CC BY
16
ДОЗАЗАВИМЫЕ РАЗЛИЧИЯ ЛПС-ИНДУЦИРОВАННОГО НЕЙРОГЕНЕЗА И ДЕСКВАМАЦИИ ОБОНЯТЕЛЬНОГО ЭПИТЕЛИЯ МЫШЕЙ
В.Г. Сергеев, К.С. Сергеева, М.С. Аникаева
ФГБОУ ВО Удмуртский государственный университет, Ижевск, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: обонятельный эпителий, десквамация, липополисахарид.
Обонятельный эпителий млекопитающих отличается уникальной особенностью генерировать нейроны (рецепторные биполярные клетки), чьи отростки формируют обонятельный нерв, проецирующийся в обонятельные луковицы [2]. В физиологических условиях существует «тонкий» баланс между пролиферацией эпителиальных предшественников и их десквамацией, что обеспечивает постоянное обновление клеток обонятельного эпителия, а также способствует поддержанию его одинаковой толщины. Нарушение этого баланса в сторону усиления десквамации эпителия может быть вызвано действием вирусных и бактериальных факторов [1,3]. В настоящее время нет полного представления о молекулярных механизмах, ве дущих к нарушению процессов нейрогенеза и десквамации в условиях вирусного или бактериального инфицирования.
10 самцам белых мышей вводили интраназаль-но унилатерально 10 мкл раствора ЛПС в концентрации 1 мг/мл (малая доза; n=5) и 10 мг/мл (большая доза; n=5) в течение 30 дней или стерильный физиологический раствор (контрольная группа; n=9). Иммуногистохимическое исследование криостат-ных срезов проводили, используя антитела к нестину, и Толл-подобному рецептору-4. Введение ЛПС вызывало усиление десквамации и значительное повышение экспрессии нестина в базальных клетках, и сустенто-цитах а также в клетках, окружающих Боуменовы железы и кровеносные сосуды в собственной пластинке слизистой. Обнаружен феномен интенсивной экспрессии Толл-подобных рецепторов и нестина в десквами-рованных клетках обонятельного эпителия. Большие дозы ЛПС приводили к отслаиванию целых пластов обонятельного эпителия и снижению экспрессии не-стина в клетках собственной пластинки слизистой. Сделан вывод о опосредованном через Толл-подобные рецепторы ремоделировании цитоскелета сустентоци-тов, ведущих к разрушению межклеточных контактов и десквамации эпителия, а также о дозазависимости в интенсивности синтеза нестина в стволовых клетках собственной пластинки слизистой оболочки.
Литература:
1. Urata S., Maruyama J., Kishimoto-Urata M. et al. ACS Chem Neurosci. 2021. Vol.17, № 4. P.589-595.
2. Watelet J.B., Katotomichelakis M., Eloy P., et al. B-ENT. 2009. Vol.5 Suppl P.11.
3. Yagi S., Tsukatani T., Yata T. et al. Acta Otolaryngol. 2007. Vol.127io P.748-753.
ПЕРСПЕКТИВЫ ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ ТУБЕРКУЛЕЗНОГО ОСТИТА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ЭЛЕКТРЕТОВ НА ОСНОВЕ ТАНТАЛА
М.С. Сердобинцев1, Т.И. Виноградова1, А.В. Баранов1, А.И. Лаврова1, М.Е. Дьякова1, Д.С. Эсмедляева1, Н.М. Блюм2, М.З. Догонадзе1, А.С. Кафтырев1, Н.В. Заболотных1, И.А. Баулин1, П.К. Яблонский1
1 ФГБУ СПб НИИФ Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия
2 ООО Межрегиональный лабораторный центр, Санкт-Петербург, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: туберкулезный остит, дефект костной ткани; остеорепарация; активность туберкулезного воспаления; квазистатическое электрическое поле; электрет наоснове анодного оксида тантала
В ортопедической хирургии в настоящее время проводится поиск факторов и условий, влияющих на течение деструктивных процессов костной ткани и на эффективность восстановительной пластической хирургии [1]. Имплантация электретов на основе анодного оксида тантала с отрицательным зарядом внешней поверхности (далее «электрет»), индуцирующих квазистатическое электрическое поле, в хирургическом лечении ранних стадий дегенеративных заболеваний суставов приводит к выраженному противоболевому эффекту и восстановлению функции пораженных суставов [2].
Исследованы процессы остеорепарации костной ткани у 30 кроликов, которым в дистальном метадиафизе бедренной кости моделировали туберкулезный остит. 3 животных были интактными (группа 1), кролики группы 2 (n=12) с моделированным туберкулезным оститом не получали лечения, 9 кроликам (группа 3) выполнена некрэктомия и пластика дефекта костным аутотрансплан-татом, животным группы 4 (n=9) — некрэктомия и пери-фокальное введение электрета, индуцирующего квазистатическое электрическое поле и 6 животным (группа 5) осуществлена некрэктомия, аутокостная пластика дефекта и перифокальная имплантация электрета. Животные 3, 4 и 5 группы получали противотуберкулезное лечение. Сроки наблюдения — 1, 2 и 4 месяца после операции. Остеорегенерацию и регресс воспаления оценивали морфологическими и биохимическими методами (ферменты пуринергической системы —активность общей адено-зиндезаминазы и ее изоферментов, активность эласта-зы, уровень реактантов острой фазы: церулоплазмина, гаптоглобина, а1-кислого гликопротеина и альбумина). Прослежена эволюция туберкулезного воспаления костной ткани в контрольные сроки. При оценке репаративных процессов костной ткани и регресса активности воспалительных изменений установлено, что только сочетание противотуберкулезного лечения, выполненной некрэкто-мии, пластики постнекрэктомического дефекта аутотран-сплантатом и перифокальной имплантации электрета позволило уже к 2 месяцам наблюдений достичь полный регресс активности туберкулезного процесса в кости и замещения ее дефектазрелой трабекулярной тканью.
Таким образом, электрическое поле электрета на основе анодного оксида тантала с отрицательным зарядом внешней поверхности в хирургическом лечении экспериментального туберкулезного оститаускоряет процессы остеорепарации и снижает активность туберкулезного воспаления.
Литература:
1. Oryan A, Alidadi S, Moshini A, Maffulli N. J Orthop Sung Res. 2014.V. 9. № 1. Р.18.
2. Вансович Д.Ю., СердобинцевМ.С., Усиков В.В., Цололо Я.Б., Мансуров Д.Ш., Спичка А.А., Алиев Б.Г., ВороковА.А. Мед-фарм. Жур. «Пульс». 2021. T.23. № 3. С. 24-30.
ПРОТЕКТОРНОЕ ДЕЙСТВИЕ НА ТКАНИ ЗАДНЕГО ОТДЕЛА ГЛАЗА IN VITRO ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ 3D-НОСИТЕЛЯ, СОДЕРЖАЩЕГО БИОРЕГУЛЯТОР, ВЫДЕЛЕННЫЙ ИЗ СКЛЕРЫ ГЛАЗА
Е.В. Сидорский1, М.С. Краснов1, В.П. Ямскова2, В.И. Лозинский1
1 ФГБУН Институт элементоорганических соединений им. А.Н. Несмеянова РАН, Москва, Россия
2 ООО «Институт проблем биорегуляции», Москва, Россия.
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: биорегуляторы, криогели, 3й-технологии, фибробласты.
Склера обеспечивает внутриглазное давление и является защитным каркасом для тканей глаза. Прочность склеры определяют высокомолекулярные структуры коллагена, эластина, которые синтезируют фибробласты, часть которых является клеточными источниками регенерации, способными к пролиферации и дифференциров-ке. Именно за их счетпроисходит быстрая регенерация ткани склеры. Увеличению жизнеспособности фибробла-стов и сохранению пространственной организации ткани способствует биорегулятор, обнаруженный в склере глаза быка (БР-СК). Его действие характеризуется наличием тканевой, но отсутствием видовой специфичности. Основой БР-СК является пептидно-белковый комплекс, в состав которого входят биологически активные пептиды (мол. масса 1300-5100 Да) и изоформа сывороточного альбумина под номером gi 11351907 в базе данных Uniptrot. Ранее было показано, что белковые криогели были успешно использованы в качестве носителей биорегуляторов для индукции регенерации костной ткани. Целью исследования было изучение действия БР-СК, введенного в 313-носитель, на состояние склеры и тканей заднего отдела глаза (сетчатка, пигментный эпителий, сосудистая оболочка) в условиях стационарного органо-типического культивирования in vitro. В качестве носителя биорегулятора использовали криогенно-структуриро-ванные губки в виде дисков диаметром 22 мм и высотой 10 мм, приготовленные из белков сыворотки крови КРС. Работа была выполнена на тритонах Pleurodeles waltl обоего пола, разведение который осуществляется в Институте биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН. Исследование проводили на задних секторах глаза, которые культивировали на криогелях, нагруженных БР-СК в диапазоне концентраций 10-19-10-3 мг белка/мл. В качестве контрольных серий изучали задние секторы глаза, которые культивировали на криогелях, не содержащих БР-СК, или которые культивировали без криогелей. Все культуры фиксировали в р-ре формалина на 3-и сут и приготавливали гистологические срезы, окраска гематоксилин-эозином. Гистологическое исследование показало, что только в опытных сериях, в которых задние секторы глаз культивировали на криогелях, напитанных БВ-СК в концентрации 10-9, 10-11 мг белка/мл
наблюдали отсутствие выраженных изменений деградации тканей заднего сектора: сосудистая оболочка сохранялась плотной, без признаков деградации, сохранялись адгезионные взаимодействия между сетчаткой и пигментным эпителием, в котором пигмент был распределен равномерно и компактно, что свидетельствует о поддержании статуса пролиферации и дифференцировки в пигментном эпителии, в также о сохранении структуры интерфоторецепторного матрикса, играющего принципиальную роль в передаче зрительного акта. В склере наблюдали плотное расположение коллагеновых волокон с малозаметными расслоениями и большое количество жизнеспособных фибробластов, подсчет которых на 1мм2 среза ткани склеры показал, что в данных опытных сериях их количество было приблизительно вдвое больше по сравнению с другими контрольными сериями. Также следует отметить, что использование криогеля усиливало протекторное действие БР-СК.
ВНЕКЛЕТОЧНЫЕ ВЕЗИКУЛЫ, ПОЛУЧЕННЫЕ ИЗ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК, ОБЕСПЕЧИВАЮТ НЕЙРОПРОТЕКЦИЮ ПУТЕМ МОДУЛЯЦИИ ПУТИ PI3K/AKT И КАЛЬЦИЕВОЙ ОСЦИЛЯЦИИ
Д.Н. Силачев1, 3, Е.А. Туровский2, В.В. Головичева1, Е.Г. Варламова2, Т.И. Данилина1, К.В. Горюнов3, Ю.А. Шевцова3, 5, И.Б. Певзнер1, 3, Л.Д. Зорова1, 3, В.А. Бабенко1, 3, Е.А. Евтушенко4, А.А. Жарикова5, А.А. Хуторненко3, С.И. Ковальчук6, Е.Ю. Плотников1, 3, Д.Б. Зоров1, 3, Г.Т. Сухих3
1 Институт физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского Московского государственного университета
им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
2 Институт биофизики клетки РАН, ФИЦ Пущинский научный центр биологических исследований РАН, Пущино, Россия
3 НМИЦ акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова, Москва, Россия
4 Биологический факультет Московского государственного университета
им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
5 Факультет биоинженерии и биоинформатики Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
6 Лаборатория методов биоинформатики
в комбинаторной химии и биологии Института биоорганической химии им. Шемякина-Овчинникова РАН, Москва, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: мультипотентные мезенхимальные стро-мальные клетки, внеклеточные везикулы, нейропротекция.
Мезенхимальные стромальные клетки (МСК) рассматриваются в качестве перспективной терапии острых патологических состояний головного мозга. Предполагается, что основной нерйропротекторный механизм реализуется паракринно в том числе и за счет секреции внеклеточных везикул ВВ [1]. В этом исследовании мы предположили, что многоцелевой терапевтический эффект ВВ обусловлен белковым грузом, который может обеспечивать нейропротекцию, и указали на некоторые ключевые механизмы и молекулярные мишени для такой защиты. Изучались механизмы
