CC BY
13
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 7
внутриопухолевая гетерогенность, то есть встречаются материалы и методы. Водорастворимые диады и ис-клетки, содержащие не только ЭРа или ЭРр, но и оба ре- ходные полизамещенные ВПФ синтезированы в ИПХФ цептора. РАН, структура соединений доказана методами ИК- и УФ-Заключение. Учитывая разнонаправленный вклад ЭРа спектроскопии, спектроскопии ядерного магнитного реи ЭРр в реализацию пролиферативных стимулов, важным зонанса на ядрах 'Н и 13С и электроспрей масс-спектроме-прогностическим показателем агрессивности РЯ и чувст- трии. Для регистрации спектров SERS и SEF исследуемых вительности к антиэстрогенам может быть не только уро- веществ использовались оригинальные подложки Ин-вень одиночной экспрессии ЭРа и ЭРр в опухоли, Спектр SERS, в которых поверхностным слоем служило но и уровень их коэкспрессии как в опухоли, так и в одних наноостровковое серебро. и тех же клетках. результаты и заключение. В настоящей работе методы Работа поддержана Российским фондом SERS и SEF впервые применены для детектирования ВПФ фундаментальных исследований и их диад с хлорином е6 в воде. Показано, что хлорин е6 (гранты № 15-04-06991_а, 16-34-01049_мол_а), а также и ковалентные диады фуллерен—хлорин обладают близки-грантом Президента РФМК-7709.2016.7. ми по структуре характерными спектрами SERS. У диад фуллерен—хлорин наблюдается выраженный сигнал SEF, А.Ю. Белик1, В.И. Кукушкин2, А.Ю. Рыбкин1, Н.С. Горячев1, тогда как у свободного хлорина е6 флуоресценция SEF от-Д.А. Полетаева1, В.Ю. Кузнецов13, О.А. Краевая1, сутствует, что согласуется с теорией, предсказывающей П.А. Михайлов4, П.А. Трошин15, А.И. Котельников1 обратную зависимость интенсивности SEF от квантового разработка мЕтодА СПЕктроСкоПии выхода обычной флуоресценции. Концентрационная за-ГиГАнтСкоГо комбинационного рассеяния висимость интенсивности SEF линейна для исследуемых и поверхностно-усиленной диад в диапазоне 0,1-2,0 мкМ. Эти эффекты позволяют ФлУорЕСЦЕнЦии для детектирования с высокой чувствительностью определять содержание ис-водорАСтворимыХ Производных следуемых соединений, обладающих малым квантовым ФУллЕрЕнов и иХ ДиАД С Хлорином Е6 выходом для обычной флуоресценции в растворах. 1ФГБУНИПХФ РАН, Черноголовка, Московская область, Исследования поддержаны Программой Президиума Россия; РАН № 1«Наноструктуры: физика, химия, биология, 2ФГБУНИФТТРАН, Черноголовка, Московская область, основы технологий», гос. заданием ФАНО (№ гос. регистра-Россия; ции 01201361875) и грантом РФФИ № 18-34-00607мола. 3МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия; 4ФГБУН«ИНХС им. А.В. Топчиева РАН», Москва, Россия; А.П. Бер, А.Э. Мачулкин, М.В. Ковальчук, Н.С. Воробьева, 5Сколковский институт науки и технологий, Москва, Россия Е.К. Белоглазкина, С.В. Ковалев, В.Э. Котелянский, введение. Водорастворимые производные фуллере- А.Г. Мажуга нов (впф) имеют широкий спектр биологической актив- синтез и биологические испытания ности и являются перспективными с точки зрения созда- конЪЮГАТОв ПАклитАкСЕлА нА оСновЕ ния на их основе лекарственных препаратов. В ИПХФ ингибитора ПроСТАтичЕСкоГО РАН разработаны методы синтеза различных ВПХ С60, СПЕЦиФичЕСкоГо мембранного АнтиГЕнА а также водорастворимых ковалентных диад ВПФ-краси- Для тЕрАПии рака ПрЕДСТАтЕлЬной ЖЕлЕЗы тель. В предыдущих работах была показана перспектив- МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия ность использования таких диад в качестве высоко- введение. В 2012 г. рак предстательной железы (РПЖ) эффективных фотосенсибилизаторов для применения был 2-м по распространенности злокачественным новоо-в фотодинамической терапии. В связи с этим разработка бразованием среди мужского населения (1,1 млн новых методов детектирования таких наночастиц в тканях ор- случаев). Широкий спектр методов лечения заболевания, ганизма является актуальной задачей биологии и фунда- таких как радикальная простатэктомия, лучевая терапия, ментальной медицины. Известно, что фуллерены облада- гормональная терапия и химиотерапия, не позволяет про-ют невыраженным спектром поглощения в УФ-области водить эффективное лечение опухолей, имеющих метаста-и не проявляют флуоресцентных свойств, что затрудняет зы. Помимо этого, многие методы обладают различными их детектирование наиболее традиционными спектраль- побочными эффектами. В качестве одного из решений ными методами. Флуоресценция красителей, входящих данной проблемы выступает направленная доставка пров структуру диад ВПФ-краситель, практически полно- тивоопухолевых препаратов. В клетках РПЖ наблюдается стью потушена и также трудно детектируема. Одним повышенная экспрессия простатического специфического путей решения данной проблемы является использо- го мембранного антигена (ПСМА) по сравнению со здо-вание явлений гигантского комбинационного рассеяния ровыми клетками. Существует ряд низкомолекулярных (метод поверхностно-усиленной Рамановской спектро- лигандов, обладающих высокой аффинностью к ПСМА. скопии, surface-enhanced Raman spectroscopy, SERS) и по- Цель исследования. Разработка конъюгатов противо-верхностно-усиленной флуоресценции (surface-enhanced опухолевого препарата паклитаксел с рядом лигандов, fluorescence, SEF). специфично связывающихся с ПСМА. Связь терапевти-Цель исследования. Исследование спектров SERS ческого агента и лиганда осуществлялась посредством и спектров SEF хлорина е6 и водорастворимых ковалент- углеродного линкера, который обеспечивает высвобожде-ных диад фуллерен—хлорин. ние лекарства внутри клетки. Часть лигандов содержали
Спецвыпуск / том 17 / 2018 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
8
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
N-галогенбензильный заместитель при атоме азота лизина. Вектор с линкером соединялись амидным или мочевин-ным фрагментом. Сшивка противоопухолевого агента и вектора с линкером осуществлялась посредством 1,3-ди-полярного циклоприсоединения с образованием 1,4-диза-мещенного 1,2,3-триазола.
материалы и методы. Все полученные вещества были охарактеризованы спектроскопией ЯМР 'H и 13C. Чистота конъюгатов подтверждалась с помощью метода ВЭЖХ/МС. Также конечные соединения были протестированы in vitro и in vivo.
результаты. Была синтезирована серия из 11 конъюга-тов, и проведены in vitro испытания на клеточных линиях РПЖ LNCaP (ПСМА+) и PC3 (ПСМА). Конъюгаты показали токсичность, близкую к паклитакселу, но некоторые из них имели низкую избирательность по отношению к ПСМА-экспрессирующим клеткам. Также были проведены in vivo испытания для 2 конъюгатов. Соединения показали способность ингибировать рост опухоли, сопоставимую с оригинальным препаратом.
Заключение. Были синтезированы 11 конъюгатов, строение которых подтверждено спектрами 1H и 13C ЯМР, МС высокого разрешения. Чистота соединений была подтверждена методом ВЭЖХ/МС. Также были проведены биологические испытания in vitro и in vivo.
Ю.В. Береснева1, Ф.А. Ибрагимов1, Ю.Ю. Ассесорова2, Ш.Н. Мусаева2
сравнительная оценка противоопухолевой Активности y-облучения и препарата сояфлан, изучение иммунологических показателей крови экспериментальных животных
1ИБОХ АН РУз, Ташкент, Узбекистан; 2РОНЦМЗ РУз, Ташкент, Узбекистан
введение. Лучевая терапия сопровождается проявлением ряда тяжелых побочных действий, самыми значимыми из которых являются нарушение кроветворения и дестабилизация иммунной системы организма. Решение данной проблемы лежит в применении средств, нивелирующих или снижающих негативные последствия у-облучения для организма. В Институте биоорганической химии АН РУз получена стандартизированная комбинация полипептидов из сои с молекулярной массой 12,5—79,0 кДа, богатая изофлавонами, — препарат сояфлан.
Цель исследования. Сравнительная оценка противоопухолевой активности у-облучения и препарата сояфлан на раннем этапе развития опухоли «саркома-180» (С-180) (3—13-й день после перевивки опухолевого штамма) и определение числа иммунокомпетентных клеток в крови экспериментальных животных.
материалы и методы. Трансплантацию солидной опухоли С-180 производили гомогенатом опухолевой ткани в стерильном физиологическом растворе. Противоопухолевую терапию проводили следующим образом: I группа — у-облучение, II группа — сояфлан, III группа — сояфлан + у-облучение, IV группа — контроль (животные-опухолено-сители, без терапевтического воздействия), V группа — ин-тактные животные. Облучение животных-опухоленосителей
(II и III группы) проводили 3-кратно — на 5-, 7- и 9-й день после перевивки опухоли, при тотальном воздействии. Облучение выполнено на радиотерапевтической установке «Рокус» у-лучами 60Со. Разовая доза составила 2 Гр, суммарная доза — 6 Гр. Сояфлан растворяли в дистиллированной воде и вводили зондом в желудок мышам в дозе 75 мг/кг начиная с 3-го дня после перевивки опухоли. Метод оценки иммунного статуса основан на количественном тестировании субпопуляций лимфоцитов со специфическими для каждого вида рецепторами — кластерами дифференци-ровки (CD) (Шушкевич Н.И., 2007). Использовались CD-маркеры: CD3, CD4, CD8, CD16, CD20, CD25, CD95.
результаты. Облучение в монорежиме показывает торможение роста опухоли (ТРО) 85,6 % по массе и 82 % по объему; сояфлан, вводимый в монорежиме, оказывает выраженное противоопухолевое действие — ТРО 91,2 % по массе и 90,3 % по объему, при введении сояфлана в комплексной терапии с у-облучением показатель ТРО по массе составил до 94,3 % и по объему — до 94 %. Результаты иммунологического обследования интактных животных и животных-опухоленосителей показали, что появление и развитие в организме животных опухолевого очага приводит к достоверному увеличению числа CD3-клеток на 20 %, CD8 - на 70 %, CD16 - на 90 % и CD95 — на 50 %, уменьшению числа CD4-кпеток — на 14 %, CD20 — на 22 % (р <0,05); иммунорегуляторный индекс (ИРИ) — 0,83. Воздействие лучевой терапии достоверно снижало число CD3-клеток на 36 %, CD4 — на 40 %, CD8 — на 20 %, CD16 — на 20 % и CD20 — на 20 % в сравнении с контролем (р <0,05), ИРИ — 0,83. Лечение сояфланом в монорежиме вызывает достоверное снижение показателей по 3 параметрам — числа CD8-кпеток на 28 %, CD16 — на 57 % и CD95 — на 33 %, и увеличение числа CD20 клеток на 17 % (р <0,05), ИРИ — 1,16. Комплексное воздействие у-облучения и сояфлана приводило к уменьшению общего пула CD3-клеток на 25 %, CD8 — на 50 %, CD16 — на 40 %, CD95 — на 18 %, увеличению общего пула CD25 на 22 %, ИРИ — 1,23.
Заключение. Нормализующие иммунологические параметры действия сояфлана при монотерапии и в комплексе с у-облучением коррелируют с выраженным противоопухолевым действием.
В.Г. Беспалов, Я.Г. Муразов, А.Н. Стуков,
Г.В. Точильников, И.Н. Васильева, А.Л. Семенов,
О.А. Беляева, Г.С. Киреева, К.Ю. Сенчик, А.М. Беляев
противоопухолевая активность производного симметричных триазинов при гипертермической интраперитонеальной химиоперфузии асцитной опухоли яичников в эксперименте
ФГБУ«НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия
введение. У 75 % больных эпителиальным раком яичников (РЯ) на момент установления диагноза присутствует канцероматоз брюшины, который трудно поддается хирургическому и стандартному (внутривенному) химио-терапевтическому лечению.
Цель исследования. Изучить противоопухолевую активность производного симметричных триазинов (ПСТ)
Спецвыпуск / том 17 / 2018
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
