CC BY
34ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕКАРСТВ
А.Д. Мурашко, А.Л. Рудой,
И.Г. Гулевская, Т.М. Ермоленко,
Т.В. Трухачева
РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ И МЕТОДИК КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА ГЛАЗНЫХ КАПЕЛЬ «РАСТВОР ДЕКСАМЕТАЗОНА 0,1 %»
РУП «Белмедпрепараты», г. Минск
Предложен оптимальный состав лекарственного средства для офтальмологического применения «Дексаметазон
0,1% раствор (капли глазные)». Разработаны технология приготовления 0,1% раствора и методики контроля качества лекарственного средства. Для количественного определения действующего вещества и консерванта использовался метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Изучена стабильность лекарственного средства, глазные капли дексаметазона стабильны в течение всего изучаемого периода (2 года).
Ключевые слова: дексаметазон,
контроль качества, количественное определение, стабильность.
ВВЕДЕНИЕ
Синтетический глюкокортикосте-
роид дексаметазон, обладающий выраженной глюкокортикостероидной активностью, антиаллергическим эффектом, пролонгированным противовоспалительным действием и отсутствием минералкортико-стероидной активности, нашел широкое применение в офтальмологии [1,2].
Показания к его использованию довольно широки: аллергические заболевания глаз (дерматиты век, блефариты, конъюнктивиты и кератоконъюнктивиты), увеиты, профилактика и лечение воспалительных явлений после травм и операций, восстановление прозрачности роговицы и подавление неоваскуляризации после перенесенных кератитов, химических и тер-
мических ожогов (после полной эпители-зации роговицы) [3,4].
Целью настоящего исследования являлась разработка стабильного состава, методик контроля качества, технологии производства лекарственного средства «Раствор дексаметазона 0,1% (капли глазные)», определение оптимальных условий хранения и сроков годности в различных видах упаковки.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Опытные серии глазных капель “Раствор дексаметазона 0,1%» были приготовлены исходя из общих правил технологии приготовления, фильтрации и розлива офтальмологических растворов в условиях действующего производства.
Для наработки опытных серий использовали субстанцию дексаметазона натрия фосфата производства Nort China pharmaceutekal corporation imp&exp.co с. CCI/DSP/E/04/04/177, зарегистрированную с 2006 г. в Республике Беларусь (НД РБ 0261 С-2008). Глазные капли разливали во флаконы по 5 мл из нейтрального стекла по ТУ 9461-025-00480678-99, укупоренные пробками резиновыми по ТУ У 600152253.013-96 и обкатанные колпачками алюминиевыми по ТУ 9467-004-397984222004, а также по 1 мл в тюбик-капельницы по ТУ РБ 100049731.075-2003.
Количественное содержание дексаметазона натрия фосфата, посторонних примесей и бензалкония хлорида определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии на жидкостном хроматографе «Shimadzu» с УФ-детектором (модель SPD-10AVP. от 190 до 600 нм), автосамплером с охлаждением (модель SIL- 10AF), двухканальным насосом (модель LC-10ATVP) с использованием программного обеспечения LCsolution.
Значение pH раствора дексаметазона 0,1% определяли потенциометрически на иономере И-130. Внешний вид лекарственного средства оценивался визуально.
Изучение стабильности лекарственного средства во флаконах и в тюбик-
капельницах было проведено методом «ускоренного старения» при температуре 20±20С в течение 12 месяцев и при температуре 10±20С (холодильник) в течение 2,5 лет. Оценивали количественное содержание дексаметазона натрия фосфата, бен-залкония хлорида, содержание посторонних примесей, pH и внешний вид раствора.
РЕЗУЛЬТАТЫИ ОБСУЖДЕНИЕ
Важнейшей задачей при определении оптимального состава лекарственного средства является разработка современных, эффективных и воспроизводимых методик контроля качества препарата.
Для количественного определения дексаметазона натрия фосфата и возможных посторонних примесей использовали метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) [5]. Методика разрабатывалась на основе методики, предлагаемой Американской фармакопеей для количественного определения дексаметазона натрия фосфата в лекарственных формах. Основной задачей проводимых исследований было усовершенствование методики таким образом, чтобы наряду с количественным определением осуществлять контроль за содержанием посторонних примесей в препарате.
Для выбора оптимальных условий проведения анализа и получения хроматографических характеристик, удовлетворяющих требованиям метода по параметрам асимметрии основного пика, степени разделения контролируемых веществ, эффективности хроматографической колонки и времени выхода, варьировали: концентрацию фосфатного буферного раствора, состав буферного раствора (вводился ион-парный реагент триэтиламин), соотношение фосфатный буфер - растворитель (в качестве растворителя использовали метанол и ацетонитрил), pH подвижной фазы. Анализ проводили при различных температурах и скоростях подачи подвижной фазы, в изократическом режиме и с введением линейного градиента, были использованы октадецилсилильные колонки С 18,
различающиеся по длине и зернению сорбента.
Опытным путем были установлены оптимальные условия хроматографирования для определения количественного содержания дексаметазона натрия фосфата и посторонних примесей: колонка
ЫСИгоБрЬег 100 КР-18 5 мкм размером 250x4 мм, температура 35°С, использование изократического режима элюирования смесью калий-фосфатного буферного раствора с pH 4,0 и метанола в соотношении (50:50), со скоростью 1 мл/мин и детектирование при 254 нм. На рис.1 представлена хроматограмма лекарственного средства в выбранных условиях. Эффективность хроматографической колонки, рассчитанная по пику дексаметазона натрия фосфата, составляет не менее 1000 теоретических тарелок, коэффициент разделения основного пика от любого пика посторонних примесей - не менее 2, относительное стандартное отклонение, рассчитанное для пика дексаметазона натрия фосфата из пяти определений, составляет менее 2 %.
Метод ВЭЖХ использован также для определения содержания в лекарственном средстве консерванта - бензалко-ния хлорида (рис. 2). Анализ проводили на хроматографической колонке, заполненной сорбентом Ь1СЬго8ркег100 СК Использование специально предназначенной для количественного определения бензал-кония хлорида хроматографической колонки и экспериментально подобранные условия проведения хроматографии позволяют осуществлять определение содержания бензалкония хлорида в течение короткого промежутка времени (10 мин) с достаточно высокой степенью точности. Значение относительного стандартного отклонения, рассчитанного для площади пика бензалкония хлорида из семи определений, составляет менее 7 %.
При такой низкой концентрация консерванта бензалкония хлорида в лекарственном средстве (30-40 мг/л) это высокий показатель достоверности получаемых результатов анализа.
Рис. 1. Хроматограмма дексаметазона натрия фосфата в лекарственном средстве «Раствор дексаметазона 0,1% (глазные капли)»
Бегсатюння хторнд С12Н25
Бензатюннд хлорид С14Н29
Рис. 2. Хроматограмма бензалкония хлорида в лекарственном средстве «Раствор дексаметазона 0,1% (глазные капли)»
С целью выбора оптимального состава лекарственного средства исследованы буферные системы, наиболее часто применяемые для приготовления глазных капель: фосфатный буфер, боратный бу-
фер, композиция с неводным растворителем (пропиленгликоль). В качестве консерванта использовали бензалкония хлорид (таблица 1).
Таблица 1 - Экспериментальные составы лекарственного средства _________«Раствор дексаметазона 0,1% (капли глазные)»_______
Состав 1 (на 100 мл) 1. Дексаметазона натрия фосфата - 0,1 г; 2. Натрия фосфорнокислого двузамещенного 12-водного - 1,33 г; 3. Натрия фосфорнокислого однозамещенного 2-водного - 0,3 г; 4. Натрия хлористого - 0,4 г; 5. Натрия эдетата - 0,05 г; 6. Бензалкония хлорида - 0,007 г
Состав 2 (на 100 мл) 1. Дексаметазона натрия фосфата - 0,1 г; 2. Кислоты борной - 1,5 г; 3. Натрия эдетата - 0,05 г; 4. Бензалкония хлорида - 0,004 г; 5. Натрия гидроксида - до pH 6,6
Состав 3 (на 100 мл) 1. Дексаметазона натрия фосфата - 0,1 г; 2. Натрия фосфорнокислого двузамещенного 12-водного - 1,4 г; 3. Пропиленгликоля - 5 г; 4. Натрия хлористого - 0,3 г; 5. Натрия метабисульфита - 0,2 г; 6. Натрия эдетата - 0,02 г; 7. Бензалкония хлорида - 0,004 г;
Состав 4 (на 100 мл) 1. Дексаметазона натрия фосфата - 0,1 г; 2. Кислоты борной - 1,5 г; 3. Натрия тетраборнокислого 10-водного - 0,06 г; 4. Натрия эдетата - 0,05 г; 5. Бензалкония хлорида - 0,004 г
Стабильность опытных серий экспериментальных составов лекарственного средства изучалась при температуре хранения 20±20С в течение 12 месяцев (таблица 2).
Таблица 2 - Результаты изучения стабильности опытных серий экспериментальных составов лекарственного средства «Раствор дексаметазона 0,1% (капли глазные)» во флаконах по 5 мл ________________________________при температуре 20±20С_______________________________
№ состава Количественное содержание (от 0,90 до 1,10 мг/мл) Посторонние примеси (не более 2 %) pH от 6,0 до 7,0 Описание
На момент выпуска
Состав 1 1,01 1,60 7,3 бесцветн
Состав 2 1,01 1,63 6,6 бесцветн
Состав 3 1,03 1,66 7,2 бесцветн
Состав 4 1,02 1,60 6,6 бесцветн
0,5 года
Состав 1 0,98 2,47 7,4 бесцветн
Состав 2 1,00 1,85 6,6 бесцветн
Состав 3 0,98 2,89 7,3 бесцветн
Состав 4 1,02 1,69 6,63 бесцветн
1 год
Состав 1 0,92 2,85 7,3 бесцветн
Состав 2 0,97 2,03 6,6 бесцветн
Состав 3 0,86 3,70 7,4 бесцветн
Состав 4 0,99 1,83 6,6 бесцветн
Лучшие результаты по стабильности были получены для состава 4. Данная буферная система в сочетании с консервантом бензалкония хлоридом обеспечивает стабильность лекарственной формы.
Изучение стабильности проводилось на трех опытных сериях лекарственного средства состава 4. Уже на первых этапах исследования было установлено, что глазные капли не выдерживают хранения при температуре 40 0С, так как происходит нарастание посторонних примесей (более 2,0%). В связи с этим изучение стабильности лекарственного средства осуществляли при температуре 20±20С и 10±20С (холодильник).
Было показано, что значение pH практически не изменялось, лекарственное средство оставалось прозрачным и бесцветным на протяжении всего срока хранения. Выбранный состав лекарственного средства обеспечивал стабильность по показателю посторонние примеси. Для приготовления опытных серий использовали субстанцию с содержанием примесей око-
ло 1,6 %. Статистически значимого нарастания посторонних примесей в течение всего периода наблюдения (2,5 года) не происходило. Суммарное содержание посторонних примесей в лекарственном средстве по истечении срока годности не превысило 2%.
Количественное содержание действующего вещества дексаметазона натрия фосфата в глазных каплях сохранялось практически на одном уровне, оставаясь постоянным в пределах погрешности измерений. Наблюдалось постепенное снижение количественного содержания консерванта бензалкония хлорида к концу срока годности на 20-25%.
На примере опытной серии, приготовленной параллельно и во флаконах, и в тюбик-капельницах, представлены результаты исследования стабильности лекарственного средства в течение 2,5 лет по основным показателям качества (pH, посторонние примеси, количественное содержание дексаметазона натрия фосфата, бензалкония хлорида) (таблица 3).
2. Разработан состав лекарственного средства «Раствор дексаметазона 0,1% (капли глазные)». Предложенный состав обеспечивает стабильность глазных капель по всем показателям качества в течение срока годности (2 года) при хранении в защищенном от света месте и температуре 10±20С.
Таблица 3 - Результаты изучения стабильности лекарственного средства «Раствор дексаме-__________________тазона 0,1% (капли глазные)» при температуре 10±20С.____________________
Серия Показатели качества Срок хранения, соответствующий естественному хранению
момент выпуска 0,5 года 1,0 года 1,5 года 2,5 года
Раствор дексаметазона 0,1% в тюбик-капельницах pH 6,60 6,61 6,63 6,64 6,67
дексаметазона натрия фосфат, мг/мл 1,05 1,03 1,05 1,02 1,02
посторонние примеси 1,56 1,61 1,60 1,62 1,72
бензалкония хлорид, мг/мл 0,040 0,039 0,036 0,034 0,031
Раствор дексаметазона 0,1% во флаконах pH 6,60 6,60 6,61 6,61 6,62
дексаметазона натрия фосфат, мг/мл 1,05 1,02 1,01 1,00 0,99
посторонние примеси 1,60 1,60 1,65 1,67 1,86
бензалкония хлорид, мг/мл 0,044 0,042 0,038 0,035 0,032
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
1. Разработаны методики ВЭЖХ по показателям: посторонние примеси, количественное определение дексаметазона натрия фосфата и количественное определение бензалкония хлорида в глазных каплях.
3. На основании полученных результатов разработана технология получения лекарственного средства, разработана и зарегистрирована в М3 Республики Беларусь фармакопейная статья.
С 2007 г. на РУП «Белмедпрепара-ты» освоено производство импортозамещающего лекарственного средства «Раствор дексаметазона 0,1% (капли глазные)».
SUMMARY
A.D. Murashko, A.L. Rudoi,
I.G. Gulevskaya, T.M. Ermolenko,
T.V. Trukchachova DEVELOPMENT OF TECHNOLOGY AND QUALITY CONTROL TECHNIQUES OF EYE DROPS «SOLUTION OF DEXAME-THASONE 0,1%»
It was suggested optimal composition of drug for ophthalmic administration «Dex-amethasone (eye drops, 0.1% solution)». It was developed technology of the preparation
0.1% solution, quality estimate methods of obtained dosage form. The HPLC method of quantity determination of acting substance and preservative was used. It was studied stability of the drug, 0.1% Dexamethasone eye drops remained their stability during all observation period (2 years).
Keywords: dexamethasone, quality estimate, quantity determination, stability.
ЛИТЕРАТУРА
1. Егоров, E.A. Опыт применения пролонгированного глюкокортикостероидного препарата Дексапос. Новое в офтальмоло-
гии / Е.А. Егоров, Т.В. Ставицкая, Ю.С. Астахов. - 2001. - №4. - С. 31-33.
2. Сорока, Н.Ф. Глюкокортикостероидные гормоны в клинике внутренних болезней: Практ. пособие для врачей/ Н.Ф.Сорока-Мн.: Беларусь. - 2000.- 126 с.
3. Абрамова, Т.А. Технология и изучение глазных лекарственных форм с дексамета-зоном и канамицином / Т.А. Абрамова // Москва. - 1984.
4. Иванова, Л.А. Технология глазных капель динатриевой соли дексаметазона фосфата. Сб. научных трудов / Л.А. Иванова, Т.А. Абрамова. - Москва. - 1983. -С. 30-32.
5. Хефтман, Э. Хроматография. Практическое приложение метода (в 2-х томах) / Э. Хефтман. - Москва: “Мир”. - 1986. - Т.1. -С. 305-307.
Адрес для корреспонденции:
220007, Республика Беларусь,
РУП «Белмедпрепараты», г. Минск, ул. Фабрициуса, 30, тел./факс 8 (017) 220-37-16, 220-31-42, e-mail: [email protected], [email protected]
Мурашко А.Д.
Поступила 25.05.2009 г.
