CC BY
19
24
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРА ТОВ
трофотометрирования. В кювете сравнения используется раствор вспомогательных веществ соответствующей концентрации. Предложенная методика предусматривает использование рабочего стандартного образца. В качестве РСО могут быть использованы как эталонный образец
митоксантрона, так и исходная субстанция, для которой известно содержание основного вещества. Разработанная методика обладает высокой точностью и воспроизводимостью, удобна в исполнении. Относительная ошибка определения не превышает 1 %.
СОЛЮБИЛИЗАЦИЯ с помощью липосом ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ НА ПРИМЕРЕ БЕТУЛИНОВОЙ КИСЛОТЫ И ГЕЛИОМИЦИНА
А.П. Каплун, С.В. Подольская, В.В. Красильникова, А.В. Сымон, В.И. ШвецМосковская Государственная Академия Тонкой Химической Технологии им. М.В. Ломоносова, (МИТХТ).119571, Пр. Вернадского 86. E-mail: [email protected] Тел. (095) 4348355
Известно несколько способов солюбилизации плохо растворимых лекарственных веществ: добавление органических растворителей (ДМСО, пропиленгликоля); использование комплексов с амфифильными полимерами (например, поливинилпирролидоном); измельчение до нанокристаллов в особых условиях для предотвращения агрегации; заключение в компартменты наночастиц (липосом, жировых эмульсий, полимерных мицелл); использование соединений включения (например, с производными циклодекстринов) и т.п.
Наиболее физиологичные способы предусматривают использование природных нетоксичных солюбилизаторов. Липосомы, жировые эмульсии, твердые жировые наночастицы содержат только фосфолипиды и триглицериды -нормальные компоненты тканей человека.
Мы исследовали зависимость удельной загрузки липосом гелиомицином и бетулиновой кислотой от состава липосом.
Липосомы получали экструзией мультиламеллярных липосом через ядерные фильтры (последовательно через 500, 300, 200 и 100 нм) с помощью ЬЛровоРав! Ва$1с. Концентрацию гелиомицина определяли по поглощению при 457 нм, бетулиновую кислоту - с помощью ВЭЖХ на обращенной фазе. Невключившееся в липосомы вещество отделяли фильтрацией через ядерные фильтры.
Для гелиомицина в липосомах из яичного фосфати-дилхолина было показано, что вплоть до 20% мольных весь антибиотик ассоциируется с липосомами. При дальнейшем увеличении доли вводимого лекарственного вещества доля ассоциированного с липосомами вещества уменьшается. При этом появляется еще одна дисперсная фаза размером ~ 400 нм, в которой присутствуют как фосфатидилхолин, так и гелиомицин с преобладанием последнего.
С введением холестерина максимальная удельная загрузка липосом уменьшается (для состава яичный фосфати-дилхолин/холестерин (яФХ/Хол) 7/3 она составляет 15%). При этом основные закономерности не изменяются.
Для бетулиновой кислоты исследовали липосомы из фос-. фолипидов с разной длиной цепи: яФХ и димиристоилфос-фатидилхолин. Удельная загрузка для этого, вещества оказалась значительно меньше 5-3%. Образовывалась и дополнительная дисперсная фаза с размером частиц >200 нм.
Природа отличной от липосом дисперсной фазы, образующейся при получении липосом с лекарственным веществом большего содержания, чем максимальная удельная загрузка, изучается. Она может представлять интерес, как новая лекарственная форма, так как в ней лекарственного вещества больше, чем носителя (в отличие от липосом), размеры меньше 1 мкм.
Работа поддержана грантом МНТЦ1781
ДОКЛИНИЧЕСКОЕ И КЛИНИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ КАСКАТОЛА
Л. И. Карасева, М.Я. Шашкина, Э.Г. Горожанская, Т. В. Давыдова,
М.В. Максимова, А.В. Сергеев. Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН
Каскатол (КС) представляет собой комплекс естественной антиоксидантной, защитной системы организма, разработанный в НИИ ЭДиТО РОНЦ, выпускается ОАО “Хол-динг-ЭДАС”.
Цель работы - оценить возможность включения КС в схему комбинированного лечения онкологических больных. Проведено доклиническое изучение безопасности и эффективности КС. Безопасность оценивали в двух- месячном эксперименте на собаках, с добавлением КС в корм в 5-кратной терапевтической дозе с учетом видового коэффициента. Эффективность изучали на модели максимально приближенной к клиническим условиям. Опухоль яичника (С'аОУ) инокулировали под капсулу почки мы-
шей. КС добавляли ежедневно в корм животным в течение 2-3 недель. В качестве цитостатиков применяли цик-лофосфан (30-200мг/кг) или аранозу (500мг/кг). Активность КС оценивали по торможению роста опухолей (ТРО) и снижению числа хромосомных аберраций в клетках костного мозга мышей, индуцированных цитостатиками. В доклиническом исследовании не выявлено токсичности КС, в то же время показано, что он потенциирует действие цитостатиков и снижает их токсичность. ТРО по сравнению с контролем увеличивалось на 75-82%, а число хромосомных аберраций снижалось в 1,5-2 раза. Полученные данные с учетом исследований по иммуномодулирующей и антиканцерогенной активности позволили про-
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
№1/томШ003
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРА ТОВ
25
вести клиническую апробацию КС на базе НИИ КО с включением двух групп онкологических больных. 1 группа больных раком яичника (30 человек) и 2 группа - раком молочной железы (80 человек). Каскатол назначали по 2 драже 4 раза в день в предоперационный период подготовки больных 1ой группы и по 2 драже 3 раза в день после радикального лечения больным 2ой группы. Оценивали по объективным и биохимическим показателям крови пациентов. Предварительное биохимическое исследование показало нарушение антиоксидантного статуса у всех больных, что выражалось в снижении активности СОД и концентрации бета-каротина в плазме на 30-50%, повышении концентрации токсичных метаболитов перекисно-
го окисления липидов по сравнению со здоровыми добровольцами. Химио-, радио-терапия и хирургическое вмешательство усугубляло ситуацию. Применение КС приводило к нормализации показателей антиоксидантного статуса, повышению активности СОД и концентрации бета-каротина в плазме крови в 1,5-2 раза, снижению концентрации токсичных метаболитов перекисного окисления - МДА и МСМ. У больных обеих групп значительно снижалось число послеоперационных осложнений.
Таким образом, включение каскатола в схему комбинированного лечения онкологических больных способствует коррекции естественной защитной системы организма и снижению эндогенной интоксикации.
СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ВЗАИМОСВЯЗИ ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРОВ НА ПРИМЕРЕ ЦИКЛОММИДНЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ХЛОРИНА Рб.
Т. А. Кармакова1, Г. В. Шаронов 2, А.И, Гришин2’4, А.Д. Плютинская А. И. Филясова2, А.В. Феофанов2, Н.И. Казачкта l, Р.И. Якубовская \ B.C. Лебедева3, Р.Д. Рузиев4,
А.Ф. Миронов3, П. Вини4
1Московский научно-исследовательский онкологический институт им. П. А. Герцена; 2Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова, Москва; 3Московская государственная академия тонкой химической технологии им. М. В. Ломоносова;
4Centre de Biophysique Moleculare, C.N.R.S., Universite de Orleans, France.
Охарактеризованы свойства фотосенсибилизаторов нового класса - производных циклоимида хлорина рб (ЦХлрб), поглощающих в длинноволновой области спектра (1р= 708-746 пт). Выявлена высокая фотоиндуцирован-ная активность данных соединений на культуре опухолевых клеток человека А549 (1С50 варьирует от 0,21 до 0,38 мкМ), значительно превышающая активность хлорина рб (1С50 = 5 мкМ) и Фотогема (1С50 = 8,5 мкМ). Для ряда производных ЦХлрб показана фотоиндуцированная противоопухолевая активность на лимфомоподобной модели перевивной опухоли мыши Р388. Выявлено, что противоопухолевый эффект фотодинамического воздействия может быть обусловлен повреждением как опухолевых клеток, так и сосудов. Таким образом, данные соединения могут оказаться перспективными для разработки новых эффективных ИК-фотосенсибилизаторов для фотодинамической терапии.
На примере производных ЦХлрб с различными боковыми заместителями, введенными в пиррольные кольца и имидный цикл выявлено, что структура молекулы существенно влияет на ключевые параметры, определяющие
фототоксичность соединений в отношении опухолевых клеток в культуре: квантовый выход генерации синглетно-го кислорода (0,35-0,73), коэффициент внутриклеточного накопления, скорость внутриклеточного накопления и выведения. Все исследованные производные эффективно проникают в клетку в мономерной форме при этом, характер заместителей определяет их преимущественную внутриклеточную локализацию. Фотосенсибилизаторы с менее гидрофобными заместителями накапливаются в мембранах аппарата Гольджи и митохондрий, с более гидрофобными заместителями - в гранулярных включениях нелизо-сомальной и неэндосомальной природы. И тот и другой тип внутриклеточного распределения обеспечивают высокую фототоксичность соединений. Проникновение производных МКлрб в клетку и их распределение в органеллах, предположительно, осуществляется посредством специализированных транспортных систем.
Работа поддержана грантами РФФИ (01-04-49298,
02-04-08043, 02-04-06181, 02-04-06182), НАТО (LST.CLG.9777077), PICSu ИНТАС (01- 0461).
ИЗУЧЕНИЕ БЕЗОПАСНОСТИ ПРОИЗВОДСТВА ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ ИЗ ГРУППЫ МЕТИЛНИТРОЗОМОЧЕВИН
Клочкова Т. И.
Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН
Токсичность противоопухолевых (ПО) препаратов представляет опасность для медицинского персонала, работающего с ними, и для работников фармацевтической и химической промышленности, их производящей. При
производстве ПО препаратов выбросы в атмосферу и воду по санитарным нормам недопустимы. Поэтому, при передаче ПО соединений для промышленного производства необходимо решить следующие задачи: 1) разрабо-
№1/том1/2003
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
