CC BY
1и оптимизированный нами ранее [2]. Модель оценки скорости и направления движения ДК исследовали в системе наблюдения за живыми клетками Cell-IQ с программным обеспечением Cell-IQ Analyser (CM Technologies Oy, Finland).
Результаты
Изучение на модели кокультивирования с клетками МК in vitro миграционных свойств незрелых ДК под влиянием компонентов опухолевого микроокружения, блокирующих их подвижность, показало, что между количественным содержанием факторов TGFßl, VEGF-A, EGF, FGF, HGF, цитокина IL10, растворимой формы лиганда sFASL в супернатантах культур МК и средней скорости движения ДК, определяемой в аналитической системе Cell-IQ, существует обратная корреляция высокой силы (р&к;0,01). Направление траекторий ДК, определяемое по углу движения клеточной популяции, было связано с экспрессией клетками МК диф-ференцировочных антигенов Melan A, тирозиназы, раково-тестикулярных антигенов семейств MAGE, BAGE, NY-ESO1. Добавление в культуральную модельную систему высоких концентраций ILIO, TGFßl, VEGF приводило к статистически значимому уменьшению длины траектории и средней скорости прохождения траектории ДК (p<0,05).
Выводы
Опухоль формирует иммуносупрессивное микроокружение, которое способно воздействовать на скорость и направление миграции ДК.
Список литературы
1. Sakref C, Bendriss-Vermare N, Valladeau-Guilemond J . Phenotypes and Functions of Human Dendritic Cell Subsets in the
Tumor Microenvironment. Methods Mol Biol . 2023;2618:17-35 . DOI: 10 ,1007/978-1-0716-2938-3_2 . 2 . Нехаева Т. Л . Оптимизация аутологичных дендритно-клеточных вакцин для лечения больных злокачественными
новообразованиями / Т Л . Нехаева // Сибирский онкологический журнал . 2013 . Vol . 57 . № 3 . P 52-56 .
Эпигенетический метод определения подтипа лимфомы из клеток мантийной зоны
Авторы:
(1) Бигильдеев Алексей Евгеньевич, [email protected], ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, Москва
(2) Карпенко Дмитрий Владимирович, [email protected], ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, Москва
(3) Королева Дарья Александровна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, Москва
(4) Звонков Евгений Евгеньевич, [email protected], ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, Москва
Ключевые слова
лимфома из клеток мантии, эпигенетика, диагностика лимфом, метилирование ДНК, CpG
Актуальность
Выделяют два основных подтипа лимфомы из клеток мантии (ЛКМ): классический (С1) и лейкеми-ческий ненодальный (С2) [1]. Для классического варианта характерно агрессивное течение заболевания, наличие симптомов опухолевой интоксикации (В-симптомы) и генерализованной лимфаденопатии. В случаях лейкемической ненодальной формы ЛКМ чаще наблюдается индолентное течение заболевания, поражение костного мозга, лейкемизация и спленомегалия, незначительное увеличение размеров лимфатических узлов. Для определения варианта ЛКМ используются клинико-лабораторные данные, имму-ногистохимические и молекулярно-генетические исследования. Недавно было установлено, что подтипы ЛКМ можно установить, измерив степень метилирования всего трех CpG [2], однако этот метод дорогой и трудоемкий, поскольку опирается на получение полногеномного профиля метилирования ДНК с помощью NGS-секвенирования.
Цель
Провести пилотное исследование по определению подтипа ЛКМ с помощью избирательного анализа степени метилирования CpG с помощью секвенирования по Сэнгеру.
Материалы и методы
В дебюте заболевания у пациентов с ЛКМ (n=18) были получены клетки периферической крови (ПК) (n=11), костного мозга (n=6) или биоптат лимфоузла (n=1). В качестве контроля были использованы клетки ПК пациентов с неопухолевыми заболеваниями системы крови (n=3). Из клеток выделяли ДНК и проводили бисульфитную конверсию. Амплифицировали CpG cg03425785, cg07769421 и cg23892310 c помощью подобранных условий реакции и праймеров, фланкирующих локусы интереса в традиционной ПЦР. Очищали продукт ПЦР и секвенировали его по Сэнгеру. Степень метилирования CpG определяли по ранее разработанной методике [3].
Результаты
В 5 образцах ПК был обнаружен лимфоцитоз. Разработанный метод позволил верно определить подтип ЛКМ в 80% (4/5) из них: по 2 случая С1- и С2-подтипов. В образцах костного мозга метод позволил верно определить подтип только в 50% случаев (3/6). Стоит отметить, что в норме доля лимфоцитов в костном мозге ниже, чем в ПК, и искажение клеточного состава костного мозга вследствие его лейкемизации обычно менее выражено, чем искажение формулы крови. Вероятно, с этим связана меньшая точность метода в костном мозге. В единственном образце, где в качестве источника ДНК была биопсия лимфоузла, подтип ЛКМ был определен верно (С1).
Выводы
Эпигенетический метод определения подтипа ЛКМ показал свою перспективность, но нуждается в доработке. Для повышения точности метода представляется целесообразным выделять ДНК не из суммарной клеточной популяции ПК или костного мозга, а из мононуклеарных клеток или из фракции В-лимфоцитов. Это позволит увеличить долю опухолевых клеток в образце и повысит точность метода.
Список литературы
1. Queirös, A. C . et al . Cancer Cell 30, 806-821 (2016) . DOI: 10 ,1016/j . ccell . 2016 . 09 . 014.
2 . Duran-Ferrer, M . et al . Nat . cancer 1, 1066-1081 (2020) . DOI: 10 ,1038/s43018-020-00131-2 .
3 . Karpenko, D . et al . DNA Cell Biol . 39, 790-800 (2020) . DOI: 10 ,1089/dna . 2019 . 5310 .
Исследование эффективности нового соматоклеточного противоопухолевого препарата «Мукоплазмин-ovа» для CAR-T терапии СА125-позитивных опухолей
Авторы:
(1) Боженко Владимир Константинович, [email protected], ФГБУ «Российский научный центр рентгено-радиологии» Минздрава России, Москва
(2) Киселева Яна Юрьевна, [email protected], ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадио-логии» Минздрава России, Москва
(3) Шишкин Александр Михайлович, [email protected], ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиоло-гии» Минздрава России, Москва
(4) Кулинич Татьяна Михайловна, [email protected], ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России, Москва
(5) Большакова Оксана Борисовна, [email protected], ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России, Москва
(6) Кудинова Елена Александровна, [email protected], ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России, Москва
(7) Солодкий Владимир Алексеевич, [email protected], ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадио-логии» Минздрава России, Москва
Ключевые слова
иммунотерапия, рак яичников, соматоклеточный лекарственный препарат, CAR-T терапия
Актуальность
Опухоль-специфичный антиген рака яичников СА125 считается привлекательной терапевтической антигенной мишенью для таргетной терапии [2]. В работе приведены результаты исследования противоопухолевой
