CC BY
55
664.014/.019
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТОКСИЧНОСТИ РАСТИТЕЛЬНОГО ЭМУЛЬГА ТОРА -ВОДНОГО ЭКСТРАКТА ИЗ КОРНЕЙ МЫЛЬНЯНКИ ЛЕКАРСТВЕННОЙ
SAPONARIA OFFICINALIS L.
Т.П. ЮДИНА, Е.И. ЧЕРЕВАЧ, Е.И. ЦЫБУЛЬКО,
Е.В. МАСЛЕННИКОВА, Н.В. ПЛАКСЕН, Н.С. ХИЛЬЧЕНКО
Тихоокеанский государственный экономический университет Владивостокский государственный медицинский университет
Эмульсионная продукция, пользующаяся повышенным спросом у населения, перспективна для ввода биологически активных веществ и создания продуктов функционального назначения. В связи с этим актуален поиск новых поверхностно-активных веществ с широким спектром действия, одним из которых является экстракт из корней мыльнянки лекарственной Saponaria officinalis L. (ЭКМ). На основе ЭКМ с содержанием сухих веществ (СВ) 7%, которые в основном представлены сапонинами, нами разработаны низкокалорийные эмульсионные продукты [1-3]. Количество ЭКМ в рецептуре эмульсионной продукции составляет 3-5 г/100 г продукции. Эмульгирующие свойства экстракта обусловлены содержанием в нем сапонинов, которые могут быть в определенных количествах токсичны для организма [4].
Цель нашего исследования - установление безопасности экстракта из корней мыльнянки, интродуциро-ванной в почвенно-климатических условиях Приморского края, с содержанием СВ 7% для теплокровных животных (мыши, крысы), выявление нежелательных эффектов и разработка рекомендаций по его применению в лечебном и профилактическом питании.
Для оценки безопасности ЭКМ нами изучена острая и хроническая (подострая) токсичность препарата на подопытных животных. Крысы и мыши - самые мелкие лабораторные животные, которые, как и человек, питаются растительной и животной пищей, а значит, имеют близкие ферментные системы [5]. При изучении острой токсичности 30 мышам-самцам массой 18-23 г по 6 особей в каждой группе однократно вводили возрастающие дозы ЭКМ: от минимальной -0,1 мл/20 г массы тела до максимально физиологически возможной - 0,5 мл/20 г массы тела. Определяли среднюю летальную дозу, от которой через 24 ч погибает 50% животных (средняя смертельная доза LD50) [6, 7]. Приготовленный ЭКМ вводили в желудок специальным шприцем с оливой на конце иглы.
Оценку подострой токсичности ЭКМ - введение в рацион питания в течение 30 дней в одной дозе - проводили на 40 крысах весом 200-240 г, разделенных на 2 группы: самцов и самок [7]. Контрольная группа получала стандартный рацион питания, который представлял собой полноценную физиологическую диету для данного типа животных [8]; опытная группа помимо стандартного рациона получала ЭКМ с содержани-
ем СВ 7% в рекомендуемой дозе - 5 мл на 100 г стандартного рациона питания. Исследования подострой токсичности ЭКМ проводили согласно общепринятым методам, включая интегральные показатели (внешний вид, состояние шерстного покрова, прибавка в массе тела), двигательную активность, а после декапита-ции - гематологические, биохимические и патогистологические исследования (макро- и микроскопию внутренних органов) [9].
В плазме крови измеряли активность аланинами -нотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (АСТ) по методу Райтмана и Френкеля, билирубин (общий, прямой, непрямой) по методу Іеп^єєік-Оі^ с помощью наборов реактивов «Лохема» (Чехия), общий белок по методу, основанному на биуретовой реакции на реактивах «Вектор Бест» (Россия), мочевину в биологической жидкости по реакции с диацетилмо-нооксимом на реактивах «Агат» (Россия) [10]. Соотношение форменных элементов крови (эритроциты, лейкоциты, тромбоциты), гемоглобин определяли на гематологическом аппарате «Кобас микрос» фирмы ЯосИ (Франция).
Микропрепараты для гистологического исследования готовили после предварительной фиксации в течение 24-48 ч в 10%-м нейтральном растворе формалина из кусочков органов толщиной 0,5-1 см. На обзорных препаратах, окрашенных гематоксилин-эозином по стандартной методике [11], изучали гистологическую картину внутренних органов (печень, почка, сердце, надпочечник, тимус, селезенка, яичники, тестикулы).
Как следует из результатов исследования, максимальная доза ЭКМ введенная мышам - 0,5 мл/на 20 г массы тела - не вызвала гибели животных в течение 2 сут наблюдения. Указанная доза соответствует 1,7 л ЭКМ в пересчете на массу тела человека (70 кг) или 34 кг эмульсионной продукции, приготовленной с использованием эмульгатора в количестве 5 г/100 г продукта. Следовательно, ЭКМ с содержанием 7% СВ можно отнести к группе нетоксических веществ.
Введение в рацион питания подопытных крыс изучаемого экстракта в течение 30 дней (подострая токсичность) не вызывало ухудшения их внешнего вида. У опытных, как и у контрольных животных, видимые слизистые были розовые, шерстный покров имел нормальный блеск и обычную густоту. Крысы были активны во всех исследуемых группах, полностью поедали корм, потребляли обычное количество воды, прибавка массы тела происходила равномерно и в контрольных, и в опытной группах. К концу эксперимента в опытной группе самцов отмечалось преобладание массы тела на 10% по сравнению с контролем.
Таблица 1
Группа животных Билирубин, мкмоль/л Общий белок, АЛТ, АСТ, Мочевина,
общий прямой непрямой г/л мкмоль/(мл • ч) мкмоль/(мл • ч) ммоль/л
Контрольная 4,8 ± 0,4 1,4 ± 0,1 3,35 ± 0,2 76,5 ± 6,1 0,54 ± 0,05 0,52 ± 0,04 4,8 ± 0,5
Опытная 4,6 ± 0,3 1,3 ± 0,09 3,4 ± 0,3 75,3 ± 7,1 0,55 ± 0,04 0,53 ± 0,05 4,6 ± 0,5
Таблица 2
Группа животных Базофилы, % Эозинофилы, % Нейтрофилы, % Лимфоциты, % Моноциты, %
палоч. с егмент.
Контрольная 0 1,5 ± 0,1 3,5 ± 0,1 23,6 ± 2,0 65,0 ± 4,0 7,1 ± 0,3
Опытная 0 1,4 ± 0,01 3,4 ± 0,1 22,7 ± 1,5 64,0 ± 3,5 7,0 ± 0,5
Таблица 3
Группа животных Гемоглобин, г/л Эритроциты, 1012 /л Цветной показатель, у.е. Лейкоциты, 109/л Тромбоциты, 109/л
Контрольная 150 ± 9,3 8,5 ± 0,7 16,9 ± 1,4 16,5 ± 9,7 455,0 ± 2,9
Опытная 147 ± 10,4 8,7 ± 0,9 17,2 ± 1,5 17,3 ± 9,9 447,0 ± 46,7
Вскрытие показало, что изучаемые внутренние органы животных были без видимых изменений. При взвешивании не отмечено достоверных отклонений массы внутренних органов опытных животных от контрольных. Определение массы внутренних органов является высокоинформативным тестом в токсикологических исследованиях, так как изменения коэффициента массы внутренних органов при неблагоприятных воздействиях наступают раньше их функциональных нарушений [12]. Гистологическое строение внутренних органов обеих групп также идентично. Патоморфологическим исследованиям внутренних органов должно отдаваться предпочтение при оценке безопасности лекарственных средств, так как адаптационные системы успевают включиться в процесс детоксикации и компенсировать функциональную недостаточность органа-мишени при введении веществ в малых дозах [13].
Биохимические показатели плазмы крови опытных животных не отличались от аналогичных показателей в контрольной группе (табл. 1).
Показатели периферической крови (клеточный состав, гемоглобин, цветной показатель) у подопытных животных оставались в пределах нормы и также не отличались от показателей контрольной группы (табл. 2, 3).
Таким образом, сравнительный анализ результатов проведенных исследований на группах экспериментальных животных позволяет исключить подострую токсичность экстракта из корней мыльнянки лекарственной Saponaria officinalis L., интродуцированной в почвенно-климатических условиях Приморского края, с содержанием сухих веществ 7% в рекомендованной дозе 5 мл на 100 г продукта.
ЛИТЕРАТУРА
1. Пат. 035878. Способ получения майонеза / Е.И. Цыбуль-ко, И.Н. Никитина, Т.П. Юдина и др. // Роспатент, 1995.
2. Инновационность и экономическая привлекательность эмульгаторов на основе корней мыльнянки / Т.П. Юдина, К.И. Сафо -нова, Е.И. Черервач и др. // Масложировая пром-сть. - 2006. - № 5. -С. 30-31.
3. Кремы функционального назначения с эмульгатором из корней мыльнянки / Т.П. Юдина, Е .И. Цыбулько, Т. А. Ершова и др. // Кондитерское производство. - 2004. - № 3. - С. 2-3.
4. Георгиевский В.П. Биологически активные вещества лекарственных растений. - Томск: Томский гос. мед. ин-т ВНИИхи -мии и технологии лекарств, 1990. - 58 с.
5. Токсикологическая химия / Под ред. Т.В. Плетневой. -М.: ГЭОТАР. - Медиа, 2005. - 512 с.
6. Зориков П.С. Биологическая активность экстрактов из дальневосточных и интродуцированных растений: Дис. ... д-ра биол. наук. - Владивосток, 1999. - С. 11-12.
7. Новиков В.Е., Сизов П.И. Рецептура и общая фармако -логия. - Смоленск, 2001. - С. 7-8.
8. Западнюк И.П., Западнюк Е.А., Захария Е.А., Западнюк Б.В. Лабораторные животные: разведение, содержание, ис -пользование в эксперименте. - Киев, 1983. - 360 с.
9. Колхир В.К., Вичканова С.А., Крутикова Н.М. Некоторые аспекты доклинического изучения лекарственных средств природного происхождения // Тр. ВИЛАР. - М., 2000. - С. 186-191.
10. Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимиче -ской лабораторной диагностике. Т. 2. - Минск: Беларусь, 2000. -465 с.
11. Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники. -Л.: Медицина, 1969. - 423 с.
12. Тихонов В.Н., Шитиков В.К. Анализ изменений массы внутренних органов в токсикологическом эксперименте // Фармако -логия и токсикология. - 1984. - № 5. - С. 113-116.
13. Гуськова Т.А. Концепция развития лекарственной токсикологии // Хим.-фармацевт. журн. - 2001. - 35. - № 10. - С. 3-8.
Лаборатория функциональных продуктов питания научно-исследовательского института экономических исследований и наукоемких технологий
Поступила 09.08.07 г.
