CC BY
33
ПРОБЛЕМЫ ФАРМАКОЛОГИИ И КЛИНИЧЕСКОЙ ФАРМАКОЛОГИИ
А. П. ГАЛЕНКО-ЯРОШЕВСКИЙ1, И. А. ВАРЛАШКИНА12, X. П. ТАХЧИДИ3, Б. Э. МАЛЮГИН3, С. Н. САХНОВ4
МЕСТНОАНЕСТЕЗИРУЮЩИЕ СВОЙСТВА СОЧЕТАНИЯ ПРОИЗВОДНОГО ИМИДАЗОБЕНЗИМИДАЗОЛА РУ-1117 С ВИЗИТОНОМ-ПЭГ В УСЛОВИЯХ ПОВЕРХНОСТНОЙ АНЕСТЕЗИИ РОГОВИЦЫ ГЛАЗА
1 Кафедра фармакологии Адыгейского филиала Кубанского государственного медицинского университета,
2 Краснодарский филиал Южного бюро РАМН,
3ФГУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С. Н. Федорова Росздрава»,
4Краснодарский филиал ФГУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С. Н. Федорова Росздрава»
Известно, что визитон-ПЭГ (визитон лазерный), разработанный в ФГУ МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С. Н. Федорова Росздрава», предназначен для защиты переднего эпителия глаза при кератотомии и лазерном воздействии [8]. Оперативные вмешательства с использованием вискоэластиков, к которым относится визитон-ПЭГ, сопровождаются применением обезболивающих средств, включая местные анестетики [4, 5, 7].
Показано, что производное имидазобензимидазо-ла с лабораторным шифром РУ-1117 является перспективным веществом в плане использования его в офтальмологической практике в качестве анестетика для поверхностного обезболивания [2, 3].
Целью работы явилось определение местноанестезирующих свойств сочетания РУ-1117 с визитоном-ПЭГ в условиях поверхностной анестезии роговицы глаза.
Материалы и методы
Работа выполнена на 60 белых нелинейных мы-шах-самцах и 40 кроликах (80 глаз) обоего пола массой 0,018-0,032 и 2,5-3,2 кг соответственно.
Исследования проведены согласно методическим указаниям по изучению местноанестезирующей активности фармакологических веществ [6, 12] и в соответствии со статьей 11-й Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации (1964), «Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных» (1985) и Правилами лабораторной практики в Российской Федерации (приказ М3 РФ № 267 от 19.06.2003 г).
Поверхностную анестезию сочетания РУ-1117 + ви-зитон-ПЭГ, а также РУ-1117 + физиологический раствор (физраствор), взятого для сравнения, исследовали в экспериментах на роговице глаз кроликов с использованием метода Ренье-Валета [10], при этом параллельно изучали возможное раздражающее действие по Бе^юаг [13].
Острую токсичность сочетаний исследовали (определяли среднюю летальную (смертельную) дозу -ЛД50) в опытах на мышах при их подкожном введении [9].
Соединение РУ-1117 растворяли в официнальных 1%-ном растворе визитона-ПЭГ (производится ООО «Научно-экспериментальное производство «Микрохирургия глаза» ФГУ «МНТК «Микрохирургия глаза» Росздрава» по ТУ-9393-008-29039336-2005 и регистрационному удостоверению Росздравнадзора ФС 01031475/ 1140-05) и физрастворе.
Статистическую обработку данных, учитываемых в градированной форме, проводили по М. Л. Беленькому [1] и с помощью таблиц Н. Н. Самойлова [11]. Учет результатов исследований, выраженных в альтернативной форме, определение ЛД50, средних эффективных концентраций (ЭК50), границ доверительного интервала и терапевтических индексов (ЛД50/ЭК50) или широты терапевтического действия (ШТД) осуществляли по методам, описанным В. Б. Прозоровским [9] и М. Л. Беленьким [1]. Расчет площадей полного (ЭПО) и общего профилей обезболивания (ЭОПО), находящихся под кривыми, отражающими зависимость «глубина анестезии» - продолжительность обезболивающего действия, проводили планиметрически с использованием разработанных на кафедре фармакологии Кубанского государственного медицинского университета программ для ЭВМ 1ВМ РС ХТ.
Результаты исследования
Проведенные исследования показали, что в условиях поверхностной анестезии в опытах на роговице глаз кроликов минимальной анестезирующей концентрацией (по РУ-1117) как для сочетания РУ-1117 + ви-зитон-ПЭГ так и для РУ-1117 + физраствор является 0,0125%. Максимальной концентрацией (по РУ-1117), вызывающей 100%-ную анестезию в течение 60 мин, индексы Ренье которой равны 1300,0, оказалась для
УДК 615.216.2
Таблица 1
Сравнительная активность (по индексам Ренье и Валета) сочетаний РУ-1117 + визитон-ПЭГ и РУ-1117 + физраствор при поверхностной анестезии
в опытах на роговице глаз кроликов
Концентрация, % Индексы Ренье1 Индексы Валета относительно РУ-1117 + физраствор
РУ-1117 + визитон-ПЭГ РУ-1117 + физраствор
0,0125 591,0 ± 27,5 28,9 ± 6,8 -
(524,9 4- 657,1) (12,5 4- 45,2)
0,025 1175,0 ± 59,1 633,2 ± 25,0 1,9
(1033,1 4- 1316,9) (573,2 4 693,3) (0,0134)
0,05 1300,0 851,1 ± 22,8 1,9
(796,4 4 905,9) (0,0263)
0,1 1300,0 1056,2 ± 22,0 1,4
(1003,6 ± 1108,9) (0,0699)
0,25 1295,5 ± 4,0
(1286,0 4 1305,0)
0,5 1300,0
Представлены средние арифметические, вычисленные из 8 опытов, со стандартной ошибкой средней.
Примечание: в скобках: круглых - доверительные границы при р = 0,05, квадратных - эквивалентные анестетические концентрации для РУ=1117 + визитон-ПЭГ.
Таблица 2
Сравнительная активность [по ЭК50 и терапевтическому индексу (широте терапевтического действия)] сочетаний РУ1117 + визитон-ПЭГ и РУ-1117 + физраствор при поверхностной анестезии в опытах на роговице глаз кроликов
Сочетание Местноанестезирующая активность Токсичность 0,05%-ного раствора при подкожном введении мышам Терапевтический индекс
ЭК501, % Относитель- ная ЛД50, мг/кг Относи- тельная Абсолютный Относи- тельный
РУ-1117 + визитон-ПЭГ 0,012 (24) (0,009 4 0,016) 3,3 52,5 (30) (49,2 4 56,1) 0,71 4375,0 4,7
РУ-1117 + физраствор 0,040 (48) (0,027 4 0,059) 1,0 37,5 (30) (35,5 4 39,4) 1,0 937,5 1,0
1При расчете ЭК50 сочетания РУ-1117 + визитон-ПЭГ взяты индексы Ренье при концентрациях РУ-1117, соответствующие 0,0125, 0,025 и 0,05%.
Примечание: в скобках: квадратных - количество опытов, круглых - доверительные границы при р = 0,05.
комбинации РУ-1117 + визитон-ПЭГ 0,05%, а для РУ-1117 + физраствор - 0,5%, т. е. для первого сочетания она была в 10 раз меньше. Индексы Ренье для РУ-1117 + визитон-ПЭГ в 0,0125, 0,025, 0,05 и 0,1%-ном растворах составляют 591,0, 1175,0, 1300,0 и 1300,0, а для РУ-1117 + физраствор в 0,0125, 0,025, 0,05, 0,1, 0,25 и 0,5%-ном растворах - 28,9, 633,2, 851,1, 1056,2, 1295,5 и 1300,0 соответственно. Индексы Валета для
сочетания РУ-1117 + визитон-ПЭГ относительно РУ-1117 + физраствор, взятого для сопоставления в 0,025, 0,05, и 0,1%-ном растворах (по РУ-1117), составили 1,9, 1,9 и 1,4 соответственно, при этом эквивалентные анестетические концентрации равны 0,0134, 0,0263 и 0,0699% соответственно (табл. 1). Важно отметить, что РУ-11117 + визитон-ПЭГ, как и РУ-1117 + физраствор, ни в одной из исследованных концентраций
Таблица 3
Сравнительная характеристика временных параметров действия сочетаний РУ-1117 + визитон-ПЭГ и РУ-1117 + физраствор при поверхностной анестезии в опытах на роговице глаз кроликов
Сочетание Концентрация, % Начало анестезии, мин Начало полной анестезии, мин Окончание полной анестезии, мин Общая п родолжител ьность анестезии, мин
РУ-1117 + визитон-ПЭГ 0,0125 2,0 + 0,0* ^і- СО 0, 4, +1 -I* ,8 ,9 3, (2, 23,1 + 0,9 (21,0 4 25,3) 34,4 + 1,5* (30,9 4 37,9)
РУ-1117 + физраствор 0,0125 3,0 + 0,0 - - 21,32 + 0,8 (19,3 4 23,2)
РУ-1117 + визитон-ПЭГ 0,025 2,0 + 0,0 3,2 + 0,2 (2,7 4 3,8) 51,9 + 2,8* (45,2 4 58,5) 73,1 + 2,1* (68,2 4 78,1)
РУ-1117 + физраствор 0,025 2,0 + 0,0 3,8 + 0,4 (2,9 4 4,6) 18,8 + 0,8 (216,8 4 20,7) 43,1 + 4,8 (31,8 4 54,5)
РУ-1117 + визитон-ПЭГ 0,05 2,0 + 0,0 3,0 + 0,0 109,4 + 3,1* (102,2 4 116,6) 128,8 + 1,6* (125,1 4 132,4)
РУ-1117 + физраствор 0,05 2,0 + 0,0 3,5 + 0,3 (2,7 4 4,3) 28,8 + 1,2 (25,8 4 31,7) 53,8 + 0,8 (51,8 4 55,7)
РУ-1117 + визитон-ПЭГ 0,1 2,4 + 0,2 (1,9 4 2,8) 3,8 + 0,4 (2,9 4 4,6) 100,6 + 3,1* (93,4 4 107,8) 121,2 + 0,8* (119,3 4 123,2)
РУ-1117 + физраствор 0,1 2,4 + 0,2 (1,9 ^ 2,8) 3,4 + 0,2 (2,9 4 3,8) 35,6 + 1,8 (31,5 4 39,8) 68,1 + 0,9 (66,0 4 70,3
* р < 0,001.
Примечание: в скобках - доверительные границы при р = 0,05.
не оказывали раздражающего действия на ткани переднего отдела глаза.
По местноанестезирующей активности при сопоставлении ЭК50, выраженных в % по содержанию в сочетаниях РУ-1117, и терапевтических индексов РУ-1117 + визитон-ПЭГ в 3,3 раза более значимо и в 4,7 раза имеет большую ШТД, чем РУ-1117 + физраствор (табл. 2).
Выявлено (табл. 3), что время наступления анестезии при инстилляции в конъюнктивальный мешок глаза равнозначных (одинаковых концентраций по РУ-1117 - 0,025, 0,05 и 0,1%) растворов РУ-1117 + визи-тон-ПЭГ и РУ-1117 + физраствор было практически сопоставимо и колебалось в пределах 2-3 минут. Исключение составляли 0,0125%-ные растворы РУ-1117 + визитон-ПЭГ и РУ-1117 + физраствор, при этом
Рис. 1. Местнообезболивающая активность сочетаний РУ-1117 (0,025%) + визитон-ПЭГ и РУ-1117 (0,025%) + физраствор при поверхностной анестезии в опытах на роговице глаз кроликов
Рис. 2. Местнообезболивающая активность сочетаний РУ-1117 (0,05%) + визитон-ПЭГ и РУ-1117 (0,05%) + физраствор при поверхностной анестезии в опытах на роговице глаз кроликов
Рис. 3. Местнообезболивающая активность сочетаний РУ-1117 (0,1%) + визитон-ПЭГ и РУ-1117 (0,1%) + физраствор при поверхностной анестезии в опытах на роговице глаз кроликов
В структуре графиков: графики (линейные и столбиковые диаграммы), отражающие местноанестезирующую активность сочетаний РУ-1117 + визитон-ПЭГ и РУ-1117 + физраствор.
В структуре графиков: линейные диаграммы - зависимость «глубина анестезии» - время обезболивающего действия сочетаний РУ-1117 + визитон-ПЭГ и РУ-1117 + физраствор» (□); столбиковые диаграммы: внизу - начало и окончание полной и общей (продолжительность) анестезии,
справа - Бпо и 5опо.
Обозначения: общая (а) и полная (б) анестезия, вызываемая сочетанием РУ-1117 + физраствор; общая (в) и полная (г) анестезия, индуцируемая сочетанием РУ-1117 + визитон-ПЭГ. Звездочки над линейными диаграммами и светлые кружки у основания доверительных интервалов столбиковых диаграмм - различия статистически достоверны при р = 0,05.
при использовании первого сочетания (2,0 мин) обезболивающий эффект наступал в 1,5 раза быстрее, чем второго (3,0 мин). Важно также отметить, что РУ-1117 + визитон-ПЭГ и РУ-1117 + физраствор, взятые в 0,1%-ной концентрации (по РУ-1117), индуцировали наступление анестезии (2,4 и 2,4 мин) в 1,4 раза позже, чем 0,05%-ные растворы этих сочетаний (2,0 и 2,0 мин).
По времени наступления полной (100%-ной) анестезии РУ-1117 + визитон-ПЭГ и РУ-1117 + физраствор во всех исследованных растворах существенно не отличались; полный обезболивающий эффект наступал через 3-5 минут. Исключение составлял 0,0125%-ный раствор РУ-1117 + физраствор, который не вызывал полной анестезии. Время окончания полного
обезболивающего эффекта под влиянием 0,0125, 0,025, 0,05 и 0,1%-ного раствора РУ-11117 + визитон-ПЭГ составляло 23,1, 51,9, 109,4 и 100,6 мин, тогда как при использовании РУ-1117 + физраствор в 0,025, 0,05 и 0,1%-ной концентрациях - 18,8, 28,8 и 35,6 мин, т. е. РУ-1117 + визитон-ПЭГ в соответствующих растворах в 2,8, 3,8 и 2,8 раза превосходило РУ-1117 + физраствор соответственно. Общая продолжительность анестезии при применении РУ-1117 + визитон-ПЭГ в 0,0125, 0,025, 0,05 и 0,1%-ном растворах составляла 34,4, 73,1, 128,8 и 121,2 мин, а в случаях использования РУ-1117 + физраствор в аналогичных растворах - 21,2, 43,1, 53,8 и 68,1 мин, т. е. первое сочетание по этому показателю в 1,6, 1,7, 2,4 и 1,8 раза соответственно превосходило второе. Следует отметить, что 0,05 и 0,1%-ный растворы РУ-1117 + визитон-ПЭГ по продолжительности полной анестезии и общей длительности обезболивания практически были сопоставимы. Подтверждением тому, что сочетание РУ-1117 + визитон-ПЭГ, в котором РУ-1117 содержится в концентрациях 0,025, 0,05 и 0,1%, по продолжительности полной анестезии и общей длительности обезболивания значительно превосходит РУ-1117 + физраствор в аналогичных условиях эксперимента, являются статистически достоверные различия ЭПО (4862,5 ± 273,2 и 1500,0 ± 94,5, 10637,5 ± 305,3 и 2525,0 ± 122,1, 9687,5 ± 297,9 и 3225,0 ± 172,9 усл. ед. соответственно; р < 0,001 во всех случаях) и ЭОПО (5932,2 ± 180,1 и 2395,9 ± 257,2, 11558,4 ± 232,6 и 3675,6 ± 94,4, 10441,2 ± 169,0 и 4735,3 ± 103,9 усл. ед. соответственно; р < 0,001 во всех случаях) (рис. 1-3).
Важно заметить, что при использовании РУ-1117 в концентрациях 0,0125-0,05% имела место полная прозрачность композиции РУ-1117 + визитон-ПЭГ, тогда как в концентрации РУ-1117, равной 0,01%, эта композиция теряла прозрачность, становясь мутной.
Таким образом, при поверхностной анестезии в экспериментах на роговице глаз кроликов сочетания РУ-1117 с визитоном-ПЭГ и физраствором, в которых РУ-1117 использовалось в 0,0125 (только в первом сочетании), 0,025, 0,05 и 0,1%-ной концентрациях, индуцируют прогрессивно нарастающее (исключение составляет первое сочетание, содержащее РУ-1117 в
0,1%-ной концентрации, которое по активности не отличалось от предыдущего) обезболивающее действие. По минимальной анестезирующей концентрации первое сочетание превосходит второе.
По активности (ЭК50) и ШТД сочетание РУ-1117 + визитон-ПЭГ более значимо, чем РУ-1117 + физраствор. По продолжительности полной анестезии и общей длительности обезболивания первое сочетание превосходит второе.
Сочетание РУ-1117 + визитон-ПЭГ, как и РУ-1117 + физраствор ни в одной из исследованных концентраций РУ-1117 не оказывает раздражающего действия на ткани переднего отдела глаза.
Наиболее выраженным местноанестезирующим эффектом при стабильной прозрачности обладает сочетание РУ-1117 + визитон-ПЭГ, в котором РУ-1117 использовано в 0,05%-ной концентрации.
Сочетание РУ-1117 + визитон-ПЭГ может быть рекомендовано для дальнейшего доклинического изучения в качестве фармацевтической композиции, предназначенной для обезболивания в условиях поверхностного метода анестезии тканей переднего отдела глаза.
Поступила 28.09.2006
ЛИТЕРАТУРА
1. Беленький М. Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. Л., 1963. 152 с.
2. Галенко-Ярошевский А. П., Попков В. Л., Каде Е. А.,
Пономарев В. В. Сравнительное исследование местноанестезирующей активности производного имидазобензимидазола РУ-1117, дикаина, лидокаина и маркаина // Кубанский научный медицинский вестник. 2000, № 4. С. 58-61.
3. Галенко-Ярошевский А. П., Зайцев А. А., Пономарев В. В. и др. Влияние производного имидазобензимидазола РУ-1117 на трансмембранные ионные токи изолированных нейронов // Кубанский научный медицинский вестник. Краснодар, 2000. № 4. С. 87-90.
4. Золотаревский А. В., Андронов С. И., Малюгин Б. Э. и др. Результаты использования эпибульбарно-внутрикамерной анестезии в катарактальной хирургии // Офтальмохирургия. 1999, № 3. С. 37-43.
5. Золотаревский А. В., Малюгин Б. Э., Багров С. Н. и др. Клинико-экспериментальное обоснование и результаты использования вискоанестетиков при факоэмульсификации // Офтальмохирургия. 2000, № 4. С. 58-71.
6. Игнатов Ю. Д., Червякова И. В., Васильев Ю. Н., Галенко-Ярошевский А. П., Жуков В. Н. Методические указания по изучению местноанестезирующей активности фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией члена-корреспондента РАМН, профессора Р. У. Хаб-риева. 2-е изд., перераб. и доп. М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. С. 364-392.
7. Малюгин Б. Э., Верзин А. А. Вискоанестетик - новая фармацевтическая композиция для обезболивания в хирургии катаракты // Съезд офтальмологов России, VII: Тез. докл. Москва, 2000. С. 60.
8. Новиков С. В., Леонтьева Г. Д., Кобелевский А. В. и др. Протектор роговицы: патент РФ № 2238738 от 2004 г.
9. Прозоровский В. Б. Использование метода наименьших квадратов для пробит-анализа кривых летальности // Фарма-кол. и токсикол. 1962. Т. 25, № 1. С. 115-119.
10. Прянишникова H. Т., Шаров H. А. Тримекаин. Фармакология и клиническое применение. Л.: Медицина, 1967. 239 с.
11. Самойлов H. H. Таблицы значений средней ошибки и доверительного интервала средней арифметической величины вариационного ряда. Томск, 1970. 63 с.
12. Хабриев Р У. (ред.) Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. 2-е изд., перераб. и доп. М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. 832 с.
13. Setnicar I. Tolerance indices of some phenoxyethylamino derivatives with local anaesthitic properties // Arzneim. Forsch. 1966. Bd. 16, № 5. Р 623.
A. P. GALENKO-YAROSHEVSKY,
I. A. VARLASHKINA, H. P. TAKHCHIDI, B. E. MALUGIN, S. N. SAKHNOV
LOCAL ANESTETIC PROPERTIES OF COMBINATION IMIDAZOBEZIMIDAZOL DERIVA TIVE RU-1117 WITH VIZITON-PEG IN CONDITION OF SURFACE ANESTHESIA OF CORNEA OFAN EYE
It has been showed, that combination ofimidazobenzm-idazol derivative RU-1117 (laboratory cupher) with 1% solution of vizitone-PEG in condition of surface anesthesia of cornea of an rabbits eye overeomes greatly RU-1117 (prepared on physiologic salt solution) on the local anesthetic activity.
Combination RU-1117 + vizitone-PEG, as well asRU-1117 + physiologic salt solution, produced no irritating effect on the tissues of anterpart of an eye in any ofR U-1117 concentration studied.
Combination RU-1117 + vizitone-PEG (with RU-1117 = 0,05%) has the greatest local anesthetic effect in stable transparence.
Combination RU-1117 + vizitone-PEG is recommended for further pre-clinic investigation as a pharmaceutical composition for anesthesia in method of surface anesthesia of tissues of anter part of an eye.
