CC BY
12Полиморфизм гена NAT2 в риске развития туберкулёза с множественной лекарственной устойчивостью
при ВИЧ-инфекции
Мальцева Н. В., Викторова И. Б., Казанцева О. М, Ханин А. Л.
НГИУВ - филиал ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России, Россия, Новокузнецк
Ключевые слова: полиморфизм гена NAT2; туберкулёз; ВИЧ; противотуберкулёзные препараты; множественная лекарственная устойчивость
Для цитирования:
Мальцева Н.В., Викторова И.Б., Казанцева О.М., Ханин А.Л. Полиморфизм гена NAT2 в риске развития туберкулёза с множественной лекарственной устойчивостью при ВИЧ-инфекции // Фармакогенетика и фармакогеномика. 2020;(2):12-13. (In Russ). DOI: 10.37489/2588-0527-2020-2-12-13
Введение. Высокая частота регистрации множественной лекарственной устойчивости (МЛУ) Mycobacterium tuberculosis (МБТ) при туберкулёзе (ТБ) у больных ВИЧ-инфекцией даёт основания полагать, что ТБ с МЛУ МБТ (МЛУ-ТБ) ассоциирован с положительным ВИЧ-статусом, а ВИЧ-инфекция может рассматриваться в качестве независимого фактора риска формирования МЛУ-ТБ. Среди вероятных причин такой ассоциации рассматриваются высокий риск инфицирования резистентными формами МБТ в условиях социальной дезадаптации больных ВИЧ-инфекцией [1], мальабсорбция рифампицина [2] и особенности фармакокинети-ки других противотуберкулёзных препаратов [3]. В метаболизме некоторых из них принимают участие ферменты — продукты экспрессии гена N-ацетил-трансферазы2 NAT2 [4].
Цель. Целью настоящей работы явилось исследование распределения частот встречаемости генотипов NAT2 при МЛУ-ТБ у пациентов с ВИЧ-инфекцией.
Материалы и методы. В исследование включены 70 больных коинфекцией ВИЧ и туберкулёз (ВИЧ/ТБ) в возрасте от 24 до 54 (36,17+0,784) лет: — 43 (61 %) мужчины в возрасте от 27 до 49 (35,79+0,833) лет и 27 (39 %) женщин в возрасте от 24 до 54 (36,78+1,557) лет, находившихся на стационарном лечении в ГКУЗ Кемеровской области «Новокузнецком клиническом противотуберкулёзном диспансере» г. Новокузнецка в период 2017—2019 гг. Из них МЛУ МБТ обнаружена у 47 пациентов в возрасте от 24 до 54 (35,85+0,982) лет, мужчин — 28 (60 %) человек в возрасте от 27 до 48 (35,5+0,985) лет и женщин — 19 (40 %) в возрасте от 24 до 54 (36,37+1,981) лет. Фенотипическое определение лекарственной чувствительности (ЛЧ) МБТ к препаратам основного (изониазид, рифампицин,
этамбутол, стрептомицин) и резервного (канами-цин, офлоксацин, этионамид, капреомицин, ци-клосерин и ПАСК) рядов проводилось методом абсолютных концентраций на плотных питательных средах Левенштейна — Йенсена. Генотипическая экспресс-диагностика МЛУ МБТ проводилась с использованием GeneXpert MTB/RIF выявлением в биологическом материале (мокроте) ДНК МБТ и мутации в гене rpoB, ответственной за резистентность к рифампицину (маркер МЛУ). Лекарственная чувствительность к противотуберкулёзным препаратам была установлена у 23 больных ВИЧ/ ТБ (ЛЧ-ТБ). МЛУ МБТ (резистентность одновременно к изониазиду и рифампицину) была обнаружена у 47 (67,1 %) пациентов, а в 12 случаях имелась дополнительная резистентность к фторхинолонам. Дополнительными критериями включения в исследование были проведение противотуберкулёзной терапии [5] и согласие пациентов на участие в исследовании. Медиана количества CD4-лим-фоцитов составила во всей выборке 177,0 клеток/ мкл (диапазон 9,0—1624,0 клеток/мкл), у пациентов с МЛУ-ТБ — 189,0 клеток/мкл (диапазон 50,0— 1624,0 клеток/мкл), при ЛЧ-ТБ — 157,0 клеток/мкл (диапазон 9,0—930,0 клеток/мкл).
Для выделения образцов геномной ДНК у каждого больного забирали по 3 мл цельной венозной крови из локтевой вены в стандартные пробирки, содержащие ЭДТА-К3 (IMPROVE, China). ДНК выделяли с помощью коммерческого реагента «ДНК-экспресс-кровь» (НПФ «Литех», Москва). Генотипирование проводили по полиморфным ло-кусам гена ^ацетилтрансферазы2 — NAT2Lys268Arg A803G rs1208, NAT2 Ar«197Gln G590A rs1799930 и NAT2Leu161Leu C481T rs1799929 — с помощью коммерческих комплектов реагентов «SNP-экспресс» (НПФ «Литех», Москва).
Статистическая обработка результатов проводилась с использованием программ Microsoft® Excel® версия 14.4.6 (141106), Statistica 6.0, InStatlI, SPSS.
Результаты. Распределение частот генотипов всех тестируемых полиморфных локусов гена NAT2 соответствовало равновесию Харди—Вайнберга (р>0,05). Отличие от указанного равновесия по ло-кусу NAT2°590A выявлено при МЛУ-ТБ (р<0,05).
Более половины пациентов с МЛУ-ТБ (66 %) являлись носителями NAT2ama. Соответственно, риск развития МЛУ-ТБ в сравнении с ЛЧ-ТБ у обследованных пациентов с генотипом NAT2G590G оказался высоким (OR=3,63, р=0,02), а риск развития ЛЧ-ТБ — низким (0R=0,27, р=0,02). У гетерозигот NAT2G590A выявлен сниженный риск развития МЛУ-ТБ (0R=0,28, р=0,03) и существенная предрасположенность к развитию ЛЧ-ТБ (0R=3,57, р=0,03). По двум другим полиморфизмам NAT2A803G и NAT2°mj отличий в частотах аллелей и генотипов между когортами с МЛУ-ТБ и ЛЧ-ТБ не обнаружено. Однако сочетание диких генотипов NAT2A803A х NAT2G590G встречалось у трети пациентов с МЛУ-ТБ (33 %) и всего лишь
у 1 (4 %) из 23 обследованных больных с лекарственно-чувствительным ТБ. Выявлен 10,65-кратный риск развития МЛУ-ТБ у носителей данного сочетания (^=0,0134) и, соответственно, очень низкая вероятность развития ЛЧ-ТБ (OR=0,09, р=0,0071). Одновременное носительство дикого генотипа по третьему исследованному локусу NAT2C481T (сочетание генотипов NAT2A803A х NAT2G59ÜG х NAT2C481C) не было обнаружено ни у одного пациента в случаях ЛЧ-ТБ. Поэтому вероятность развития МЛУ-ТБ у носителей повысилась до 0R=10,78 (р=0,04).
Заключение. Выявлена ассоциация полиморфных локусов NAT2 Lys268A8 A803G rs1208, NAT2 Arg197Gln G590A rs1799930 и NAT2 Leu161Leu C481T rs1799929 с риском развития МЛУ-ТБ у больных ВИЧ-инфекцией. Селекция в организме резистентных мутантных штаммов M. tuberculosis может быть более успешной при генотипе быстрых метаболизаторов. Поэтому данный генотип может быть предрасполагающим к развитию множественной лекарственной устойчивости M. tuberculosis, что, несомненно, требует подтверждения в дальнейших исследованиях.
Литература / References
1. Conaty SJ, Hayward AC, Story A et al. Explaining risk factors for drug-resistant tuberculosis in England and Wales: contribution of primary and secondary drug resistance. Epidemiol. Infect. 2004;132(6):1099-1108. DOI: 10.1017/S0950268804002869.
2. Patel KB, Belmonte R, Crowe HM. Drug malabsorption and resistant tuberculosis in HIV-infected patients. N Engl J Med. 1995;332(5):336-7. DOI: 10.1056/NEJM199502023320518.
3. Van Oosterhout JJ, Dzinjalamala FK, Dimba A et al. Pharmacokinetics of antituberculosis drugs in HIV-positive and HIVnegative adults in Malawi. Antimicrob Agents Chemother. 2015;59(10):6175-80. DOI: 10.1128/AAC.01193-15.
4. Mthiyane T, Millard J, Adamson J et al. N-Acetyltransferase 2 Genotypes among Zulu-Speaking South Africans and Isoniazid and N-Acetyl-Isoniazid Pharmacokinetics during Antituberculosis Treatment. Antimicrob Agents Chemother. 2020;64(4):e02376-19. DOI: 10.1128/ AAC.02376-19.
5. Федеральные клинические рекомендации по диагностике и лечению туберкулеза у больных ВИЧ-инфекцией, 2015 г. [Federal clinical guidelines for the diagnosis and treatment of tuberculosis in patients with HIV infection, 2015. (In Russ).]. http://roftb.ru/netcat_files/ doks2016/rec2016.pdf
