CC BY
12
В1СНИК ВДНЗУ «Украхнська медична стоматологгчна академхя»
Литература
1. Лях Ю.Е. Основы компьютерной биостатистики: анализ информации в биологии, медицине и фармации статистическим пакетом Medstat / Ю. Е. Лях, В. Г. Гурьянов, В. Н. Хомен-ко. - Д. : Папакица, 2006. - 214 с.
2. Abbracchio M. P. International Union of Pharmacology LVIII: Update on the P2Y G Protein-Coupled Nucleotide Receptors:
From Molecular Mechanisms and Pathophysiology to Therapy / M. P. Abbracchio, G. Burnstock, J. M. Boeynaems // Pharmacol. Rev. - 2006. - V. 58. - P. 281-341. 3. Rivera J. Platelet receptors and signaling in the dynamics of thrombus formation / J. Rivera, M. L. Lozano // Haematologica. -2009. - V. 94. - P. 700-711.
Реферат
ЗМ1НА РЕАКЦИ ТРОМБОЦИТ1В НА Д1Ю АГРЕГАНТ1В ПРИ ГОСТРОМУ КОРОНАРНОМУ СИНДРОМ1
Барсов Е.Ф., Сулаева О.М., Юреева М.О., ГатЫа G.I.
Ключовi слова: гострий коронарний синдром, тромбоцити, реактивнють.
З метою з'ясування патогенетичних механiзмiв порушення тромбогенеза при гострому коронарному синдромi (ГКС) проведена оцЫка агрегаци тромбоци^в при шкубацп з рiзними шдукторами у 6о па^ен^в з iнфарктом мю-карда. У роботi обговорюються варiанти i рецепторнi основи рiзноí адренореактивност органiзму. Показано, що при ГКС вщбуваеться посилення ефектiв гуморальних регуляторiв з пiдвищенням реакцií тромбоцитiв на катехо-ламiни за рахунок посилення сигналiзацií через а-адренорецептори i пперсенситивнютю P2Y рецепторiв. Отри-манi дат вщображають посилення фази прогресування тромбогенезу, що ймовiрно е провiдним мехашзмом оклюзií коронарних судин.
Summary
CHANGE IN RESPONSE OF PLATELET REACTION TO AGREGANTS IN ACUTE CORONARY SYNDROME Barinov E.F., Sulayeva O.N., Kireeva M.A., Gatina E.I. Key words: acute coronary syndrome, platelets, reactivity.
To study the pathogenetic mechanisms of thrombogenesis in acute coronary syndrome we carried out estimation of platelet aggregation under incubation with different inducers in 60 patients with myocardial infarction. The paper presents the discussions related to the options and the receptor bases of various adrenoreactivity of the body. It is shown that under acute coronary syndrome there is the enhancement of effects produced by humoral regulators on catecholamines due to the increased signaling via а-adrenergic receptors, and hypersensitivity of P2Y receptors. These data reflect the hyperstimulation of thrombogenesis progression phase, which is probably the main mechanism causing the occlusion of coronary vessels.
УДК 616.33/.342-002.44-005.1-018.73
Баринов Э.Ф., Сулаева О.Н., Кондратенко П.Г., Делий В.Ю., Раденко Е.Е.
РОЛЬ АДРЕН0РЕАКТИВН0СТИ В РАЗВИТИИ КРОВОТЕЧЕНИЙ ИЗ ЯЗВ ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНОЙ ЗОНЫ
Донецкий национальный медицинский университет им. М. Горького
Для выяснения роли адренореактивности в развитии и исходе язвенных кровотечений проведен анализ агрегации тромбоцитов 51 пациента с язвами желудка и двенадцатиперстной кишки (ДПК). Анализ агрегации проводили при инкубации тромбоцитов с адреналином, агонистами а1 и а2, а также антагонистом /3-адренорецепторов. Показано, что в основе различной реакции тромбоцитов на адреналин у больных с язвенными кровотечениями лежит вариабельность экспрессии адренорецепторов. Наиболее частым фоном развития язвенных кровотечений является гипореак-ция на адреналин. Гиперадренореактивность наиболее часто ассоциирована с развитием кровотечений из язв ДПК при их малом размере. Наибольшая частота рецидивов кровотечений выявлена в группе с нормальной реакцией тромбоцитов на адреналин, что стимулирует продолжение поиска молекулярных детерминант нарушения тромбогенеза при кровотечениях. Ключевые слова: кровотечения, язвы гастродуоденальной зоны, реактивность организма
Реализация гемостаза обеспечивается системной реакцией организма, направленной на поддержание объема циркулирующей крови, и сопровождается рядом метаболических изменений. Данная защитная реакция организма напрямую связана с активацией симпатоадреналовой системы и сопровождается ва-зоконстрикцией в зоне кровотечения, что, наряду с процессом тромбообразования, обеспечивает самопроизвольную остановку кровотечения [2]. Отсутствие или нивелирование данного эффекта может быть связано с декомпенсацией саногенетических регуля-торных систем и/или нарушением ответа клеток-мишеней, участвующих в реакции сосудистой стенки, вследствие изменения сенситивности рецепторов или
гиперактивности антагонистических систем. Причем как гипо-, так и гиперреактивность к катехоламинам (КА) при кровотечениях из язв гастродуоденальной зоны (ГДЗ) могут иметь негативные последствия. Установлено, что КА помимо позитивных эффектов в виде гипергликемии, стимуляции метаболизма, спазма сосудов и усиления свертывания крови, оказывают и негативное влияние, включая нарушение микроциркуляции в ГДЗ, активацию оксидативного стресса и апоптоза клеток, изменение метаболизма арахидо-новой кислоты, стимуляцию продукции провоспали-тельных цитокинов, системы комплемента и активности лейкоцитов [1]. С этих позиций изучение адрено-реактивности организма позволяет не только тракто-
Том 11, Випуск 2
9
вать состояние сосудистого тонуса и уровень внутриклеточного Са2+, но и прогнозировать выраженность синдрома ишемии-реперфузии в зоне язвенного кровотечения, способствующего расширению зоны язвы и развитию ранних рецидивов кровотечения. В современной литературе нет конкретных данных, освещающих роль адреналина в патогенезе язвенных кровотечений. Хотя выяснение данного вопроса имеет принципиальное значение в выборе тактики и методов остановки кровотечения. Цель работы - выяснить роль адренореактивности в развитии и исходе кровотечений из язв гастродуоденальной зоны.
Материал и методы исследования
Обследован 51 пациент (35 мужчин и 16 женщин, средний возраст 57±3,2 лет) с язвенным кровотечением на момент поступления в стационар. У ряда пациентов имели место сопутствующие заболевания сердечно-сосудистой системы: ишемическая болезнь сердца (11,7%); гипертоническая болезнь (7,6%), периферические ангиопатии (3,8%); нарушение мозгового кровотока (3,8%). До госпитализации пациенты не принимали препараты, влияющие на гемостаз. При анализе locus morbi определяли локализацию и размер язвы, состояние ее дна на момент первичной эндоскопии. Исследование адренореактивности тромбоцитов проводили на момент госпитализации. В качестве контроля обследовано 34 человека (23 мужчины и 11 женщин) аналогичного возраста, не имеющих в анамнезе нарушений в системе гемостаза. Исследовали показатели тромбоцитарного гемостаза: количество тромбоцитов, степень агрегации (АТ) с применением в качестве индукторов адреналина (2,5 мкМ), селективных агонистов а1- и а2-адренорецепторов (АР), антагониста ß-АР на агрегометре фирмы Solar (Белоруссия). Статистическую обработку данных осуществляли при помощи программного обеспечения MedStat [3].
Результаты исследования
Проведение статистического анализа не выявило влияния пола и возраста на размеры, локализацию и эндоскопические характеристики язв. Среди обследованных пациентов у 11 (21,6±5,7%) выявлены язвы тела и дна желудка, у 8 (15,7±5,1%) - язвенные поражения пилорического отдела желудка и в 32 (62,7±6,77%) случаях - язвы луковицы двенадцатиперстной кишки (ДПК). Сопоставление анамнестических данных с результатами эндоскопического обследования показали, что наиболее крупные язвы, осложненные развитием кровотечения, характерны для тела желудка, тогда как дуоденальное кровотечение возникало при малых дефектах стенки ДПК. Так, средний показатель размера язвенных дефектов в теле желудка составлял 1,7±0,26 см, в области пило-руса - 1,16±0,15 см, тогда как в ДПК средний диаметр язв составил 0,95±0,1 см. Рецидивы кровотечения развивались у 5 пациентов с язвами ДПК, у 4 с язвами пилоруса и у 1 пациента с язвой желудка. Не выявлено влияния возраста пола, размера язвы и ее локализации на развитие повторного кровотечения у пациентов с язвенными поражениями ГДЗ. Так, у 4 пациентов с язвами тела желудка диаметром более 2 см не зарегистрировано развития рецидива кровотечения, тогда как повторные кровотечения из язв пи-
лоруса развивались при язвах диаметром 1,0±0,2 см. В ДПК фактор размера язвы играл более важную роль - во всех случаях рецидивов размер язв был более 1 см. Это может отражать различную резистентность слизистой оболочки тела, пилорического отдела желудка и ДПК к действию повреждающих факторов, а также разную способность к ограничению альтерации.
В поиске причинно-следственных связей и механизмов развития первичных и повторных кровотечений был проведен анализ интегративного звена гемостаза - тромбоцитов. В соответствии с предыдущими исследованиями анализ АТ при действии различных индукторов проводили с учетом ответа на адреналин. При первичном анализе АТ выявлено, что ответ тромбоцитов на адреналин отличался от нормального (Х2=24,4; р<0,001), а медиана составляет 21 ±6,61 (ДИ 10-32%). При этом адренореактивность тромбоцитов не зависела от давности кровотечения (р=0,52), длительности язвенной болезни (р=0,17) и наличия сопутствующей патологии сердечнососудистой системы (р=0,232). Более детальный анализ с разделением обследованных больных на три подгруппы: (с низкой от 0 до 25%, нормальной (2675%) и высокой (более 76%) реакцией на адреналин позволил выявить ряд интересных фактов. Данные подгруппы были сопоставимы по полу и возрасту пациентов. Однако характеристики язвенного дефекта значимо различались, отражая роль адренореактивности в патогенезе язвенного поражения ГДЗ, осложненного кровотечением. Кровотечение из язв тела желудка наиболее часто развивалось на фоне гипо-адренореактивности, ульцерогенез в пилорическом отделе регистрировался с одинаковой частотой при разных вариантах адренореактивности, тогда как поражение ДПК наиболее часто было ассоциировано с вариантами гипо- и гиперадренореактивности.
В первую очередь обращал на себя внимание тот факт, что среди пациентов с язвенными кровотечениями превалировали больные с низкой реакцией на адреналин - 27 пациентов (52,9±6,9%). Это в свете существующих представлений о роли ваготонии в патогенезе язвенной болезни могло бы отражать сдвиг баланса нейрогуморальной регуляции в сторону ацетилхолина по сравнению с симпатоадренало-вой системы. Однако дополнительная серия исследований с использованием селективных агонистов адренорецепторов позволила поставить под сомнение данное предположение, показав значимое усиление АТ при введении в инкубационную смесь агони-ста а2-АР (34,2±4,4%) и мощный подъем ответа тромбоцитов на адреналин при преинкубации тромбоцитов с антагонистом р-АР (41,6±2,2%). Эти данные свидетельствуют о том, что низкая АТ при действии адреналина является результатом суммации эффектов а2-АР, вызывающих агрегацию, и р-АР, индуцирующих антиагрегантный эффект. Исходя из этого, можно утверждать, что у пациентов с низкой реакцией на адреналин превалирует экспрессия р-АР, что может ограничивать агрегационный ответ тромбоцитов за счет активации сигнальной системы АЦ-цАМФ-ПкА и Ерас [3]. Интересно, что среди гипоадреноре-активных больных превалировали пациенты с язвами ДПК (17 из 27 пациентов; 63±9,3%) и меньше было больных с язвами желудка (10; 37±9,3%), среди кото-
В1СНИК ВДНЗУ «Украгнська медична стоматологгчна академхя»
рых чаще встречались язвы тела (вдоль малой кривизны) желудка (8; 29,7±8,7%). Несмотря на максимальную предрасположенность данной подгруппы к развитию язвенных кровотечений по сравнению с другими вариантами адренореактивности, повторные кровотечения были зарегистрированы лишь у 3 пациентов (11,1 ±6,1%), среди которых было 2 случая язвы ДПК и 1 язва пилоруса. Причем рецидивы кровотечений были зарегистрированы в случае размера язвы 1-2 см, что может отражать превалирование поражения вглубь, и эндоскопически подтверждалось наличием крупного тромбированного сосуда на дне язвенного дефекта.
Количество пациентов с нормальным и повышенным ответом тромбоцитов на КА были примерно одинаковы, соответственно 12 (23,5±5,9%) и 11 пациентов (21,6±5,8%). В подгруппе пациентов с нормальным ответом на адреналин язвы желудка и ДПК представлены пропорционально, однако рецидивы кровотечений развивались в 41,6±14,4% случаев, что, учитывая средний размер язв 1,26±0,2 см в диаметре, заставило более пристально проанализировать статус адренорецепторов. Так, при среднем значении АТ на адреналин 36,3±2,9%, ответ тромбоцитов на аго-нист а2-АР составил лишь 17,3±10,7%, тогда как селективный стимулятор а1-АР вызывал более значимый ответ - 39,5±4,2%. В условиях преинкубации тромбоцитов с антагонистом р-АР, АТ при добавлении адреналина усиливалась до 51,4±5,2%. Эти данные свидетельствуют о суммации эффектов стимуляции адренорецепторов при действии адреналина с взаимным нивелированием эффектов а2- и р-рецепторов на АЦ, и превалированием роли а1-АР, реализующих сигнал посредством Ор через фосфо-липазу С, диацилглицерол, протеинкиназу, инозитол-3-фосфат и Са2+. О роли изменений Са2+-сигнализации в нарушении сосудистого гомеостаза свидетельствовала частота сопутствующей патологии сердечно-сосудистой системы, выявленной у 6 (50±14,4%) пациентов данной подгруппы, причем у 5 из них имело место развитие рецидива кровотечения. Нарушение тромбогенеза при этом может быть ассоциировано с превалированием роли а1-АР, которые через Са2+-зависимый механизм стимулируют продукцию N0, являющегося негативным регулятором прогрессирования и стабилизации тромба. Анализ клинико-морфологических характеристик в подгруппе
больных с выраженной реакцией на адреналин выявил превалирующее поражение ДПК (у 9 пациентов; 81,8±11,6%), в оставшихся 2 случаях имели место язвы пилорического отдела желудка, хотя размер язв у всех пациентов не превышал 1 см. Интересно, что, несмотря на высокую частоту (54,5±15,5%) сопутствующей патологии, в данной подгруппе не зарегистрировано развития повторных кровотечений. Анализ сенситивности разных АР выявил ряд интересных фактов. Так, в данной подгруппе АТ при инкубации с адреналином составляла 94,5±2,3%, агонист а2-АР вызывал АТ 47,1±3,2%, агонист а1-АР повышал АТ на 37,9±2,3%, тогда как преинкубация с антагонистом р-АР не оказывала значимого влиянии на эффект адреналина. Данная комбинация фактов может отражать слабую роль р-АР в регуляции функционального состояния тромбоцитов и превалирование эффектов а2-АР вероятно потенцируемых при действии адреналина активацией а1-АР. На уровне внутриклеточной сигнализации это означает ингибирование системы аденилатциклазы при повышение роли ФлС-сигнальной системы.
Таким образом, в основе различной реакции тромбоцитов на адреналин у больных с язвенными кровотечениями лежит вариабельность экспрессии адренорецепторов и статуса разных звеньев системы внутриклеточной сигнализации. Гипореакция на адреналин является наиболее частым фоном развития язвенных кровотечений и ассоциирована с увеличением диаметра язв. Гиперадренореактивность наиболее часто ассоциирована с развитием кровотечений из язв ДПК при их малом размере. Наибольшая частота рецидивов кровотечений выявлена в группе с нормальной реакцией тромбоцитов на адреналин, что стимулирует продолжение поиска молекулярных детерминант нарушения тромбогенеза при кровотечениях.
Литература
1. Баринов Э.Ф. Морфологические предикторы рецидива кровотечения при язвах гастродуоденальной области / Э.Ф. Баринов, П.Г. Кондратенко, О.Н. Сулаева // Укр. журнал хiрургií. - 2008. - № 2. - С. 25-30.
2. Гостищев В. К. Острые гастродуоденальные язвенные кровотечения: от стратегических концепций к лечебной тактике / В.К. Гостищев, М.А. Евсеев. - М., 2005. - 352 с.
3. Лях Ю.Е. Основы компьютерной биостатистики / Ю.Е. Лях, Г.В. Гурьянов, В.Н. Хоменко. - Д., 2006. - 211 с.
Реферат
РОЛЬ АДРЕНОРЕАКТИВНОСТ1 У РОЗВИТКУ КРОВОТЕЧ З ВИРАЗОК ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНО1 ЗОНИ
Барсов Е.Ф., Сулаева О.М., Кондратенко П.Г., Делш В.Ю., Раденко G.G.
l^rcwoBi слова: кровотеч^ виразки гастродуоденальноТ зони, реактивнють органзму.
Для з'ясування рoлi адренореактивност у розвитку i результат виразкових кровотеч проведено аналiз агрегаци тромбоцитв 51 пацента з виразками шлунка i дванадцятипалоТ кишки (ДПК). Аналiз агрегаци проводили при шку-бацп тромбоцитв з адреналЫом, агонютами a1 i а2, а також антагонютом р-адренорецетгрв. Показано, що в ос-нoвi рiзнoТ реакцп тромбоцитв на адреналЫ у хворих з виразковими кровотечами лежить варiабельнiсть експресп адренoрецептoрiв. Найбтьш частим фоном розвитку виразкових кровотеч е ппореакця на адреналн Пперадре-нореактивнють найбтьш часто асоцйована з розвитком кровотеч з виразок ДПК при Тх малому рoзмiрi. Найбть-ша частота рецидивiв кровотеч виявлена у труп з нормальною реакцею тромбоцитв на адреналн що стимулюе продовження пошуку молекулярних детермiнант порушення тромбогенеза при кровотечах.
Summary
ROLE OF ADRENOREACTIVITY IN BLEEDING FROM GASTRODUODENAL ULCERS Barinov E.F., Sulaeva O.N., Kondratenko P.G., Deliy V.Yu., Radenko E.E. Key words: bleeding, gastroduodenal ulcers, body reactivity.
To investigate the role of adrenoreactivity in the development and outcome of ulcer bleeding we have carried the analy-
Том 11, Выпуск 2
11
sis of platelet aggregation in 51 patients with peptic ulcers. This analysis has been performed under the incubation of platelets with epinephrine, a1 and a2 agonists, and antagonist of ß-adrenoreceptors. It has been shown that different responses of platelets to epinephrine in patients with peptic ulcer bleeding are due to variability of adrenoreceptors expression. Most commonly ulcer bleedings are associated with hyporeaction on epinephrine. Hyperadrenoreactivity is associated with bleeding from small-sized duodenal ulcers. The highest frequency of bleeding recurrence is observed in the group of patients with normal platelet response to epinephrine. These data impel to continue the search for molecular determinants of thrombogenesis disorders under ulcer bleeding.
УДК 618.36-001.18 БЫаш С.М., Шеттько В.1.
ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНЕ МОДЕЛЮВАННЯ ЗАПАЛЕННЯ ОБОЛОНОК ШЛУНКУ
ВДНЗ УкраТни УкраТнська медична стоматолопчна академiя», м. Полтава
В статтi за допомогою комплексу гiстологiчних, ультрамiкроскопiчних, гiстохiмiчних, лектинохiмiчних та статистичних методiв до^дження вивченi морфофункщональш змiни в оболонках шлунку при введент внут-рШньоочеревенно Л-карагтену. Доведено, що Л-карагтен являе собою сильний флоген, який при введеннi викли-кае запалення шлунку, що за морфологiчними ознаками вiдповiдае гострому гастриту.
Ключовi слова: оболонки шлунку, запалення, Л-карапнен, гострий гастрит.
Робота е фрагментом науково-до^дноТ роботи ВДНЗ Украни «УкраТнська медична стоматологiчна академiя» МОЗ Украши: "Експериментально-морфоло^чне вивчення дп трансплантатiв крюконсервованоТ плаценти на морфофунщональ-ний стан ряду внут^шшх оргашв", № 0108и001572.
Вступ
Ерозивно-виразковi та неопластичн захворю-вання шлунку е дуже розповсюдженою, типовою для вах розвинених краТн патолопею. Висока Тх частота, постшне збтьшення чисельност хворих, необхщнють зваженого диференцмованого пщходу до вибору ль кувальних схем потребуе пошуку нових, бтьш тонких методiв дiагностики, в тому чи^ i ранньоТ дiагности-ки, потребуе бтьш глибокого вивчення питань етюло-гп i патогенезу. На цьому тл роль рiзноманiтних ме-тодiв дослщжень, а також Тх комплексне використання набувае особливого значення [1,4,6,7]. В останшй час в харчовм промисловост дуже широко використову-ють для продовження тривалосп зберiгання харчових продуктiв Л-карапнен - сульфатизований полюаха-рид, видiлений з iрландського моху Chondrus. За да-ними [8] ця речовина викликае запалення внутрiшнiх органiв.
Мета дослщження Провести моделювання запалення оболонок шлунку за допомогою Л-карапнену та встановити морфофункцюнальы змiни при данiй патологи. До-слiдити патоморфологiчнi змiни в слизовм оболонцi шлунку з'ясувавши ступшь i активнiсть запалення, ступiнь атрофи шлункових залоз, активнiсть процесiв метаплазм на мiкроскопiчному та ультрамiкроскопiч-ному рiвнi. На основi отриманих даних провести ана-логовий аналiз цих змЫ з метою встановлення виду експериментального гастриту, зпдно СiднейськоТ кла-сифiкацiТ.
Матер1ал та методи дослщження Моделювання запалення оболонок шлунку проводилось на бтих щурах лжи Вютар, якi по висновку фармаколопчноТ асоцiацiТ США, е оптимальним видом для вивчення лкарських препаратiв, яю потiм засто-совують людинi тому, що iмунна система щура най-бiльш чутлива до дiТ хiмiчних речовин в дозах в порiв-няннi з масою тiла. Таким чином щури, як об'ект дослщження е найбтьш вiдповiдним для тестування лi-
карських препаратiв та моделюванш рiзних патологiч-них процеав.
Моделювання запалення проводилось на 40 щурах самцях лiнií Вiстар масою 220-250 г., яга знахо-дились у вiварií ВДНЗ УкраТ'ни «Украшська медична стоматолопчна академiя» на стандартному утриманш. Для виключення сезонних i добових коливань дослi-джуваних показнигав, всi дослiдження проведенi в оаншй перiод в ранковий час. Експерименти на тва-ринах проводились зпдно з "Правилами використання лабораторних експериментальних тварин", додаток 4 i ХельсЫкською декларацiею «Про гуманне вiдношен-ня до тварин».
Моделлю запалення послужило гостре асептич-не запалення, внаслщок введення внутрiшньоочере-венно 5 мг Л-карапнену ("Sigma", США) в 1 мл. iзото-ычного розчину хлориду натрiю. Забiр матерiалу для дослiдження проводився на 1,2,7,10,14,21,30,60 добу експерименту шляхом декаттаци тварин пiсля пере-дозування тюпенталового наркозу. Для дослiдження шлунок вщокремлювали вiд стравоходу та дванадця-типало1 кишки вiдмивали у фiзiологiчному розчиш. Потiм фрагменти кардiальноí та пторично! частини, тiла шлунку занурювали у фксатор. Для свiтловоí мi-кроскопп, гiстохiмiчного, лектинохiмiчного методiв до-слщження бiоптати фiксували у 4% розчиы нейтрального формалiну, для отримання натвтонких зрiзiв та електронно-мiкроскопiчного дослщження матерiал фi-ксували у розчиы 2,5% глютарового альдегiду. Пiсля зневоднення матерiал вiдповiдно заливали у парафЫ та епоксидну смолу за загальноприйнятими методиками [2,3,5]. Парафiновi зрiзи фарбувались гематок-силiном Караццi i Ерлiха, еозином, за методом ван Гизон, альциановим сишм з еозином, реактивом Ши-фа. При використанш iмуногiстохiмiчного методу пре-парати додатково фарбували гематоксилЫом Майе-ра. Для проведення лектинохiмiчного методу викори-стовували лектин арахюу (PNA) та лектин соí (SBA). Напiвтонкi зрiзи забарвлювали толущиновим синiм та полiхромним барвником.
