CC BY
4ны с использованием стекловолокнистых сорбентов в присутствии октановой кислоты. Относительная экспрессия микроРНК была оценена методом stem-loop RT-PCR. Статистическую обработку данных проводили в программе MedCalc Statistical Software.
Результаты
С помощью однофакторного дисперсионного анализа ANOVA выявлены дифференциально-экспресси-рованные пары микроРНК: 16 пар микроРНК ВВ и 17 пар микроРНК БкФ.
Выводы
Выявлены пары микроРНК, относительная экспрессия которых была больше у ГЧРПЖ, чем у
КРРПЖ: 19/375, 30/375, 31/92, 31/200, 31/205, 31/375, 92/375, 125/200, 125/375, 125/600, 200/375, 205/375 (ВВ); 31/200, 125/200, 205/660 (БкФ); меньше ГЧРПЖ, чем у КРРПЖ: 30/31, 30/125, 92/125, 375/660 (ВВ); 19/30, 19/31, 19/92, 19/125, 19/200, 19/205, 19/375, 19/660, 30/31, 30/125, 30/205, 92/205, 125/205, 200/205 (БкФ). На основе полученных результатов были сформированы диагностические алгоритмы: для микроРНК БкФ мочи — состоящий из трех пар микроРНК (19/200, 19/205, 200/205) и позволяющий диагностировать больных КРРПЖ с точностью 100%; для микроРНК ВВ мочи — состоящий из трех пар микроРНК (30/31, 92/125, 125/200) и позволяющий диагностировать 90% больных КРРПЖ.
Список литературы
1. Konoshenko M .Y et al ., miRNAs and androgen deprivation therapy for prostate cancer // Biochim Biophys Acta Rev Cancer. 2021. 1876 (2) . Р. 188625 .
2 . Konoshenko M .Y et . al . The Panel of 12 Cell-Free MicroRNAs as Potential Biomarkers in Prostate Neoplasms // Diagnostics . 2020 .10 (1) . Р. 38 .
Микрофлюидный анализ эритроцитов при действии базовых препаратов химиотерапии in vitro
Авторы
Букатин Антон Сергеевич, [email protected], ФГБУ ВОиН «Санкт-Петербургский национальный исследовательский академический университет им. Ж.И. Алферова РАН», ФГБУН Институт аналитического приборостроения РАН, Санкт-Петербург
Скверчинская Елизавета Арнольдовна, [email protected], ФГБУН Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН, ФГБУ ВОиН «Санкт-Петербургский национальный исследовательский академический университет им. Ж.И. Алферова РАН, Санкт-Петербург
Иванов Александр Сергеевич, [email protected], ФГАОУ ВО «Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого», ФГБУ ВОиН «Санкт-Петербургский национальный исследовательский академический университет им. Ж.И. Алферова РАН», Санкт-Петербург
Миндукшев Игорь Викторович, [email protected], ФГБУН Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН, Санкт-Петербург
Левдарович Надежда Андреевна, [email protected], ФГБУ ВОиН «Санкт-Петербургский национальный исследовательский академический университет им. Ж.И. Алферова РАН, Санкт-Петербург
Ключевые слова:
эритроциты, химиотерапия, микрофлюидика
Актуальность
Мониторинг состояния пациента при химиотерапии (ХТ) включает в себя численную оценку клеток крови, но не оценку их функционального состояния. Эритроциты с нарушениями деформируемости удаляются из циркуляции, а если расход не компенсируется образованием эритроцитов de novo, развивается состояние гемолитической анемии [1]. Нарушение деформационных характеристик эритроцитов приводит к возникновению локальных зон гипоксемии, что снижает апоптотический потенциал ХТ и ухудшает прогноз лечения. Моделирование условий прохождения эритроцитов по капиллярам в микроканалах микрофлюидного устройства позволяет проследить
связь между биофизическими параметрами эритроцитов (форма, размер, жесткость) и цитологическим состоянием, т.е. оценивать вклад трансформации мембран в динамику микроциркуляции [2, 3].
Цель
Оценка способности эритроцитов, подвергнутых действию препаратов ХТ, двигаться в искусственных капиллярах микрофлюидного устройства.
Материалы и методы
Отмытые эритроциты здоровых доноров инкубировали с коммерческими препаратами: паклитакселом (TAX), оксалиплатином (PLAT), циклофосфамидом,
доксорубицином. Дозы соответствовали рекомендованным максимальным терапевтическим дозам. Проточную цитометрию (CytoFlex, BC) использовали для оценки витальности клеток (Calcein-am), трансформации мембран (Annexin V-FITC; Eosin5-maleimide), генерации АФК (DCF-DA). Конфокальная и атом-но-силовая микроскопия использована для оценки морфологии и жесткости мембран (модуль Юнга); лазерная дифракция — для оценки осмотической хрупкости. Скорость движения эритроцитов в микроканалах (3^2x200 мкм) определяли по видео, полученному на микроскопе Leica DM4000B с помощью камеры XIMEA MC023MG-SY; обработка видеофайлов — MATLAB; статистика GraphPad Prism8.
Результаты
Выявлены значимые цитологические нарушения эритроцитов при действии всех исследованных препаратов — снижение активности внутриклеточных эстераз (витальность), нарушение липидной асимме-
трии. Наибольшей травматичностью для эритроцитов обладали препараты таксанов, поскольку механизм их действия затрагивает многие белки цитоскелета. По данным конфокальной микроскопии установлены грубые нарушения формы при обработке TAX и TAX-PLAT — стоматоцитоз, множественные каверны мембраны, для остальных препаратов — единичные нарушения. Микрофлюидный анализ показал, что действие препаратов ХТ вызывает появление субпопуляции эритроцитов с нарушенными параметрами микрореологии — снижение скорости движения в микроканалах, окклюзии, повышение адгезии к стенкам каналов.
Выводы
Нарушения поведения эритроцитов в микропотоке могут рассматриваться как значимая часть механизма развития анемии при онкологии — цитологическая травма эритроцитов препаратами ХТ приводит к нарушению микрореологии. Работа выполнена при поддержке РНФ 22-24-00998.
Список литературы
1. Frontiers in Physiology 2018 . 9 . DOI . org/10 . 3389/fphys . 2018 . 00656 .
2 . Cells 2021. 10 (12) . Р 3552 . doi . org/10 . 3390/cells10123552 .
3 . Membranes 2022 . 12 (2) . Р 217 . DOI . org/10 ,3390/membranes12020217 .
Мутационная сигнатура алкилирования ДНК, ассоциированная с SDHB-мутацией, при вагальной параганглиоме
Авторы
Снежкина Анастасия Владимировна, [email protected], ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, Москва
Кобеляцкая Анастасия Андреевна, [email protected], ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, Москва
Калинин Дмитрий Валерьевич, [email protected], ФГБУ «НМИЦ хирургии им. А.В. Вишневского» Минздрава России, Москва
Федорова Мария Сергеевна, [email protected], ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, Москва
Павлов Владислав Сергеевич, [email protected], ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, Москва
Пудова Елена Анатольевна, [email protected], ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, Москва
Головюк Александр Леонидович, [email protected], ФГБУ «НМИЦ хирургии им. А.В. Вишневского» Минздрава России, Москва
Краснов Георгий Сергеевич, [email protected], ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Эн-гельгардта РАН, Москва
Кудрявцева Анна Викторовна, [email protected], ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Эн-гельгардта РАН, Москва
Ключевые слова:
параганглиомы головы и шеи, SDHx, мутации, мутационные сигнатуры, повреждение ДНК
Актуальность SDHx. Однако соматические изменения и молекуляр-
Параганглиомы головы и шеи являются редкими ные механизмы, приводящие к развитию как спора-
нейроэндокринными опухолями, которые часто ас- дических, так и наследственных форм, не до конца
социированы с герминальными мутациями в генах ясны.
