным ВЭЖХ составляет до 80%. Из указанной смеси после перекристаллизации получали субстанцию препарата цифелин.
Работа выполнена при поддержке РФФИ-Урал, грант 01-03-96424.
СИНТЕЗ И ПРЕДКЛИНИЧЕСКИЕ ИСПЫТАНИЯ НОВЫХ КАРБОРАНИЛПОРФИРИНОВ ДЛЯ БОРИЕЙТРОНЗАХВАТИОЙ ТЕРАПИИ РАКА
А.В. Зайцев1, В.А. Ольшевская2, В.Н. Лузгана1, А.А. Штиль3, ТА. Сидорова3, Р.П.
Евстигнеева1
Московская Государственная академия тонкой химической технологии им. М. В. Ломоносова, г. Москва 2Институт элементоорганическйх соединений РАН им. А.Н. Несмеянова, г. Москва 3Российский Онкологический научный центр РАМН им. Н.Н. Блохина
Одним из условий эффективности противораковой терапии является преимущественная гибель опухолевых клеток при минимальном повреждении здоровых органов. Направленная доставка цитотоксического агента в опухоль позволит локализовать повреждение, наносимое тканям в результате терапевтических воздействий. Пор-фирины представляют класс химических соединений-кан-дидатов на роль селективных противораковых агентов. Порфирины - макроциклы, входящие в качестве просте-тических групп биологически активных соединений - избирательно накапливаются и продолжительное время задерживаются в быстро пролиферирующих тканях. Наряду с собственной автибдастомной активностью, такие вещества могли бы использоваться для доставки токсинов в опухоль. Действительно, конъюгаты порфиринов с борсодержащими соединениями, например, карборанами, применяются для борнейтронзахватной терапии (БНЗТ)
рака. Мы синтезировали серию карборансодержащих порфиринов, связанных с производными о-и-м карбора-нов через атом углерода полиэдрического ядра карбора-на. Синтезированные соединения тестированы на цито-токсическую активность относительно линий опухолевых клеток человека: А549 (аденокарицинома легких) и К562 (лейкоз). Изучение токсичности новых соединений для неопухолевых клеток проводилось на первичной культуре фибробластов кожи человека. Все испытанные соединения вызывали гибель опухолевых клеток в низких мик-ромолярных концентрациях в течение 48-72 час. Важным оказалось то, что металлосодержащве карбораны нетоксичны для нормальных фибробластов в исследованных концентрациях в течение 72 час. Таким образом, новые карборанилпорфирины перспективны для дальнейших предклннических испытаний как лекарственные препараты, специфичные для опухолевых клеток.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИТОКСАНТРОНА В ЛИОФИЛИЗИРОВАННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЕ
Е.В. Игнатьева, Л. Г. Гатшская, Б. С. Кикоть, И. В. Ярцева, Н.А. Оборотова Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН
Митоксантрон -1,4-дигидрокси-5,8-бис[[2-[(2-гидрокси-этил)-амино]этил]амино]-9,10-антрацендион - является по-лициклическим соединением антрахинонового ряда, способным интеркалировать в ДНК. Он обладает одинаковой активностью с антрациклиновыми антибиотиками при меньшей токсичности. Препарат, лекарственная форма которого представляет собой водный раствор митоксант-рона и вспомогательных веществ, разработан и выпускается американской фирмой “Цианамид”.В РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН разработана новая лекарственная форма препарата - “Митоксантрон-ГЛЕС лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 0,02 г”.
Для определения основного вещества в лекарственной форме и в технологическом “концентрате” был использован спектрофотометрический метод. В электронном спектре поглощения раствора митоксантрона в 0,1
№1/том1/2003
М растворе хлористоводородной кислоты наблюдаются четыре полосы поглощения с максимумами при 241; 275; 608; 660 нм, а также плечо 565 нм. Для количественного определения митоксантрона выбрана полоса поглощения с максимумом при 608 нм, так как эта полоса расположена в области спектра, где не поглощает большая часть органических соединений, а значения величины оптической плотности наиболее стабильны. Установлено, что поглощение лекарственной формы в диапазоне рабочих концентраций (0,001% - 0,0025%) подчиняется закону Бу-гера-Ламберта-Бера. При сравнении электронных спектров поглощения растворов митоксантрона, вспомогательных веществ и лекарственной формы показано, что присутствие вспомогательных ингредиентов не мешает определению основного вещества.
Определение проводится по стандартной методике спек-
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
24
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРА ТОВ
трофотометрирования. В кювете сравнения используется раствор вспомогательных веществ соответствующей концентрации. Предложенная методика предусматривает использование рабочего стандартного образца. В качестве РСО могут быть использованы как эталонный образец
митоксантрона, так и исходная субстанция, для которой известно содержание основного вещества. Разработанная методика обладает высокой точностью и воспроизводимостью, удобна в исполнении. Относительная ошибка определения не превышает 1 %.
СОЛЮБИЛИЗАЦИЯ с помощью липосом ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ НА ПРИМЕРЕ БЕТУЛИНОВОЙ КИСЛОТЫ И ГЕЛИОМИЦИНА
А.П. Каплун, С.В. Подольская, В.В. Красильникова, А.В. Сымон, В.И. ШвецМосковская Государственная Академия Тонкой Химической Технологии им. М.В. Ломоносова, (МИТХТ).119571, Пр. Вернадского 86. E-mail: [email protected] Тел. (095) 4348355
Известно несколько способов солюбилизации плохо растворимых лекарственных веществ: добавление органических растворителей (ДМСО, пропиленгликоля); использование комплексов с амфифильными полимерами (например, поливинилпирролидоном); измельчение до нанокристаллов в особых условиях для предотвращения агрегации; заключение в компартменты наночастиц (липосом, жировых эмульсий, полимерных мицелл); использование соединений включения (например, с производными циклодекстринов) и т.п.
Наиболее физиологичные способы предусматривают использование природных нетоксичных солюбилизаторов. Липосомы, жировые эмульсии, твердые жировые наночастицы содержат только фосфолипиды и триглицериды -нормальные компоненты тканей человека.
Мы исследовали зависимость удельной загрузки липосом гелиомицином и бетулиновой кислотой от состава липосом.
Липосомы получали экструзией мультиламеллярных липосом через ядерные фильтры (последовательно через 500, 300, 200 и 100 нм) с помощью ЬЛровоРав! Ва$1с. Концентрацию гелиомицина определяли по поглощению при 457 нм, бетулиновую кислоту - с помощью ВЭЖХ на обращенной фазе. Невключившееся в липосомы вещество отделяли фильтрацией через ядерные фильтры.
Для гелиомицина в липосомах из яичного фосфати-дилхолина было показано, что вплоть до 20% мольных весь антибиотик ассоциируется с липосомами. При дальнейшем увеличении доли вводимого лекарственного вещества доля ассоциированного с липосомами вещества уменьшается. При этом появляется еще одна дисперсная фаза размером ~ 400 нм, в которой присутствуют как фосфатидилхолин, так и гелиомицин с преобладанием последнего.
С введением холестерина максимальная удельная загрузка липосом уменьшается (для состава яичный фосфати-дилхолин/холестерин (яФХ/Хол) 7/3 она составляет 15%). При этом основные закономерности не изменяются.
Для бетулиновой кислоты исследовали липосомы из фос-. фолипидов с разной длиной цепи: яФХ и димиристоилфос-фатидилхолин. Удельная загрузка для этого, вещества оказалась значительно меньше 5-3%. Образовывалась и дополнительная дисперсная фаза с размером частиц >200 нм.
Природа отличной от липосом дисперсной фазы, образующейся при получении липосом с лекарственным веществом большего содержания, чем максимальная удельная загрузка, изучается. Она может представлять интерес, как новая лекарственная форма, так как в ней лекарственного вещества больше, чем носителя (в отличие от липосом), размеры меньше 1 мкм.
Работа поддержана грантом МНТЦ1781
ДОКЛИНИЧЕСКОЕ И КЛИНИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ КАСКАТОЛА
Л. И. Карасева, М.Я. Шашкина, Э.Г. Горожанская, Т. В. Давыдова, М.В. Максимова, А.В. Сергеев. Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН
Каскатол (КС) представляет собой комплекс естественной антиоксидантной, защитной системы организма, разработанный в НИИ ЭДиТО РОНЦ, выпускается ОАО “Хол-динг-ЭДАС”.
Цель работы - оценить возможность включения КС в схему комбинированного лечения онкологических больных. Проведено доклиническое изучение безопасности и эффективности КС. Безопасность оценивали в двух- месячном эксперименте на собаках, с добавлением КС в корм в 5-кратной терапевтической дозе с учетом видового коэффициента. Эффективность изучали на модели максимально приближенной к клиническим условиям. Опухоль яичника (С'аОУ) инокулировали под капсулу почки мы-
шей. КС добавляли ежедневно в корм животным в течение 2-3 недель. В качестве цитостатиков применяли цик-лофосфан (30-200мг/кг) или аранозу (500мг/кг). Активность КС оценивали по торможению роста опухолей (ТРО) и снижению числа хромосомных аберраций в клетках костного мозга мышей, индуцированных цитостатиками. В доклиническом исследовании не выявлено токсичности КС, в то же время показано, что он потенциирует действие цитостатиков и снижает их токсичность. ТРО по сравнению с контролем увеличивалось на 75-82%, а число хромосомных аберраций снижалось в 1,5-2 раза. Полученные данные с учетом исследований по иммуномодулирующей и антиканцерогенной активности позволили про-
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
№1/томШ003
