CC BY
8Влияние новых штаммов ротавирусов на экспрессию PD-1 и PD-L1 на Т- клетках периферической крови
Авторы
Межевова Ирина Валентиновна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Ситковская Анастасия Олеговна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Филиппова Светлана Юрьевна., [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Гненная Надежда Владимировна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Шамова Татьяна Владимировна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Тимофеева Софья Владимировна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Новикова Инна Арнольдовна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Кит Олег Иванович, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Златник Елена Юрьевна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Бондаренко Елена Сергеевна, [email protected], ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Колпакова Е.П., [email protected], ФБУН «Ростовский НИИ микробиологии и паразитологии» Роспотребнадзора, Ростов-на-Дону
Ключевые слова:
онколитические вирусы, PD-1, PD-L1, Т-хэлперы, виротерапия рака
Актуальность
Перспективные онколитические вирусы оценивают, как правило, по их прямому цитотоксическому действию на клетки рака. Тем не менее положительный эффект от виротерапии рака может быть связан с воздействием на иммунную систему, в частности на экспрессию PD-1 и PD-L1 на лимфоцитах.
Цель
Исследовать влияние неклассифицированных апа-тогенных штаммов ротавирусов RVK100 и RVK228 на экспрессию PD-1 и PD-L1 на Т-клетках периферической крови больных раком молочной железы.
Материалы и методы
Выделяли мононуклеарные клетки периферической крови на градиенте фиколла, культивировали в RPMI 1640 (Gibco, США) без сыворотки при 37 °С, 5,0% СО2 в 4 вариантах опыта: 1) отрицательный контроль без вирусов; 2) положительный контроль активации с добавлением PHA; 3) опыт с добавлением 107 частиц на 1 мл штамма RVK100; 4) опыт с добавлением 107 частиц на 1 мл штамма RVK228. Через 24 и 72 часа культивирования определяли экспрессию PD-1 (CD279) и PD-L1 (CD274) на Т-клетках методом проточной цитометрии. В исследовании использовали конъюгированные с флуо-рохромами антитела: анти-CD4 (PE), анти-CD8 (APC-Cy7), анти^279 (FITC), анти^274 (PerCP-Cy5-5) (Becton Dickinson, США).
Результаты
Через 24 часа культивирования отмечено возрастание экспрессии PD-1 на CD4+ клетках: РНА — 40,5%, RVK100 — 42,3%, RVK228 — 37,5% по сравнению с контролем (18,1%). Сходное, хотя и менее выраженное увеличение экспрессии PD-1 было получено на CD8+ клетках: РНА — 41,7%, RVK100 — 46,4%, RVK228 — 42,6% по сравнению с контролем (27,7%). Экспрессия PD-L1 на CD4+ клетках под действием RVK100 и RVK228 возросла до 67,0 и 58,6% соответственно, тогда как под действием РНА она выросла до 75,1% по сравнению с контролем (44,8%). Подобная тенденция выявлена и на CD8+ клетках (контроль — 46,2%, RVK100 — 63,4%, RVK228 — 58,4%, РНА — 52,8%). Через 72 часа отмечено увеличение экспрессии PD-1 на CD4+ клетках только в контроле (до 41,2%), в пробе с RVK100 произошло снижение в 2 раза (до 21,6%) по сравнению с 24 часами, а в пробах с РНА и RVK228 значительных изменений не выявлено. В этот же срок исследования обнаружилось снижение экспрессии PD-1 на CD8+ клетках под действием RVK100 в 2,7 раза (до 17,4%) по сравнению с 24 часами, без значительных изменений в остальных пробах (контроль — 33,1%, РНА — 48,1%, RVK228 — 38,4%). Инкубация в течение 72 ч вызвала повышение экспрессии PD-L1 на CD8+ клетках во всех вариантах, значения доли CD8+CD279+ клеток в опытных и контрольных пробах составили 67-79%. Экспрессия PD-L1 на CD4+ клетках в целом осталась без изменений, кроме пробы с RVK100, где
произошло небольшое снижение показателя до 52% прессии рецепторов иммунных контрольных то-
по сравнению с 24 часами. Выводы
Оба штамма, подобно неспецифическому Т-митогену PHA, вызывали стимуляцию экс-
чек PD-1 и PD-L1 на Т-хелперах и CTL через 24 часа культивирования. Через 72 часа культивирования у RVK100, в отличие от RVK228, выявлена способность снижать экспрессию PD-1 на этих клетках.
Список литературы
Кит О . И . , Филиппова С . Ю . , Тимофеева С . В . и др . Влияние онколитических штаммов новой неклассифицированной группы ротавирусов человека на лимфоциты периферической крови // Южно-Российский онкологический журнал . 2021. № 2 (3) . С . 23-30. https://doi . огд/10 .37748/2686-9039-2021-2-3-3 .
Оценка безопасности проведения высокодозной химиотерапии с трансплантацией аутологичных кроветворных стволовых клеток после терапии PD-1-ингибиторами при рецидивах и резистентном течении классической лимфомы Ходжкина
Авторы
Мочкин Никита Евгеньевич, [email protected], ФГБУ «Национальный медико-хирургический центр им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва
Саржевский Владислав Олегович, [email protected], ФГБУ «Национальный медико-хирургический центр им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва
Протопопова Юлия Васильевна, [email protected], ФГАОУ ВО Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова (Сеченовский университет), Москва
Демина Елена Андреевна, [email protected], ФГБУ «Национальный медико-хирургический центр им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва
Мельниченко Владимир Ярославович, [email protected], ФГБУ «Национальный медико-хирургический центр им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва
Богатырев Владимир Сергеевич, [email protected], ФГБУ «Национальный медико-хирургический центр им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва
Самойлова Анастасия Александровна, [email protected], ФГБУ «Национальный медико-хирургический центр им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва
Мамедова Айсель Акифовна, [email protected], ФГБУ «Национальный медико-хирургический центр им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва
Рукавицын Анатолий Анатольевич, [email protected], ФГБУ «Национальный медико-хирургический центр им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва
Банникова Анна Андреевна, [email protected], ФГБУ «Национальный медико-хирургический центр им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва
Смирнова Елена Григорьевна, [email protected], ФГБУ «Национальный медико-хирургический центр им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва
Шорохов Никита Сергеевич, [email protected], ФГБУ «Национальный медико-хирургический центр им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва
Ключевые слова:
классическая лимфома Ходжкина, трансплантация аутологичных кроветворных стволовых клеток, иммунотерапия
Актуальность химиотерапии с трансплантацией аутологичных
Ингибиторы контрольных точек (PD-1- кроветворных стволовых клеток (ВХТ+аутоТКСК)
ингибиторы) высокоэффективны при рецидивах после терапии PD-1-ингибиторами может быть
и резистентном течении классической лимфомы перспективным вариантом для данной группы па-
Ходжкина (р/р кЛХ): общая частота объективного циентов. Имеющиеся в настоящее время данные
ответа составляет более 70% [1, 2]. Однако долго- о безопасности ВХТ+аутоТКСК после иммуноте-
срочные результаты выживаемости без прогресси- рапии, особенно в контексте возможных иммуно-
рования (ВБП) остаются неудовлетворительными. опосредованных нежелательных явлений (иНЯ),
Консолидация ответа с помощью высокодозной недостаточны [3].
