CC BY
10I POSTTRANSPLANT INFECTIONS
менной многокомпонентной терапии, а также активный динамический мониторинг инфекционного процесса, являются основополагающими моментами успешного лечения тяжелого ЦМВ-гастроэзофагита как осложнения алло-ТГСК.
Ключевые слова
Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток, цитомегаловирус, гастрит, эзофагит.
PI-03
ICMV-specific immune reconstitution in patients after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation
Anna A. Dmitrova, Mikhail Yu. Drokov, Larisa A. Kuzmina, Murad S. Vagida, Dmitry O. Kiryukhin, Vera A. Vasilyeva, Natalia N. Popova, Ekaterina D. Mikhaltsova, Maria V. Dovydenko, Olga M. Koroleva, Darya S. Dubnyak, Zoya V. Konova, Mobil I. Akhmedov, Natalia M. Nikiforova, Ulyana V. Maslikova, Olga S. Starikova, Feruza A. Omarova, Elmira I. Kolgaeva, Grigoriy A. Efimov, Elena N. Parovichnikova, Valery G. Savchenko
National Research Center for Hematology, Moscow, Russia
Contacts: Dr. Mikhail Yu. Drokov, e-mail: [email protected], Dr. Anna A. Dmitrova, e-mail: [email protected]
Introduction
Cytomegalovirus infection (CMV infection) remains one of the most common complications after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (allo-HSCT). Despite high frequency of the CMV reactivation in immunocompromised patients, the high costs of antiviral treatment and toxicity as a side effect of therapy also remain a problem. The leading role in the fight against CMV infection belongs to T cells. Reconstitution of the T-cell immunity depends on many factors, for example, conditioning regimen, source of hematopoietic stem cells and the graft-versus-host disease (GvHD) prophylaxis regimen. This study shows the dynamics of quantitative recovery of CMV-specific T-cell immunity in the patients with hematologic malignancies and non-neoplastic hemato-logic disorders at different time points after allo-HSCT, depending on the GvHD prophylaxis regimen.
Patients and methods
The patients' characteristics are presented in Table 1. Blood samples were collected on days +30, +90, +180. CMV-specif-
Table 1. Patients' characteristics
ic CD8+ cytotoxic lymphocytes (CMV-CTL) were identified by flow cytometry using fluorochrome-conjugated monoclonal antibodies against CD3, CD8 and CD45 molecules, a viability reagent, and tetramers. The tetramers consisted of MHC monomers class I, associated with one of the immunodominant epitopes at the viral pp65 protein: peptides NLVP-MVATV (NLV), TPRVTGGGAM (TPR), RPHERNGFTVL (RPH), presented on the HLA-A * 02 and HLA-B * 07 alleles in complex with streptavidin, labeled with phycoerythin. The total number of leukocytes was assessed using a Sysmex X-2100 blood analyzer. Two-platform method was used to calculate the absolute number of CMV-CTL.
Results
The fastest recovery of CMV-specific T cells was observed when anti-T-lymphocyte globulin (ATG) was included into the additional GVHD prophylaxis. The patients who received T-cell depletion (TCD) and post-transplant cyclophospha-mide (PT-Cy) as GvHD prophylaxis have significantly lower number of CMV-CTL, and these values remained lower until + 180 days after allo-HSCT.
Parameter ATG (n=24) T-cell depletion (n=5) Post-transplant cyclophosphamide (n=8)
Sex Female 11 (45.8%) 3 (60%%) 5 (62.5°%)
Male 13 (54.2%) 2 (40%) 3 (37.5°%)
Donor's type Mismatched unrelated donor (MMUD) - - 6 (75.0%)
Matched unrelated donor (MUD) 13 (54.2%) - -
Haploidentical related donor - 5 (100%%) 2 (25%)
Matched related donor (MRD) 11 (45.8°%) - -
Diagnosis Lymphoma 1 (4.2°%) - -
Myelodysplastic syndrome (MDS) 3 (12.5°%) 1 (20%) 1 (12.5%)
Myelofibrosis 1 (4.2%) 1 (20%) -
Acute lymphoblastic leukemia (ALL) 5 (20.8%) 1 (20%) 4 (50%)
Acute myeloid leukemia (AML) 14 (58.3%) 1 (20%) 3 (37.5%)
Chronic myeloid leukemia (CML) - 1 (20%) -
Graft source Bone marrow (BM) 12 (50%) - 2 (25%)
Peripheral blood stem cells (PBSC) 12 (50%) 5 (100%%) 6 (75%)
*ATG, anti-T-lymphocyte globulin; TCD, T-cell depletion; PT-Cy, post-transplant cyclophosphamide.
CTT JOURNAL | VOLUME 9 | NUMBER 3 | SEPTEMBER-OCTOBER 2020 8 7
POSTTRANSPLANT INFECTIONS |
Conclusion
T-cell depletion and post-transplant cyclophosphamide included in GvHD prophylaxis regimen have a more "aggressive" effect upon the reconstitution of CMV-specific T cell immunity. Therefore, these groups of patients are candidates for the cell therapy (infusion of CD45RA- lymphocytes, CMV-specific T lymphocytes).
Keywords
Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation, cyto-megalovirus infection, CMV-specific T-lymphocytes, im-munosuppressive therapy, graft-versus-host disease.
Реконституция ЦМВ-специфического Т-клеточного иммунитета у пациентов после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток
Анна А. Дмитрова, Михаил Ю. Дроков, Лариса А. Кузьмина, Мурад С. Вагида, Дмитрий О. Кирюхин,
Вера А. Васильева, Наталья Н. Попова, Екатерина Д. Михальцова, Мария В. Довыденко, Ольга М. Королева,
Дарья С. Дубняк, Зоя В. Конова, Мобил И. Ахмедов, Наталия М. Никифорова, Ульяна В. Масликова,
Ольга С. Старикова, Феруза А. Омарова, Эльмира И. Кольгаева, Григорий А. Ефимов, Елена Н. Паровичникова,
Валерий Г. Савченко
Национальный медицинский исследовательский центр гематологии, Москва, Россия
Введение
Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВ-инфекция) остается одним из наиболее часто встречаемых осложнений у пациентов после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК). Несмотря на возможности фармакотерапии, крайне актуальными остаются вопросы токсичности, высокой стоимости, а также для ряда стран доступности современных препаратов, направленных на ЦМВ-инфекцию. Ведущая роль в борьбе с ЦМВ-инфекцией принадлежит Т-клеткам. На реконституцию Т-клеточного звена иммунитета влияют множество факторов: вид кондиционирования, источник стволовых клеток, режим профилактики реакции «трансплантат против хозяина» (РТПХ). В настоящей работе нами показана динамика количественного восстановления ЦМВ-специфичного Т-клеточного иммунитета у пациентов с гемобластозами и неопухолевыми заболеваниями системы крови на разных сроках после алло-ТГСК в зависимости от режима профилактики РТПХ.
Материалы и методы
Детальные характеристики пациентов представлены в таблице 1. Образцы крови пациентов исследовали на +30, +90, +180 дни после алло-ТГСК. ЦМВ-специфичные Т-лимфоциты идентифицировали методом проточной цитометрии, используя конъюгированные с флюорохро-мом моноклональные антитела против молекул CD3, CD8 и CD45, реагент для определения жизнеспособности, а также тетрамеры, состоящие из мономеров MHC класса I, связанных с одним из иммунодоминантных эпитопов вирусного белка pp65: пептиды NLVPMVATV (NLV), TPRVTGGGAM (TPR), RPHERNGFTVL (RPH), представленные на аллелях HLA-A*02 и -B*07 в комплексе со стрептавидином, меченым фикоэритрином. Далее для расчета абсолютного числа клеток применялся двухплатформенный метод. Общее число лейкоцитов оценивалось на гематологическом анализаторе Sysmex X-2100, что в дальнейшем было использовано для расчета абсолютного числа ЦМВ-специфичных клеток.
Результаты
Наиболее быстрое восстановление абсолютного числа ЦМВ-специфичных клеток было отмечено при включении антитимоцитарного глобулина (АТГ) в режим профилактики РТПХ. При использовании Т-клеточной деплеции (ТКД) и посттрансплантационного цикло-фосфамида (ПТ-ЦФ) в качестве профилактики РТПХ количество ЦМВ-специфичных клеток было значимо ниже и сохранялось на таком значении до +180 дня после алло-ТГСК.
Заключение
Режимы профилактики РТПХ, включающие ПТ-ЦФ, а также ТКД, обладают более «агрессивным» действием на реконституцию ЦМВ-специфического иммунитета, в том числе и в более поздние сроки после алло-ТГСК. Таким образом именно эти категории пациентов, могут являться целевой группой для применения у них таких клеточных технологий, как реинфузия CD45RA- донорских лимфоцитов, а также ЦМВ-специфичных Т-лим-фоцитов донора.
Ключевые слова
Трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, цитомегаловирусная инфекция, ЦМВ-специ-фичные Т-лимфоциты, иммуносупрессивная терапия, реакция «трансплантат против хозяина».
88
CTT JOURNAL | VOLUME 9 | NUMBER 3 | SEPTEMBER-OCTOBER 2020
@ cttjournal.com
