CC BY
47О.Г. Парахневич1, Т.В. Трухачева1, А.И. Жебентяев2,
Т.М. Ермоленко1, Е.В. Литвинова1
РАЗРАБОТКА СОСТАВА ПРОЛОНГИРОВАННЫХ ГЛАЗНЫХ КАПЕЛЬ ТИМОЛОЛА
1РУП «Белмедпрепараты», г. Минск 2Витебский государственный медицинский университет
Разработан состав глазных капель пролонгированного действия на основе бета-блокатора тимолола. С целью выбора оптимального пролонгатора глазных капель проведена оценка вязкости, рН растворов индивидуальных полимеров гипромел-лозы, повидона, полиэтиленгиколя 400, поливинилового спирта и их композиций. Подобрана буферная система, обеспечивающая значение рН глазных капель около 7,0. Изучено влияние тимолола и вспомогательных веществ на вязкость и рН растворов полимерных композиций. Выбран оптимальный состав полимерной композиции гипромеллозы и повидона для обеспечения пролонгации действия тимолола. Изучено антимикробное действие различных концентраций бензалкония хлорида на модельных растворах лекарственного средства. Показано, что бензалкония хлорид обладает антимикробным действием в диапазоне исследуемых концентраций 0,003-0,009%. Для обеспечения стерильности пролонгированных глазных капель тимолола выбрана концентрация бензалкония хлорида 0,005% и проведена проверка эффективности его антимикробного действия.
Ключевые слова: тимолол, глазные капли, полимерные композиции, бензалкония хлорид.
ВВЕДЕНИЕ
В офтальмологической практике для снижения внутриглазного давления широко используется высокоэффективный бе-та-адреноблокатор тимолол. К основным преимуществам лекарственных средств (ЛС) тимолола относят быстрый выраженный гипотензивный эффект, отсутствие влияния на аккомодацию и диаметр зрачка, выравнивание суточной кривой внутриглазного давления. Эти положительные качества и относительная безопасность тимолола позволили сделать его ЛС первого выбора в терапии глаукомы. Однако длительное использование бета-адреноблокаторов приводит к нарушению структуры слезной пленки и формированию признаков синдрома сухого глаза (сухость роговицы, точечный кератит) [1]. Для минимизации проявления местных побочных эффектов бета-адреноблокато-ров целесообразным является включение действующего вещества в полимерную основу, которая выступает в роли протектора эпителия роговицы и одновременно обеспечивает пролонгированный гипотензивный эффект. В качестве полимерных основ в составе лекарственных
средств используются пролонгаторы и их композиции.
В современной офтальмологии эффективными пролонгаторами являются синтетические гидрофильные полимеры: производные метилцеллюлозы (карбокси-метилцеллюлоза, гидроксиметилцеллю-
лоза, гидроксипропилметилцеллюлоза и др.), поливиниловый спирт, поливинил-пирролидон (повидон), пропиленгликоль, декстран, карбомер, гиалуроновая кислота и др. Эти вещества не раздражают слизистую оболочку глаза, совместимы со многими лекарственными средствами и консервантами [2].
Целью настоящего исследования является разработка состава глазных капель тимолола пролонгированного действия на основе полимерной композиции.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
- подобрать перспективный состав полимерной композиции;
- оценить влияние вспомогательных веществ на физико-химические свойства глазных капель;
- обеспечить стерильность глазных капель.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
При разработке состава глазных капель пролонгированного действия на основе тимолола использовали субстанцию тимолола малеата, соответствующую требованиям НД РБ 0108-2010. Для создания пролонгированной формы глазных капель были исследованы полимерные композиции на основе гидроксипропилметилцеллюлозы (гипромеллозы) (Болг СЬешісаі, США), по-ливинилпирролидона низкомолеклярного медицинского 12600±2700 (повидона) (АК Синтвита, Россия), полиэтиленгиколя 400 (ПЭГ 400) (Бійка, Германия), поливинилового спирта (ПВС) ^§ша-А1ёпсЬ, Германия). В качестве вспомогательных веществ для обеспечения стабильности, изотонич-ности и буферных свойств раствора использовали динатрия фосфата дигидрат, натрия дигидрофосфата дигидрат, натрия хлорид, динатрия эдетат, бензалкония хлорид и воду для инъекций, отвечающие требованиям Государственной фармакопеи Республики Беларусь (ГФ РБ) [3].
При выборе оптимального состава полимерной композиции оценивали в первую очередь вязкость растворов. Вязкость определяли на капиллярном вискозиметре с висячим уровнем (внутренний диаметр капилляра 0,84 мм). При оценке влияния вспомогательных веществ на свойства растворов полимеров определяли вязкость, рН и осмоляльность. Значение рН растворов измеряли на иономере универсальном И-130. Определение осмоляльности растворов осуществляли криоскопическим методом на приборе миллиосмометр-кри-оскопе термоэлектрическом МТ-5-02. Вязкость, рН, осмоляльность растворов определяли согласно требованиям ГФ РБ [3].
Испытания по определению антимикробного действия пролонгированных глазных капель тимолола проводили в соответствии с ГФ РБ, т. 1, раздел 2.6.1. [3]. Для данного испытания были приготовлены стерильные модельные растворы лекарственного средства, не содержащие в составе консерванта и содержащие бензалкония хлорид в концентрациях 0,003%, 0,005%, 0,007%, 0,009%. Для получения стерильных растворов использовали метод стерилизующей фильтрации с применением мембранных фильтров фирмы Милли-пор с диаметром пор 0,22 мкм. Стерильные растворы разливали в асептических усло-
виях в тюбик-капельницы по 1 мл. Антимикробное действие определяли в отношении тест-микроорганизмов Staphylococcus aureus ATCC 6538, Bacillus subtilis ATCC 6633, Pseudomonasa aeruginosa ATCC 9027. Для инкубации использовали жидкую тио-гликолевую среду.
Испытания по определению эффективности антимикробного консерванта бензалкония хлорида проводили в соответствии с ГФ РБ, т. 1, раздел 5.1.3. [3]. Антимикробное действие консерванта определяли в отношении тест-микроорганизмов: Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa АТСС 9027 и Candida albicans ATCC 885-653.
Для выращивания тест-штаммов бактерий использовали плотную питательную среду № 1. Для выращивания тест-штаммов грибов использовали твердую питательную среду № 2. Культуры бактерий инкубировали при температуре 32±2°С в течение 18 - 24 часов, культуру Candida albicans инкубировали при температуре 22±2°С в течение 48 часов. Выросшие культуры тест-штаммов бактерий и Candida albicans смывали с поверхности скошенного агара стерильным изотоническим раствором, содержащим 9 г/л натрия хлорида и 0,1 г/л пептона. Концентрацию клеток микроорганизмов доводили до 107
- 108 КОЕ/мл по стандарту мутности.
При испытании контейнеры с лекарственным средством, содержащим
0,0035% бензалкония хлорида, инокулиро-вали суспензиями тест-микроорганизмов до конечной концентрации клеток в образце 106 - 107 КОЕ/мл. Фактическую исходную концентрацию бактерий и грибов в контаминированных образцах определяли сразу же после контаминации чашечным методом путем посева на соответствующие агаризованные питательные среды.
Инкубировали контаминированные образцы при температуре 20±2°С в защищенном от света месте. Количество жизнеспособных микроорганизмов в 1 мл конта-минированного лекарственного средства определяли через 6 ч, 24 ч, 7 сут, 14 сут и 28 сут после инокуляции чашечным методом путем посева на соответствующие агаризованные среды.
Изменение количества микробных клеток по сравнению с исходной концентрацией выражали в десятичных логарифмах (lg).
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Одним из основных аспектов разработки глазных капель пролонгированного действия является выбор оптимальной концентрации пролонгатора, совместимого со всеми компонентами ЛС и с биологической средой глаза. В качестве пролон-гаторов для офтальмологических лекарственных средств широко используются синтетические гидрофильные полимеры: метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюло-за, гидроксипропилцеллюлоза, гидрокси-пропилметилцеллюлоза (гипромеллоза), поливиниловый спирт, поливинилпирро-лидон (повидон), пропиленгликоль, дек-стран, карбомер, гиалуроновая кислота и
др. [2]
Пролонгирование действия активного вещества достигается за счет увеличения вязкости раствора при введении полимеров в состав глазных капель, что в свою очередь приводит к замедлению вымывания компонентов из конъюнктивального мешка и к более полному всасыванию их через роговицу. Однако введение в состав глазных капель в высокой концентрации полимеров для увеличения вязкости может приводить к раздражению глаза, нечеткому зрению, слипанию ресниц [4]. Поэтому выбор полимеров, обеспечивающих пролонгирование действия глазных капель за счет высокой вязкости при низкой кон -центрации, является основной задачей для разработчиков. Анализ составов глазных капель и литературных данных показал, что оптимальные диапазоны концентраций используемых полимеров в качестве про-лонгаторов составляют: для производных метилцеллюлозы (гидроксипропилцеллю-лозы, гидроксипропилметилцеллюлозы) от 0,1% до 0,5%, для повидона и ПЭГ 400 в основном до 2,0%, для ПВС - до 4,0%, для
декстрана - до 0,1% [5, 6]. Обеспечить повышение вязкости в растворах можно также за счет полимерных композиций. При этом для достижения требуемого значения вязкости концентрации используемых полимеров могут быть ниже, чем при использовании индивидуальных полимеров. Такое сочетание полимеров в композиции приводит к синергетическому эффекту повышения вязкости. Видимо, по этой причине во многих составах офтальмологических ЛС, в том числе глазных каплях, используются полимерные композиции. В составе глазных капель Слеза натуральная (Алкон) содержится полимерная композиция гипромеллозы и декстрана, Офталь-моферон (Фирн М) - повидона, полиэти-леноксида 4000 и гипромеллозы, глазного геля Офтагель (Сантен) - карбомера и поливинилового спирта. Полимерные композиции в составе глазных капель выполняют ряд важнейших функций: уменьшают токсическое действие активных веществ и консервантов, оказывают протекторное действие на роговичный слой глаза, восстанавливают и стабилизируют слезную пленку глаза [2].
С целью определения наиболее приемлемых концентраций полимеров на первом этапе разработки состава пролонгированных глазных капель тимолола была исследована зависимость вязкостных свойств индивидуальных полимеров от их концентраций и определены значения рН полученных растворов. Для исследования были выбраны пролонгаторы гипромеллоза, по-видон, полиэтиленгликоль 400, поливиниловый спирт (таблица 1).
Оптимальной для пролонгированных глазных капель считается вязкость от 5,0 до 15,0 мПа-с [6]. Этот диапазон вязкости был взят за основу при разработке глазных капель тимолола пролонгированного дей-
Таблица 1 - Результаты исследования физико-химических свойств растворов полимеров
№ п/п Исследуемый раствор полимера Концентрация р-ра полимера, % Динамическая вязкость, мПа-с рН раствора
1. Гипромеллоза 0,1 1,8 5,2
2. Гипромеллоза 0,3 8,4 5,7
3. Гипромеллоза 0,5 22,3 6,0
4. Повидон 2,0 1,2 4,8
5. ПЭГ 400 2,0 1,2 5,4
6. ПВС 2,0 3,0 6,8
7. ПВС 3,0 5,7 6,4
8. ПВС 4,0 17,0 6,2
ствия, хотя строгого ограничения по вязкости глазных капель не существует. В ГФ РБ данный показатель также не регламентируется.
Результаты проведенного исследования показали, что растворы повидона и ПЭГ 400 при максимальных концентрациях 2%, включаемых в составы глазных капель, имеют одинаково низкие значения вязкости (около 1,2 мПа-с). Низкое значение вязкости (3,0 МПа-с) обеспечивает также раствор ПВС в концентрации 2%, допустимую вязкость 5,7 и 17,0 мПа-с обеспечивают концентрации ПВС 3% и 4% соответственно. Приемлемые значения вязкости 8,4 мПа-с и 22,3 мПа-с обеспечивают растворы гипромеллозы в концентрациях 0,3% и 0,5%, соответственно. Растворы с вязкостью, несколько превышающие рекомендованную верхнюю границу 15 мПа-с, рассматривались как перспективные для дальнейших исследований, поскольку при наличии солей вязкость растворов полимеров снижается. Таким образом, на основании полученных результатов самым подходящим полимером для включения в состав полимерных композиций является гипромеллоза, которая при низких концентрациях от 0,3 до 0,5% обеспечивает достаточно высокие значения вязкости.
В качестве вспомогательных компонентов солевой буферной системы глазных капель были использованы динатрия фосфата дигидрат, натрия дигидрофосфата дигидрат и натрия хлорид. Подбор концентраций солей для буферной системы осуществляли с целью обеспечения в глазных каплях значения рН в области 6,5 - 7,5. Такой диапазон значений рН в глазных каплях приближен к рН слезной жидкости и обеспечивает комфортность применения и хорошую переносимость глазных капель. Другим критерием комфортного применения глазных капель является соответствие значения осмотического давления таковому в слезной жидкости или изотоническому раствору натрия хлорида. Таким обра-
зом, в идеале глазные капли должны быть изотоничными (280 - 300 мОсм/кг), однако слабо гипертоничные или гипотонич-ные препараты являются приемлемыми для использования в офтальмологической практике. В результате ряда исследований установлено, что легкая гипотоничность глазных капель оказывает положительное воздействие на эпителий роговицы и конъюнктивы, противодействует гиперос-молярности слезной пленки, типичной для синдрома «сухого глаза», который может развиваться при длительном применении бета-адреноблокаторов [1, 7-9]. При разработке пролонгированной формы глазных капель на основе тимолола учитывали тот факт, что капли должны быть гипотонич-ными и иметь значения осмоляльности в пределах от 210 до 260 мОс/кг.
С учетом того, что вязкость растворов полимеров снижается в присутствии солей, а в состав глазных капель тимоло-ла вводится солевая буферная система для обеспечения значения рН около 7,0 и ги-потоничности раствора, было проведено исследование по оценке влияния вспомогательных компонентов на вязкость растворов полимеров. Изучение проводили на растворах гипромеллозы в концентрациях 0,1%, 0,3% и 0,5%. Результаты изучения представлены в таблице 2.
Результаты исследования показали, что для растворов гипромеллозы с концентрацией от 0,1% до 0,5% при добавлении солей наблюдается снижение вязкости. При этом значительное изменение вязкости (в 1,5 раза) отмечено для раствора с содержанием гипромеллозы 0,5%. Таким образом, на основании полученных экспериментальных данных установлена оптимальная концентрация гипромеллозы для включения в состав лекарственного средства в качестве пролонгатора для глазных капель, которая составляет 0,3%.
С целью увеличения вязкости глазных капель и создания полимерных композиций в раствор 0,3% гипромеллозы были
Таблица 2 - Результаты сравнительного исследования физико-химических свойств
растворов гипромеллозы в отсутствии и присутствии солей
Исследуемый показатель Растворы гипромеллозы, %
в отсутствии солей в присутствии солей
0,1 0,3 0,5 0,1 0,3 0,5
Вязкость, мОсм/кг 1,8 8,4 22,3 1,5 7,6 14,6
рН 5,2 5,7 6,0 7,4 7,4 7,4
дополнительно введены полимеры пови-дона в концентрации 0,5%, ПЭГ 400 и ПВС в концентрациях 1% и подобраны следующие составы полимерных композиций: ги-промеллоза, повидон; гипромеллоза, ПЭГ 400; гипромеллоза, ПВС; гипромеллоза, повидон, ПЭГ 400; гипромеллоза, пови-дон, ПВС. В эти полимерные композиции были включены действующее вещество тимолол в концентрации 0,5% и вспомогательные компоненты: динатрия фосфат дигидрат (0,78%), натрия дигидрофосфат дигидрат (0,13%), натрия хлорид (0,23%), динатрия эдетат (0,02%), бензалкония хлорид (0,005%) и вода для инъекций.
В процессе разработки лекарственного средства его качество оценивают на различных этапах. На данном этапе разработки глазных капель одним из критериев такой оценки был внешний вид раствора. Как правило, бесцветные растворы лекарственных средств вызывают большее доверие у потребителя. При приготовлении опытных образцов было отмечено, что растворы на основе повидона в концентрациях 1% имели желтоватую окраску, при концентрациях полимера 0,5% растворы оставались практически бесцветными. Поэтому выбранная концентрация повидона в опытных образцах не превышала 0,5%. Для исследуемых составов глазных капель также оценивали вязкость и рН, значения которых представлены в таблице 3.
В результате исследования физико-химических характеристик экспериментальных составов глазных капель показано,
что подобранные полимерные композиции и буферная система на основе натрия фосфатов и натрия хлорида при концентрации действующего вещества тимолола 0,5% обеспечивают значения рН 6,8-6,9. Включение дополнительно в состав по-видона (состав 3), ПЭГ 400 (состав 5) и ПВС (состав 6) способствует увеличению вязкости растворов по сравнению с экспериментальным составом на основе одного пролонгатора гипромеллозы (состав 2). Наибольшее увеличение вязкости, равное 12,7 и 13,4 мПа-с, отмечено при добавлении ПВС 1% (состав 6) или композиции ПВС 1% и повидона 0,5% (состав 7), соответственно. Практически одинаковую вязкость, около 7,7 мПа-с, имеют растворы на основе гипромеллозы 0,3% и повидона 0,5% (состав 3), гипромеллозы 0,3%, по-видона 0,5% и ПЭГ 400 1% (состав 4), гипромеллозы 0,3% и ПЭГ 400 1% (состав 5). Полученные значения вязкости экспериментальных растворов являются подходящими для обеспечения пролонгирующего действия глазных капель тимолола.
С целью выбора оптимальной по составу полимерной композиции для пролонгированных глазных капель тимолола проводили оценку технологических аспектов получения вязких растворов. Процесс получения опытных образцов пролонгированных глазных капель тимолола предусматривает отдельную технологическую стадию приготовления раствора гипромел-лозы. Для этого в емкость с нагретой до 70-80 °С водой для инъекций загружают
Таблица 3 - Результаты исследования физико-химических характеристик экспериментальных составов полимерных композиций для глазных капель
Наименование компонента Состав 1 Состав 2 Состав 3 Состав 4 Состав 5 Состав 6 Состав 7
Гипромеллоза, % - 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3
ПВС, % - - - - - 1,0 1,0
Повидон, % - - 0,5 0,5 - - 0,5
ПЭГ 400, % - - - 1,0 1,0 - -
Тимолол, % - 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5
Динатрия фосфата дигидрат, % 0,78 0,78 0,78 0,78 0,78 0,78 0,78
Натрия дигидрофосфата дигидрат, о/ % 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13
Натрия хлорид, % 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23
Бензалкония хлорид, % 0,005 0,005 0,005 0,005 0,005 0,005 0,005
Динатрия эдетат, % 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02
Вода для инъекций, мл 100 100 100 100 100 100 100
рН 7,4 6,8 6,8 6,8 6,8 6,9 6,8
Вязкость, мПа-с 1,1 7,2 7,7 7,6 7,7 12,7 13,4
гипромеллозу, перемешивают до образования однородной массы не менее 10 мин, охлаждают и выдерживают при температуре от 2 до 8 °С в течение не менее 4 ч. Приготовление растворов ПВС требует также нагревания раствора полимера до 80 °С для полного его растворения, затем охлаждения. Кроме того, получение глазных капель тимолола требует приготовления раствора, содержащего действующее и другие вспомогательные вещества, входящие в состав. Таким образом, технология приготовления лекарственной формы на основе полимерной композиции гипромеллозы и ПВС не отличается технологическими преимуществами по сравнению с выбранными составами 3-5, для которых не требуется дополнительная стадия приготовления раствора второго полимера. Выбор между составом 3, составом 4 и составом 5 проводился с учетом физико-химических свойств полимеров повидона и ПЭГ 400. Предпочтительным составом для пролонгированных глазных капель тимолола является состав 3 на основе полимерной композиции гипромелозы 0,3% и повидона 0,5%. Данная композиция позволяет при меньшей концентрации второго полимера (повидона) достичь такого же значения вязкости, как при использовании гипро-меллозы 0,3% и ПЭГ 400 в концентрации 1%. Полимерная композиция гипромелло-зы 0,3%, повидона 0,5% и ПЭГ 400 1% не дает значительных преимуществ с точки зрения увеличения вязкости.
В офтальмологической практике глазные капли тимолола применяются в двух концентрациях 0,25% и 0,5%, поэтому были также исследованы физико-химические свойства раствора, содержащего ти-молол в концентрации 0,25% и оптимальную полимерную композицию: гипромел-лоза - 0,3% и повидон - 0,5%. Для данного состава пролонгированных глазных капель с содержанием тимолола в концентрации 0,25% значение рН составляет около 7,0, осмоляльности - около 230 мОсм/кг и вязкости - около 7,2 мПа-с. Для состава пролонгированных глазных капель, содержащих тимолол в концентрации 0,5%, значение осмоляльности составляет около 240 мОсм/кг. Таким образом, подобран одинаковый солевой состав вспомогательных компонентов и полимерной композиции для глазных капель тимолола двух концентраций 0,25% и 0,5%, который позволяет
обеспечить приемлемые значения рН, вязкости и осмоляльности глазных капель.
Основными требованиями, предъявляемыми к любой лекарственной форме офтальмологических ЛС, являются обеспечение стабильности и стерильности не только в процессе хранения, но и при использовании после вскрытия первичной упаковки. Для сохранения стабильности и стерильности в состав глазных капель включены динатрия эдетат и бензалкония хлорид. Бензалкония хлорид, обычно используемый в концентрации 0,01%, до настоящего времени остается самым широко применяемым консервантом в глазной практике и входит в состав антиглауком-ных препаратов: Тимолол (Белмедпре-параты), Тимолол-Акос (Синтез), Фотил (Сантен) и др. Динатрия эдетат, выступающий в роли стабилизатора, усиливает бактерицидное действие бензалкония хлорида, что позволяет использовать консервант в меньших количествах [10]. Кроме того, уменьшение количества консерванта в глазных каплях при той же эффективности бактерицидного действия приводит к снижению местных побочных эффектов на ткани глаза со стороны консерванта. В связи с этим в состав глазных капель ти-молола пролонгированной формы предложено включить бензалкония хлорид в концентрации 0,005% (0,05 мг/мл).
Для подтверждения эффективности выбранной концентрации консерванта проведено изучение антимикробного действия бензалкония хлорида в концентрации от 0,003 до 0,009% в модельных образцах лекарственного средства, содержащих тимолол в концентрации 0,5%. Испытания были выполнены в соответствии с ГФ РБ (раздел 2.6.1) [3] в отношении тест- микроорганизмов Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Pseudomonasa aeruginosa. Результаты представлены в таблице 4.
Результаты эксперимента показали, что модельный раствор лекарственного средства без консерванта не обладает антимикробным действием. Одинаковый спектр антимикробного действия у модельных растворов с разным содержанием консерванта свидетельствует об эффективности бензалкония хлорида как консерванта в диапазоне концентраций от 0,003 до 0,009%. Таким образом, выбранная концентрация бензалкония хлорида 0,005% для пролонгированной формы глазных
Таблица 4 - Результаты определения антимикробного действия бензалкония хлорида в модельных растворах лекарственного средства тимолола 0,5%
Штаммы тест-микроорганизмов Наличие/отсутствие роста тест-культур
Контроль Содержание бензалкония хлорида в модельных образцах ЛС, %
без консерванта 0,003 0,005 0,007 0,009
Staphylococcus aureus ATCC 6538 + + - - - -
Bacillus subtilis ATCC 6633 + + - - - -
Pseudomonasa aeruginosa ATCC 9027 + + - - - -
Примечание: «+» - наличие роста тест-культур; «-» - отсутствие роста тест-культур.
капель тимолола способна обеспечить стерильность лекарственного средства.
Для подтверждения способности выбранной концентрации бензалкония хлорида сохранять стерильность в процессе хранения требуется проведение испытания на эффективность антимикробного консерванта в соответствии с требованиями ГФ РБ, т. 1, раздел 5.1.3.
В глазных каплях тимолола разработанного состава допускаются нормы по содержанию консерванта в течение срока годности от 0,0035 до 0,0065%. В связи с этим эффективность антимикробного консерванта изучали на модельном растворе лекарственного средства с содержанием бензалкония хлорида 0,0035 % (нижний предел допустимой концентрации). Результаты испытаний представлены в таблице 5.
В результате установлено, что в условиях проведения испытаний для образцов лекарственного средства в течение 6 ч и 24 ч наблюдалось снижение количества микробных клеток по сравнению с исходной концентрацией. Полученные значения логарифмов уменьшения числа жизнеспособных микроорганизмов удовлетворяют критериям оценки эффективности антимикробных консервантов для лекарственных средств для офтальмологического применения, указанных в ГФ РБ, в соответствии
с которыми уменьшение логарифмов числа бактерий в 1 мл испытуемого образца через 6 ч должно быть не менее, чем на 2, через 24 ч - не менее, чем на 3, не должно быть увеличения числа грибов [3]. На протяжении периода испытаний от 7 до 28 сут в испытуемых образцах не было выявлено роста клеток бактерий Staphylococcus aureus и Pseudomonasa aeruginosa, также не наблюдалось увеличения числа грибов Candida albicans. Полученные результаты подтверждают эффективность консерванта бензалкония хлорида в концентрации 0,0035%, следовательно, концентрация 0,005% надежно обеспечит стерильность лекарственного средства.
В результате выполненной работы исследованы составы полимерных композиций на основе гипромеллозы, повидона, ПЭГ 400 и ПВС, обеспечивающие при наименьших концентрациях полимеров вязкость, достаточную для создания глазных капель пролонгированного действия. Разработан оптимальный состав и выбраны технологические параметры для получения пролонгированных глазных капель тимолола на основе наиболее перспективной и технологичной полимерной композиции гипромеллозы 0,3% и повидона
0,5%. Изучено антимикробное действие входящего в состав модельных растворов лекарственного средства консерванта
Таблица 5 - Результаты определения эффективности антимикробного консерванта бензалкония хлорида 0,0035% в модельном растворе лекарственного средства тимолола 0,5%
Те ст-микроорганизмы lg уменьшения числа жизнеспособных микроорганизмов
6 ч 24 ч 7 сут 14 сут 28 сут
Staphylococcus aureus ATCC 6538 4 3 НВ НВ НВ
Pseudomonasa aeruginosa ATCC 9027 4 4 НВ НВ НВ
Candida albicans ATCC 885-653 4 3 НУ НУ НУ
бензалкония хлорида в количестве 0,0030,009%. Подтверждена его эффективность в качестве консерванта на нижнем допустимом пределе количественного содержания (0,0035%) при внесении в состав лекарственного средства концентрации 0,005%.
В целом в результате исследований разработан следующий состав лекарственного средства Тимолол-лонг, капли глазные:
Тимолол, % 0,25 или 0,5
Динатрия фосфата дигидрат, % 0,78
Натрия дигидрофосфата дигидрат, % 0,13 Натрия хлорид, % 0,23
Бензалкония хлорид, % 0,005
Динатрия эдетат, % 0,02
Гипромеллоза, % 0,3
Повидон, % 0,5
Вода для инъекций, мл до 1,0
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
1. При создании глазных капель пролонгированного действия наиболее перспективными являются следующие полимерные композиции: гипромеллоза, пови-дон; гипромеллоза, ПЭГ 400; гипромеллоза, ПВС; гипромеллоза, повидон, ПЭГ 400; гипромеллоза, повидон, ПВС.
2. Для обеспечения стерильности глазных капель пролонгированного действия достаточной является концентрация бен-залкония хлорида 0,005%.
3. На основании полученных результатов рекомендован состав глазных капель тимолола, перспективный для дальнейшей фармацевтической разработки.
SUMMARY
O.V. Parakhnevich, T.V. ТгикИасИоуа,
A.I. Zhebentyaev, T.M. Ermolenko,
E.V. Litvinova TECHNOLOGICAL ASPECTS OF DEVELOPMENT OF COMPOSITION
OF TIMOLOL-LONG EYE DROPS
The composition of prolonged eye drops on the basis of a beta-blocker timolol was developed. Viscosity and pH of solutions of individual polymers such as hypromellose, povidone, polyethylene glycol 400, polyvinyl alcohol and their compositions was determined to choose an optimum prolonged agent for the eye drops. The buffer system provid-
ing value pH of eye drops nearby 7,0 was chosen. Evaluation of influence of timolol and auxiliary substances on viscosity and рН of polymeric compositions was studied. As a result the composition of polymers on a basis of hypromellose and povidone for providing prolongation of timolol was chosen. An anti-microbic action of the eye drops with different concentration of benzalkonium chloride was studied. The preservative provides an antimicrobic action within testing concentrations from 0,003 to 0,009%. For providing sterility of the eye drops the concentration of benzalkonium chloride 0,005% was chosen and test for antimicrobic preservative efficiency for model solutions of the preparation was carried out.
Keywords: timolol, eye drops, polymeric compositions, benzalkonium chloride.
ЛИТЕРАТУРА
1. Муратова, Н.В. Диагностика и лечение синдрома «сухого глаза» у больных, получающих Р-адреноблокаторы / Н.В .Муратова // Клиническая офтальмология. - 2003. -№4 (1). - С. 4-6.
2. Егоров, Е.А. Офтальмофармакология : руководство для врачей / Е.А. Егоров, Ю.С. Астахов, Т.В. Ставицкая - 3-е изд., испр. и доп. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009.
- 592 с.
3. Государственная фармакопея Республики Беларусь: в 3 т. / УП «Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении», 2006 - 2009. - Т. 1. Общие методы контроля качества лекарственных средств / УП «Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении»; под общ. ред. Г.В. Годовальни-кова. - Минск: Минский государственный ПТК полиграфии, 2006. - 656 с; - Т. 2. Контроль качества вспомогательных веществ и лекарственного растительного сырья / УП «Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении»; под общ. ред. А. А. Шеряко-ва. - Молодечно: «Типография «Победа», 2008. - 472 с.
4. Effects of Artificial Tears on Visual Performance in Normal Subjects / Ridder, W. H. 3rd [et al.] // Optometry and vision science. - 2005. - Vol. 82, № 5. - P. 370-377.
5. Abelson, M.B. Demystifying Dumul-cents / M.B. Abelson, R.A. Anderson // Rev. Opthal. - 2006. - Vol.13, №11. - P. 122-126.
6. Справочник лекарственных препаратов Видаль // Каталог-справочник [Элек-
тронный ресурс]. - Режим доступа: http:// www.vidal.ru. - Дата доступа: 13.05.11.
7. Муравьев, И. А. Технология лекарств / И. А. Муравьев. - 3-е изд., перераб. и доп.
- М.: Медицина, 1980. - Т.2. - 704 с.
8. Sodium hyaluronate eye drops of different osmolarity for the treatment of dry eye in Sjogren's syndrome patients / P. Aragona [et al.] // Br. J. Ophthalmol. - 2002. - Vol. 86, № 8. - P. 879 - 884.
9. Efficacy of sodium hyaluronate eye drops of different osmolarities in the symptomatic treatment of dry eye patients / G. Mi-lazzo [et al.] // Adv. Exp. Med. Biol. - 2002.
- Vol. 506, № 506(Pt B). - P. 1233 - 1235.
10. Исследование влияния некоторых вспомогательных веществ на антимикробное действие бензалкония хлорида / Н.А. Ляпунов [и др.] // Фармаком. - 2010.- №1.
- С. 47 - 56.
Адрес для корреспонденции:
Республика Беларусь,
220007, г. Минск, ул. Фабрициуса, 30,
РУП «Белмедпрепараты», тел./факс 8(017)220 31 42, e-mail: nfc@belmedpreparaty. com.
Парахневич О.Г.
Поступила 02.02.2012 г.
