CC BY
9
УДК 615.28:616.34-008.8:636.4
С.А. Риженко, Г.М. Кременчуцький , О. В. Дробот, М.О. Бредихта, Т. В. Дикленко, 1.О. Гамота
Дтпропетровська обласна санiтарно-епiдемiологiчна станцiя (гол. лкар - д. мед. н., проф. С.А. Риженко) Дтпропетровська державна медична академiя (ректор -академiк АМН Укра'ти, д. мед. н., проф. Г.В.Дзяк)
ВПЛИВ ПРОБ1ОТИКУ «А-БАКТЕРИН» НА М1КРОБ1ОТУ КИШЕЧНИКУ ПОРОСЯТ
Ключовi слова: мкробюта поросят, пробютик «А-бактерин», умовно патогенна мкрофлора Key words: microbiota of piglets, probiotic "A-bacterinum", conditionally pathogenic microflora
Резюме. Представлены результаты исследования эффекта применения пробиотика «А-бактерин» на микробиоту кишечника поросят. Установлено, что у 80% поросят в первый день жизни из содержимого кишечника выделяется условно патогенная микрофлора, которая исчезала из микробиоты кишечника, за исключением P.vulgaris, у поросят, которые питались кормом, орошенным «А-бактерином». Увеличилось число поросят, у которых выделен штамм P.vulgaris, что является предметом последующих изучений свойств штамма. Summary. Research results of probiotic "A-bacterinum" application and its effect on microbiota of piglets' intestine are presented. It was determined that in 80% ofpiglets in the first day of life conditionally-pathogenic microflora is discharged from intestine, the latter disappeared from microbiota of intestinal content, except for P.vulgaris in piglets which were fed with forage, irrigated by "A-bacterinum". A number of piglets, in which strain P.vulgaris was discharged, increased. This is the subject of further investigation of this strain properties.
Важливою проблемою медично! науки i практики е поширення стшких до антибютиюв мш-рооргaнiзмiв [2, 8].
Глобальна стратепя Всесв^ньо! оргашзаци охорони здоров'я (ВООЗ) по стримуванню ре-зистентносп до антимшробних препарапв [4] прийнята у зв'язку iз значним поширенням в останш роки резистентних форм патогенних мiкроорганiзмiв i зниженням ефективносп ряду антибютиюв. Цю проблему, на думку ВООЗ, необхщно виршувати шляхом впровадження нових антибактерiальних препарапв, ращональ-ного використання антибютиюв, розробки вакцин i застосування в терапи механiзмiв анта-гошзму мiкроорганiзмiв.
Використання антибютиюв у твариннищга ютотно сприяло поширенню мiкроорганiзмiв, стшких до антибютиюв. У Ившчнш Америщ та Сврош приблизно 50% антибютиюв, що випус-кають, використовуються у тваринницга для профiлактичних цiлей i стимуляци росту [16].
Хвороби, що передаються через харчовi про-дукти, е важливою причиною захворюваносп i смертносп в усьому свiтi.
Проведенi дослщження показали, що пацiенти з резистентними штамами сальмонел гостта-лiзуються часпше, нiж пацiенти iз чутливими до
антибютиюв штамами, i смертнiсть серед них бшьш висока [10, 11, 13].
З огляду на заборону з 1 шчня 2006 року використання кормових антибютиюв (стимуляторiв росту) у Свропейському Союзi (€С), впровадження концепци «яюсть вщ ферми до столу» i вступ Укра!ни у Свiтову органiзацiю торгiвлi (СОТ) пiдвищуеться актуальнiсть питань безпеки харчових продукпв [3].
У €С природною альтернативою застосу-ванню антибютиюв у 1ж1 тварин стали пробю-тики. Сприятливий вплив пробiотикiв на тварин, у т.ч. на поросят, вщзначили ряд учених [12, 14, 15]. Однак подiбних дослщжень недостатньо, що шщювало вивчення нами впливу пробютику «А-бактерин» [9] на мшробюту тварин.
Метою дано! роботи було вивчення ефекту застосування пробютику «А-бактерин» на мшро-бюту кишечнику поросят.
МАТЕР1АЛИ ТА МЕТОДИ ДОСЛ1ДЖЕНЬ
У робой використали пробiотик «А-бактерин®», виготовлений вщповщно до ТУ У 15.801984033-001:2006, затверджених Мiнздравом Укра!ни (Висновок державно! саштарно-ешде-мюлопчно! експертизи № 05.03.02-06/27768 вщ 15.06.2006). Вмют у препаратi пробiотичного мiкроорганiзму Аегососсш viridans штам № 167 не менш 1108 КУО/см3.
08/ Том XIII/ 3
5
Вплив пробютику «А-бактерин» на концентращю м1кроорган1зм1в у м1кроб1от1 товстого кишечнику поросят (КУО/г)
Вм1ст м1крооргашзм1в у мшробюп кишечнику тварин
до прийому препарату (1-й день життя)
тсля прийому препарату (28-й день життя)
Поряд-ковий номер поросяти
загаль-на тль-к1сть E.coli
зага-
лакто-бактерй б1фвдо-бактерй вид УПМ УПМ льна юль-к1сть E.coli лакто-бактерн б1ф1до-бактерн вид УПМ УПМ
Досл1д
11 8^107 9106 1109 - - 2107 6106 1109 P.vulgaris 3108
12 8^107 1108 1109 - - 6107 4106 1109 P.vulgaris 5108
13 5107 5107 1109 K.pneumonia 1105 3108 <1105 1109 - -
14 7-107 3107 1109 E.aerogenes P.mirabilis 2105 2105 1107 <1105 <1109 - -
15 3107 1106 1107 K.pneumonia 6107 5107 3108 1109 - -
16 4106 6106 1109 E.coli 6104 2107 1,5108 1109 - -
17 8^107 5106 1109 K.pneumonia E.coli 2106 1105 1108 3108 1109 P.vulgaris 2107
18 19 5107 2107 2107 6106 1109 1109 E.coli P.rettgeri K.pneumonia P.mirabilis 1106 5105 5105 6107 3107 2107 2,5108 2107 1109 1109 P.vulgaris 8^107
20 1107 1106 1107 K.pneumonia P.vulgaris 2105 4107 2107 1107 1109 - -
Контроль (тварини, що не отримували препарату)
1-й день життя 28-й день життя
1 2108 3107 1109 K.pneumonia 1106 1108 2,5107 1109 K.pneumonia P.vulgaris 2106 3107
2 4108 3108 1109 - - 3107 8^107 1109 Citrobacter 8^107
3 3108 1108 1109 K.pneumonia E.aerogenes 7105 3105 2107 2106 1109 K.pneumonia E.aerogenes 6105 5105
4 2108 9108 1109 - - 2107 1106 <1109 - -
5 5107 1109 1109 K.pneumonia 7104 2106 4106 1109 K.pneumonia 6104
6 1108 6107 1109 E.coli 5106 5105 <1105 <1109 E.coli P.vulgaris 6106 8105
7 4108 1109 1109 K.pneumonia 1107 1107 7106 1109 K.pneumonia 8106
8 9107 2107 1109 K.pneumonia E.cloaceae 6105 7-107 1107 1107 1109 K.pneumonia E.cloaceae P.vulgaris 4105 5107 2108
9 3108 2108 1109 - - 8^107 8^107 1109 - -
10 4107 2107 1109 - - 3108 1107 1109 - -
Дослщження проводили на 6a3i господарства ТОВ «Агро-Овен» (Днiпропетровська область, Украша). Новонародженим поросятам у перший день, тд час обрiзання iклiв, одноразово вводили per os по 5 мл препарату (з концентращею живих аерокоюв не менш Ы08 КУО/см3).
З 18 по 28 день життя проводили годування
поросят сухим кормом, який був зрошений препаратом «А-бактерин®». У середньому кожне порося пощало за добу 150 г корму з розра-хунковим вмютом аерокоюв 4109 КУО/г.
Щцготовка корму: корм знезаражували уль-трафiолетовим випромшюванням, зрошували препаратом «А-бактерин®» встановлено! кон-
центраци i висушували. При KOHTponi A.viridans пoвнiстю 36epirae свою життeздатнiсть у KopMi при 36epiraHHi вiд +40 до +160С протягом 14 дiб.
Дослщна група визначена в кшькост 50 гoлiв (10 свиноматок i3 приплодом по 9-11 поросят). Контрольна група, яка не одержувала препарат «А-бактерин®», склала 50 гoлiв (10 свиноматок i3 приплодом по 9-11 поросят).
Для вивчення впливу препарату «А-бакте-рин®» в 1-й i 28-й день дослщу провели вiдбip проб фекалш вiд 10 поросят кожно! групи (по 2 з кожного приплоду). Провели мшробюлопчне дослщження вiдiбpаних проб i3 визначенням кон-центраци бiфiдoбактеpiй, молочнокислих бакте-рш, кишково! палички з нормальною фермен-тативною активнiстю, умовно патогенно! мшро-флори (УПМ).
Антибioтики у дослщнш i кoнтpoльнiй групах не застосовувалися.
Забip, пoсiв бioматеpiалу (фекалiй поросят), щентифшащя видiлених культур проводилися вщповщно до нормативно! документаци [6, 7].
Штами УПМ дoслiджували на чутливють до антибioтикiв вiдпoвiднo до методичних рекомен-дацiй [1]. Контролем був еталонний штам Escherichia сoli (АТСС 25922), отриманий з НД1 стандартизаци та контролю медичних бюло-пчних пpепаpатiв iм. Л.А.Тарасевича (ДНД1СК).
Визначення чутливосп дискo-дифузiйним методом проводили на сеpедoвищi АГВ iз дисками виробництва НДЦФ, Санкт-Петербург, Рoсiя.
Результати дослщження статистично обробле-нi [5], враховаш бioетичнi критери проведення дослщження.
РЕЗУЛЬТАТИ ТА IX ОБГОВОРЕННЯ
Результати дослщження мшробюти кишечнику поросят дослщно! i контрольно! груп наведет в таблищ.
Вiдпoвiднo до даних, що наведенi в таблищ, у перший день життя у 80% поросят дослщно! i контрольно! груп з кишечнику видшялася УПМ: K.pneumonia - 48%, P.mirabilis - 9,5%, E.coli -19%, P.rettgeri - 4,7%, P.vulgaris - 4,7%, E.aero-genes - 9,4%, E.cloaceae - 4,7%.
У поросят, як харчувалися кормом, зрошеним «А-бактерином®», вiдмiчаеться зникнення у вмiстi кишечнику УПМ: К.рпеитоша, P.mirabilis, E.coli, P.rettgeri, E.aerogenes, Е.с1оасеае. У той же час, тсля проведеного курсу отримання препарату, в 4 поросят видшена культура P.vulgaris (до отримання курсу ця культура була видiлена тшьки вiд одного поросяти).
У контрольнш груш УПМ кишечнику зали-шилася без змiн, за виключенням культури P.vulgaris, що не визначалася в перший день життя i була видшена у трьох поросят (30%) на 28 день життя. Дослщження властивостей штаму P.vulgaris i встановлення можливих причин !х-нього заселення мiкробiоти товстого кишечнику поросят е перспективою наступних дослщжень.
Не вщзначено iстотних змiн нормально! мш-рофлори кишечнику (лактобактерш i бiфiдо-бактерш) тварин дослiдно! групи.
Штами УПМ дослщжували на чутливiсть до антибютиюв. Видiленi культури в 85,7% були стшкими до антибiотикiв (канамiцин - 25,4%, цефазолш - 26,9%, еритромщин - 33,3%), 14,3% були чутливими до антибютиюв. Це пiдтверджуе роль антибютиюв, якi застосовуються у вете-ринарi!, у формуваннi резистентних форм мшро-органiзмiв.
ВИСНОВКИ
1. Установлено, що у 80% поросят на перший день життя iз вмiсту кишечнику видiляеться УПМ: К.рпеитоша, Р.тнаЫ^, E.coli, P.rettgeri, P.vulgaris, E.aerogenes, Е.с1оасеае.
2. Вiдзначено зникнення в мшробют кишечнику УПМ, за винятком P.vulgaris, у поросят, як
харчувалися кормом, зрошеним «А-бактери-
®
ном ».
3. У контрольнiй груш поросят до 28 дня життя УПМ у мшробют кишечнику в цшому не змшилася, за винятком збшьшення кiлькостi тварин з P.vulgaris з однiе! до трьох.
4. Вщзначено стшюсть видiлених штамiв УПМ до антибютиюв: канамiцину - 25,4%, цефазолшу - 26,9%, еритромiцину - 33,3%.
СПИСОК Л
1. Визначення чутливосп MiKpoopraHi3MiB до aHra6aKTepiaibHm препарапв: Методичнi BKa3iBKH 9.9.5-143-2007. - К., 2007. - 74 с.
2. Владыко А.С., Петкевич А.С. Новые и вновь появляющиеся инфекции. Молекулярная эпидемиология // Здравоохранение. - 2001. - № 11. - С. 23-24.
3. Глобальная стратегия ВОЗ в области безопасности пищевых продуктов: более безопасная пища ради лучшего здоровья. Резюме.- Женева:В0З,2003.- 35с.
4. Глобальная стратегия ВОЗ по сдерживанию резистентности к антимикробным препаратам. World Health Organization. - Женева, 2001. - 20 с.
5. Лакин Г.Ф. Биометрия: Учеб. пособие для студ. биол. спец. ун-тов и пед. вузов. - 3-е изд., перераб. и доп. - М.: Высшая шк., 1973. - 352 с.
6. Методические указания по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеро-бактериями. - М., 1984.
08/ Том XIII/ 3
7
7. Микробиологическая диагностика дисбакте-риозов: Метод. рекомендации. - К., 1986. - 27 с.
8. Руководство по инфекционному контролю в стационаре Пер. с англ.; Под ред. Р. Венцеля и др. -Смоленск: МАКМАХ, 2003. - 272с.
9. Рыженко С.А. Новый пробиотик А-бактерин. -Днепропетровск: Пороги, 2001. - 252 с.
10. Сальмонелла, обладающая резистентностью к противомикробным препаратам // Международная сеть органов по безопасности пищевых продуктов (ИНФОСАН). - Информационная записка. N. 3. -2005. Електронний ресурс: http://www.who.int/ foodsafety/ fs_management/ No_03_ Salmonella_ Apr05_ru.pdf
11. Antimicrobial-Resistant Nontyphoidal Salmonella is Associated with Excess Bloodstream Infections and Hospitalizations / Varma J.K., Molbak K., Barret T.J. et al. // J. Infect. Dis. - 2005. - Vol. 191. - P. 554-561.
12. Hasman H., Villadsenm A.G., Aarestrup F.M. Diversity and stability of plasmids from glycopeptide-
resistant Enterococcus faecium (GRE) isolated from pigs in Denmark // Microb. Drug Resist. - 2005. - N 11. - P. 178-184.
13. Helms M., Simonsen J., Molbak K. Quinolone resistance is associated with increased risk of invasive illness or death during infection with Salmonella serotype Typhimurium // J. Infect. Dis. - 2004. - Vol. 190. - P. 1652-1654.
14. High-level aminoglycoside resistant enterococci isolated from swine / Jackson C.R., Fedorka-Cray P.J., Barrett J.B., Ladely S.R. // Epidemiol. Infect. - 2005. -Vol. 133. - P. 367-371.
15. Performance, diarrhea incidence, and occurrence of Escherichia coli virulence genes during long-term administration of a probiotic Enterococcus faecium strain to sows and piglets / Taras D., Vahjen W., Macha M., Simon O. // J. Anim. Sci. - 2006. - Vol. 84. - P. 608-617.
16. WHO Fact Sheet N. 194, January 2002 (revised). Електронний ресурс: http://www.who.int/ mediacentre/ factsheets/fs 194/en/index.html
♦
УДК 615.252.349.7:547.461.2 О.Н. Литвинова
ВИВЧЕННЯ ЦУКРОЗНИЖУВАЛЬНО1 АКТИВНОСТ1 НОВИХ ПОХ1ДНИХ ОКСАМ1НОВИХ КИСЛОТ
Нацюнальний фармацевтичний унгверситет м. Хартв
Ключовi слова: дикарбоновi кислоти, noxidm оксамтових кислот, цукрознижувальна активтсть
Key words: dicarbonic acids, oxaminic acids derivatives, hypoglycemic activity
Резюме. Проведены скрининговые исследования производных оксами-новых кислот и изучено их влияние на углеводный обмен у кроликов. Установлено, что исследуемые соединения обладают сахароснижаю-щей активностью. В результате эксперимента выявлены вещества, которые по сахароснижающему действию превосходят препараты сравнения бутамид и букарбан. Замещенные оксаминовые кислоты являются биологически активными веществами и могут быть использованы для дальнейшего углубленного изучения с целью создания на их основе лекарственных средств с гипогликемическими свойствами. Summary. The was conducted and studied the screening research of oxaminic acids derivates and their influence on the rabbit's carbohydrates metabolism. It was estimated, that examined compounds have hypoglycemic activity. As the result of the experiment, there were detected substances that regarding their hypoglycemic activity exceed drugs of comparison: butamid and bucarban. Oxaminic acids derivates are the biologically active substances and may be used for the further extend study aimed at development of new drugs with the hypoglycemic activity on their basis.
Протягом останшх роюв у Нацюнальному фармацевтичному ушверситет проводиться цше-спрямований синтез бюлопчно активних речо-вин у рядi похщних дикарбонових кислот [5]. Багаторiчнi синтетичш й бюлопчш дослщження
дозволили копичити великий матерiал зi струк-турно-морфолопчних властивостей похщних дикарбонових кислот. Ц дослщження були покладеш в основу пошуку нових субстанцш з метою створення нових лшарських препара^в,
