CC BY
0
При л о ж ен и е 1
Накастоев И. М., Гальцева И. В., Спицын В. К., Давыдова Ю. О., Байтерякова О. Н., Капранов Н. М., Гапонова Т. В. ФАКТОРЫ, ВЛИЯЮЩИЕ НА ВЫЖИВАЕМОСТЬ КРИОКОНСЕРВИРОВАННЫХ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК
ФГБУ«НМИЦгематологии» Минздрава России
Введение. Единственным методом длительного хранения стволовых клеток является криоконсервация. Одним из этапов процесса криоконсервации является подготовка полученной клеточной суспензии, включающая центрифугирование и разделение на несколько криоконтейнеров (при планировании 2 и более трансплантаций). По данным литературы хранение лейкоконцентрата до 72 часов при температуре от +2 до +4 0С, не оказывает негативного влияния на качество трансплантата. В 2022 году в ФГБУ «НМИЦ гематологии» при недостаточном количестве С034+ клеток, полученных за один день сбора, мы смешивали лейкоконцентраты полученные в течение 2—3 дней сбора в один криоконтейнер перед заморозкой.
Цель работы. Оценить влияние дополнительных манипуляций в виде смешивания лейкоконцентратов полученных в течение нескольких дней сбора на выживаемость криоконсервированных ге-мопоэтических стволовых клеток (ГСК).
Материалы и методы. В анализ было включено 32 криоконтей-нера заготовленных в течение нескольких дней и смешанных в один криоконтейнер перед криоконсервацией и 42 криоконтейнера, заготовленных за один день. Все исследованные образцы были до 1 года хранения. Методом проточной цитометрии было проанализировано количество ядросодержащих клеток (ЯСК), процент и абсолютное содержание нейтрофилов, моноцитов, лимфоцитов и С034+ клеток. Жизнеспособность оценивали с использованием красителя 7-амино-актиномицина О. Жизнеспособные клетки рассчитывали по отношению к общему количеству соответствующих клеток.
Результаты и обсуждение. Средняя выживаемость всех ЯСК составила 66,6% (34—91) для образцов, полученных из смешанных криоконтейнеров и 77% (32—99) для заготовленных за один день (Р= 0,068). При распределении средней выживаемости по различным популяциям лейкоцитов получены следующие данные: средняя выживаемость нейтрофилов составила 35% (4—70), моноцитов 80% (38—97), лимфоцитов 78% (27—98), стволовых клеток 79% (16—99,5) для смешанных лейкоконцентратов и 31% (5—73), 87% (58—98), 92% (75—99) и 94 (81—99,5) соответственно для заготовленных за один день. Статистически достоверная разница (^<0,05) получена для моноцитов, лимфоцитов и стволовых клеток, которые значимо хуже выживают при использовании смешивания клеток, полученных в течение нескольких дней сбора.
Заключение. По результатам, проведенных ранее исследований, хранение лейкоконцентрата при температуре от +2 до +4 0С в течение 48—72 часов не приводило к снижению выживаемости клеток. В нашем исследовании срок хранения перед криоконсервацией не превышал допустимых значений. По данным некоторых исследований высокая концентрация ЯСК в полученном лейкоконцентрате может оказывать негативное влияние на выживаемость клеток. Возможно сочетание таких факторов как высокая плотность ЯСК, хранение без заморозки более 24 часов и дополнительные манипуляции перед замораживанием (переливание в криоконтейнер, центрифугирование, разделение) приводят к апоптозу части клеток, что может приводить к запуску различных путей апоптоза в других клетках.
Накастоев И. М., Гальцева И. В., Спицын В. К., Давыдова Ю. О., Байтерякова О. Н., Егорова Е. К., Гапонова Т. В., Капранов Н. М.
ВЛИЯНИЕ СРОКОВ ХРАНЕНИЯ КРИОКОНСЕРВИРОВАННЫХ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК
НА ИХ ВЫЖИВАЕМОСТЬ
ФГБУ «НМИЦ гематоло
Введение. Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) является важным этапом лечения многих гематологических заболеваний. В некоторых случаях, полученные ГСК переливают не сразу после заготовки, а через несколько месяцев или даже лет. Единственным методом, позволяющим хранить лей-коконцентрат в течение нескольких лет, является криоконсервация. Криоконсервация это процесс низкотемпературного хранения клеток с возможностью восстановления их биологических функций после размораживания. В литературе есть сведения об успешном использовании стволовых клеток после 18 лет хранения. В то же время есть исследования, демонстрирующие негативное влияние длительного хранения на качество трансплантата.
Цель работы. Оценить влияние длительных (более 5 лет) сроков хранения на выживаемость криоконсервированных ГСК.
Материалы и методы. В анализ было включено 33 криоконтейнера со сроком хранения от 5 до 13 лет и 80 криоконтейнеров не более 1 года хранения. Во всех случаях криоконсервация проводилась с использованием диметилсульфоксида в концентрации 7%. Методом проточной цитометрии проанализировали количество ядросодержащих клеток (ЯСК) в образцах, процент и абсолютное содержание С034+ клеток, а также долю нейтрофилов, лимфоцитов и моноцитов от всех ЯСК. Жизнеспособность оценивали так же методом проточной цитометрии с использованием
гии» Минздрава России
красителя 7-аминоактиномицина D. Жизнеспособные клетки рассчитывали по отношению к общему количеству соответствующих клеток.
Результаты и обсуждение. Выживаемость всех ЯСК составила 61,5% (16—95) при сроке хранения более 5 лет и 77% (32—99) при сроке хранения до 1 года (Р=0,003). Выживаемость нейтрофилов составила 26% (4—55), моноцитов 79% (39—97), лимфоцитов 83% (60—96) и CD34+клеток 75% (17—96) при хранении более 5 лет и 31% (5—73), 89% (58-98), 92% (75-99) и 94% (81-99,5) соответственно для клеток, хранившихся менее 1 года. По данным литературы известно, что ней-трофилы значительно хуже переносят криоконсервацию чем другие популяции лейкоцитов. В нашем исследовании мы также получили значимое снижение выживаемости нейтрофилов по сравнению с другими популяциями клеток, однако, это не зависит от сроков хранения (p=0,34). Статистические различия по срокам хранения получены для выживаемости стволовых клеток (^<0,001), лимфоцитов (^<0,01) и моноцитов (p=0,045).
Заключение. Известно, что криоконсервация приводит к повреждению клеток. В литературе противоречивые данные относительно влияния сроков хранения на выживаемость ГСК. В результате нашего исследования мы установили, что длительный срок хранения приводит к достоверному снижению выживаемости CD34+ клеток лимфоцитов и моноцитов.
Наумова К. В., Гриценко Т. А., Носков К. К., Миронова Т. П., Самойлова Е. В. КЛИНИЧЕСКИЙ СЛУЧАЙ РАЗВИТИЯ ТЯЖЕЛЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ ГИПЕРГОМОЦИСТЕИНЕМИИ
ФГБОУ «Самарский государственный медицинский университет» МЗ РФ
Введение. Развитие сосудистых заболеваний, связанных с гипер- Цель работы. Представить клинический случай развития ослож-
гомоцистеинемией, можно предотвратить с помощью лечения фоли- ненийгипергомоцистеинемииупациента40лет.
евой кислоты и витаминами В6 и В12. Однако клиническая картина Материалы и методы. Изучены материалы истории болезни, ам-
некоторых патофизиологических состояний, вызванных гипергомо- булаторной карты и проведенных дополнительных методов исследо-
цистеинемией, может быть довольно тяжелой и необратимой. вания.
| ГЕМАТОЛОГИЯ ИТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | Ки$$1АтОША[ОРНЕМАТОЮСУАМОТкАМ$Ри$ЮЮСУ(СЕМАТОЮС1УА 1ТкАМ5Ри$10ЮС1УА) | 2024; ТОМ69; №2 |
Результаты и обсуждение. Пациент В., 40 лет поступил в отделение гематологии Клиник ФГБОУ ВО СамГМУ МЗ РФ с жалобами на общую слабость, одышку, тяжесть в груди и чувство сердцебиения. В анамнезе: в 2009 г. — ТЭЛА, тромбоз вен нижних конечностей. Пациент был дообследован, выявлены генетические мутации гемостаза (МТИЕЯ — гетерозигота, РА1-1 — гетерозигота) и высокий уровень гомоцистеина. Принимал варфарин (целевые значения ЖНО были достигнуты), фолиевую кислоту (5—10 мг/сут.), витамины группы В. В связи с рецидивирующими кишечными кровотечениями варфарин заменен на ривароксабан 20 мг/сут. В 2014 г. — мезентериальный тромбоз с резекцией части тонкой кишки. Ухудшение самочувствия с июня 2023 г., когда появились вышеописанные жалобы. Уровень гомоцистеина составил 182,9 мкмоль/л, диагностирован тромбоз БПВ правой нижней конечности. Назначен ривароксабан 15 мг 2 раза в сут. Госпитализирован в отделение гематологии в августе 2023 г. Пациент отрицает курение, прием алкоголя. При аускультации — ослабленное везикулярное дыхание, зафиксирована одышка. В биохимическом анализе крови: уровень гомоцистеина 194 мкмоль/л. К.Т-ангиография легочной артерии: ТЭЛА мелких нижнедолевых ветвей слева. ЭхоКГ: систолическое давление в легочной артерии — 37 мм рт. ст. ФВ ЛЖ по Симпсону — 58%. При УЗДГ сосудов: неокклю-зирующий тромбоз портальной вены. Признаки ПТФБ селезеночной
вены. Признаки портальной гипертензии; ПТФБ глубоких вен левой нижней конечности в стадии частичной реканализации, явления ин-терстициального отека на уровне голени слева. Поставлен диагноз: Жультифакториальная тромбофилия генетическая (МТНЕК — гетерозигота, РА1 — гетерозигота) гематогенная (гипергомоцистеи-немия). Состояние после перенесенной ТЭЛА, тромбоза вен левой нижней конечности (2009 г.). Состояние после мезентериального тромбоза с резекцией части тонкой кишки (2014 г.). Тромбоз БПВ правой нижней конечности от 05.07.2023. ТЭЛА мелких ветвей слева 07.08.2023. 60 баллов по РЕ81. Легочная гипертензия. Подострое легочное сердце. ДНО. Пациенту назначен: дабигатран 150 мг 2 раза в сут., ангиовит 5 мг 2 раза в сут., плазмаферез. Несмотря на проводимую терапию, состояние пациента прогрессивно ухудшалось. Исходом госпитализации явилась смерть пациента.
Заключение. Данный клинический случай интересен многообразием клинических проявлений гипергомоцистеинемии и её осложнений в виде повреждения жизненно-важных органов и относительно удовлетворительным состоянием пациента на протяжении длительного времени. Таким образом, гипергомоцистеинемия требует незамедлительной диагностики для своевременного начала адекватной терапии и профилактики гемодинамических и органных осложнений.
Неведрова О. Е.1, Баранникова Л. В.1, Белозерская Г. Г.1, Момот А. П.2, Кабак В. А.1, Логвинова Ю. С.1, Калелова А. В.1,
Голубев Е. М.1, Росса А. А.1
ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СВОЙСТВ ЛОКАЛЬНЫХ ПОКРЫТИЙ НА ИХ ГЕМОСТАТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
1ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, 2Алтайский филиал ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. .Массивные посттравматические кровотечения являются наиболее частой причиной смерти на поле боя и второй по значимости причиной смерти от догоспитальной травмы среди гражданского населения. Перспективными для исследования и последующего внедрения в производство являются гемостатические полимерные покрытия в форме губки и плёнки.
Цель работы. Оценка влияния различных концентраций растворителя и гемостатически активных добавок на гемостатическую активность и физико-химические свойства покрытий в форме губки и плёнки на основе хитозана.
Материалы и методы. Для изготовления исследуемых покрытий использовались растворы хитозана (X) с массовой долей 1,0%, в качестве растворителя применяли 0,5% и 3,0% уксусную кислоту (Ук), измерены рН и вязкость растворов. На основании данных растворов были изготовлены экспериментальные образцы покрытий в форме губки и плёнки с введением в их состав гемостатически активных добавок. Для покрытий в форме губки изучена оптическая микроскопия. Значения физико-химических параметром определяли построением кинетических кривых водопоглощения. Гемостатическую активность (ГА) всех покрытий определяли посредством измерения времени остановки кровотечения и объёма кровопотери.
Результаты и обсуждение. Эксперименты 1п показали, что все покрытия обладают ГА. Показано влияние изменений концентраций тромбина и растворителя в составе покрытий в форме губки на их структурно-функциональные свойства и ГА вусловиях капиллярно-паренхиматозного кровотечения, а также влияние введения микро-и наночастиц оксидов железа (НЧ) в покрытия в форме плёнки на ГА.
Заключение. В работе измерены рН и вязкость растворов, на основании которых получали гемостатические покрытия в форме губки и плёнки. Для покрытий в форме губки с помощью оптического микроскопа показано, что увеличение концентрации Ук и введение тромбина не влияет на макропористую структуру губок. Основной объём покрытий составляют поры, образованные лентовидным полимерным каркасом, на котором нет неровностей или выпуклостей, что свидетельствует о равномерном распределении добавок в исследуемых губках. Введение тромбина в губки на основе 1% X в 3,0% Ук не эффективно. Выявлена взаимосвязь между значениями гемостатической активности локальных покрытий на основе хитозана в Ук ¿п ^¿ро при их аппликации на раневую поверхность печени кролика и физико-химическими показателями 1п у'йго. Проведение исследований 1п ^о и 1п у'йго интересно и необходимо для сравнительной оценки структурного состояния и механизма действия новых гемостатических средств локального действия. Для покрытий в форме плёнки показано, что большинство покрытий на основе 1,0% X с добавлением микро- и наночастиц оксидов железа не способны эффективно останавливать кровотечение. Большой разброс экспериментальных данных был связан со слабыми адгезивными свойствами плёнок на раневой поверхности и различным темпом кровотечения. В ходе экспериментов наблюдалось подтекание крови из-под краёв плёнок. Тенденция к увеличению гемостатической активности была отмечена только у образцов X (300 кДа) 1,0% + НЧ-29 (25 мг) и X (500 кДа) 1,0% + НЧ-29 (50 мг) (79,80±12,90% и 75,78±12,66% соответственно).
Никитина Т. П.1, Мельниченко В. Я.2, Федоренко Д. А.2, Саржевский В. О.2, Банникова А. Е.2, Богатырев В. С.2, Мамедова А. А.2, Мочкин Н. Е.2, Панченко А. К.2, Рукавицын А. А.2, Самойлова А. А.2, Шорохов Н. С.2, Порфирьева Н. М.3, Ионова Т. И.'
РАЗРАБОТКА И АПРОБАЦИЯ ЭЛЕКТРОННОГО ДНЕВНИКА САМОЧУВСТВИЯ ПАЦИЕНТА «ЭД-САМ» ДЛЯ МОНИТОРИНГА КАЧЕСТВА ЖИЗНИ ПАЦИЕНТОВ ОНКОГЕМАТОЛОГИЧЕСКОГО ПРОФИЛЯ В КЛИНИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ
1Клиника высоких медицинских технологий им. Н.И. Пирогова СПбГУ, Национальный медико-хирургический центр им. Н.И. Пирогова МЗ РФ, Межнациональный центр
исследования качества жизни
Введение. Оценка качества жизни является одной из составляющих пациент-ориентированной медицинской помощи и направлена на получение от пациента информации об изменении его состояния в процессе лечения.
Цель работы. Цель исследования — разработка и апробация электронного приложения для мониторинга качества жизни и симп-томову пациентов с онкогематологическими заболеваниями, получающих высокотехнологичную медицинскую помощь (ВЖП).
