Новые производные колхицина -индукторы КСФ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ

21

NN10 на всех генерациях вводили в дозе 9,5 мг/кг, на 1-9 сутки. На каждой генерации проверяли чувствительность каждого штамма к ЦФ, применяемому в терапевтическом режиме (100 мг/кг, 1 и 5 сутки). Полная резистентность штамма Р388 к монотерапии ЦФ развивалась к 8-й генерации. При применении комбинированной терапии, на 8-й генерации опухоль еще сохраняла 100%-ную чувствительность к ЦФ, и в этом случае полная резистентность к ЦФ развивалась лишь к 14-й трансплантационной генерации.

Исследование влияния АК-23 на чувствительность к ММС проводили на штаммах лейкоза Р388, устойчивых к рубомицину (Р388/рн), рубоксилу (Р388/рл), винкристину (Р388/вкр), винбластину (Р388/вбл) и к комбинированной

терапии рубомицином и винкристином (Р388/рн+вкр). Показано, что исходная опухоль Р388 высокочувствительна к ММС (показатель ILS 460%), тогда как резистентные штаммы проявляли к нему перекрестную резистентность. Препарат АК-23 (10 мг/кг) увеличивал чувствительность к ММС первых 3 штаммов в 4,5-5,8 раза, а двух последних -почти в 2 раза. Препарат АК-23 не изменял чувствительности к ММС родительского штамма Р388, и ни на одной из исследованных опухолей не обладал собственной противоопухолевой активностью.

Полученные результаты свидетельствуют, что с помощью доноров монооксида азота можно замедлить скорость развития лекарственной резистентности лейкоза Р388 к ЦФ, и увеличить чувствительность МЛУ-опухолей к ММС.

НОВЫЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЙ ПРЕПАРАТ МОРФОЗОЛ: ВНУТРИКЛЕТОЧНОЕ РАСПРЕДЕЛЕНИЕ И ВЛИЯНИЕ НА СИНТЕЗ ДНК

Л. Б. Горбачева, Л.Ю. Дедерер, А.Г. Тихомиров, Л.И. Очертянова, H.A. Иванова, И.А. Ефименко Институт биохимической физики им. H. М. Эмануэля РАН, Москва Институт общей и неорганической химии им. Н. С.Курнакова РАН, Москва

В 2002 году появилось два сообщения о новом классе комплексных соединений палладия, обладающих высокой противоопухолевой активностью [1,2]. В данной работе изучали внутриклеточное распределение морфозола в клетках меланомы В16 мышей и влияние этого препарата на синтез ДНК в активно пролиферирующих клетках. Мышам Б1 (СВАхС57Б1) однократно вводили морфозол в дозах 20-25 мг/кг (~ 1/2 от МПД). Гомогенаты опухолей подвергали дифференциальному центрифугированию. Дополнительную очистку ядер осуществляли центрифугированием в 2,2 М сахарозе. Чистоту ядер контролировали в фазово-контрастном микроскопе. Все фракции замораживали и подвергали лиофильной сушке. Микроопределение палладия проводили атомно-абсорбционньм методом на спектрофотометре Перкин Элмер модель 2100 с электротермической атомизацией. Пробы фракций гомогената переводили в раствор с помощью микроволновой печи. Синтез ДНК в клетках меланомы В16, костного мозга и селезенки исследовали по включению 2-14С-тимидина в ДНК.

Установлено преимущественное накопление палладия

в ядрах: через 4, 24,48 и 72 ч после введения морфозола содержание палладия (%) составило 0,1; 0,9; 0,17 и 0,053 соответственно. Для фракции митохондрий аналогичные значения были 0,022; 0,60; 0,086; 0,056; для фракции микро-сом - 0,012; 0,025; 0,058; 0,034; для фракции цитозоля- 0,036;

0.088.0,029; 0,034.

Максимальное накопление палладия в ядрах и цитозоле наблюдалось через 24 ч после введения морфозола, причем в ядрах содержание палладия было в 10 раз выше, и в эти же сроки синтез ДНК ингибировался на 35%. В аналогичных условиях цисплатин подавлял синтез ДНК на 75%. Эти отличия могут быть обусловлены тем, что цисплатин и морфозол реагируют с разными сайтами ДНК, поскольку известно, что цисплатин реагирует преимущественно с гуанином, а морфозол, как было показано нами, с гуанином и аденином в одинаковой степени.

1. Трещалин И.Д., Бодягин Д.А., Переверзева Э.Р., Бухман В.М., Ефименко И.А., Либензон A.B. // Российский терапевтический ж., 2002, Т. 1, С. 146

2. Keith Campbell, Creamer Media, 2002, V. 11, P. 22

НОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ КОЛХИЦИНА-ИНДУКТОРЫ КСФ

З.М. Еникеева, Д.А. Алиева, С.Н. Наврузов Республиканский онкологический научный центр М3 РУз

Повышение интенсивности химиотерапии ограничено токсичностью, то есть повреждающим действием ци-тостатиков на нормальные ткани. Токсичность многообразна, и одним из распространенных и опасных ее видов является миелотоксичность. Перспективным подходом для борьбы с миелотоксичностью химиотерапии является применение гемоцитокинов - полипептидов, ускоряющих пролиферацию и дифференцировку предшественников ге-мопоэза после их лекарственного повреждения. В первую очередь, это миелоидные колониестимулирующие факторы: гранулоцитарный колониестимулирующий фактор

№1/том1/2003

(Г-КСФ) и гранулоцитарномоноцитарный (ГМ-КСФ) и эритроидный фактор роста (эритропоэтин). Многие из этих цитокинов играют важную роль не только в гемопо-эзе, но и во многих биологических процессах, в частности в иммуномодуляции.

Ранее было показано, что новые производные колхицина К-42 и К-48 способны увеличивать численность КОЕ от 12 до 60. По всей видимости, эти вещества способствуют индукции КСФ и проявляют свою активность на этапах дифференцировки СКК.

Для выяснения влияния препаратов на дифференци-

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

22

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕПРЕПАРА ТОВ

ровку СКК был проведен эксперимент на беспородных мышах. Испытуемые вещества вводились через 2 часа после облучения в дозе 1 мг/кг перорально. Эта доза, при которой оба эти вещества проявляют максимальную иммуномодулирующую активность. Морфологическое исследование селезенок показало, что К-48 в малых дозах является индуктором ГМ-колоний, в больших же дозах (100мг/кг), введенный в/бр - индуктором М-колоний, то есть значи-

тельно стимулирует мегакариоцитарный росток.

Видимо, малые дозы новых соединений К-42 и К-48, обладая способностью стимулировать выброс большего числа эндогенных колоний в селезенке, индуцируют также их дифференцировку в сторону появления определенных колоний, а также появления иммуномодулирующей активности, что далее сказывается в их значимом противоопухолевом эффекте.

ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ АКТИВНОСТЬ НОВЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ТРОПОЛОНОВЫХ АЛКАЛОИДОВ

З.М. Еникеева, Д. А. Алиева, Т. М. Фузаилова, О.Ю. Баленков, НуруллаеваД.Ш., Агзамова H.A. Республиканский онкологический научный центр М3 РУз

В лаборатории антимитотических препаратов РОНЦ получен большой ряд оригинальных веществ на основе ми-тозтормозящих алкалоидов колхицина и колхамина, выделяемых из растений местной флоры. Вещества обладают меньшей токсичностью и высокой противоопухолевой активностью, которая объясняется сочетанием антимитоти-ческого, алкилирующего и иммуномодулирующего механизмов действия, а также индукцией стволовых кроветворных клеток.

На широком спектре перевивных опухолей животных показана высокая противоопухолевая активность соединений К-42 и К-48, отобранных в предварительных экспериментах, которые, соответственно, в 30 и 360 раз менее токсичны, чем колхицин и в 2,5 и 26 раз, чем колхамин, при более значительном противоопухолевом эффекте, который превышает активность колхицина и применяемого в онкологии колхамина на 20-70%, а также в ряде случаев цикло-фосфана, использованного в качестве контроля. Значительным показателем при лечении животных является процент рассосавшихся опухолей, который наиболее выражен при действии препарата К-42 (от 30 до 66%).

К-48 в дозе 1 ООмг/кг (МПД= 150 мг/кг) при внутрибрю-

шинном введении проявил значительную противоопухолевую активность на штаммах: КСУ - 97%; АКАТОЛ - 92%,; АКАТОН - 93%; РШМ-5 - 71%; и менее значительную на С-45 - 61%; Меланоме В-16 - 56%. Во всех опытах отмечались рассосавшиеся опухоли (от 17 до 36%). При проверке этого препарата, введенного перорально (при котором токсичность снижалась на порядок) на трех штаммах в дозах 250

- 500 мг/кг, показано торможение роста равное 62-72%, Интересно, что этот препарат, введенный в дозе 1 мг/кг как внутрибрюшинно, так и перорально, подавлял рост трех опухолей на 50-62%.

К-42 в дозе 12 мг/кг (МПД) тормозил рост: КСУ на 96%; С-45 - 75%; АКАТОН - 97%; АКАТОЛ - 86%; РШМ-5

- 84%; Меланома В-16 - 62%, АКЭ(7,5 мг/кг) - 220% (СПЖ). Препарат, введенный перорально (ЛД50 снижалась в 20 раз) в дозе 40 мг/кг, на штамме АКАТОН, показал торможение роста равное 72%.

Цитогенетические исследования этих препаратов в терапевтических дозах показали отсутствие их мутагенных свойств в отношении клеток костного мозга, в тестах не наблюдали хромосомных аберраций, К-митозов и полиплоидии.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ДИНАМИЧЕСКОГО КИНЕТИЧЕСКОГО РАЗДЕЛЕНИЯ ДЛЯ СИНТЕЗА СУБСТАНЦИИ ПРЕПАРАТА ЦИФЕЛИН

Е.А. Ждановаа, Н.З. Солиеваа, И.М. Букринаа, Л.Ш. Садретдиноваа, Л.И. Смирноваъ, В. П. Краснов0 аИнститут органического синтеза УрО РАН, г. Екатеринбург ь Российский онкологический научный центр РАМН им. H.H. Блохина

Потребности медицины в стереоизомерно чистых лекарственных препаратах стимулирует развитие новых эффективных методов асимметрического синтеза. Одним из таких методов является метод динамического кинетического разделения (ДКР).

Противоопухолевый препарат цифелин представляет собой стереоизомер дипептида (1а). Традиционные методы синтеза дипептидов из производных рацемических аминокислот приводят, как правило, к смесям, содержащим около 50% каждого из диастереомеров.

Повышение эффективности получения субстанции

R*, /Р ЫН2-СН-СН(СН,)2

R-QH-COOH CICOOAIk І-------------Г і_„.

Ас-L ' ТЭЛ.ТГ© * nY° -------------2221------•

2 Me

?

----► Ac-NH-CH-C-NH-CH-CH(CH3)2

R COOEt

R= CH2-On(CH2CH2CI)2

la: L-D' + D-L' lb: L-L' + D-D'

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

№1/том1/2003