CC BY
37
кристаллы крестообразной формы, папоротнико- чений от 5,2854 до 40,9836х10-4 Ом-1, в среднем в первой
образные кристаллы; кристаллы в виде ниточек бус по группе 9,3624±0,5175х 10-4 Ом-1; во второй группе
всей капле; мелкие кристаллы по периферии капли; кри- 10,973±0,7420х 10-4 Ом-1 (t = 0,2, P>0,05). Показатели элек-
сталлы в форме маленьких геометрически правильных тропроводности желчи находились в диапазоне от 7,4075
фигур (кубы, параллелепипед, цилиндры); кристаллы в до 12,820х 10-4 Ом-1; в среднем в первой группе
центре капли в виде мелких вычурных фигур; отсутствие 10,024±0,1212х 10-4 Ом-1; во второй группе -
кристаллов (Рис 1-6). При помощи приложения 8,9071±0,1667х10-4 Ом-1 (t = 4,95, P<0,05). Электропро-
STATISTICA 5.5 получены достоверные статистические водность мочи колебалась в диа пазоне от 2,4243 до
различия в микрокристаллизации обеих групп обнару- 85,4711х 10-4 Ом-1; в среднем в п ервой группе -
жены во всех изучаемых средах: для первой группы ха- 8,3257±0,1200х 10-4 Ом-1; во второй группе -
рактерным было или отсутствие кристаллов или нали- 4,7141±0,8065х10-4 Ом-1 (t = 2,8, P<0,03). Таким обра-
чие мелких, вычурных кристаллов; напротив, во второй зом, достоверные различия в группах обнаружены в элек-
группе, крупных, крестообразных, папоротникообраз- тропроводности мочи и желчи, отмечались также зна-
ных кристаллов. В цифровом виде (таблица 2) это вы- чительные колебания этих показателей в ликворе пер-
ражено более низкими значениями коэффициентов для вой группы. Существенных различий электропровод-
всех сред (от 100,1 до 108,5, напротив - от 109,3 до 113,3; ности при изучении крови нами не выявлено. Наблюда-
p<0,02, во второй группе). лись также различия микрокристаллизации ликвора,
Значения электропроводности крови находились крови, желчи и мочи в группах, где использовались и не
диапазоне от 7,1942 до 11,2867х10-4 Ом-1, в среднем в использовались инфузионные растворы. Дальнейшее
первой группе у лиц, умерших на месте происшествия - изучение указанных процессов позволит решить вопрос
9,2549±0,1849х 10-4 Ом-1; во второй группе - о возможности использования предложенных методов
8,7168±0,2321х10-4 Ом-1 (t = 1,81, P>0,05). Значения элек- как теста обоснованности и эффективности примене-
тропроводности ликвора находились в диапазоне зна- ния лекарственных средств в премортальном периоде.
Литература:
1) Витер В.И., Поздеев А.Р. Постмортальный анализ ведения медицинской докумен-тации при судебно-медицинской оценке правильности назначения лекарственным средств // Труды Ижевской государственной медицинской академии. - Ижевск: Экспертиза, 2002. - Т.XL.- С. 53-56.
2) Витер В.И., Поздеев А.Р., Закиров Т.Р., Коковихин А.В. Особенности морфологии микрокристаллов ликвора у лиц, погибших в результате острой коронарной недостаточ-ности//Российские морфологические ведомости.- Ижевск-Москва: Экспертиза.- 2000.- C. 29-31.
3) Дамаскин Б.Б., Петрий О.А., Подловченко Б.И. и др. Практикум по электрохимии: Учеб. пособие. - М.: Высш.. шк, 1991.288 с.
4) Интенсивная терапия/В.Д.Малышев, И.В.Веденина, Х.Т.Омаров и др.; Под ред. Проф. В.Д.Малышева. - М.: Медицина, 2002. - 584 с.
5) Тимофеев И.В. Патология лечения. - СПб: Северо-Запад, 1999. - 566 с.
© Г.И. Авходиев, О.В. Кузьмина, 2002
УДК 547.262:547.466:61:34
Г.И. Авходиев, О.В. Кузьмина ВЛИЯНИЕ ЭТАНОЛА НА КОЛИЧЕСТВЕННЫЕ И КАЧЕСТВЕННЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ ЦИТОМЕДИНОВ
Кафедра судебной медицины (зав. кафедрой - доц. Г.И. Авходиев)
Читинской государственной медицинской академии
Статьяпосвящена изучению количества и биологической активности цитомединов внутренних органов под влиянием алкогольной интоксикации. Установлено, что алкогольная интоксикация вызывает значительное снижение количествацитомединов внутренних органовиусилениеихподавляющеговоздействият фагоцитарную активность нейтрофилов крови, что может приводить кнарушению регуляции межклеточных взаимодействий.
Ключевые слова: алкогольная интоксикация, цитомедины, судебная медицина
G.I.Avhodiev, O.V.Kuzmina ETHANOL INFLUENCE ON CITOMEDINES QUALITATIVE AND QUANTITATIVE ACTIVITY
Chita
The article is devoted to quantity and biological activity studying ofinternal citomedines under alcoholic intoxication influence There was estimated that alcoholic intoxication cause si zable decrease ofinternal citomedines and at the same time increase its overpowering action on phagocyte activity ofblood neutrophiles, what can lead to dysfunction ofintercellular cooperation.
Key words: alcoholic intoxication, citomedines, forensic medicine.
Последние годы характеризуются бурным ростом шой молекулярной массы, вырабатывающимися в орга-
работ, посвященных исследованию информационных низме, отличающимися разнообразием происхождения и
молекул - биологических регуляторов. Значительная часть характером биологических эффектов [ 8]. Они контроли-
из них представлена пептидными соединениями неболь- руют многие системы организма, выполняющие жизнен-
Таблица 1
Распределение трупов людей по причине смерти, возрасту и полу
ПС ВОЗРАСТ (лет)
до 19 20-29 30-39 40-49 50-59 60-69 70... Всего
м ж м ж м ж м ж м ж м ж м ж м ж
ОКН 0 0 0 0 8 1 5 2 11 3 5 4 2 1 31 11
МА 2 1 4 0 5 1 8 1 5 1 5 0 0 2 29 6
МТК 1 0 11 1 3 1 10 0 4 1 3 1 0 1 32 5
МТ 1 1 4 1 10 2 11 2 3 1 5 0 2 2 36 9
ОА 0 0 1 0 1 2 4 2 2 2 2 1 0 0 10 7
ПР 0 0 1 0 2 0 0 0 2 0 0 0 0 0 5 0
Всего 4 2 21 2 29 7 38 7 27 8 20 6 4 6 143 38
Условные обозначения:
ПС - причина смерти,
ОКН - острая коронарная недостаточность,
МА - механическая асфиксия,
МТК - механическая травма с обильной кровопотерей, МТ - механическая травма без кровопотери,
ОА - отравление алкоголем,
А- - отсутствие этанола,
А+ - наличие этанола в крови
но важные функции [2]. Известны пептиды, регулирующие кровообращение [3], кроветворение [7], деятельность желудочно-кишечного тракта [9], центральной нервной системы [11], систем иммунитета [10], гемостаза [4] и других систем организма. В настоящее время цитомедины выделены практически из всех органов и тканей [ 10].
Экспериментально-клиническое изучение цитомеди-нов обнаружило специфическое узконаправленное влияние на отдельные органы и неспецифическое, связанное с действием пептидных регуляторов на защитные системы организма [5]. Таким образом, цитомедины представляют собой функционально непрерывную совокупность регуляторных пептидов, обеспечивающих согласованную деятельность клеточных популяций организма [ 10].
Судебные медики при проведении различных экспертиз, связанных с установлением длительности тех или иных процессов, причины смерти вынуждены учитывать ряд эндо- и экзогенных факторов, оказывающих существенное влияние на большинство диагностических признаков. Влияние различных факторов, в первую очередь, необходимо учитывать при распаде тканей. Известно, что все биохимические процессы в значительной мере зависят от температуры окружающей среды, состояния организма до наступления смерти, алкоголизации [6].
В последнее время, судебно-медицинские эксперты в своей повседневной практике все чаще встречаются со случаями, когда погибшие незадолго до смерти употребляли алкоголь [13] . Известно, что этанол способен вызывать сдвиг рН в кислую сторону и, вероятно, влиять на посмертную динамику цитомединов. К тому же, продукт распада этанола - ацетальдегид, обладая высокой активностью, приводит к тому, что любая свободная аминогруппа может стать объектом его агрессии. Так как максимальная активность алкогольдегидрогеназы наблюдается в пече-
ни, соответственно высока вероятность образования в данном органе продукта распада этанола, обладающего высокой активностью - ацетальдегида [ 12].
В связи с этим ранее нами проведено исследование по определению влияния этанола на количество и активность цитомединов печени в эксперименте на животных. При этом динамика количественных и качественных показателей щелочных полипептидов печени определялась при температурах окружающего воздуха равного -25-30, +4, +18, +36 градусов С. Решение о необходимости проведения исследования при различных температурах окружающего воздуха обусловлено тем обстоятельством, что температура значительно влияет на скорость протекания биохимических процессов. При проведении серии экспериментов получены данные, свидетельствующие о том, что в подавляющем большинстве случаев, при всех исследуемых температурных режимах, этанол приводил к снижению количества экстрагируемых из ткани печени цитомединов. При температуре окружающего воздуха равного +4°С, данный показатель колебался от 0,55 до 1,83 мг/г ткани. При +18°С было также отмечено снижение количества получаемых цитомединов от 0,20 до 1,77мг/г. При +36°С наблюдалось снижение экстрагируемых веществ от 0,03 до 2,28 мг/г. При отрицательной температуре окружающего воздуха, равного -25-30°С наблюдалось снижение количества от 0,87 до 1,25 мг/г ткани.
Изменения активности цитомединов печени также имели место. Так при +4°С данные показатели уменьшились на величины от 2,19 до 11,47%. При 18°С снижение активности было меньшим и составляло от 0,02 до 2,67%. При +36°С в большинстве случаев отмечалось снижение активности от 0,04 до 4,52%. При температуре равной -25-30°С, отмечено незначительное снижение активности на величины от 0,53 до 1,28%. Снижение количества цитомединов печени при воздействии этанола на организм экспериментальных животных, по всей видимости, связано с тем, что данное вещество, воздействуя на мембраны клеток, вызывает изменения белковой их части, составным элементом которых являются цитомедины [ 1 ].
Материалы и методы. Наши исследования на 181 трупе людей, умерших от различных причин. Трупы людей находились при 18-20°С. Влажность воздуха была равна 40-60%. Кусочки внутренних органов умерших людей (стволовой части, белого и серого ве щества го-
повного мозга, гипофиза, миокарда, щитовидной железы, надпочечников, почек, легких, тонкого и толстого отделов кишечника, селезенки, поперечно-полосатых мышц) забирали во вторые сутки постмортального периода через 4-х часовые интервалы времени.
Цитомедины получали методом уксуснокислой экстракции по разработанной нами модификации способа В.Г. Морозова, В.Х. Хавинсона. Содер жание пептидов определяли с помощью спектрофотометра по разработанной нами формуле:
_ А х (1,45Е° - 0,74Е° 260)
_ В
где: С - содержание цитомединов в мг/г А - вес кусочка органа в граммах Е280 - экстинция при длине волны 280 нм Е°260 - экстинция при длине волны 260 нм В - вес порошка цитомединов в мг
Биологическую активность цитомединов изучали путем влияния на фагоцитарную активность нейтро-филов крови здоровых доноров.
Таблица2
Влияние этанола на показатели цитомединов органов человека
орган Э п кол-во мг/г, М±т р ФП (%) М±т р ФЧ (%) М±т р
миокард + 30 51 12,2±0,89 10,3±0,65 <0,1 56,2±3,61 40,9±2,67 <0,002 56,6±3,44 40,7±2,73 <0,001
скелетная мышца + 30 51 11,6±0,90 9,9±0,67 >0,1 55,0±3,10 40,8±2,63 <0,001 55,4±3,22 41,6±2,80 <0,002
почка + 30 51 12,2±0,84 10,1±0,57 <0,05 57,7±3,35 42,8±2,19 <0,001 54,5±3,32 45,0±1,88 <0,02
надпочечник + 30 51 10,4±0,73 9,0±0,55 >0,1 50,0±3,67 35,5±2,21 <0,002 54,2±2,27 43,4±1,69 <0,001
тонкий кишечник + 30 51 13,8±0,54 9,8±0,23 <0,001 60,7±2,57 42,9±1,84 <0,001 58,9±2,15 44,9±1,88 <0,001
толстый кишечник + 30 51 11,3±0,5 9,6±0,44 <0,02 55,2±2,53 43,1±1,99 <0,001 56,9±2,36 44,8±1,89 <0,001
ствол головного мозга + 30 51 12,7±0,53 9,8±0,31 <0,001 62,5±2,95 39,1±1,91 <0,001 59,6±3,09 40,3±1,97 <0,001
кора голов. мозга + 30 51 11,5±0,55 8,9±0,36 <0,001 58,4±3,88 41,4±1,80 <0,001 58,4±3,2 40,3±1,89 <0,001
селезенка + 30 51 13,2±0,74 8,6±0,29 <0,001 55,9±3,57 36,4±2,07 <0,001 60,3±3,45 36,2±2,15 <0,001
легкое + 30 51 13,4±0,79 8,7±0,32 <0,001 54,7±4,0 39,0±2,28 <0,001 55,6±3,7 38,1±2,31 <0,001
гипофиз + 30 51 13,9±0,57 8,8±0,09 <0,001 58,5±3,09 39,2±1,91 <0,001 61,5±3,12 37,1±2,11 <0,001
щитовидная железа + 30 51 13,9±0,58 8,6±0,37 <0,001 58,2±2,77 38,4±2,5 <0,001 62,4±3,06 38,7±2,43 <0,001
печень + 30 51 12,4±0,65 9,1±0,26 <0,001 61,2±3,57 38,9±1,73 <0,001 62,3±3,81 39,7±1,69 <0,001
поджелудочная железа + 30 51 12,6±0,63 8,4±0,31 <0,001 59,4±3,93 37,5±1,69 <0,001 61,9±3,19 36,9±1,75 <0,001
Примечание:
Э(-) - отсутствие этанола, Э(+) - наличие этанола; п - количество наблюдений; р - достоверность.
Хроматографический анализ полипептидов проводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе "Ыса" (Япония) методом обращенных фаз на колонке 4 х 250 с сорбентом ЫсЬобогЬ ЯР 18 Т (Япония) с использованием хроматографического процессора "СЬгоша1:осогёег 12".
Содержание этанола в крови и моче о пределяли методом газожидкостной хроматографии с использованием прибора ЛХМ - 80М.
Статистическая обработка полученных результатов проводилась с использованием персонального компьютера типа 1ВМ РС. Для обработки экспериментальных данных использовалась компьютерная программа, разработанная П.А Матыциным.
Полученные в эксперименте результаты позволили провести исследования на практическом материале. Все изучаемые соединения были разделены на две группы: первая - полипептиды, полученные из органов людей, употреблявших перед смертью этанол, вторая - пептиды трупов людей, у которых этанол обнаружен не был. Установлено, что алкогольная интоксикация также вли-
яет на посмертную динамику количества и активности цитомединов внутренних органов умерших людей. Под влиянием этанола показатели цитомединов менялись следующим образом: количество данных соединений достоверно снижалось во всех случаях, за исключением пептидов миокарда, надпочечника и скелетной мышцы. Однако и в этих случаях отмечена тенденция к снижению их концентрации. Наибольшее снижение концентрации цитомединов отмечалось в щитовидной железе (на 38%), наименьшее - в толстом кишечнике (на 15%) и почке (на 17%). Количество пептидов гипофиза под влиянием этанола снижалось на 37%, селезенки, легкого - на 35%, поджелудочной железы - на 33%, тонкого отдела кишечника -на 29%, печени - на 27%. Уровень пептидов коры и стволовой части головного мозга уменьшался на 23%.
Полученные соединения достоверно угнетали фагоцитарную функцию нейтрофилов в среднем на 30%.
Наибольшее снижение фагоцитарного показателя отмечалось под воздействием цитомединов ствола головного мозга и поджелудочной железы - на 37% по отношению к контролю, наименьшее - под влиянием пептидов толстого отдела кишечника (на 22%). Пептиды селезенки, гипофиза, щитовидной железы, печени угнетали данный показатель в среднем на 35%, а цитомедины надпочечника, тонкого кишечника, легкого и коры головного мозга на 29%. Фагоцитарное число более всего уменьшалось под влиянием пептидов селезенки, гипофиза и поджелудочной железы - на 40%. Менее значительное снижение данного показателя наблюдалось под воздействием цитомединов коры и стволовой части головного мозга, легкого, щитовидной железы и печени в среднем на 34%. Меньше всего фагоцитарное число угнетали пептиды почки (на 17%), надпочечника (на 20%), толстого (на 21%) и тонкого (на 24%) отделов кишечника, скелетных мышц (на 25%) и миокарда (на 28%) (табл. 2).
Вызываемое алкогольной интоксикацией снижение активности полученных соединений может быть обусловлено тем, что при этом происходит накопление полипептидов с частично блокированными активными центрами, вызываемое токсическим воздействием дан-
Литература:
1. Авходиев Г.И. Влияние этанола и температуры окружаю щей среды на содержание и активность пептидов печени в постмортальном периоде // Регуляторные пептиды в норме и патологии. - Чита, 1991. - С. 5-6.
2. Ашмарин И.П., Обухова М.Ф. Регуляторные пептиды, функционально-непрерывная совокупность //Биохимия. -1986. -Т. 51, № 4. - С. 531-545.
3. Бадмаева Э.Э. Иммуномодулирующее и антиаритмическое действие цитомединов сердца. //Цитомедины. - Чита, 1996. - С. 11 -12.
4. Биохимические компоненты свертывания крови / А.Ш. Бышевский, О.А. Терсенов, С.Л. Галян и др. - Свердловск, 1990. - 210 с.
5. Биргер П.С., Прохорчик Е.В. // Структура и функция иммуннорегуляторных пептидов. - М, 1988, - С. 137-141
6. Витер В. И., Толстолуцкий В.Ю. Влияние температуры на процессы в объектах судебно-медицинских исследований // Современные вопросы судебной медицины и экспертной практики. - Ижевск, 1993. - 57-63.
7. Гомазков В.А. Функциональная биохимия регуляторных пептидов. - М.: Наука, 1992. -160 с.
8. Ерошенко Т.М., Титов С.А., Лукьянова Л.П. Каскадные эффекты регуляторных пептидов. - М., 1991. - 203 с.
9. Климов П.К., Барашкова Г.М. Эндогенные пептиды как единая система регуляторных ве ществ // Физиол. журнал. -1993. - Т. 79, № 3. - С. 80-87.
10. КузникБ.И. Цитомедины и правило "Что, где, когда"//Цитомедины. - Чита, 1996. - С. 6-10
11. Луценко В.К. Пептиды и синапсы: механизм регуляторного действия центральной нервной системы. М.: Знание, 1986.-54 с.
12. Морозов Ю.Е. Судебно-медицинское значение продуктов ферментативного окисления этанола в головном мозге трупов // Судебно-медицинская экспертиза. - 2002. - №. 1. - С. 17-21.
13. Пиголкин Ю.И., Морозов Ю.Е., Богомолов Д.В. и др. Судебно-медицинские аспекты патоморфологии внутренних органов при алкогольной интоксикации // Судебно-медицинская экспертиза. - 2000. - №. 3. - С. 34-38.
ного вещества. Неоднородность воздействия, по всей видимости, обусловлена тем, что у различных людей индивидуальная переносимость влияния этанола, способность инактивировать данное соединение. Определенное значение может иметь привыкание к воздействию этанола, особенно у лиц с хронической алкогольной интоксикацией, концентрация продукта распада данного вещества - ацетальдегида, обладающего значительно большей токсичностью, чем этанол.
Влияние этанола на состав цитомединов печени умерших людей подтверждено высокоэффективной жидкостной хроматографией, при проведении которой выявлено изменение структуры исследуемых соединений. При анализе хроматограмм было выявлено изменение структуры цитомединов под воздействием этанола - изменилось количество пиков и время их выхода. На хроматограмме цитомединов печени без предшествующей смерти алкоголизации наблюдалось 27 пиков, причем первые 7 пиков составили 2%. Большая часть вещества вышла в составе 8-13 пиков. В то же время этанол приводил к уменьшению количества пиков до 16, с 1 по 7 пик отмечался наибольший выход пептидов.
Выводы:
1. Алкогольная интоксикация вызывает значительное снижение количества цитомединов внутренних органов и усиление их подавляющего воздействия на фагоцитарную активность нейтрофилов крови, что может приводить к нарушению регуляции межклеточных взаимодействий.
2. Выявленными изменениями информационных молекул можно объяснить многообразные изменения во внутренних органах людей при злоупотреблении этанолом, т.е. данные вещества играют значительную роль в патогенезе алкоголизма.
3. Установленные изменения цитомединов могут быть использованы в качестве диагностического критерия алкогольной интоксикации наряду с другими методами, при этом наиболее информативными являются цитомедины печени, поджелудочной железы, гипофиза и стволовой части мозга.
