CC BY
0
При л о ж ен и е 1
Т3151 (7—15%), при которой иматиниб и ИТК 2 поколения не эффективны, и целесообразно назначение ИТК третьего поколения (пона-тиниба или асциминиба). В качестве метода для чувствительного, специфичного и быстрого определения клинически значимых мутаций мы предлагаем использовать полимеразную цепную реакцию в реальном времени с аллель-специфичными праймерами (АС-ПЦР).
Цель работы. Подобрать и синтезировать аллель-специфичные праймеры и флюоресцентные зонды для выявления мутаций Т3151, Е255К, ¥359У, М244У гена ВСК::АВЬ1 методом АС-ПЦР. Результаты сравнить с данными, полученными методом высокопроизводительного секвенирования (ВПС)
Материалы и методы. Аллель-специфичные праймеры и флюоресцентные зонды для поиска мутаций Т3151г Е255КГ Р359УГ М244У были подобраны авторами и синтезированы в компании «Синтол» (Россия). В исследование включены 15 образцов ДНК больных ХМЛ на разных этапах терапии ИТК, проходивших обследование и лечение на базе ФГБУ «НМИЦ гематологии« МЗ РФ 2020 по 2023 г. Мониторинг химерного транскрипта ВСК::АВЫ у больных ХМЛ про -водили с помощью набора «АмплиСенс Лейкоз Квант М-Бсг-ЕИТ» (Интерлабсервис, Россия).
Результаты и обсуждение. 15 образцов ДНК, выделенной из образцов периферической крови пациентов с резистентностью к ИТК,
были проанализированы методом АС-ПЦР на вышеназванные мутации. Уровень транскрипта ВСК::АВЫ на момент анализа составлял от 2,18% до 87,70%. Мутация Т3151 была выявлена в 8 образцах из 15, Е255К в 1 образце, Р359У в 2 образцах, М244У в 1 образце. В 5 образцах мутаций выявлено не было. При этом у двух пациентов были выявлены сочетанные мутации: у одного и а у второго
Т3151, Р359Уи Е255К. Все 15 образцов ДНК были исследованы методом ВПС для выявления мутаций в тирозинкиназном домене химерного гена ВСК::АВЫ. Мутация Т3151 была выявлена в тех же 8 образцах, что и при анализе с помощью АС-ПЦР, мутация Р255К в 2 образцах, РЗЗУУ в 2 из 15 образцах, М244Ув 1. Сравнение результатов, полученных двумя методами, показывает их полную идентичность, за исключением того, что в одном образце ДНК больного, в котором методом ВПС была выявлена мутация Е255К, методом АС-ПЦР она не была обнаружена. Это разногласие требует дополнительной проверки.
Заключение. Сравнение результатов, полученных методами АС-ПЦР с разработанными нами праймерами и ВПС для выявления мутаций Т3151г Е255КГ Р359УГ М244УГ показало их практически полную идентичность. Однако, метод АС-ПЦР для ДНК быстрее, проще в постановке и дешевле, чем ВПС. Также его можно использовать при анализе архивных материалов, оценки ответа на терапию и раннего прогнозирования резистентности к ИТК.
Каххарова Н. X.
ИЗУЧЕНИЕ ПОЛИМОРФИЗМА His 166Arg В ГЕНЕ FCG&A ПРИ МИЕЛОМНОЙ НЕЙРОПАТИИ
РСНПМЦ гематологии, Ташкент, Узбекистан
Введение. FCGR2A (CD32) входит в группу рецепторов для Fc-конца иммуноглобулинов класса G. Данный рецептор локализован на моноцитах, гранулоцитах, эозинофилах, макрофагах и В-лимфоцитах. CD32 обладает невысокой аффинностью и способен связывать только агрегированные IgG. Как правило, взаимодействие иммуноглобулинов с соответствующими рецепторами приводит к перераспределению последних на поверхности клетки и поглощению комплекса клеткой.
Цель работы. Изучение полиморфизм His 166Arg в гене FCGR2A при миеломном нейропатии.
Материалы и методы. Работа выполнена при РСНПМЦ гематологии в клинических отделениях. Ообследованы 94 пациента с достоверно установленным диагнозом множественная миелома в возрасте от 24 до 79 лет, из них 47 женщины (50%) и 47 мужчины (50%). Наибольшее количество больных составляли женщины в возрасте свыше 60 лет (39,4%). Полимофризм генов определяли по стандартной методике, выделение ДНК из ядер лимфоцитов, концентрация и чистота ДНК оценивалась при измерении оптической плотности при длине волны 260 и 280 нм против ТЕ, Амплификацию проводили на программируемом термоциклере фирмы "AppliedBiosystems",
при следующих условиях: предварительная денатурация — 940 °С (4 мин), 33 циклов амплификации: 940 °С (45 сек) — денатурация, 580 °С (45 сек) — отжиг праймеров, 720 °С (45 сек) — элонгация, и заключительный синтез 720 °С (3 мин). Статистическая обработка полученных данных по генотипированию полиморфныхучастков цито-кинов проводили с помощью пакет прикладных программ «OpenEpi 2009, Version 2.3» и компьютерной программы для анализа генетических данных "GenePop". Оценка отклонения распределений генотипов изученных полиморфизмов ДНК от канонического распределения Харди — Вайнберга проводилась с помощью компьютерной программы для анализа генетических данных "GenePop".
Результаты и обсуждение. Аллели и генотипы в основной и в контрольной группе распределялись относительно одинаковы, Н аллель в основной группе 61,2% а в контрольной группе 77,2%, А аллель 38,8% в основной и в контрольной группе 22,8% случаев. Статистические данные показали отношение шансов было равно 2,2, а доверительный интервал был равен 1,37—3,38, ^=0,01, эти результаты говорят, что А аллельувеличили шансы развития нейропатии в 2 раза.
Заключение. Данная мутация имеет высокие шансы развития миеломной нейропатии.
Каюмов А. А., Ачилова О. У.
АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ МОБИЛИЗАЦИИ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У ПАЦИЕНТОВ С МИЕЛОМНОЙ
БОЛЕЗНЬЮ И ЛИМФОМОЙ В УЗБЕКИСТАНЕ
РСНПМЦ гематологии, Ташкент, Узбекистан
Введение. В Узбекистане, как и во многих странах мира, развивается трансплантация костного мозга. Эта процедура дает возможность достичь длительной ремиссии пациентам в потенциально неизлечимых случаях, таких как миеломная болезнь и злокачественные лимфомы. Однако нередко неудачи в мобилизации стволовых клеток костного мозга могут ограничить применение данного метода терапии.
Цель работы. Определить частоту неудач, хороший результатов и предрасполагающих к неудаче факторов в мобилизации стволовых клеток (СБ34+) при миеломной болезни и лимфомах в Узбекистане.
Материалы и методы. Проанализированы результаты анализов 45 взрослых пациентов (11 с лимфомой и 34 с ММ) ретроспективно. Все пациенты получали О-СЭЕ, как традиционный режим мобилизации. Подсчет СБ34+ проводился методом цитофлуометрии.
Результаты и обсуждение. В исследовании у 10 пациентов с ММ и бти с лимфомой была отмечена плохая мобилизация. СБ34+ се11/рЬ составляла не более 8, позднее 5-го дня мобилизации. А к 7-му дня вовсе составляли не более 6 се11/рЬ. Исследование показало, что недостаточное количество С034 + менне 20се11/рЬ на 6-й день является предиктором плохой мобилизации стволовых клеток и требует применения Плериксофора. При этому 2 пациентов несмотря на низкий уровень С034+ проведены сеансы афе-реза. В первом случае СИ34+ составили 12 сеП/рЬ и за 2 сеанса собрано 2,99х10б СИ34+ клеток/кг. Во втором случае СИ34+ составили 11 се11/рЬ и за 2 сеанса не было собрано целевых 2,0х10б СБ34 +клеток/кг. У остальных 29 пациентов (24 с ММ и 5 с лимфомой) мобилизация и сбор были удачными. В среднем С034+ на 5-й день составил более 35±5се11/рЬ, а количество собранных С034+
| ГЕМАТОЛОГИЯ ИТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF НЕМАТОLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2024; ТОМ69; №2 |
клеток/кг в среднем было (3,14±1,5)х10б/кг. При анализе химио-терапевтического анамнеза, у пациентов с плохой мобилизацией было проведено более 4 курсов ПХТ, а в случае с лимфомами все 6 пациентов с неудачной мобилизацией принимали высокодозные курсы ПХТ с содержанием метотрексата и этапозида, и также получали не менее 4 курсов.
Заключение. При мобилизации СИ34+ клеток на основе О-СЭЕ, сбор стволовых клеток должен быть по возможности сразу же при достижении ремиссии. В данном исследовании прослежена зависимость снижения мобилизируемых С034+ клеток от количества проведенных ПХТ. Хорошим подходом может служить сбор и криоконсервация СШ4+ клеток и последующее продолжение ПХТ до начала ауто-ТКМ.
Ким А. Ю., Зоренко В. Ю., Полянская Т. Ю., Карпов Е. Е., Петровский Д. Ю., Сампиев М. С., Королева А. А., Садыкова Н. В.,
Голобоков А. В., Мишин Г. В., Ражаева М. У.
ПЕРИПРОТЕЗНЫЕ ИНФЕКЦИИ У ПАЦИЕНТОВ С ГЕМОФИЛИЕЙ В ПЕРИОД С 2015 ПО 2018 ГОД, ОПЫТ ОТДЕЛЕНИЯ
ФГБУ«НМИЦгематологии» Минздрава РФ
Введение. Эндопротезирование крупных суставов на данный момент является терапией выбора при терминальной стадии артро-патии у пациентов с гемофилией, что неминуемо приводит к увеличению количества осложнений, самое грозное из которых — пери-протезная инфекция.
Цель работы. Определить количество пациентов с гемофилией и перипротезной инфекцией, прооперированных в период с 2015 по 2018 год в отделении травматологии и реконструктивно-восстано-вительной ортопедии для больных гемофилией, сравнив полученные результаты с общей популяцией.
Материалы и методы. Проанализированы протоколы операций в период с 2015 по 2018 год, из которых отобраны и проанализированы операции при перипротезной инфекции. Все операции проведены в отделении травматологии и реконструктивно-восстановительной ортопедии для больных с гемофилией ФГБОУ «НМИЦ гематологии» МЗ РФ.
Результаты и обсуждение. Всего за исследуемый период проведено 30 операций ревизионного эндопротезирования при перипротезной
инфекции из 476 эндопротезирований, доля прооперированных пе-рипротезных инфекций составила 6,3%. Перипротезные инфекции левого коленного сустава встречались 9 раз (30%), правого — 19 (63%). В случае с тазобедренным суставом за весь исследуемый период перипротезные инфекции данных суставов встречались 2 раза, правого — 1 раз (3%) и левого — 1 раз (3%). Перипротезная инфекция у пациентов с гемофилией В встречалась в 9 случаях (30%), во всех остальных случаях пациенты страдали гемофилией А. За весь исследуемый период рецидив инфекции встречался 3 раза (10%). По данным мировой литературы перипротезные инфекции в общей популяции возникают в 2% случаев.
Заключение. Данное исследование показало, что такое осложнение как перипротезная инфекция после эндопротезирования суставов у пациентов с гемофилией встречается чаще и чаще рецидивирует, чем в общей популяции. Поиск причин возникновения данного осложнения требует дополнительных исследований.
Кислова М. И.1, Дмитриева Е. А.2, Наумова Е. В.3, Почтарь М. Е.3, Луговская С. А.3, Кобзев Ю. Н.1, Гладышева М. А.4, Обухова Т. Н/,
Бидерман Б. В.4, Судариков А. Б.4, Птушкин В. В.2, Никитин Е. А.2
КОМБИНАЦИЯ ИБРУТИИИБА И ВЕИЕТОКЛАКСА В ЛЕЧЕНИИ ПАЦИЕНТОВ С ХЛЛ И КОМПЛЕКСНЫМ КАРИОТИПОМ
'ГБУЗ «ГКБ им. С.П. Боткина», 2ГБУЗ «ГКБ им. С.П. Боткина» ДЗМ, ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России, 3ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России,
4ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Исследования К^Ъа! (2021) и Al-Sawaf (2020) показали неблагоприятное влияние комплексного кариотипа (КК) на показатели выживаемости у пациентов с хроническим лимфолейко-зом (ХЛЛ) как на терапии ибрутинибом и венетоклаксом. Выбор оптимального режима терапии и ее продолжительность остаются неопределенны для пациентов высокой группы риска. Клинические исследования, включающие пациентов с неблагоприятными факторами прогноза, в настоящее время сфокусированы на подходе, основанном на динамической оценке минимальной остаточной болезни (МОБ) при терапии различными комбинациями ингибиторов ВТК и венетоклакса.
Рис. 1
Цель работы. Оценка эффективности комбинации ибрутиниба и венетоклакса по сравнению с последовательной терапией ибрутинибом и венетоклаксому пациентов с ХЛЛ и КК.
Материалы и методы. Данное наблюдательное исследование включало пациентов с ХЛЛ и кариотипом высокой комплексности, >=5 хромосомных нарушений, или комплексным кариотипом в комбинации с делецией 17р (КК+ dell7p). Первая ретроспективная когорта пациентов включала пациентов, получавших терапию ибрутинибом (Imoho) до прогрессии с последующей терапией венетоклаксом, начиная с мая 2015 г. Вторая проспективная когорта включала пациентов, получающих комбинацию ибрутиниба и венетоклакса (IVen) с июля 2019. Комбинированная терапия продолжалась до достижения полной/частичной ремиссии с МОБ-негативным статусом в костном мозге в последовательных пункциях 1 раз в 3 месяца. Через 24 месяца терапии прием венетоклакса останавливался, ибрутиниб продолжался на постоянном приеме. Оценка показателей выживаемости проводилась с учетом случаев смерти от COVID-19, так как пациенты наблюдались не в разные временные интервалы.
Результаты и обсуждение. В исследование включено 94 пациента. В первой когорте — 50 пациентов, 44 — во второй. В первой когорте 34 пациента были переключены на терапию венетоклаксом. Характеристика пациентов представлена в табл. 1, 2. При настоящем периоде наблюдения IVen показал значимо лучшие показатели беспрогрессивной
