ДИНАМИКА ВОССТАНОВЛЕНИЯ СУБПОПУЛЯЦИЙ Т-КЛЕТОК ПАМЯТИ У ПАЦИЕНТОВ С ОСТРЫМИ ЛЕЙКОЗАМИ ПОСЛЕ ТРАНСПЛАНТАЦИИ АЛЛОГЕННЫХ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

AL-04

I Dynamics of different memory T cell recovery in patients with acute leukemia after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation

Natalia N. Popova, Mikhail Yu. Drokov, Julia O. Davydova, Nikolay М. Kapranov, Ulyana V. Maslikova, Feruza A. Omarova, Ekaterina D. Mikhaltsova, Olga M. Koroleva, Zoya V. Konova, Anna A. Dmitrova, Mariya V. Dovydenko, Olga S. Starikova, Darya S. Dubnyak, Elmira I. Kolgaeva, Mobil I. Akhmedov, Vera A. Vasilyeva, Irina V. Galtseva, Larisa A. Kuzmina, Elena N. Parovichnikova, Valery G. Savchenko

National Research Center for Hematology, Moscow, Russian Federation

Contact: Dr. Mikhail Drokov, e-mail: [email protected]

Introduction

Reconstitution of T-cell immunity after allogeneic stem cell transplantation determines such posttransplant complications, as infections, GVHD and tumor relapse. Our aim was to study the time course of memory T cell subsets recovery in the patients with acute leukemia after allogeneic stem cell transplantation (allo-HSCT).

Patients and methods

65 patients with acute leukemia were enrolled in the study. All the patients underwent allo-HSCT at the National Research Center for Hematology. The patients were divided into 3 groups, given an impact of immunosuppressive regimens on T cell recovery. The first group included the patients after classical GVHD prophylaxis regimen based on horse ATG (n=32); the 2nd group consisted of the patients after post-transplant cyclophosphamide (PtCy) combined with ATG (n=18), and the last group was presented by the patients after ex vivo TCR a^ depletion (n=15).

Peripheral blood samples were taken on day +30, +60, +90, + 180 to analyze reconstitution of T memory cell subsets. Flow cytometry measurements with BD FACS Canto II system (Becton Dickinson, USA) were performed to quantify the following CD4+ and CD8+ subsets: naive and T memory stem cells (Tnv+Tscm) with CD45R0-CCR7+CD28+ phenotype; T central memory cells (Tcm, CD45R0+C-CR7+CD28+); T transitional memory cells (Ttm, the

CD45R0+CCR7-CD28+ phenotype); T effector memory (Tem) cells (CD45R0+CCR7-CD28-), and terminal effectors (Tte, CD45R0-CCR7-CD28-). The entire data evaluation was performed using SPSS ver. 23. (IBM, Chicago, Il., USA). The time course of memory T cell recovery (the effect of time factor on repeated measurements) was studied within each subset, with respect to the GVHD prophylaxis regimen. The Friedman criterion was used to evaluate the dynamics. The value of p <0.05 was considered significant.

Results

The recovery of T cell immunity occurs through all studied subsets (Tnv+scm, Tcm and effector T cells) in case of ex vivo TCR aß depletion, whereas GVHD prophylaxis with ATG or Cyclophosphamide is accompanied by significant changes in the pool of effector T cells (figure 1).

Discussion

Earlier we already presented the data about comparable impact of TCR aß depletion and PtCy upon short-term T cell recovery (especially, upon Tnv+scm on day +30). This study suggests further reconstitution of T memory cell subsets (after day +30) to be significantly different in terms of GVHD prophylaxis regimens.

Keywords

Memory T cells, immune reconstitution, allogeneic stem cell transplantation, acute GVHD prophylaxis.

Динамика восстановления субпопуляций Т-клеток памяти у пациентов с острыми лейкозами после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток

Наталья Н. Попова, Михаил Ю. Дроков, Юлия О. Давыдова, Николай М. Капранов, Ульяна В. Масликова, Феруза А. Омарова, Екатерина Д. Михальцова, Ольга М. Королева, Зоя В. Конова, Анна А. Дмитрова, Мария В. Довыденко, Ольга С. Старикова, Дарья С. Дубняк, Эльмира И. Кольгаева, Мобил И. Ахмедов, Вера А. Васильева, Ирина В. Гальцева, Лариса А. Кузьмина, Елена Н. Паровичникова, Валерий Г. Савченко

Национальный медицинский исследовательский центр гематологии, Москва, Россия

Введение

Реконституция Т-клеточного звена иммунной системы после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток определяет развитие таких посттрансплантационных осложнений, как различные инфекции, РТПХ, рецидивы опухолевого заболевания. Цель исследования: изучить динамику восстановления субпопуляций Т-клеток памяти у пациентов с острыми лейкозами после трансплантации аллогенных гемопоэ-тических стволовых клеток.

Пациенты и методы

В исследование включено 65 пациентов с острыми лейкозами, которым выполнена алло-ТГСК в ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава РФ. Учитывая потенциальное влияние проводимой иммуносупрессивной терапии на восстановление Т-клеточного звена после алло-ТГСК, все пациенты были разделены на 3 группы. Первая - это больные, у которых режим профилактики РТПХ был основан на применении лошадиного АТГ (п=32), вторая -больные, у которых использовали посттрансплантаци-

CD4+ Tnv+scm

CD8+ Tnv+scm

1000-r

100-

2 10-

<1) o

0.1

1000

100

10-

1000 10010 1

0.10.01

+30

+60

+90

+180

Days after allo-HSCT CD4+ Tcm

1000-r 100 10 1 0.1 0.01

1000

100

p=0,07 p=0,29 p=0,003

—I—

+30

—I— +60

—I—

+90

-1-

+180

Days after allo-HSCT

CD4+ Ttm

+30

+60

+90

+180

Days after allo-HSCT

CD4+ Tem

p=0,0001

1000

100

10

0.1

—i-1-1—

+30 +60 +90

Days after allo-HSCT

CD4+ Tte

p=0,062 p=0,305 p=0,004

+180

+30

+60

+90

+180

+30

+60

+90

+180

Days after allo-HSCT CD8+ Tcm

TCRaß depletion

ATG + Cyclophosphamide

ATG-based

Reference

+30 +60 +90 +180 Days after allo-HSCT

CD8+ Ttm

1000-1

100 10 1 0.1

100010010-

+30

+60

+90

+180

Days after allo-HSCT CD8+ Tem

0.1

+30

+60

+90

+180

Days after allo-HSCT CD8+ Tte

1000

100-

10

0.1

+30

+60

+90

+180

Days after allo-HSCT

Days after allo-HSCT

Figure 1. Time course of T memory cell recovery following allogeneic HSCT

1

1

1

1

1

онный циклофосфамид (n=18) на +3, +4 дни, третья -пациенты после ex vivo TCR aß-деплеции (n=15).

Для анализа реконституции Т-клеток памяти исследовали образцы периферической крови больных на +30, +60, +90, +180 дни после алло-ТГСК. С помощью метода многоцветной проточной цитометрии (BD FACS Canto II, Becton Dickinson, USA) определили субпопуляции CD4+ и CD8+ Т-клеток памяти: T-наивные и стволовые клетки памяти (Tnv+Tscm) - CD45R0-CCR7+CD28+; T-клетки центральной памяти (Tcm) -CD45R0+CCR7+CD28+; T-клетки транзиторной памяти (Ttm) - CD45R0+CCR7-CD28+; T-клетки эффекторной памяти (Tem) - CD45R0+CCR7-CD28-; T-терминальные эффекторы (Tte) - CD45R0-CCR7-CD28-. Весь статистический анализ данных проводили с использованием SPSS ver. 23. (IBM, Chicago, Ill., USA). Исследование динамики восстановления субпопуляций Т-клеток памяти (влияние фактора времени на повторные измерения) проводили внутри каждой субпопуляции с учетом режима профилактики РТПХ. Для оценки динамики был использован непараметрический аналог дисперсионного анализа повторных измерений - критерий Фридмана. Значение р < 0,05 считали статистически значимым.

Результаты

В случае применения ex vivo TCR aß-деплеции восстановление Т-клеточного звена иммунной системы в тече-

ние первых 6 месяцев происходит за счет всех исследуемых субпопуляций (включая Tnv+scm и Tcm на 30 сут.), в то время как при использовании режимов с посттрансплантационным циклофосфамидом и/или АТГ -за счет субпопуляций эффекторного пула (Ttm, Tem, Tte) (рисунок 1).

Заключение

Учитывая ранее представленные данные о том, что TCR a^-деплеция и посттрансплантационный циклофосфа-мид обладают сравнимым воздействием на исследуемые субпопуляции (в частности на пул Tnv+scm) в ранние сроки после трансплантации (день +30), это исследование показало, что дальнейшее восстановление исследуемых субпопуляций Т-клеток памяти (после 30-го дня) существенно отличается в зависимости от режима профилактики РТПХ.

Ключевые слова

T-клетки памяти, реконституция иммунной системы, трансплантация аллогенных гемопоэтических клеток, профилактика острой РТПХ.

AL-05

I Comparison of different-intensity conditioning regimen prior to allogeneic stem cell transplantation in infant acute myeloid leukemia

Zhemal Z. Rakhmanova, Olesya V. Paina, Polina V. Kozhokar, Anastasiya S. Frolova, Liubov A. Tsvetkova,

Kirill A. Ekushov, Elena V. Babenko, Tatyana L. Gindina, Aleksandr L. Alyanskiy, Ildar M. Barkhatov, Elena V. Semenova,

Ludmila S. Zubarovskaya

RM Gorbacheva Research Institute of Pediatric Oncology, Hematology and Transplantation, Pavlov University, St. Petersburg, Russia

Contact: Dr. Zhemal Z. Rakhmanova, e-mail: [email protected]

Background

The infant (inborn) AML diagnosed in children aged 0-2 years is different in prognosis and treatment strategy. Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (allo-HSCT) is a potentially curative option for these patients. However, its indications are still under discussion due to the high risk of transplant-related mortality (TRM) which is especially associated with myeloablative conditioning (MAC). Reduced-intensity conditioning (RIC) is probably an option to avoid severe complications, but the data on RIC efficacy and toxicity in children with infant AML are still scarce. Our aim was to compare conditioning regimens of different intensity (MAC vs RIC) prior to allo-HSCT in infant AML.

Patients and methods

We have analyzed clinical data on 40 children with infant AML who underwent allo-HSCT between 2004 and 2018. Overall, 28 patients (pts) had 1st or 2nd remission (CR), 12 pts had active disease (AD). Median age at the moment of

diagnosis was 1 y.o. (2 months to 2 years), at the moment of allo-HCST, 2 y.o. (11 months to 4 y.o.). MAC regimens were based on busulfan (Bu) (10-16 mg/b.w.) in 16 (57%) patients in CR; in 7 cases (58%) with AD; or with treosulfan, in 4 (14%) pts in CR. Melphalan-based RIC was applied for 8 (28%) pts in CR, and in 5 (42%) pts with AD. A busul-fan-based regimen (8 mg/b.w.) was used in 1 case (3%) with CR. Prophylaxis of graft-versus-host disease (aGVHD) was as follows: ATG, in 16 (40%), or PTCy, in22 (55%) pts plus CsA, 19 (47%) or tacrolimus ± sirolimus, in 21 pts (53%), depending on the donor type: related, 4 cases (10%); unrelated, 22 (55%); haploidentical, 14 pts (35%).

Results

At the median follow-up of 3.5 years, OS was 70% for the total group. In the cohort of CR pts, after MAC regimen, OS is 80% vs 87% after RIC (p>0.05). In the patients with AD, OS is 42.9% vs 40%, accordingly (p>0.05). RFS in CR pts after MAC was 80% vs 87% after RIC; in the pts with AD, it is 57% vs 40%, accordingly (p>0.05). aGVHD-free/relapse