CC BY
63
place in the mesenteric lymphatic node inside the lymphatic region of the small intestine, and then in gut wall lymphoid formations.
Key words: selenite sodium, lymphatic region
УДК 611.42+546.23
СТРУКТУРНО-КЛЕТОЧНЫЕ ПЕРЕСТРОЙКИ ЛИМФОИДНЫХ ОРГАНОВ ПОСЛЕ ВНУТРИБРЮШИННОГО ВВЕДЕНИЯ СЕЛЕНИТА НАТРИЯ В ТОКСИЧЕСКОЙ ДОЗЕ
О.В. НИКИТЕНКО, И.Н. ПУТАЛОВА*
В эксперименте установлено, что структурно-клеточные преобразования в лимфоидных органах (тимусе, селезенке, подвздошном лимфатическом узле) после внутрибрюшинного введения селенита натрия являются стереотипными и адаптивными. Между структурными изменениями исследуемых органов определены сильные корреляционные связи (на 6 сутки эксперимента между изменения паренхимы тимуса и Т-зависимыми зонами селезенки и подвздошного лимфатического узла связь отрицательная, а после отмены препарата - положительная).
Ключевые слова: селезенка, селенит натрия, внутрибрюшинное введение
В связи с загрязнениями окружающей среды, возникает серьезная проблема защиты здоровья человека. В этих условиях нагрузка ложится на органы лимфоидной (иммунной) системы, которые участвуют в поддержании постоянства внутренней среды организма, одними из первых реагируют на экзогенные влияния и имеют потенциальные возможности в обеспечении процессов адаптации и компенсации при неблагоприятных экологических воздействиях [5,6,9].
Селен является незаменимым биологически активным микроэлементом для жизнедеятельности человека, в качестве антиоксиданта он предохраняет клеточные мембраны от окислительного стресса. Вместе с тем, он является высокоопасным и токсичным при избыточном поступлении в организм. На сегодняшний день граница между областью фармакологического действия данного биоэлемента и токсического не определена, поэтому назначение селенсодержащих препаратов таит в себе опасность передозировки при неконтролируемом применении. Кроме того, отравление селеном возможно у людей, работающих на предприятиях химической, металлургической, резиновой, фармацевтической промышленностей, а также проживающих на территориях с высоким содержанием селена в почвах и водах [1,15].
Цель исследования - выявление в эксперименте особенностей структурных преобразований лимфоидных органов (тимуса, селезенки, подвздошных лимфатических узлов) в ответ на внут-рибрюшинное введение селенита натрия в токсической дозе.
Материалы и методы исследования. В эксперименте использовали белых крыс-самцов линии Wistar, массой тела 180 г, 7 месячного возраста. Содержание, кормление, уход и выведение из эксперимента крыс осуществляли в соответствии с требованиями «Санитарных правил по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально - биологических клиник» № 1045-73 от 06.04.73., приказа №755 от 12.08.1977 МЗ СССР «О мерах по дальнейшему совершенствованию организационных форм работы с использованием экспериментальных животных», правил проведения качественных клинических испытаний в РФ (утвержденными МЗ РФ 29.12.98), положений Хельсинкской декларации 2000 г.
Животные были разделены на две группы. Первая группа контроля состояла из 10 интактных животных. Животные второй группы (30 крыс) получали в течение 5 суток внутрибрюшинно селенит натрия, из расчета 5 мг/кг массы животного, что соответствует токсической дозе [12].
Материал для исследования (тимус, селезенку, подвздошные лимфатические узлы, кровь) забирали на 2 (однократное введение препарата), 6 (5-кратное введение) и 14 (9 сутки после отмены введения препарата) сутки эксперимента. Далее материал подвергали гистологической обработке по стандартной методике (фиксировали в жидкости Теллесницкого, обезвоживали и обезжиривали в серии восходящих спиртов, просветляли в ксилолах, заливали в парафин-воск, на ротационном микротоме изготавливали срезы толщиной 10 и 5 мкм). Срезы окрашивали гематоксилином и эозином, азур II - эозином. Анализ структурных и клеточных элементов вели с помощью МБС-10, микроскоп ЛОМО Микмед-2.
* ГОУ ВПО «Омская ГМА» Росздрава, Каф. анатомии человека 644043, г.Омск, ул.Партизанская, 20, (3812) 244384
Мазки периферической крови для подсчета лейкограммы готовили по общепринятым методам, окрашивали по Романовскому - Гимзе. Для определения процентного соотношения отдельных форм лейкоцитов под иммерсионной системой подсчитывали не менее 100 лейкоцитов. Для оценки степени выраженности эндогенной интоксикации рассчитывали лейкоцитарный индекс интоксикации (ЛИИ) по формуле Кальф-Калифа [2].
Для оценки фагоцитарной активности лейкоцитов исследовали поглотительную активность нейтрофилов крови при контакте их in vitro с суточной культурой E. coli. Под микроскопом просматривали 100 нейтрофилов и определяли: фагоцитарный индекс (ФИ) и фагоцитарное число (ФЧ) [13].
Регистрацию ВНиСММ плазмы крови осуществляли по методу М.Я. Малаховой [10] в ультрафиолетовой области спектра на спектрофотометре ЛОМО СФ - 26.
Количественные данные подвергались статистической обработке с использованием пакета прикладных программ STATISTICA 6,0 и возможностей Microsoft Excel 2007. На 1 этапе статистического анализа проводили тест на нормальность распределения признаков (критерии Колмогорова - Смирнова, Шапиро - Уилка). Статобработку проводили по методике, применяемой для нормального распределения признаков. Полученные данные представлены в тексте в виде М±s, где М - средняя величина, а s - стандартное отклонение средней. Различия между независимыми выборками определяли с использованием t-теста. Критическая величина значимости различий принята на уровне p<0,05. Для выявления статистических связей использовали корреляционный анализ с вычислением коэффициента Пирсона (r) и определением его статистической значимости.
Результаты и их обсуждение. При наблюдении за животными после внутрибрюшинного введении селенита натрия в токсической дозе, начиная с первых суток эксперимента, отметили ухудшение их общего состояния: крысы становились вялыми, сонными, малоподвижными, отказывались от пищи, однако существенных изменений массы тела не выявлено. Животные входили в эфирный наркоз продолжительнее других по времени. Летальность в этой группе к концу эксперимента (на 14 сутки) составила 57%. При морфологическом исследовании лимфоидных органов выживших животных выявили изменения.
После однократного внутрибрюшинного введения препарата (на 2 сутки эксперимента) в структуре тимуса обнаружено уменьшение общей площади среза (на 17%) и площади коркового вещества (на 24%), при этом площади мозгового вещества и соединительнотканного компонента не меняются по сравнению с контролем. Эти изменения являются проявлением акцидентальной инволюции, вызванной стрессом [8]. Наши данные согласуются с результатами других авторов. При инволюции тимуса, вызванной разными причинами, чаще поражается корковое вещество, а медуллярная зона и строма являются наиболее устойчивыми [11].
В субкапсулярной и внутренней зонах коры тимуса уменьшается число лимфоидных клеток, причем молодых форм (лимфобластов, клеток в митозе, средних лимфоцитов), что может свидетельствовать о снижении лимфопоэтической функции органа. Это может быть связано с нарушением процессов миграции предшественников Т-лимфоцитов из костного мозга. Существуют данные, которые подтверждают, что селен в высоких дозах подавляет кроветворение. Кроме того, уменьшение количества клеток лимфоидного ряда, вероятно, связано с усилением процессов гибели их в условиях токсического действия препарата, при котором происходит интенсификация свободнорадикальных процессов и, как результат, повреждение клеток и тканей органов [7]. Это подтверждается увеличением числа дегенерирующих клеток во всех зонах тимуса и наличием макро-фагальной реакции. В корковом веществе тимуса выявили увеличение числа плазматических клеток, что может быть свидетельством усиления антигенной нагрузки на организм [11]. Кроме того, нами обнаружено уменьшение числа эпителиальных клеток (в 2 раза) в паренхиме тимуса, что также может указывать на снижение функциональной активности его, так как эти клетки обеспечивают целостность структуры органа и являются важнейшим компонентом микроокружения, обеспечивающим пролиферацию и дифференцировку Т-лимфоцитов.
Согласно концепции Ю.И. Бородина [4] о лимфатическом регионе, дренируемый орган и регионарный лимфатический узел находятся не только в прямой, но и в обратной связи. Структурами, которые дренируют перитонеальную полость являются пара-
тимические узлы, поэтому токсичная лимфа, проходящая через них, может оказывать на тимус прямое повреждающее воздействие, в результате рефлюкса и выхода ее за пределы афферентных лимфатических сосудов.
В селезенке в этот период, как и в тимусе, наблюдали явления инволюции: уменьшение площади и доли лимфоидной паренхимы (на 25%), за счет снижения площадей периартериаль-ных лимфоидных муфт (ПАЛМ) и вторичных лимфоидных узелков по сравнению с показателями группы контроля. В узелках уменьшены площади центров размножения, маргинальной и периартериальной зон. В исследуемых нами структурнофункциональных зонах белой пульпы определяли снижение числа лимфобластов, клеток в митозе, малых лимфоцитов, плазматических клеток, ретикулярных клеток. Параллельно в маргинальной зоне обнаруживали увеличение числа макрофагов в 1,5 раза, во всех зонах отмечали появление дегенерирующих клеток. Обнаруженные нами структурно-клеточные изменения после однократного внутрибрюшинного введения препарата в селезенке свидетельствуют об угнетении как Т-, так и В-клеточного звеньев иммунного ответа, а следовательно можно предполагать
о снижении иммунного контроля крови и, в целом, о функциональной недостаточности селезенки как органа защиты. Вследствие этого возможно снижение резистентности организма, так как селезенка является основным органом, определяющим детокси-кационный потенциал организма [14,16].
После однократного внутрибрюшинного введения селенита натрия определяли существенные изменения и в структурной организации подвздошного лимфатического узла (ПЛУ), являющегося регионарным к месту введения селенита натрия. Отмечали увеличение общей площади среза в 1,5 раза, причем как за счет паренхимы, так и за счет синусной системы. Вследствие этого структурно-функциональная специализация узла, как и в контроле, остается близка к промежуточному морфотипу по классификации Ю.И. Бородина [3], но при этом К/М индекс меньше контрольного значения в 1,5 раза и равен 0,82±0,06. Эта перестройка -компенсаторно-приспособительный процесс, связанный с усилением детоксикации и транспорта большого количества токсичной лимфы, поступающей из региона лимфосбора (с целью разгрузки). Кроме того, преобладание доли В-зависимой зоны, за счет значительного возрастания доли вторичных лимфоидных узелков, центров размножения в них, а также мозговых тяжей и увеличения во всех структурно-функциональных зонах клеток лимфоидного и плазмоцитарного ряда свидетельствует о приоритетном развитии иммунного ответа лимфатических узлов по гуморальному типу и указывают на высокую токсичность лимфы.
В структуре ПЛУ отмечали снижение доли паракортикаль-ной области, практически во всех зонах узла обнаруживали рост числа дегенерирующих клеток, а в центрах размножения вторичных лимфоидных узелков - уменьшение численности клеток в митозе и макрофагов. Все эти структурно-клеточные преобразования в узле указывают на то, что он находится в состоянии напряжения для компенсации токсического процесса.
Уже после однократного внутрибрюшинного введения селенита натрия он вызывает структурные изменения в лимфоидных органах, что ведет к снижению их функциональной активности. Даже, несмотря на то, что в регионарном подвздошном лимфатическом узле выявлены преобразования, направленные на компенсацию токсического процесса, они оказываются недостаточными. Это подтверждается развитием в организме эндогенной интоксикации, которая приобретает генерализованный характер, что проявляется высокими значениями ВНиСММ в плазме крови, особенно в спектре длин волн, где регистрируются вещества катаболического происхождения, продукты распада клеток и тканей, а в лейкограмме отмечали нейтропению и эозинопению.
На 6 сутки эксперимента (после 5-кратного введения препарата) наблюдали нарастание процессов акцидентальной инволюции тимуса, которые соответствуют III-IV фазам. Общая площадь среза его максимально снижена (в 2 раза) по сравнению со значениями 2 суток и контроля, в структуре в равной степени уменьшены площади, как паренхимы, так и соединительнотканного компонента. Однако наиболее выражены структурные перестройки в корковом веществе, площадь которого становится меньше контроля почти в 3 раза, вследствие этого К/М индекс имеет самое низкое значение - 1,25±0,15 (в контроле - 2,15±0,17; на 2 сутки - 1,77±0,06).
В клеточном составе всех структурно-функциональных зон тимуса численность клеток продолжает снижаться, причем за счет клеток лимфоидного ряда. Данные изменения могут быть обусловлены следующими причинами. Во-первых, уменьшение количества зрелых лимфоцитов связано с процессом миграции их на периферию для усиления защитных механизмов, на что указывают увеличивающиеся в этот период площади Т-зависимых зон во вторичных лимфоидных органах (селезенке, подвздошном лимфатическом узле). Это подтверждается наличием выраженной, обратной корреляционной связи между этими структурами (r=-0,76 и -0,95 соответственно, р<0,05).
Во-вторых, причиной может быть и сниженный ранее (на 2 сутки эксперимента) лимфопролиферативный процесс в тимусе. В-третьих, уменьшение числа лимфоидных клеток, причем как зрелых, так и незрелых может объясняться усиливающейся гибелью их, что подтверждается увеличением количества дегенерирующих клеток и макрофагов. Выявленные нами структурноклеточные изменения в тимусе могут служить морфологическим критерием снижения его функций. Однако усиление миграции лимфоцитов из тимуса свидетельствует о том, что он участвует в компенсаторно-приспособительных процессах, даже находясь в состоянии функциональной недостаточности.
В селезенке в этот период эксперимента отмечали увеличение общей площади среза по сравнению со значениями на 2 сутки и контроля (в среднем на 25%), за счет нарастания площади красной пульпы и восстановления площадей маргинальной и периартериальной зон лимфоидных узелков, в которых возрастает и количество малых лимфоцитов, плазматических клеток. Кроме того, в центрах размножения лимфоидных узелков и ПАЛМ увеличивается число средних лимфоцитов и макрофагов. Возможно, данная перестройка является компенсаторной, связанной с усиленным притоком крови к селезенке в условиях токсикоза, и приводит к ее «функциональному всплеску». Однако говорить о восстановлении структуры и функциональной активности органа в данном случае проблематично, так как во всех изучаемых зонах селезенки количество дегенерирующих клеток сохраняется на высоком уровне.
Общая площадь среза подвздошного лимфатического узла на 6 сутки, как и на 2 сутки, превышает значение контроля. В структуре его увеличивается площадь коркового вещества, она занимает более 50% площади среза, главным образом, за счет паракортикальной зоны, в которой отмечали самую максимальную численность клеток в этот период. При этом площадь мозгового вещества, наоборот, уменьшается, что связано со снижением площади мозговых тяжей в 3,5 раза. Практически во всех структурно-функциональных зонах узла остается увеличенным число макрофагов и дегенерирующих клеток. Перестройка структурной организации ПЛУ сопровождается изменением морфотипа узла с промежуточного на компактный (К/М индекс равен 1,62±0,24) по классификации Ю.И. Бородина [3] и преобладанием площади Т-зависимой зоны, протеканию местных иммунных процессов преимущественно по клеточному типу. Эти преобразования в ПЛУ косвенно указывают на высокий токсический прессинг на регион лимфосбора и возрастающую необходимость усиления биообработки афферентной лимфы.
Вместе с тем площадь синусной системы сохраняется увеличенной, как и прежде, однако, кроме мозговых синусов возрастает площадь и краевого синуса. Площадь капсулы также сохраняется увеличенной. В мозговых синусах численность клеточных элементов по-прежнему увеличена, за счет малых лимфоцитов, плазматических клеток и макрофагов, что может свидетельствовать о снижении дренажных и транспортных функций узла. Учитывая это, можно предполагать о фазе лимфостаза в узле. С одной стороны, это создает благоприятные условия для обмена веществ между лимфой и лимфоидной тканью, а с другой стороны, в условиях, когда необходимо срочное отведение токсичной лимфы из очага поражения, создает сопротивление лимфооттоку.
Таким образом, на 6 сутки после внутрибрюшинного введения препарата в исследуемых лимфоидных органах нами выявлены структурно-клеточные преобразования разной степени выраженности, отмечено увеличение числа эозинофильных и нейтрофильных лейкоцитов в периферической крови, а также усиление фагоцитарной активности последних, что можно расценивать как активацию компенсаторно-приспособительных процессов. На это также указывает уменьшение уровня ВНиСММ в плазме крови (однако контрольного уровня оно не достигает и
суммарное значение веществ средней массы остается выше контроля почти в 1,5 раза). В целом защитные механизмы оказываются неадекватными потребности организма, вероятно, из-за высокой степени токсической нагрузки, полученной организмом после полного курса введения препарата. Это подтверждается возрастанием деструктивных процессов в органах, сохранением эндотоксикоза в организме.
На 14 сутки эксперимента (9 сутки после отмены введения селенита натрия) площадь коркового вещества тимуса возрастает по сравнению со значениями ее на 6 сутки, но сохраняется уменьшенной в сравнении с показателями контроля. В субкапсу-лярной зоне отмечали увеличение числа средних и малых лимфоцитов, что может свидетельствовать о неполном угасании функций тимуса и возобновлении процессов пролиферации и диффе-ренцировки, это подтверждается высоким числом средних лимфоцитов во внутренней зоне коркового вещества. Выявлено восстановление площади капсулы до контрольных значений. Эти данные указывают на возможность обратимости инволюции тимуса и восстановлении его функций.
Однако в этот период деструктивные процессы еще преобладают над репаративными, что говорит о сохранении токсикоза на высоком уровне даже через 9 суток после отмены препарата. Общая площадь среза тимуса остается, как и прежде, меньше контроля; площадь мозгового вещества продолжает уменьшаться и имеет самое минимальное значение (в 3 раза ниже контрольного); площадь трабекул сохраняется сниженной; количество лимфоидных клеток во всех структурно-функциональных зонах органа остается меньше, чем в контроле, а численность макрофагов, дегенерирующих и плазматических клеток, наоборот, увеличенной.
Истощение паренхимы тимуса отражается и на вторичных лимфоидных органах (селезенке и ПЛУ), в которых отмечали уменьшение площади Т-зависимых зон, что подтверждается корреляционным анализом: между изменениями этих структурных компонентов имеется сильно выраженная прямая связь (г=0,88 и 0,96 соответственно, р<0,05).
В селезенке, как и в тимусе, в этот период доминируют атрофические процессы: общая площадь среза ее максимально уменьшается, в большей степени, за счет белой пульпы. Уменьшение площади белой пульпы обусловлено, главным образом, снижением площади лимфоидных узелков, а площадь ПАЛМ, как и в другие сроки наблюдения, остается меньше контрольных значений. Площадь красной пульпы восстанавливается на 14 сутки.
Практически во всех структурно-функциональных зонах селезенки обнаружено уменьшение количества малых лимфоцитов и плазматических клеток и сохранение увеличенного числа дегенерирующих клеток и макрофагов. Структурно-клеточные перестройки в селезенке свидетельствуют о снижении и истощении ее функциональных возможностей, активацию которых мы наблюдали на 6 сутки эксперимента, что подтверждает наличие механизмов запуска повреждения даже после отмены селенита натрия.
В подвздошном лимфатическом узле после отмены внутри-брюшинного введения селенита натрия (на 14 сутки эксперимента) общая площадь среза, площадь мозгового вещества, капсулы и краевого синуса восстанавливаются до контрольных значений. Морфотип узла вновь меняется на промежуточный (К/М индекс равен 0,90±0,04) и соответствует контролю. Кроме этого, в структуре узла Т- и В-зависимые зоны занимают практически равные доли, как и в контроле (34,42±0,24% и 30,98±1,10% соответственно), что отражает состояние местного иммунитета и позволяет отнести его к смешанному типу, где в равной степени выражены гуморальное и клеточное звенья иммунного ответа.
Данные преобразования структурной организации ПЛУ могут свидетельствовать о начале восстановительных процессов в узле. Вероятно, это связано с тем, что токсическая нагрузка на узел снижается, так как препарат не поступает в организм уже 9 суток, поэтому тканевая жидкость и лимфа в регионе лимфосбора становится менее токсичной.
В структуре ПЛУ нами обнаружено уменьшение площади коркового вещества в сравнении с контрольными значениями, за счет уменьшения количества и площади вторичных лимфоидных узелков, центров размножения их, а также паракортикальной зоны и снижение количества лимфоидных клеток в них. В маргинальной (подсинусной) зоне коркового вещества возрастает число малых и средних лимфоцитов. Площадь синусной системы, хотя и уменьшается по сравнению с предыдущими сроками, но остается больше контрольных цифр, за счет площади мозговых синусов, в которых
клеточная численность снижается по сравнению с 6 сутками, но сохраняется выше, чем в контроле. Кроме этого, практически во всех структурно-функциональных зонах узла отмечали высокую численность макрофагов и дегенерирующих клеток. Данные изменения структурно-клеточной организации ПЛУ свидетельствуют о том, что, во-первых, состояние токсического прессинга в организме сохраняется даже после отмены введения препарата, во-вторых, функции узла остаются недостаточными.
Таким образом, на 14 сутки эксперимента (9 сутки после отмены внутрибрюшинного введения селенита натрия) отмечали активацию регенераторных механизмов: в тимусе увеличение числа лимфоидных клеток в корковом веществе, в ПЛУ постепенное восстановление структурных показателей; в крови увеличение количества нейтрофилов и фагоцитарной активности их. Эти факты могут указывать на наличие резервов в организме для возможности адаптации к измененным метаболическим процессам.
Вместе с тем, в тимусе и селезенке выражена инволюция лимфоидной паренхимы, в ПЛУ уменьшена площадь коркового вещества, во всех органах сохраняется увеличенным количество дегенерирующих клеток и макрофагов, что может косвенно указывать на высокую степень токсикоза, а также на их функциональную недостаточность. Подтверждением этого являются высокие значения ВНиСММ, которые являются маркерами эндогенной интоксикации.
После внутрибрюшинного введения селенита натрия нами обнаружены стереотипные структурно-клеточные преобразования первичного и вторичных лимфоидных органов, которые являются проявлениями общего адаптационного синдрома в ответ на стрессовую ситуацию, которой является в данном случае гиперселеноз. Наличие сильных корреляционных связей между структурными изменениями органов может указывать на системную, взаимообусловленную и взаимосвязанную реакцию их на экзогенный фактор.
Литература
1.Барабой В.А. // Успехи современной биологии. 2004. Т.124, №2. С.157-168.
2.Белевитин А.Б. Клиническая интерпретация лабораторных исследований / А.Б. Белевитин, С.Г. Щербак. СПб.: ЭЛБИ-Спб, 2006. 384 с.
Ъ.Бородин Ю. И. // Вопросы экспериментальной морфологии лимфатической системы и соединительнотканного каркаса. Новосибирск, 1968. С.34-43.
4.Бородин Ю. И. // Проблемы экспериментальной и клинической лимфологии. Новосибирск, 1996. С.31-42.
5.Бородин Ю.И. // Хирургия, морфология, лимфология. Бишкек, 2007. Т.4, №7. С.13-14.
6.Бородин Ю.И. // Фундаментальные проблемы лимфоло-гии и клеточной биологии. Новосибирск, 2008. С.54-56.
I.Зайко О.А., Синдерева А.В., Путалова И.Н., Конвай В.Д. // Медицинская наука и образование Урала. 2009. Т.10, №2. С. 57-59.
8.Кветной ИМ. Нейроиммуноэндокринология тимуса / И.М. Кветной, А.А. Ярилин, В.О. Полякова, И.В. Князькин. СПб.: Деан, 2005. 157с.
9.Коненков В. И. // Проблемы саногенного и патогенного эффектов эндо- и экзоэкологического воздействия на внутреннюю среду организма. Чолпон-Ата, 2009. С.210-212.
ЮМалаховаМ.Я. // Эфферентная тер. 1995. Т.1, №1. С.1-64.
II.Обухова Л.А. // Проблемы лимфологии и интерстициального массопереноса. Новосибирск, 2004. Ч.1. С. 291-294.
12.Селен: совместное издание Программы ООН по окружающей среде, МОТ и ВОЗ (Гигиенические критерии состояния окружающей среды ВОЗ №58). М.: Медицина, 1989. 270с.
13.Хаитов Р.М. Руководство по клинической иммунологии. Диагностика заболеваний иммунной системы // Р.М. Хаитов, Б.В. Пинегин, А.А. Ярилин. М.: ГЭОТАР - Медиа, 2009. 352с.
14.Шапкин Ю.Г., Масляков В.В. // Дет. хир. 2007. №5. С.40-42.
15.Юшков Г.Г. и др. // Гигиена и санитария. 2005. №1. С.62.
16.Földi M. Földi's Textbook of Lymphology for Physicians and Lymphedema Therapists / M. Földi, E. Földi. Elsevier GmbH, Munich, Germany, 2006. 735 s.
STRUCTURALL AND CELLULAR CHANGES IN LYMPHOID ORGANS AFTER INTRAPERITONEAL OF SODIUM SELENITE INTRODUCTIONS IN THE TOXIC DOSE IN THE CAVITY PERITONEALE
O.V.NIKITENKO, I.N.PUTALOVA
Omsk State Medical Academy Anthroponomy Department
It is experimentфддн established that structurally cellular transformations in lymphoid organs (thymus, spleen, iliac lymph node) after intraperitoneal introduction of sodium selenite are stereotypic and adaptive. Strong correlative connections in the structural changes of organs being studied (on the 6th day of experiment in the changes in thymus parenchyma, T-dependent spleen zones and iliac lymph node were negative, and after canceling the medicine - positive) are defined. Key words: spleen, sodium selenite, cavity peritoneale.
УДК 611.42+546.23
СТРУКТУРНЫЕ ПРЕОБРАЗОВАНИЯ ЛИМФОИДНЫХ ОРГАНОВ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЭКЗОГЕННЫХ ВОЗДЕЙСТВИЯХ НА ОРГАНИЗМ
И.Н. ПУТАЛОВА, С.Н. ШИРОЧЕНКО, О.В. НИКИТЕНКО,
А.П. СУСЛО*
На крысах линии Wistar исследовано влияние экзогенных факторов (раневой процесс, механические повреждения, воздействие токсических доз селенита натрия) на структурные преобразования лимфоидных органов. Полученные результаты свидетельствуют о сложной динамике и широком диапазоне структурных преобразований, что зависит от вида и силы стрессора. Лимфоидные органы одними из первых реагируют на экзогенные факторы, причем структурнофункциональные изменения этих органов часто носят черты общей стереотипии.
Ключевые слова: лимфоидные органы, раневой процесс, механические повреждения, селенит натрия
Динамическое равновесие между окружающим экзоэколо-гическим и организменным эндоэкологическим пространством определяет состояние здоровья, уровень качества жизни и ее продолжительность. Лимфоидные органы являются основными гомеостатическими и регуляторными органами для внутренней среды организма, обнаруживая признаки морфофункционального реагирования в них на внешнесредовые влияния, мы можем получить информацию о механизмах адаптации организма к средовым воздействиям, о наличии, степени и пределах адапта-тивных процессов [1].
На кафедре анатомии человека Омской государственной медицинской академии проводятся экспериментальные исследования по изучению структурно-функциональных изменений лимфоидных органов при различных воздействиях на организм (рана промежности, механические повреждения, воздействие токсической дозы селенита натрия).
В экспериментах использовали белых крыс линии Wistar. Объектом для исследования служили тимус, селезенка. Опытный материал подвергали гистологической обработке по стандартной методике. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином, пикро-фуксином по методу Ван Гизона, азур II - эозином. Анализ структурных и клеточных элементов производили с помощью МБС-10, микроскопа ЛОМО Микмед-2. Количественные данные подвергались статистической обработке с использованием пакета прикладных программ STATISTIC A 6,0 и возможностей Microsoft Excel 2007.
Результаты проведенных нами морфометрических исследований лимфоидных органах при различных экспериментальных ситуациях свидетельствуют о широком диапазоне и сложной динамике структурных преобразований их.
При воздействии различных факторов, в независимости от их качества, в организме происходят изменения, которые расцениваются как общий адаптационный синдром, направленный на повышение сопротивляемости организма к действию повреждающих факторов. Одним из первых проявлений адаптационного синдрома является развитие акцидентальной инволюции лимфоидной системы. В тимусе при всех видах воздействия в первые сроки экспериментов отмечали снижение общей площади среза, площадей коркового и мозгового веществ (рис.1). При раневом
* ГОУ ВПО «Омская ГМА» Росздрава Кафедра анатомии человека644043, г. Омск, ул. Партизанская, 20, (3812) 244384
процессе промежности происходит увеличение в 2 раза площади соединительнотканного компонента его (капсула, трабекулы), что, видимо, связано с токсическим отеком ее. А при токсическом воздействии селена наблюдали противоположный характер изменений. Это говорит о том, что реакция соединительнотканного компонента зависит от вида и силы стрессоров.
Во всех структурно-функциональных зонах тимуса уменьшается число клеток лимфоидного ряда, что связано с процессом миграции зрелых лимфоцитов из коры во вторичные лимфоидные органы, с усилением процессов гибели тимоцитов, особенно незрелых форм, на что указывает наличие макрофагальной реакции и рост числа дегенерирующих клеток. Уменьшение числа бластных форм и митотически делящихся клеток говорит о снижении лимфопоэтической функции тимуса. Полученные результаты согласуются с данными многих выраженных инволютивных процессов в тимусе, а как следствие - снижение функциональной активности органа под влиянием различных факторов [2,3,6].
В более поздние сроки экспериментов наблюдали восстановление структурных компонентов тимуса: увеличение общей площади среза до контрольных значений, за счет площадей коркового и мозгового веществ. В мозговом веществе тимуса было обнаружено увеличение числа средних лимфоцитов, вероятно, относящихся к кортизон-резистентной популяции и необходимых для обеспечения процессов развития Т-лимфоцитов (табл.1).
Таблица 1
Клеточный состав мозгового вещества тимуса интактных крыс и при пероральном применении токсической дозы селенита натрия и после отмены его (М±8)
Параметры контроль So2 So6 So14
Общее кол-во клеток 218,13±2,4 222,71±6,55 206,52±7,12* 218,31±8,37
Лимфобласты 7,03±0,79 6,18±0,86 5,16±0,67* 3,95±0,58*
Средние лимфоциты 15,06±0,82 18,30±1,72* 12,69±1,52* 17,60±1,07*
Малые лимфоциты 184,62±3,0 191,80±6,87 174,50±6,8* 179,40±7,3*
Макрофаги 0,97±0,06 1,04±0,09 1,85±0,41* 4,32±0,49*
Ретикулярные клетки 8,52±0,6 3,33±0,64* 6,70±0,77* 4,30±0,88*
Плазматические клетки 1,0±0,19 0,98±0,2 0,95±0,17 0,94±0,27
Митозы 0,87±0,21 0,97±0,06 0,99±0,11 1,0±0,09
Дегенерирующие клетки 0,05±0,05 0,11±0,02* 3,68±0,34* 6,80±0,86*
Всего 765,41±8,2 757,28±14,4 667,14±11,6* 686,5±7,5*
Примечание: * - отличие достоверно при сравнении с аналогичными показателями контроля (р<0,05)
Значения соединительнотканных компонентов возвращаются к исходным показателям. Полученные нами данные могут указывать на возможность регенерации тимуса, даже после таких выраженных деструктивных перестроек. Тем более что в отличие от возрастных изменений лимфоидных органов, акцидентальная инволюция их практически всегда имеет обратимый характер, что зависит от вида стрессора, его силы и продолжительности воздействия [7].
Параллельно с изменениями в тимусе в структуре белой пульпы селезенки отмечали увеличение количества и площади вторичных лимфоидных узелков, в основном за счет маргинальной зоны, в клеточном составе которой возрастает число малых лимфоцитов (почти в 2 раза).
Ширина маргинальной зоны рассматривается в качестве морфологического критерия иммунного статуса организма. Отмечали расширение площади периартериальной (Т-зависимой) зоны лимфоидных узелков (рис.2).
Рис 1.Акцидентальная инволюция тимуса при раневом процессе промежности, 5 сутки. Окраска по Ван Гизону. Об.Ю, к.15
