CC BY
20
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
ладанием гомозиготного гаплотипа гена IL-10 (C-819T) с аллелем «дикого» типа (%2 = 5,93; р = 0,01; OR = 16,00; 95%CI: 1,27-200,93). Таким образом, найденные отличия характеризовали группу больных ММ с риском развития осложнений в раннем посттрансплантационном периоде, требующих коррекции медикаментозной терапии.
Заключение. Выявленные точечные полиморфизмы в локусах генов IL-1ß (G-1473C) и IL-10 (C-819T) могут играть роль в воспалении и/или обеспечении целостности эпителия слизистых оболочек при повреждающем токсическом действии на них химиотерапевтических препаратов. Определение этих маркеров может служить предиктором развития тяжелых мукозитов у больных ММ в раннем периоде после ауто-ТГСК, позволит индивидуализировать меры профилактики и своевременно скорректировать тактику лечения.
МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ИЗМЕНЕНИЙ В ПЕРИФОКАЛЬНОЙ ЗОНЕ ГЕПАТОЦЕЛЛЮЛЯРНОГО РАКА
Непомнящая Е.М., Шапошников А.В., Никипелова Е.А., Рядинская Л.А., Ульянова Е.П.
ФГБУ«Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Министерства здравоохранения РФ, Ростов-на-Дону, Россия
Введение. В последнее десятилетие отмечаются значительные успехи в изучении этиологии, патогенеза, диагностики и лечения злокачественных новообразований различных локализаций. Однако во всем мире и в России наблюдается постепенный рост заболеваемости. Особый интерес вызывает изучение влияния различных общих и местных коморбидных заболеваний в онкогенезе. Следует выделить базовые изменения в печени: воспаление — фиброз — цирроз — рак. Этому могут способствовать различные факторы: вирусные гепатиты, метаболический синдром, наследственность, возрастные изменения, эн-докринно-обменные процессы.
Цель и задачи. Изучить морфологические изменения в перифокальной зоне при гепатоцеллюлярной карциноме.
Материалы и методы. Материал забирали интраопера-ционно на расстоянии 2-3 см от края опухоли. Гистологическое исследование осуществляли на светооптическом уровне. Иммуногистохимическое исследование проводили с антителами CD3, CD4, CD8 для определения состава лимфоцитарного инфильтрата. Гистологически гепато-целлюлярная карцинома была представлена трабекуляр-ной и солидной формами.
Результаты. В удаленных неопухолевых участках печени были обнаружены фиброз, некроз, лимфоцитарная инфильтрация, стеатоз, цирроз. Патоморфологические изменения при наличии воспалительных изменений оценивали как активность воспалительного процесса, а также II-III степень фиброза и фибриногенеза. Вокруг портальных вен и в ткани печени была выявлена лимфо-цитарная инфильтрация, различной степени выраженности от незначительной до резко выраженной с формированием лимфоидных фолликул. Полученные результаты о лимфоцитарных инфильтратах в паратумо-ральной зоне при гепатоцеллюлярной карциноме, согласуются с исследованием выполненом нами ранее, в котором установлено, что обнаружение лимфоцитов происходит как из поступления их из крови, так и из костномозго-
вых предшественников. В лимфоцитарном инфильтрате преобладали преимущественно Т-хелперы — CD3+, CD4+, а также CD8+.
Заключение. Таким образом, выявленные структурные изменения в печени в виде фиброза, лимфоцитарной инфильтрации объективно вписываются в картину гепато-канцерогенеза: различные внешние и внутренние тумо-рогенные влияния приводят к фиброзно-некротическим изменениям органов мишени-печени с последующей трансформацией в опухолевый рост. Полученные данные подтверждают необходимость превентивной оценки функционально-морфологического состояния печени для последующего построения схем предопухолевой профилактики.
АНТИТЕЛА К ЭСТРАДИОЛУ И ПРОГЕСТЕРОНУ И РЕЦЕПТОРНЫЙ СТАТУС РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
Поленок Е.Г.1, Глушков А.Н.1, Антонов А.В.2, Вержбицкая Н.Е.3, Вафин И.А.4, Каменских Н.А.4
1ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр угля и углехимии» СО РАН (Институт экологии человека), Кемерово, Россия
2 ГБУЗ КО «Областной клинический онкологический диспансер», Кемерово, Россия
3 ГБУЗ КО OT «Кемеровское областное патологоанатомическое бюро», Кемерово, Россия
4 ГКУЗ КО «Кемеровский областной центр крови», Кемерово, Россия
Определение индивидуального риска возникновения рака молочной железы (РМЖ) с учетом рецепторного статуса опухоли имеет большое значение в связи с возможностью превентивной терапии (профилактики) селективными модуляторами эстрогеновых рецепторов (LaCroix A. et al., 2010; Cuzick J. et al., 2013; Sestak I., 2014). Одним из подходов к решению этой задачи представляется иммуноанализ антител (АТ), специфичных к стероидным гормонам.
Цель. Выявить ассоциации АТ класса А, специфичных к эстрадиолу и прогестерону (IgA-Es и IgA-Pg), с риском РМЖ с учетом наличия в опухоли эстрогеновых (ER) и прогестероновых (PR) рецепторов.
Материалы и методы. Уровни IgA-Es и IgA-Pg определили в сыворотке 222 здоровых женщин и 258 больных РМЖ в постменопаузе с помощью ранее описанного неконкурентного иммуноферментного анализа (Глушков А.Н. и соавт., 2011). Наличие ER и PR в опухоли определили с помощью стандартного иммуногистохи-мического метода (Петров С.В., 1998). Статистическую обработку результатов проводили с использованием программы Statistica 8.0 (StatSoft Inc., USA). Риски возникновения РМЖ оценивали на основании показателя отношения шансов (OR) с доверительным интервалом (CI) при 95% уровне значимости. Для выявления пороговых значений уровней АТ (cut-off) был проведен ROC-анализ (Hajian-Tilaki K., 2013).
Результаты. С помощью ROC-анализа были определены пороговые значения для АТ к стероидным гормонам: IgA-Es = 3, IgA-Pg = 3. Одновременное отсутствие или низкие уровни IgA-Es < 3 и IgA-Pg < 3 наблюдалось значительно реже у больных ER+PR+РМЖ по сравнению со здоровыми женщинами (38,2% против 56,8% соответственно, р = 0,0009). Повышение только уровней IgA-Es > 3 при отсутствии IgA-Pg обнаруживали значительно
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Онкоиммунология и гемобластозы Cancers and hematological malignancies
чаще у ER+PR+РМЖ (19,1%) и ER+PR-РМЖ (21,4%), чем у здоровых женщин (7,6%) (р < 0,05). Наличие только IgA-Pg без IgA-Es не было ассоциировано с РМЖ. Одновременно повышенные уровни обоих АТ значительно чаще встречались только у больных ER+PR+РМЖ в отличие от здоровых женщин (33,3% против 22,1% соответственно, р = 0,003).
Заключение. Впервые выявлены ассоциации антител к стероидным гормонам с РМЖ: при одновременном отсутствии IgA-Es и IgA-Pg риск ER+PR+РМЖ снижается (OR = 0,5, 95%CI 0,3-0,7), а при одновременном их образовании — повышается (OR = 2,2, 95%CI 1,3-3,7). Рекомендуется использовать предлагаемый вариант иммуноа-нализа антител к стероидным гормонам для определения показателей к превентивному назначению селективных модуляторов эстрогеновых рецепторов.
ОСОБЕННОСТИ МОНОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БОЛЬНЫХ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
Стахеева М.Н., Патышева М.Р., Андреева А.А., Тарабановская Н.А., Кайгородова Е.В., Слонимская Е.М., Чердынцева Н.В.
Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН, Томск, Россия
Макрофаги, ассоциированные с опухолью (МАО), занимают одну из центральных позиций в патогенезе злокачественных опухолей (Allavena P., Mantovani A., 2012). Эффекторы острой фазы воспаления М1-макрофаги реализуют цитотоксическую активность, в том числе и в отношении опухолевых клеток (Biswas S., Mantovani A., 2014). М2-макрофаги, активированные по альтернативному пути и опосредующие регенераторную фазу воспаления, в отношении опухоли проявляют рост-стимулирующую, ангиогенез-стимулирующую и иммуносупрессорную активность (Sica A., Mantovani A., 2012). Возможность изменить свойства МАО от М2-типа в сторону М1 делает их перспективным объектом для поиска и создания новых противоопухолевых иммунотерапевтических подходов. Большинство исследований для изучения свойств МАО и модуляции их активности используют модель индукции макрофагов из моноцитов периферической крови (ПК) здоровых доноров (Ambarus C.A. et al., 2012; Toniolo A. et al., 2015; Yang Y. et al., 2016). Вызывает сомнение адекватность подобного подхода, поскольку очевидно, что моноциты больного злокачественным новообразованием находятся в других условиях существования по сравнению со здоровыми лицами. Подобные отличия могут приводить к значимым изменениям базовых свойств моноцитов и изменять чувствительность к стимулам, индуцирующим поляризацию тканевых макрофагов. Целью работы явилось сравнение свойств (фенотип, экспрессия генов, продукция цитокинов) моноцитов ПК у больных раком молочной железы (РМЖ) и у здоровых лиц и выявление взаимосвязи с особенностями среды циркуляции (сывороточные цито-кины, циркулирующие опухолевые клетки).
Материалы и методы. В исследование включены 18 пациенток с впервые диагностированным инвазивным РМЖ и 6 здоровых женщин. В периферической крови методом проточной цитофлюориметрии были определены М1 (CD68+), M2 (CD163+) моноциты; моноциты, экспрессирующие рецепторы к IFNy(CD119+) и IL-4(CD124+); моноциты, продуцирующие внутриклеточные цитокины IL-1ß и TNFa. В полученной методом
магнитной сепарации фракции моноцитов методом количественной ПЦР в реальном времени была проведена оценка экспрессии генов, ассоциированных с поляризацией М1 (IL-1ß,TNFa) и М2 (CHI3L1, CHI3L2, CHID1, Stabilini). В качестве важных факторов среды циркуляции оценивали уровень воспалительных (IFNy, IL-1ß и TNFa) и противовоспалительных (IL-4) цитокинов в сыворотке крови методом ИФА и количество циркулирующих опухолевых клеток с фенотипом EpCAM+ (метод проточной цитофлюриметрии).
Результаты. Известно, что характерными особенностями злокачественного процесса являются системное воспаление и циркуляция опухолевых клеток в кровотоке (Ben- Baruch A., 2012; Serrano M.J., 2012). Действительно, в нашем исследовании уровень воспалительных цитокинов IFNy. IL-1ß и TNFa у больных РМЖ превышал соответствующие показатели у здоровых лиц в 4,48; 4,48 и 1,83 раза (р = 0,07; 0,002 и 0,1). Увеличение воспалительных цитокинов в циркуляции сопровождалось статистически значимым снижением экспрессии их генов и уменьшением внутриклеточной продукции IL-1ß в моноцитах ПК по сравнению со здоровым контролем. Однако количество CD68+ моноцитов ПК, которые, по мнению ряда авторов, характеризуют М1-популяцию моноцитов, не имело статистически значимых различий у больных РМЖ и у здоровых лиц. Значимым отличием в популяционной структуре моноцитов ПК у больных РМЖ явилось снижение М2 (CD163+) популяции и пула CD124+ моноцитов, экспрессирующих рецептор к IL-4 — главному индуктору М2-поляризации, по сравнению со здоровыми лицами. Если в группе контроля CD163+ моноциты составляли 14,35% от всех моноцитов, то у больных злокачественным новообразованием данный показатель равнялся лишь 0,85% (р = 0,0009). CD124+ популяция моноцитов у больных РМЖ в 3,6 раза меньше, чем у здоровых лиц (р = 0,005). При этом экспрессия генов-маркеров М2 в моноцитах и уровень сывороточного IL-4 не имели различий в группах сравнения. Интересен тот факт, что количество CD124+ моноцитов ПК у больных РМЖ коррелировало с уровнем EpCAM+ циркулирующих опухолевых клеток (r = 0,7, p < 0,05).
Заключение. Моноциты ПК у больных РМЖ и у здоровых лиц имеют выраженные фенотипические, экс-прессионные и функциональные отличия. Выявленные отличия связаны с системным воспалением и циркуляцией опухолевых клеток в кровотоке у больных РМЖ и могут оказаться критическими для осуществления направленного программирования свойств индуцируемых из моноцитов макрофагов у больных злокачественными новообразованиями, что следует учитывать при разработке иммунотерапевтических подходов.
ОЦЕНКА ПОПУЛЯЦИЙ ЛИМФОЦИТОВ У ПАЦИЕНТОВ С ГЛИОБЛАСТОМАМИ ДО И ПОСЛЕ ОПЕРАТИВНОГО ВМЕШАТЕЛЬСТВА
Сухина И.А., Чемодакова К.А., Мартынов Б.В., Никитин В.Ю., Иванов А.М., Иванникова Л.П.
Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова, Санкт-Петербург, Россия
Введение. Глиомы (нейроэпителиальные опухоли) составляют около 60% всех опухолей головного мозга. В настоящее время их лечение, в зависимости от степени злокачественности, может сочетать различные под-
