CC BY
46
20
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
Было показано, что по характеру поведения в магнитном поле полученные микросферы являются магнитомягкими ферромагнетиками. Достаточно высокая намагниченность насыщения (14 е.т.и.^) в сочетании с низкими остаточной намагниченностью (0,1 е.т.и./я) и коэрцитивной силой дают возможность концентрировать частицы в магнитных полях доступной напряженности (1500 - 2000 Э) и использовать минимальное количество микросфер при проведении сепарации клеток.
Анализ размеров показал, что разработанная методика синтеза позволяет получать образцы частиц со средним диаметром от 300 нм до 1,5 мкм.
Сродство полученных микросфер к иммуноглобулинам зависело от условий активации поверхности, заметно возрастая при увеличении количества активирующего аген-
та. Требуемых значений сорбционной емкости и наиболее прочной связи между магнитньм носителем и векторными молекулами удается достичь использованием при активации избытка w-Ts-CL.
Эффективность селекции с использованием имму-носпецифических конъюгатов на основе исследованных магнитных микрочастиц и моноклональных антител против поверхностных антигенов гемопоэтичес-ких клеток человека (CD3, CD4, CD8, CD20, CD34) составляет 95 - 98%.
Предлагаемый комплекс аналитических методов, модифицированных с учетом специфики исследуемого материала и определенные нами оптимальные физико-химические критерии, могут стать основой для стандартизации биомагнитных сорбентов.
ГИДРОХЛОРИД АМИРОНА - НОВОЕ СОЕДИНЕНИЕ С ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ
И.С. Голубева, Н.П. Яворская, Н.А. Чикинева, Л. И. Смирнова, Л. П. Сушинина, Е.Н. Глибин1 Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН 1 Санкт-Петербургский технологический университет
Гидрохлорид амирона - производное ВЪ-а-мино-Ь{п-ди(2-хлорэтил)аминофенокси]фенил}-пропионовой кислоты, полученное в результате совместных исследований сотрудников РОНЦ РАМН и Санкт-Петербургского технологического университета. Целью работы стало изучение противоопухолевой активности субстанции гидрохлорида амирона в широком диапазоне доз с использованием различных режимов введения соединения.
Гидрохлорид амирона, в отличие от амирона, при пятикратном пероральном введении на модели Са-755 с интервалом 24 часа в дозах от 40 до 400 мг/кг показывает выраженную дозовую зависимость противоопухолевого эффекта, которая четко видна как непосредственно после окончания лечения, так и на 17-й день после начала опыта. Минимальной действующей дозой можно считать дозу 40 мг/кг. Высокий стойкий противоопухолевый эффект на Са-755 гидрохлорид амирона вызывает в дозах от 100 до 200 мг/кг. Оптимальной терапевтической дозой, вызывающей максимальный противоопухолевый эффект на 17-й день (87% ТРО), является доза 150 - 200 мг/кг, суммарная доза -
750-1000 мг/кг. Необходимо отметить, что гидрохлорид амирона в дозе 200 мг/кг вызывал увеличение продолжительности жизни мышей на 44%, что статистически достоверно отличается от контроля.
При изучении различных режимов введения вещества показано, что режим однократного применения гидрохлорида амирона является неэффективным: противоопухолевая активность ни в одной из тестируемых доз (200, 300, 400 мг/кг) не сохранилась до 21-го дня после перевивки опухоли (ТРО=35-51%). При двукратном введении гидрохлорида амирона через 96 часов в дозах от 100 до 300 мг/кг выраженного противоопухолевого эффекта не отмечено, из них наиболее эффективной оказалась токсичная доза 300 мг/кг (ТРО на 7-й день после перевивки опухоли = 75% (р=0,05), однако, к 21-му дню опыта ТРО снижалось до 47%.
Таким образом, показано, что ежедневное пятикратное введение препарата оказалось наиболее эффективным, оптимальная терапевтическая доза составила 150-200 мг/кг (ТРО = 87%).
ДОНОРЫ ОКСИДА АЗОТА КАК МОДУЛЯТОРЫ ЛЕКАРСТВЕННОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОПУХОЛЕЙ
С.А. Гончарова, Т.А. Раевская, Н.П. Коновалова, В. Т. Кагия1 Институт Проблем химической физики РАН, Черноголовка
1Кинки центр по изобретениям., Киото.
В работе исследовано влияние доноров монооксида азота из класса органических нитратов (препарат ЫМО) на развитие устойчивости лейкоза Р388 мышей к цикло-фосфану (ЦФ) и влияние донора монооксида азота из класса триазолов (препарат АК-23) на чувствительность к ми-томицину С (ММС) ранее полученных штаммов лейкоза Р388, обладающих генотипом и фенотипом множествен-
ной лекарственной устойчивости (МЛУ).
Для развития резистентности к ЦФ использовали метод последовательной перевивки опухоли от животных, которых лечили одним ЦФ или ЦФ в комбинации с НМО. ЦФ вводили на 1 и 5 сутки после перевивки, дозы его в ряду трансплантационных генераций увеличивали от 5мг/кг до 70 мг/кг, одинаково в двух параллелях опытов. Препарат
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
№1/том1/2003
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
21
NN10 на всех генерациях вводили в дозе 9,5 мг/кг, на 1-9 сутки. На каждой генерации проверяли чувствительность каждого штамма к ЦФ, применяемому в терапевтическом режиме (100 мг/кг, 1 и 5 сутки). Полная резистентность штамма Р388 к монотерапии ЦФ развивалась к 8-й генерации. При применении комбинированной терапии, на 8-й генерации опухоль еще сохраняла 100%-ную чувствительность к ЦФ, и в этом случае полная резистентность к ЦФ развивалась лишь к 14-й трансплантационной генерации.
Исследование влияния АК-23 на чувствительность к ММС проводили на штаммах лейкоза Р388, устойчивых к рубомицину (Р388/рн), рубоксилу (Р388/рл), винкристину (Р388/вкр), винбластину (Р388/вбл) и к комбинированной
терапии рубомицином и винкристином (Р388/рн+вкр). Показано, что исходная опухоль Р388 высокочувствительна к ММС (показатель 1ЬЭ 460%), тогда как резистентные штаммы проявляли к нему перекрестную резистентность. Препарат АК-23 (10 мг/кг) увеличивал чувствительность к ММС первых 3 штаммов в 4,5-5,8 раза, а двух последних -почти в 2 раза. Препарат АК-23 не изменял чувствительности к ММС родительского штамма Р388, и ни на одной из исследованных опухолей не обладал собственной противоопухолевой активностью.
Полученные результаты свидетельствуют, что с помощью доноров монооксида азота можно замедлить скорость развития лекарственной резистентности лейкоза Р388 к ЦФ, и увеличить чувствительность МЛУ-опухолей к ММС.
НОВЫЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЙ ПРЕПАРАТ МОРФОЗОЛ: ВНУТРИКЛЕТОЧНОЕ РАСПРЕДЕЛЕНИЕ И ВЛИЯНИЕ НА СИНТЕЗ ДНК
Л.Б. Горбачева, Л.Ю. Дедерер, А.Г. Тихомиров, Л.И. Очертянова, Н.А. Иванова, И.А. Ефименко Институт биохимической физики им.. Н. М. Эмануэля РАН, Москва Институт общей и неорганической химии им. Н. С.Курнакова РАН, Москва
В 2002 году появилось два сообщения о новом классе комплексных соединений палладия, обладающих высокой противоопухолевой активностью [1,2]. В данной работе изучали внутриклеточное распределение морфозола в клетках меланомы В16 мышей и влияние этого препарата на синтез ДНК в активно пролиферирующих клетках. Мышам Б1 (СВАхС57Б1) однократно вводили морфозол в дозах 20-25 мг/кг (~ 1/2 от МПД). Гомогенаты опухолей подвергали дифференциальному центрифугированию. Дополнительную очистку ядер осуществляли центрифугированием в 2,2 М сахарозе. Чистоту ядер контролировали в фазово-контрастном микроскопе. Все фракции замораживали и подвергали лиофильной сушке. Микроопределение палладия проводили атомно-абсорбционньм методом на спектрофотометре Перкин Элмер модель 2100 с электротермической атомизацией. Пробы фракций гомогената переводили в раствор с помощью микроволновой печи. Синтез ДНК в клетках меланомы В16, костного мозга и селезенки исследовали по включению 2-14С-тимидина в ДНК.
Установлено преимущественное накопление палладия
в ядрах: через 4, 24,48 и 72 ч после введения морфозола содержание палладия (%) составило 0,1; 0,9; 0,17 и 0,053 соответственно. Для фракции митохондрий аналогичные значения были 0,022; 0,60; 0,086; 0,056; для фракции микро-сом - 0,012; 0,025; 0,058; 0,034; для фракции цитозоля- 0,036;
0.088.0,029; 0,034.
Максимальное накопление палладия в ядрах и цитозоле наблюдалось через 24 ч после введения морфозола, причем в ядрах содержание палладия было в 10 раз выше, и в эти же сроки синтез ДНК ингибировался на 35%. В аналогичных условиях цисплатин подавлял синтез ДНК на 75%. Эти отличия могут быть обусловлены тем, что цисплатин и морфозол реагируют с разными сайтами ДНК, поскольку известно, что цисплатин реагирует преимущественно с гуанином, а морфозол, как было показано нами, с гуанином и аденином в одинаковой степени.
1. Трещалин И.Д., Бодягин Д.А., Переверзева Э.Р., Бухман В.М., Ефименко И.А., Либензон А.В. // Российский терапевтический ж., 2002, Т. 1, С. 146
2. Keith Campbell, Creamer Media, 2002, V. 11, P. 22
НОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ КОЛХИЦИНА-ИНДУКТОРЫ КСФ
З.М. Еникеева, Д.А. Алиева, С.Н. Наврузов Республиканский онкологический научный центр М3 РУз
Повышение интенсивности химиотерапии ограничено токсичностью, то есть повреждающим действием ци-тостатиков на нормальные ткани. Токсичность многообразна, и одним из распространенных и опасных ее видов является миелотоксичность. Перспективным подходом для борьбы с миелотоксичностью химиотерапии является применение гемоцитокинов - полипептидов, ускоряющих пролиферацию и дифференцировку предшественников ге-мопоэза после их лекарственного повреждения. В первую очередь, это миелоидные колониестимулирующие факторы: гранулоцитарный колониестимулирующий фактор
№1/том1/2003
(Г-КСФ) и гранулоцитарномоноцитарный (ГМ-КСФ) и эритроидный фактор роста (эритропоэтин). Многие из этих цитокинов играют важную роль не только в гемопо-эзе, но и во многих биологических процессах, в частности в иммуномодуляции.
Ранее было показано, что новые производные колхицина К-42 и К-48 способны увеличивать численность КОЕ от 12 до 60. По всей видимости, эти вещества способствуют индукции КСФ и проявляют свою активность на этапах дифференцировки СКК.
Для выяснения влияния препаратов на дифференци-
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
