CC BY
10
M. Г. ЧЕСНОКОВА
Омская государственная медицинская академия
УДК 616.345-008.87006.5-031.81+576.8
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ГИДРОФОБНОЙ ХАРАКТЕРИСТИКИ ЭШЕРИХИЙ, ВХОДЯЩИХ В СОСТАВ ПРОСВЕТНОЙ И ПРИСТЕНОЧНОЙ МИКРОфЛОРЫ ТОЛСТОЙ кишки БОЛЬНЫХ ПОЛИПОЗОМ_
ПРОЦЕСС АДГЕЗИИ ПО СВОЕМУ ХАРАКТЕРУ ДОВОЛЬНО СЛОЖНЫЙ И ВКЛЮЧАЕТ КАК СПЕЦИФИЧЕСКИЕ, ТАК И НЕСПЕЦИФИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ. СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ГИДРОФОБНОЙ ХАРАКТЕРИСТИКИ ЭШЕРИХИЙ, ВХОДЯЩИХ В СОСТАВ МИКРОБИОЦЕНОЗА ТОЛСТОЙ КИШКИ У БОЛЬНЫХ ПОЛИПОЗОМ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА ПОКАЗАЛО, ЧТО ШТАММЫ Е COU, ВЫДЕЛЕННЫЕ ОТ БОЛЬНЫХ ПОЛИПОЗОМ, ХАРАКТЕРИЗОВАЛИСЬ БОЛЕЕ ВЫСОКОЙ ГИДРОФОБНОСТЬЮ В СРАВНЕНИИ С ЭШЕРИХИЯМИ, ПОЛУЧЕННЫМИ ОТ БОЛЬНЫХ ЖКБ И ОТ ЗДОРОВЫХ ЛЮДЕЙ. ХАРАКТЕРНО, ЧТО В ПОПУЛЯЦИИ Е. COU, НАСЕЛЯЮЩЕЙ КИШЕЧНИК БОЛЬНЫХ ПОЛИПОЗОМ, НАБЛЮДАЛСЯ ЗНАЧИТЕЛЬНЫЙ УДЕЛЬНЫЙ ВЕС ВЫСОКОГИДРОФОБНЫХ ШТАММОВ. УДЕЛЬНЫЙ ВЕС ВЫСОКОГИДРОФОБНЫХ ШТАММОВ БЫЛ ДОСТОВЕРНО НИЖЕ В СРАВНЕНИИ С ИЗОЛЯТАМИ, ПОЛУЧЕННЫМИ ИЗ ИСПРАЖНЕНИЙ, БИОПТАТОВ ПОЛИПОВ И БИОПТАТОВ НЕИЗМЕНЁННЫХ УЧАСТКОВ СЛИЗИСТОЙ СИГМЫ. КОПРО-КУЛЬТУРЫ ЭШЕРИХИЙ, ПОЛУЧЕННЫЕ ОТ ЗДОРОВЫХ ЛИЦ, НЕ ПРОЯВЛЯЛИ ВЫСОКОЙ СТЕПЕНИ ГИДРОФОБНОЙ АКТИВНОСТИ.
Микроорганизмы, входящие в состав нормальной микрофлоры, участвуют в создании защитного барьера, функции которого связаны с блокированием слизистых макроорганизма от патогенных и условнопа-тогенных микроорганизмов[1,2,6,8]. Анализ последних литературных данных показывает, что в процессе адгезии участвуют физические и физико-химические взаимодействия (электростатические, гидрофобные, водородные связи и др.). т.е. процесс адгезии, по своему характеру достаточно сложный и включает, как специфические так и неспецифические механизмы [4,7.9].
Адгезия патогенных эшерихий, в большинстве случаев являющаяся начальным этапом колонизации бактериями кишечника, детально освещена в литературе [3,5,7]. Особенности адгезии и колонизации кишечника неэнтеропатогенными кишечными палочками исследованы гораздо хуже, что и явилось целью настоящего исследования.
Характерно, что некоторые факторы вирулентности и колонизации у непатогенных бактерий, включающие взаимодействаия между бактериями и клеткой, могут быть относительно видонеспецифическими, что можно объяснить гетерогенностью адгезинов, а также изменением поверхностного заряда и гидрофобных характеристик у определенных штаммов [1,9]. Для нас представляло интерес изучение особенностей гидрофобной характеристики исследуемых штаммов Е. coli, колонизирующих кишечник больных полипо-зом.
Цель работы заключалась в сравнительном изучении гидрофобной характеристики эшерихий, входящих в состав микробиоценоза толстой кишки у больных полипозом желудочно-кишечного тракта.
Материалы и методы исследований
Было обследовано 159 больных в возрасте от 17 до 65 лет, от которых выделялись культуры Е. coli при
проведении микробиологического исследования биоматериала, проводимого с целью изучения качественной и количественной характеристики микробиоценоза толстого кишечника. Всего было выделено 2372 культуры Е. coli, при этом от больных полипозом - 921 копрокультура, 315 изолятов из биоптатов полипов, а также 348 штаммов из биоптатов неизмененных участков слизистой оболочки толстой кишки. Следует отметить, что у всех больных выявлялся дисбактери-оз определенной степени тяжести.
При микробиологическом исследовании испражнений больных желчно-каменной болезнью и от здоровых лиц были выделены, соответственно, 431 и 357 штаммов эшерихий.
Для исследования отбирались культуры эшерихий, не принадлежащие к патогенным серовариан-там на основе результатов проводимого серотипиро-вания.
Исследование гидрофобности клеточной стенки Е. coli, выделенных от больных полипозом, желчнокаменной болезнью и от здоровых лиц контрольной группы проводилось по методике А.К. Акатова с со-авт. (1987) в тесте солевой агрегации бактерий.
К высокогидрофобным относили культуры, вызывавшие агрегацию сернокислого аммония (NH4)2S04 в диапазоне от 0,2 - до 0,6 М, к среднегидрофобным -от 0,8 - до 2,0 М, культуры, агрегировавшие в растворе с концентрацией от 2,2 - до 4,0 М расценивались нами как штаммы, обладающие низкой степенью гидрофобности.
Результаты исследований
Результаты проведённых исследований представлены в таблице, из которой видно, что штаммы Е. coli, выделенные от больных полипозом, характеризовались более высокой гидрофобностью, в сравнении с эшерихиями, полученными от больных ЖКБ и от здоровых людей (р< 0,001, р< 0,001, р< 0,001).
Таблица
Гидрофобность эшерихий, выделенных от больных полипозом
Происхождение культуры Е. coli, выделенные от больных полипозом • из испражнений Обследовано больных Выделено штаммов Из них обладали гидрофобностью (Р±ш %)
114 921 абс.
669 Р±т (%) Р
• из биоптатов полипов 315 247 72,6±1,5 р<0,001
• из биоптатов неизменённых участков слизистой толстой кишки 348 264
Е. coli, выделенные от больных ЖКБ 45 431 175 78,4±23 р<0,001
Е. coli, выделенные от здоровых людей 35 357 74 75,9±2,3 р<0,001
В ходе исследования степени проявления гидрофобной активности среди штаммов Е. coli, изолированных от обследованных больных, было установлено, что в популяции Е. coli, населяющей кишечник больных полипозом, отмечается значительный удельный вес высокогидрофобных штаммов, который существенно превышает численность таковых среди Е. coli, изолированных от здоровых людей и от больных желчно-каменнной болезнью.
Вместе с тем, среди копрокультур, полученных от больных желчно-каменной болезнью, наблюдалось достоверно больше штаммов с высокой степенью гид-рофобности, чем среди Е. coli, полученных от здоровых лиц, у которых данная степень признака отсутствовала (р<0,001). При этом культуры, полученные от больных желчно-каменной болезнью чаще проявляли высокую степень гидрофобности. Однако, удельный вес высокогидрофобных штаммов был достоверно ниже в сравнении с изолятами, полученными из испражнений, биоптатов полипов и биоптатов неизменённых участков слизистой сигмы.
Определено, что копрокультуры эшерихий, полученные от здоровых лиц, не проявляли высокой степени гидрофобной активности.
Интересно отметить, что Е. coli, колонизирующие слизистую оболочку полипов толстой кишки, обладали чаще других культур, полученных от больных полипозом, высокой степенью признака - 64,8±3,0% случаев.
Кроме того, среди культур Е. coli, изолированных от больных полипозом, встречалось также больше штаммов со средней степенью гидрофобности в сравнении со штаммами Е. coli, полученными от обследованных больных контрольной группы.
Таким образом, при изучении особенности проявления гидрофобной активности у культур Е. coli, выделенных от больных полипозом желудочно-кишечного тракта, было установлено, что исследованные изоляты характеризовались высокой степенью гидрофобности по сравнению с Е. coli, полученными от здоровых людей и от больных ЖКБ. При этом среди эшерихий, выделенных из биптатов полипов, наблюдался наиболее высокий удельный вес штаммов, обладающих высокой степенью гидрофобности. Вероятно, полученные данные можно объяснить струк-
турными особенностями клеточной поверхности Е. coli, колонизирующими слизистую оболочку, изменённую неопластическим процессом.
Результаты проведенных исследований согласуются с литературными данными, свидетельствующими о наличии выраженных факторов вирулентности у представителей нормальной микрофлоры, колонизирующих толстый кишечник больных полипозом при дисбиозе[3,5,7,8].
ЛИТЕРАТУРА
1. Бондаренко В.М. Дисбактериоз желудочно-кишечного тракта // Рос. журн. гастроэнтерол.,гепатол.,-колопроктол. - 1998.-Т. 8. - № 1.-С. 61-65.
2. Бондаренко В.М.,Учайкин В.Ф., Муранова А.О. и др. Дисбиоз, современные возможности профилактики и лечения - М., 1995. - 219 с.
3. Воробьёв А.А.. Абрамов Н.А., Бондаренко В.М., и др. Дисбактериоз - актуальная проблема медицины // Вестн. РАМН. - 1997. - № 3.-С.4-7.
4. Горская Е.М., Манихина И.М., Бондаренко В.М. и др. Адгезивные и колонизирующие свойства бактерий неэнтеропатогенной кишечной палочки // Колонизационная резистентность и химиотерапевтичес-кие антибактериальные препараты. - Москва. - 1988. - С. 10-11.
5. Езепчук Ю.В. Функциональные критерии пато-генности // Микробиол. журн. 1988. - № 5. - С. 113-116.
6. Красноголовец В.М. Дисбактериоз кишечниками Медицина,- 1989. - 207 с.
7. Маянский А.Н., Воробьёва О.Н., Малышева Э.Ф. и др. Взаимоотношения между естественной колонизацией и адгезией бактерий к буккальному эпителию человека // Микробиол. журн. - 1987. - № 2. - С. 18-20.
8. Anderson R. The Significance and Potencial Molecular Mechanisms of Gastrointestinal Barrier Homeostasis II Scand. J. Gastroenterol. - 1997. - V. 32. -№ 11. - P. 1073-1083.
9. Boujaafar N.. Freney J., Bouvet P.S. et al. Cell surface hydrophobic^ of 88 clinical strains of Acinetobacter baumanni // Res. Microbiol. - 1990. -V. 141-№4. -P. 477-482.
ЧЕСНОКОВА Марина Геннадьевна - ассистент каф. микробиологии,вирусологии и иммунологии, K.M.H.,
О ПИ А.
