CC BY
23
Л итература
1.Бьшза Т.П., Брынцова С.С., Белозерова Н.И. Состояние иммунореактивности у детей 6-летнего возраста, родившихся у женщин, перенесших поздний токсикоз беременных // Педиатрия. 1991. -Ха8. - С. 109.
2. Вельтищев Ю.Е. Экологически детерминированная патология детского возраста // Рос. вестник пе-ринатологии и педиатрии. - 1996. - Ха2. - С.5-12.
3. Воеводин Д.А., Розанова Г.П., Стенина М.А., Че-редеева А.Н. Роль дисбактериоза в формировании хронической неинфекционной патологии у детей // ЖМЭИ. - 2001. - Хаб. - С.88-90.
4. Земсков А.М., Земсков В.М. Дополнительные методы оценки иммунного статуса // Клин. лаб. диагностика. - 1994. - ХаЗ. - С.34-35.
5. Каганов С.Ю., Розинова Н.Н., Вельтищев Ю.Е. Иммунологические проблемы пульмонологии // Клиническая иммунология и иммунопатология детского возраста / Под ред. Д. В. Стефани, Ю.Е. Вельтищева. - М., 1996. - С.209.
6. Каукиайнен А.Б., Шабанова Л.Ф., Сиротина В.В. Становление клеточного иммунитета новорожденных при нормальной и патологической беременности // Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях: Тез. докл. 10 научной конференции. - Челябинск, 1990. - С.62.
7. Краснов В.В. Инфекционные болезни в практике педиатра. - Нижний Новгород, 1997.
8. Мазанкова Л.H., Запруднов А.М. Микро:жология кишечника у детей в норме и при патологии // Рос-
сийские медицинские вести. - 1996. — Ха1. - С.34-42.
9. Мазанкова Н.Н., Ваулина О.В. Новые лекарственные средства для коррекции дисбиотических нарушений // Детский доктор. - 2000. - ХаЗ. - С.51-54.
10. Манчук Т.В. Структурно-метаболические параметры иммунокомпетептных клеток у детей с перинатальным поражением ЦНС: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. - Красноярск, 1999. - 15 с.
11. Нисевич Н.И., Гаспарян М.О., Новокшонов А.А. К вопросу о дисбактериозе кишечника у детей // Педиатрия. - 1999. - Ха 1. - С.98-100.
12. Студепикип В.М., Брагина Н.К. Особенности лимфоидных субпопуляций периферической крови не-доношеных детей при различных видах вскармливания // Вопр. охраны материнства и детства. -1989.-ХаЮ.-С.38-42.
13. Ходжиметов Х.А. Биологические препараты и Т-активин в профилактике постинфекционных энтероколитов у детей: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. -Ташкент, 1990. - 22 с.
14. Dorner A., Pauschinger М., Schwimmbeck P.L.et al. The shift in the myocardinal ademine nucleotide translocator isoform expression pattern is associated with an enteroviral infection in the absence of an active T-cell dependent immune response in human inflammatory heart disease // .1. Am. Coll. Cardiol. - 2000. -Vol.35, N.7.-P. 1778-1 784.
15. Wells .1., Nelson D. Clinical Immunology (Ullus-trated). - Sydney: Wiliams and Wilkins, 1986.
© АВХОДНЕВ Г.Н., КУЗЬМИНА О.В., ЖУКОВ A.B. -УДК 6 12.39 8. 13-576.3.0 8-61 6-002] (00 1.5)
ВЛИЯНИЕ ПЕПТИДОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ РАН РАЗЛИЧНОЙ ДАВНОСТИ НА НЕКОТОРЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ ИММУНИТЕТА И ГЕМОСТАЗА
Г.И. Авходиев, О.В. Кузьмина, A.B. Жуков.
(Читинская государственная медицинская академия, ректор - засл. врач РФ, д.м.и., проф. A.B. Говорин; кафедра судебной медицины, зав. - к.м.н., доцент Г.И. Авходиев)
Резюме. Проведено сравнительное исследование концентрации цитомединов, полученных из ран различной давности, их влияния на фагоцитарную активность нейтрофилов и показатели свертывающей системы крови здоровых доноров (время рекальцификации, активированное частичное тромбопластиновое время, протромбиновое и тромбиновое время). Выявлена достоверная разница между первым и вторым повреждением, что может быть использовано для определения последовательности причинения ран в судебно-медицинской практике.
Известно, что среди повреждений наиболее часто встречаются прежде всего механические воздействия. Характер повреждения при действии механических факторов различен: ушибы, раны,
разрывы, переломы, раздавливания или их комбинации. Местные последствия травмы зависят от степени кровопотсри, повреждения кожных покровов, нервных стволов, а также сопутствующих общих проявлений, например травматического шока и др. [4].
Выделяют разные уровни повреждений: молекулярный, клеточный, тканевой, органный и орга-низменный. При одном и том же воздействующем факторе может быть задействовано несколько уровней повреждения. Повреждение па клеточном уровне проявляются структурными и метаболическими нарушениями; синтезом и секрецией биологически активных веществ: гистамина, серотонина, гепарина, брадикинина, цитокинов и др., что в свою очередь приводит к повышению про-
5 8
ницаемости сосудистого русла, сгущению крови, расстройству микроциркуляции с явлениями сладжа эритроцитов и микротромбозов; активации гликолитических и лизосомальных ферментов [1]-
При повреждении клеток всегда запускается комплекс неспецифичсских изменений. К их числу относятся ацидоз, избыточная активация свободнорадикальных и перекисных реакций, денатурация белковых молекул, повышение проницаемости клеточных мембран, а зачастую их массивное разрушение, например при ударах, дисбаланс ионов и жидкости, изменение параметров мембранного потенциала. Действие повреждающего фактора может опосредоваться через нервно-эндокринные системные влияния, например при стрессе, шоке, недостаточности кровообращения, дыхания. Повреждения на тканевом уровне характеризуются нарушением функции, развитием состояния патологического парабиоза, повреждения тканей - некроза [5].
Процессы повреждения во многом зависят от физиологически активных веществ, которые в дальнейшем обусловливают особенности течения патологического процесса. Приоритетным направлением современной биологии и медицины является изучение координации межклеточных взаимодействий в органах и тканях. В связи с этим большой интерес теоретиков и клиницистов более 25 лет привлекают эндогенные регуляторы пептидной природы. К началу девяностых годов из различных тканей было выделено свыше тысячи пептидов с определенным числом аминокислотных остатков и установленной последовательностью их расположения. Среди них большое значение уделяется щелочным полипептидам с малой молекулярной \-ассоА - цитомединам [2]. Помимо выполнения специфических функций, большинству цитомединов присущ ряд неспецифических свойств: влияние на состояние клеточного и гуморального иммунитета, систему гемостаза, активность комплемента, иеспсцифическую резистентность организма, перекисное окисление липидов и др.
Предполагается, что продукция и секреция цитомединов в целостном организме осуществляется изолированно в связи со сложившейся ситуацией и физиологическими потребностями в той или иной фракции в данный момент. Все цитомедины, независимо от источника их выделения, проявляют способность изменять тромбогенные свойства крови. Являясь антипротеазами, они удлиняют время свертывания плазмы, дозозависимо ингибируют фибринолиз и сосудисто-тромбоцитарный гемостаз [3].
Вопрос о последовательности причинения повреждений регулярно ставится работниками следственных органов и требует, в связи с этим, научно-обоснованного решения. Однако до настоящего времени судебно-медицинская практика не
располагает методами диагностики в полной мерс отвечающими требованиям, предъявляемыми судебно-следственными органами. В первую очередь это касается повреждений, нанесенных в короткий временной интервал.
В связи с тем, что причинение травматических воздействий вызывает нарушение межклеточных взаимодействий, нам представляется важным изучение пептидов из ран при определении последовательности нанесения повреждений, что в настоящее время является актуальной проблемой судебно-медицинской практики.
Материалы и методы
Наши исследования проведены на 5 белых беспородных крысах, весом 180-200 г, 29 трупах людей, умерших от различных причин и 74 образцах донорской крови. Лабораторных животных содержали в условиях вивария на стационарном рационе питания в соответствии с "Санитарными правилами по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев)", утвержденных М3 СССР 06.07.73 г., приказом М3 СССР №755 от 12.08.77 г., приказом М3 СССР №163 от 10.03.66 г. "О суточных нормах кормления лабораторных животных и продуцентов". Животных забивали под кратковременным эфирным наркозом путем нанесения черепномозговой травмы. Крысам перед смертью, под эфирным наркозом, наносились колото-резаные раны через 5-минутпые интервалы времени (всего по 2 повреждения каждому животному). Трупы экспериментальных животных и людей сохраняли при температуре окружающего воздуха - 18-20°С. Влажность воздуха была равна 40-60%. Из поврежденных тканей раневого канала для исследования была изъята мышечная ткань. Выделение пептидов из pan проводили путем последовательных этапов уксуснокислой экстракции по методу В.Г. Морозова, В.Х. Хавипсопа (1981).
Содержание цитомединов определяли с помощью спектрофотометра по формуле
Ах( 1,45 В 280-0,74В 260)
В
где: С - содержание цитомединов, в мг/г,
А - вес кусочка ткани, в граммах,
В 280 - экстинция при длине волны 280 им,
В 260 - экстинция при длине волны 260 им,
В - вес порошка цитомединов.
Биологическую активность щелочных полипептидов изучали путем влияния па фагоцитарную активность нейтрофилов крови здоровых допоров. Подсчет поглощенных частиц вели в 200 нейтрофилах по фагоцитарному показателю (количество нейтрофилов, принявших участие в фагоцитозе из 100 просмотренных) и фагоцитарному числу (среднее число частиц, поглощенных одним нейтрофилом). Для статистической оценки результатов фагоцитарный показатель и фагоцитарное число были пересчитаны в процентном от-
Таблица 2.
Активность цитомединов мышц из ран экспериментальных эюивотных в зависимости от последовательности их образования
Показатель Порядковый № раны Кол-во исследований (п) Уровень цитомединов (М+1Т1) Р
Фагоцитарный показатель 1 5 118,4+5,2
2 5 102,9+4,5 <0,02
Фагоцитарное число 1 5 123,5+6,18
2 5 106,4+3,71 <0,02
Время рекальцификации плазмы 1 5 141 + 12,0
2 5 112+6,0 <0,02
АЧТВ 1 5 155+8,7
2 5 125±6,3 <0,02
Протромбиновое время 1 5 130+7,3
2 5 112+3,7 <0,02
Тромбиновое время 1 5 155+8,7
2 5 120+4,6 <0,01
ношении к контрольным цифрам. Для этого показатели полученные в опыте умножались на 100% и делились на контрольные значения.
О воздействии цитомединов, выделенных из ран на коагуляционный гемостаз судили но изменению времени рекальцификации плазмы, АЧТВ, нротромбинового и тромбинового времени (В.П. Балуда, З.С. Баркаган, Е.Д. Гольдберг, 1974).
Все изучаемые величины были пересчитаны и представлены в процентном отношении к контролю, которым служили показатели иммунитета и гемостаза крови здоровых доноров.
Статистическая обработка полученных результатов проводилась с использованием персонального компьютера тина 1ВМ РС. Для анализа экспериментальных данных использовалась методика, описанная П.А Матыциным (БГМИ, кафедра патофизиологии 1992 г.). Достоверными считались результаты с Р<0,05.
Результаты и обсуждение
Первоначально влияние пептидов, выделенных из ран различной давности на показатели иммунитета и гемостаза исследовалось в эксперименте на животных. При изучении последовательности образования ран нами не установлено достоверного изменения концентрации цитомединов в зависимости от давности их причинения. Цитомедины, полученные из повреждений обладали стимулирующим воздействием на реакцию фагоцитоза нейтрофилов. Обнаружено достоверное удлинение всех исследованных показателей свертывающей системы при добавлении регуляторных пептидов в плазму здоровых доноров (время рекальцификации, АЧТВ, протромбиновое и тромбиновое время). Однако пептиды, полученные из второго повреждения обладали меньшей биологической активностью.
Полученные нами в экспериментах на животных результаты (табл.1), выявленные при этом за-
Таблица 2.
Уровень цитомединов мышц из ран умерших людей в зависимости от последовательности их образования
Методы Порядковый № раны Кол-во исследований (л) Уровень цитомединов (М+1П) Р
Фагоцитарный показатель 1 29 121,4+0,9
2 29 107,8+4,0 <0,05
Фагоцитарное число 1 29 134,4+12,3
2 29 98,2+4,5 <0,05
Время рекальцификации плазмы 1 29 118,0+2,4
2 29 109,6+2,8 <0,05
АЧТВ 1 29 131,4+3,9
2 29 104,0+2,6 <0,001
Протромбиновое время 1 29 119,6+2,9
2 29 110,5+3,0 <0,05
Тромбиновое время 1 29 121,8+2,7
2 29 105,9+4,4 <0,005
кономерности, позволили перейти к исследованию цитомединов умерших людей. Во всех случаях исследованию подвергались рапы, которые были получены людьми незадолго до смерти и была известна последовательность их причинения. Было установлено, что количественные показатели пептидов не являются информативными в плане установления последовательности образования ран. При этом отмечена тенденция к снижению количества экстрагируемых веществ из второго повреждения.
Исследуемые соединения обладали, в большинстве случаев, стимулирующим воздействием на реакцию фагоцитоза нейтрофилов здоровых доноров. Однако цитомедины, выделенные из второй раны обладали меньшей активностью в реакции фагоцитоза. Под влиянием пептидов на-
блюдалось увеличение времени рекальцификации плазмы, АЧТВ, протромбинового и тромбинового времени. Причем отмечена достоверная разница между значениями данных показателей гемостаза у пептидов, полученных из первой и второй раны (табл.2).
Таким образом, в результате проведенных исследований отмечены изменения биологической активности цитомединов, полученных из ран, причиненных через короткий временной интервал. Установлено, что пептиды, выделенные из первого повреждения обладают более высокой активностью в отношении изученных показателей фагоцитоза и свертывающей системы крови. Результаты могут быть использованы в судебномедицинской практике для определения последовательности причинения ран.
EFFECT OF PEPTIDES ISOLATED FROM WOUNDS OF DIFFERENT ANTIQUITY ON SOME PARAMETERS OF IMMUNITY AND HEMOSTASIS
G.I. Avkhodiev, O.V. Kuzmina, A.V. Zhukov.
(Chita State Medical Academy)
A comparative study of cytomcdines obtained from wounds of different antiquity has been conducted. Their effects on phagocytic activity of neutrophils and parameters of coagulant activity in blood of healthy donors (recalcification time, activated partial thromboplastin time, prothrombin and thrombin time) were investigated. A significant difference between the first and second wound damage was found. It may be helpful in determining the sequence of wound damage in forcnsic medical practice.
Литература
1. Долгий О.Д., Осипович В.K., Ващенко В.И. Применение тималина и гепарина при глубоких ожогах // Роль пептидных биорегуляторов (цитомединов) в регуляции гомеостаза. - Л., 1987. - С.35-36.
2. Замятин A.A. Система природных физиологически активных пептидов // Физиол. журнал СССР им. И.М. Сеченова. - 1989. - Т.75, Ха5. - С.646-655.
3. Кузпик Б.И. Цитомедины и правило что, где, как и когда // Цитомедины. - Чита, 1996. - Вып.2. - С.6-
10.
4. Патологическая физиология. Под ред. П.П. Зайко, Киев, "Вища школа", 1985. -С.125.
5. Чернух А.М. Воспаление. - М.: Медицина, 1979. -447 с.
О ДАВААНЯМ Л., НОРОВПИЛ Ц. -УДК 617.52-002.36
ПРИЧИНЫ И СЛУЧАЙ ФЛЕГМОНЫ ЧЕЛЮСТНО-ЛИЦЕВОЙ ОБЛАСТИ, ВСТРЕЧАЮЩИЕСЯ В УСЛОВИЯХ МОНГОЛИИ
Л. Давааням, Ц. Норовпи.ч.
(Монгольский государственный медицинский университет, ректор - д.м.н., проф. Ц. Лхавгасурэн, кафедра челюстно-лицевой хирургии, зав. - мед. мастер Л. Давааням)
Резюме. Исследованы материалы от 2277 больных с челюстно-лицевой флегмоной. Больные с челюстно-лицевыми флегмонами составили 21,5%, госпитализированных в отделение челюстно-лицевой хирургии, они же занимают 50,56% среди всех воспалительных заболеваний в челюстно-лицевой области. Основными причинами флегмоны является одонтогенный фактор в 72% случаев, а воспалительные заболевания регионарных лимфатических узлов - 24,7%. Заболевание 1-2-х моляров обеих челюстей чаще вызывали флегмоны локализованные в подчелюстном (40%) и крылочелюстном пространстве (16%). Высоко чувствительные к клафара-ну, эритромицину и гентамицину бактерии типа Staphylococcus aureus (47%) и Staphylococcus epidermicus (33%) наиболее чаще обнаружены были среди возбудителей флегмон челюстнолицевой области.
