CC BY
20
Оригинальные исследования
Original Researches
МЕДИЦИНА
НЕОТЛОЖНЫХ состояний
®
УДК 535.379:661.718.6:616.831-001-092.9
ЛУК'ЯНЧУКB.Ä.1, ПОЛЩУК е.М.1, СЕЙФУЛЛНА 1.Й.3, ПОСТЕРНАКГ.1.2, КРАВЕЦЬ A.C.1, РИСУХНА Н.В.1,
марцинко o.e.3
1Кафедра фармакологи, ФПО A3 «Луганський державний медичний ун/верситет»
2Кафедра анестезюлог'И, реан'матологИ та нев/дкладних станю ФПО A3 «Луганський державний медичний унверситет»
3Кафедра загально!хм'й та пол/мер/в, Одеський нацональний унюерситет¡мен 1.1. Мечникова
КОМПЛЕКСНА БЮХЕМ1ЛЮМНЕСЦЕНТНА ОЦНКА ЦЕРЕБРОПРОТЕКТОРНОТ ЕФЕКТИВНОСП ЦЕРЕБРОГЕРМУ НА МОДЕЛ1 ЗАКРИТОТ ЧЕРЕПНО-МОЗКОВОТ ТРАВМИ
Резюме. Шдомо, що гinерiнiцiацiя вшьнорадикального окислення фосфолтШв мембран церебральних ней-рошв у мкщ первинного ушкодження за умов закрито'Ч черепно-мозковоЧ травми вШграе ключову роль у патогенезi цього екстремального стану. Отже, для переривання даного ланцюгового механшму вторин-ного пошкодження мембран нейрошв принципове значення мае здатнсть потенцтних церебропротек-торних засобiв реалiзовувати антирадикальний захист головного мозку, що буде визначати характер перебщ та на^дки закрито'Ч черепно-мозково'Ч травми.
Ранше проведеними нами скришнговими доЫдженнями на моделi закрито'Ч черепно-мозковоЧ травми встановлена висока лкувальна ефектившсть вперше синтезованоЧ координацтноЧ сполуки ферум бс(цитрато)германат (цереброгерм).
Метою до^дження було провести в динамщ бохемлюмнесцентний аналЬз фармакотерапевтичноЧ дгЧ цереброгерму за умов закрито'Ч черепно-мозковоЧ травми.
Експериментально доведено, що до^джувана оригнальна координацшна сполукареалiзуе високу анти-радикальну актившсть, на що вказуе модифкащя вах параметрiв бохемлюмнесцентного свтння на моделi закрито'Ч черепно-мозковоЧ травми. Бльше того, цереброгерм здатен ефективно сприяти збере-женню пула ендогенних антиоксидантiв, за рахунок чого частота обривiв вльнорадикальних ланцюго-вихреакцш переважае над частотою його розгалужень ^ як результат, процес лтдного переокиснення, н^^ваний за умов травматичного пошкодження головного мозку, тддаеться рЬзкому гальмуванню. Ключовi слова: координацтт сполуки гермашю, церебропротектори, бохемлюмщесцен^я, закрита че-репно-мозкова травма.
Вступ
Гшершщац1я вшьнорадикального окислення фосфолшщв мембран церебральних нейрошв у мю-щ первинного ушкодження за умов закрито! череп-но-мозково! травми (ЗЧМТ) на тлi дц тригерного чинника патолопчних змш вщграе ключову роль у патогенезi цього екстремального стану [8, 10]. Ак-тивацц перекисного окислення лшщв при ЗЧМТ сприяе високий вмют у тканиш мозку ненасиче-них жирних кислот, а також церебральна гшокс1я, надлишок прооксиданпв ^е2+) у зош крововиливу та лiзису еритроципв на ™ зниження рiвня та ак-тивност компоненпв антиоксидантного захисту. Отже, для переривання даного ланцюгового меха-шзму вторинного пошкодження мембран нейрошв принципове значення мае здатшсть потенцшних церебропротекторних засобiв ре^зовувати антирадикальний захист головного мозку, що врештьрешт буде визначати характер переб^ та наслщки ЗЧМТ [3, 4].
Рашше проведеними нами скришнговими до-слщженнями на моделi ЗЧМТ встановлена висока л^вальна ефектившсть вперше синтезовано! ко-ординацшно! сполуки ферум бю(цитрато)германат (цереброгерм).
Мета дослвдження — провести в динамщ бюхе-мшюмшесцентний (БХЛ) аналiз фармакотерапев-тично! дц цереброгерму за умов ЗЧМТ.
Матер\али \ методи досл\дження
Дослiдження проведенi на бших безпородних щурах масою 200—220 г обох статей у лабораторп кафедри фармакологи ДЗ «Луганський державний медичний ушверситет» (ЛугДМУ), сертифжованш
© Лук'янчук В.Д., Полiщук 6.М., Сейфуллша 1.Й., Постернак Г. I., Кравець Д.С., Рисухша Н.В., Марцинко О.6., 2014 © «Медицина невщкладних сташв», 2014 © Заславський О.Ю., 2014
ДП «Державний експертний центр Мшстерства охорони здоров'я Украши», зпдно з методичними рекомендащями [5].
Експериментальною моделлю ЗЧМТ слугував патологiчний процес, що розвиваеться у тварин на тлi нанесення дозованого за силою та орiентова-ного за локалiзацiею удару вгльнопадаючим ван-тажем масою 45 г на пм'яну дiлянку черепа щурiв, що знаходилися пщ легким ефiрним наркозом та були зафiксованi у вдосконаленш камерi Когана за допомогою спецiального пристрою орипнально! конструкцп [6]. Клшчна картина форми ЗЧМТ, що моделюеться, вiдповiдае ушкодженню головного мозку середнього ступеня [9].
Усi тварини були подшеш на 4 групи по 6 щу-рiв у кожнш: iнтактну, контрольну, дослiдну та ре-ферентну. Щурам дослщно! сери тсля нанесення ЗЧМТ внутрiшньочеревинно вводили цереброгерм у виглад 2% розчину в дозi 126,5 мг/кг через 1 год 11 хв згщно з попередньо розробленим оптималь-ним режимом дозування. Як препарат порiвняння обрано загальновiдомий та добре вивчений фарма-котерапевтичний засiб церебропротекторно! ди, що широко застосовуеться у неврологiчнiй практицi та експериментальнiй фармакологи, — трацетам («Дарниця», Укра!на), який тваринам референтно! групи вводили таким же шляхом у дозi 100 мг/кг у виглядi 20% розчину через 30 хв тсля моделю-вання патологи [2]. Контрольнш серп щурiв пiсля нанесення ЗЧМТ внутрiшньочеревинно вводили еквюб'емну кiлькiсть iзотонiчного розчину натрш хлориду.
Iнтенсивнiсть надслабкого свiтiння вивчали в сироватщ кровi в динамiцi: через 6, 24 i 72 години тсля моделювання патологи. У робот використо-вували удосконалений спiвробiтниками кафедри фармакологи ЛугДМУ метод визначення в тканинах надслабкого свтння, iндукованого 3% розчином пероксиду водню [1].
БХЛ-аналiз фармакотерапевтично! ефективнос-тi цереброгерму за умов експерименту, що досль джуеться, проводили за хемiлюмiнограмами сиро-ватки кров^ якi реестрували протягом 5 хвилин на хемiлюмiнометрi «Emillite-1105» у такому режимк спектральний дiапазон 350—390 нм, дiапазон вимь рiв — 103—1010 фотон/с. Сироватку кровi попередньо iнкубували (15 хвилин при 37 °С).
Юнетику вшьних радикалiв оцiнювали за низкою показниюв: амплiтуда швидкого спалаху (11), амплiтуда повшьного спалаху (12), час щдукцп по-вшьного спалаху (т), а також загальна свгглосума ре-акцп (Б). Для всебiчноi оцiнки стану антирадикаль-но! та антиоксидантно! системи (АОС) органiзму, а також !х взаемозв'язку нами вперше запропонова-но низку показникiв: потужтсть антиоксидантно!
I, Б
системи (Р) = -р , радикальний пул (ЯР) =
12 11 + I
11
абсолютна радикальна актившсть (АЯ) = тг,
и 12
абсолютна антиоксидантна активнiсть (АА) =
и
показник проксидантно-антиоксидантно1 ршноваги
Ii + I2 ^
(PB) = —-2 хф, а також напруження антиокси-
S Ф
дантно1 системи (PA) =
I2
Розрахунок досл1джуваних параметр1в проводили за допомогою комп'ютерно'1 програми, спещаль-но розроблено1 на кафедр1 фармакологи ЛугДМУ.
Отриман1 результати обробляли за допомогою U-критерго В1лкоксона — Манна — У1тш [7]. В1д-м1нност1 вважали в1рог1дними при значимосп не менше нiж 95 % з використанням пакета приклад-них програм Statistica 6.0.
Результати досл1джень та ix обговорення
Показники БХЛ, що характеризують штенсив-н1сть надслабкого свтння в сироватщ кров1 щур1в за умов експерименту, який дослщжуеться, наведен1 на рис. i, 2 та в табл. i.
1нтенсивн1сть надслабкого св1т1ння характери-зуе швидк1сть переб1гу лшщно'1 пероксидащ1, яку в першу чергу ощнювали за показником загально'1 св1тлосуми. Як видно з рис. 1, при ЗЧМТ (контроль) кшьюсть вшьних радикал1в, що утворилися, а отже, й свгглосума БХЛ-реакц1й, значно зростае в ус1 тер-м1ни досл1дження. При цьому максимальний вм1ст вшьних радикал1в рееструеться на 24-й годин1 досль дження, коли р1зниця в контрольнш та штактнш гру-пах сягае 41 %. Незважаючи на тенденщю до знижен-ня, цей показник у контрол1 й на 72-й годит на 18 % вищий за такий, що рееструеться в штактних тварин.
1нша динам1ка змш показника св1тлосуми БХЛ спостер1гаеться в сироватщ кров1 щур1в 1з ЗЧМТ, яких лжували цереброгермом. Так, величина S у сироватщ дослщних тварин у середньому на 15 % нижча, нiж у контрольн1й груш. Це переконливо свщчить про пдвищення ст1йкост1 фосфол1п1д1в до в1льнорадикального окисления пщ впливом цере-бропротектора, що дослщжуеться, та вказуе на його здатшсть значно знижувати число вгльнорадикаль-них ланцюг1в розгалуження, пригн1чуючи таким чином реакцп ПОЛ. Бгльше того, значення S в до-слщнш груп1 на 24-й та 72-й годиш дослщження вь
iMn/c 80 000 60 000 40 000 20 000 0
□1нтактна
1Дослщна
□ Контрольна
■ Референтна
♦ I- * л/.
fl _ I Щ
W1 IrI ГР
6 24 72
53342,83
53342,83
60367,17
66480,83
53342,83
59500,17
Рисунок 1. Вплив цереброгерму на динам '!ку свтлосуми БХЛ у сироватц кров1 щур1в, що по-страждали внаслдок ЗЧМТ (п = 6) Примтки (тут I для рис. 2,3): * — Р < 0,05—в1рогщно пор1вняно з нтактною групою; 0 — Р < 0,05 — в1рогщно пор1вняно з контролем; ♦ — Р < 0,05 — в1рогщно пор1вняно з референтною групою.
61007,17
55137,5
75125,5
62951,83
рогщно нижш, н1ж у референтнiй груш, тобто у тва-рин, яю отримували пiрацетам (Р < 0,05) (рис. 1).
Аналiз динамiки величин 11, якi графiчно поданi на рис. 2, вказуе на суттеве пiдвищення показника БХЛ у контролi впродовж дослщження на 56, 79 та 29 % на 6, 24 та 72-й годиш вщповщно порiвняно з iнтактними тваринами. Щ зрушення, на нашу думку, е результатом накопичення гiдропероксидiв ль пiдiв, що обумовлено, з одного боку, штенсифжа-цiею ПОЛ активними формами кисню, надлишок яких, iмовiрно, утворюеться внаслiдок травматичного пошкодження головного мозку, а з шшого — уповшьненням 1х знешкодження.
У дослщнш же групi пщ впливом цереброгерму протягом усього експерименту значення 11 вiрогiдно нижчi за таю, що рееструються у тварин контролю (Р = 0,028), iз максимальною рiзницею на 24-го-диннiй позначщ в 22 % (середнiй показник 19,5 %). Тобто церебропротектор, що вивчаеться, мае ви-ражену здатнють зменшувати генерацiю вшьних радикалiв в органiзмi тварин iз ЗЧМТ, наближаючи на 72-й годинi величини 11 до таких, що зафiксованi в штактних щурiв (Р > 0,05). Крiм того, значення 11 пщ впливом цереброгерму вiрогiдно нижчi за показ-ники, що рееструються в референтнш групi тварин на 24-й та 72-й годиш (Р < 0,05), проте вiрогiдних вщмшностей (Р > 0,05) вщ значень групи порiвнян-ня в бiльш ранш термiни (6 год) не вщзначаеться.
Аналiз величин амплiтуди повiльного спалаху надслабкого свiтiння в сироватцi кровi при ЗЧМТ (табл. 1) показуе, що цей параметр БХЛ стабшьно в час перевищуе аналогiчний показник, що визна-
чаеться в штактних щурш, впродовж усього спосте-реження, iз максимальною рiзницею на 24-й годиш, коли 12 в контролi сягае 704,17 ± 12,77 iмп/с проти величини 12, що дорiвнюе 374,33 ± 15,98 iмп/с у тварин штакгно! групи (Р = 0,028).
Лжування щурiв цереброгермом за умов патоло-гiчного стану, що моделюеться, призводить до вiро-гщного (Р < 0,05) зниження показника 12 порiвняно з контрольною групою в усi термiни визначення на 15—31 %. Крiм того, пщ впливом цереброгерму амп-лиуда повiльного спалаху протягом усього експерименту не мае вiрогiдних вщмшностей (Р = 0,028— 0,043) порiвняно з iнтактною серiею.
Встановлений характер змш амплiтуди повшь-ного спалаху БХЛ при застосуванш координацшно!
900 800 700 600 , 500 400 300 200 100 0
Термни дослщження, год
Ынтактна ^Контрольна пДослщна ^Референтна
Рисунок 2. Вплив цереброгерму на амплтуду швидкого спалаху в динамц у сироватц кров1 щурв, що постраждали внасл'щок ЗЧМТ (n = 6)
Таблиця 1. Вплив цереброгерму на показники бюхемшюмшесценцй у сироватц кров! щур1в за умов
ЗЧМТ (n = 6)
Групи тварин Статистичний показник Термши дослщження (год)
6 24 72
Ампл'1туда повльного спалаху надслабкого свтння (I2), 'мп/с
1нтактна М ± m 374,33 ± i5,98
Контрольна М ± m Pi 5i7,50 ± 20,72 0,028 704,i7 ± i2,77 0,028 544,67 ± 20,29 0,028
Дослщна М ± m Pi P2 Рз 44i,50 ± i2,76 0,043 0,028 >0,05 488,33 ± i2,79 0,028 0,028 0,046 40i,33 ± i0,46 0,043 0,028 0,028
Референтна М ± m P1 Р2 482,67 ± i0,i5 0,028 > 0,05 540,5 ± i5,3 0,028 0,028 479,67 ± ii,98 0,028 0,046
Час iндукцil повльного спалаху (%), с
1нтактна М ± m 35,i67 ± 2,20
Контрольна М ± m Pi 23,50 ± i,38 0,028 i9,67 ± i,52 0,028 24,i7 ± i,08 0,028
Дослщна М ± m Pi Р2 Рз 28,33 ± i,76 0,028 > 0,05 > 0,05 26,i7 ± i,08 0,046 0,028 > 0,05 32,5 ± 0,72
Референтна М ± m Pi Р2 25,33 ± i,43 0,028 > 0,05 22,33 ± 2,03 0,028 > 0,05 28,33 ± i,98 > 0,05 > 0,05
Примтка (тут i в табл. 2): Р розраховано за и-критер1ем Влкоксона — Манна — Упн'г, Р < 0,05 в1рогщно пор1вняно: з Р1 — ¡нтактною; Р2 — контрольною; Р3 — референтною групою.
сполуки германiю, що дослщжуеться, на наше пере-конання, свщчить про здатнiсть потенцiйного цере-бропротектора сповшьнювати швидкiсть утилiзацГi iонiв Fe2+, попереджаючи таким чином надмiрну шщащю ланцюгових реакцiй, що перебiгають за участю цього металу, як у перюд максимально! продукций вшьних радикалiв, так i в iншi термiни дослi-дження за умов ЗЧМТ.
Важливим показником, що характеризуе антиок-сидантну активнiсть будь-якого бюсубстрату, е час iндукцГi повшьного спалаху надслабкого свiтiння, за величиною яко! можна судити про сшввщношення у системi про- та антиоксиданпв. Встановлено, що у контролi значення т у сироватцi кровi значно зни-жуеться протягом усього експерименту, що вказуе на змщення прооксидантно-антиоксидантно! рiв-новаги в бiк прооксидантiв за умов травматичного пошкодження головного мозку (табл. 1).
При використаннi ж цереброгерму час, впро-довж якого фосфолшщи чинять опiр окисленню, значно збшьшуеться. Примiтно, що на ™ лiку-вання ЗЧМТ розроблюваним церебропротектором протягом усього експерименту е чггка тенденцiя до пщвищення значення т i на 72-й годиш вiрогiдних вiдмiнностей iз iнтактною групою вже не реестру-еться (Р > 0,05). При цьому порiвняно з контролем величини т значно вищi (у середньому на 29,5 %). Усе це може бути свщченням сумарного тдвищен-ня вмюту екзо- та ендогенних антиоксидантiв в органiзмi травмованих тварин за рахунок того, що цереброгерм, з одного боку, здатен попереджати ви-трати компоненпв фонду антиоксидантно! системи захисту оргашзму, а з iншого — сам виступае як за-аб безпосереднього антирадикального захисту за умов ЗЧМТ.
Узагальнюючи iнтерпретацГi отриманих резуль-татiв, е шдстави зробити висновок, що модифiкацiя вск параметрiв БХЛ на ™ застосування цереброгерму свiдчить про суттеве пiдвищення спроможнос-тi фосфолшщв протистояти вшьнорадикальному окисленню, що, як нам видаеться, реалiзуеться ви-раженими мембранопротекторними властивостями дано! координацшно! сполуки, в основi мехашзму церебропротекторно! д!! яко! лежить антирадикаль-на активнiсть. Бшьше того, на нашу думку, цереброгерм здатен сприяти збереженню пулу ендогенних антиоксиданпв, за рахунок чого частота обривiв вшьнорадикальних ланцюгових реакцiй переважае над кшьюстю його розгалужень, i, як результат цього, вщбуваеться процес рiзкого гальмування лшщ-ного переокислення, iнiцiйованого за умов ЗЧМТ.
Особливу увагу було придiлено аналiзу вперше за-пропонованих нами показникiв комплексно! оцшки БХЛ тканин органiзму, яю суттевим чином розши-рюють та доповнюють нашi уявлення про фармако-динамiку будь-якого лiкарського засобу та, зокрема, потенцшного церебропротектора цереброгерму.
Отримаш при цьому результати наведенi у табл. 2 та на рис. 3. При !х аналiзi на перший погляд видаеться парадоксальним той факт, що потужнють антиоксидантно! системи, яка характеризуе !! спро-
можнiсть попереджати iнтенсивнiсть виникнення другого спалаху БХЛ, в контрольнш, дослiднiй та референтних групах майже не мае вiрогiдних вщмш-ностей м1ж собою та з штактною групою. Але варто врахувати, що величина Р вщображае вiдношення 11 до 12, а у референтнш та контрольнiй групах ампль туда 12 е вщносно високою. У дослщнш же групi значення амплггуд обох спалах1в е помiрними, тобто i !х спiввiдношення буде невисоким. 1ншими словами, цереброгерм пщвищуе здатнiсть АОС до опору генерацп повiльного спалаху. Також неймовiрним е те, що радикальний пул у контрольнш груш е най-нижчим. Це пояснюеться тим, що, незважаючи на високу свiтлосуму реакцп, у контролi бiльшiсть ра-дикалiв витрачаеться на генерац!! першого та другого спалахiв надслабкого свтння. У дослiднiй же групi радикальний пул на останньому термiнi спо-стереження (72 год) не мае вiрогiдних вiдмiнностей з iнтактною групою, що свщчить про антирадикаль-ш властивостi цереброгерму (табл. 2).
Аналiз абсолютно! радикально! активностi по-казуе (рис. 3), що в контрольнш, дослщнш та референтнш групах вона дещо пщсилюеться. Скорше за все, це пов'язане з активащею процеав вшьноради-кального окислення на тлi ЗЧМТ. Однак при цьому на себе звертае увагу той факт, що в дослщнш груш кшьюсть вшьних радикалiв, якi формуються в бю-субстратi пiсля швдацп !х утворення, е найнижчою. Проте тривалють дП антиоксидантно! системи, про що свщчить величина такого показника, як абсолютна антиоксидантна актившсть, у дослщнш груш тварин зростае в середньому на 11,6 % порiвняно з контрольними тваринами, а на 72-й годиш експерименту рiзниця з показником АА, що був зафжсо-ваний в штактнш груш, не е вiрогiдною (> 0,05).
При аналiзi показника, що характеризуе стан прооксидантно-антиоксидантно! рiвноваги, звертае на себе увагу та обставина, що в контрольнш груш тварин рiвновага змщуеться в бж прооксидантних процесiв. Однак застосування цереброгерму реаль зуеться пiдвищенням активностi антиоксидантних процеав, про що свiдчить збiльшення величини РВ на 16,3 % порiвняно с контролем (табл. 2).
Абсолютна антирадикальна активнють Абсолютна антиоксидантна актившсть
6 24 72 6 24 72
Термши дошдження, год I-Пнтактна Дослщна [-1 Референтна —Контрольна
Рисунок 3. Вплив цереброгерму на розрахунков '1 показники БХЛ у сироватц кров! щур1в, що постраждали внасл'щок ЗЧМТ (п = 6)
Аналопчних змш зазнае i напруження антиоксидантно! системи. Так, у контрольнш групi тва-рин величина РА знижуеться у 2,4 раза порiвняно з такою, що зареестрована в штактних тварин. Це свiдчить про рiзке прогресування оксидативного стресу в органiзмi в умовах ЗЧМТ. Застосування ж координацшно'1 сполуки, що дослщжуеться, сприяе збiльшенню напруження антиоксидантно! системи в 1,7 раза, яке практично сягае рiвня в штактних тварин. Це свщчить про спроможшсть АОС змен-шувати iнтенсивнiсть другого тку бюхемшюмшес-ценци та вщдаляти його в час за рахунок наявного в
системi (органiзмi) пулу ендо- та екзогенних анти-оксидантiв.
Пдбиваючи пщсумки комплексного бюхемь люмiнесцентного дослщження орипнально! коор-динацшно! сполуки ферум бю(цитрато)германат (цереброгерм), можна вважати доведеною високу антирадикальну активнiсть цього потенцшного це-ребропротекторного засобу, на що вказуе модифжа-цiя всiх параметрiв БХЛ-свiтiння на моделi ЗЧМТ. Бшьше того, цереброгерм здатен ефективно спри-яти збереженню пула ендогенних антиоксиданпв, за рахунок чого частота обривiв вiльнорадикальних
Таблиця 2. Вплив цереброгерму на розрахунков! показники бюхемлюмнесценцП' в сироватц кров!
щурв за умов ЗЧМТ (n = 6)
Групи тварин Статистичний показник Термiни дослiдження (год)
6 24 72
Потужн'ють антиоксидантноi системи (P), ум.од.
1нтактна М ± m 1,25 ± 0,13
Контрольна М ± m Pi 1,400 ± 0,050 > 0,05 1,18 ± 0,05 > 0,05 1,10 ± 0,04 > 0,05
ДослЩна М ± m Pi P2 Рз 1,33 ± 0,055 > 0,05 > 0,05 > 0,05 1,320 ± 0,054 > 0,05 0,028 > 0,05 1,20 ± 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05
Референтна М ± m Pi Р2 1,250 ± 0,013 > 0,05 0,046 1,300 ± 0,049 > 0,05 > 0,05 1,160 ± 0,045 > 0,05 > 0,05
Радикальний пул (RP), с
1нтактна М ± m 64,25 ± 1,71
Контрольна М ± m Pi 54,71 ± 2,62 0,046 49,14 ± 1,22 0,028 55,38 ± 2,17 0,028
Дослщна М ± m Pi Р2 Рз 57,013 ± 2,710 0,028 > 0,05 > 0,05 54,03 ± 1,80 0,028 > 0,05 > 0,05 62,49 ± 0,89 > 0,05 0,028 0,028
Референтна М ± m Pi Р2 55,76 ± 2,99 > 0,05 > 0,05 53,61 ± 1,31 0,028 > 0,05 57,58 ± 0,83 0,046 > 0,05
Показник прооксидантно-антиоксидантноi р'вноваги, ум.од.
1нтактна М ± m 0,55 ± 0,043
Контрольна М ± m Pi 0,460 ± 0,039 > 0,05 0,400 ± 0,026 0,028 0,450 ± 0,031 > 0,05
Дослщна М ± m Pi Р2 Рз 0,500 ± 0,035 > 0,05 > 0,05 > 0,05 0,480 ± 0,016 > 0,05 0,046 > 0,05 0,520 ± 0,007 > 0,05 > 0,05 > 0,05
Референтна М ± m Pi Р2 0,460 ± 0,035 0,046 > 0,05 0,410 ± 0,032 0,028 > 0,05 0,49 ± 0,034 > 0,05 > 0,05
Напруження антиоксидантноi системи, с2/1мп
1нтактна М ± m 0,095 ± 0,0060
Контрольна М ± m Pi 0,0450 ± 0,0026 0,028 0,0280 ± 0,0017 0,028 0,0440 ± 0,0015 0,028
ДослЩна М ± m Pi P2 P3 0,0640 ± 0,0042 0,028 0,028 > 0,05 0,0540 ± 0,0024 0,028 0,028 > 0,05 0,0810 ± 0,0018 > 0,05 0,028 0,046
Референтна М ± m Pi P2 0,0530 ± 0,0034 0,028 > 0,05 0,0420 ± 0,0040 0,028 0,046 0,0590 ± 0,0052 0,046 0,028
ланцюгових реакцiй переважае над частотою його розгалужень, як результат, процес лшщного пере-окислення, шщшований за умов ЗЧМТ, тддаеться рiзкому гальмуванню.
Список л1тератури
1. Лукьянчук В.Д., Кравец Д.С., Витохина Н.В. и др. Био-хемилюминесцентный анализ фармакодинамики лекарственных средств: Метод. рекомендации. — К., 2010. — 42 с.
2. Лукьянчук В.Д. Скрининг и сравнительная оценка церебро-протекторной активности координационных соединений германия при закрытой черепно-мозговой травме / В.Д. Лукьянчук, И.И. Сейфуллина, А.А. Высоцкий, Е.Э. Марцинко, О.Г. Песарог-ло//Лжи. — 2006. — № 5-6. — С. 38-41.
3. Говорова Н.В. Влияние мексидола на оксидантный стресс у больных с тяжелой черепно-мозговой травмой // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2006. — № 1. — С. 41-44.
4. Держинский Н.В. Интенсивность свободно-радикального окисления липидов и белков и состояние антиоксидантной системы у больных с тяжелой черепно-мозговой травмой: Авто-
реф. дисс... канд. мед. наук по спец. 03.01.04 — «Биохимия». — Тюмень, 2012. — 20 с.
5. Доклинические исследования лекарственных средств: Метод. рекоменд. / Под ред. член-кор. АМН Украины А.В. Стефа-нова. — К, 2002. — 567с.
6. Патент на корисну модель 13678, Украгна, МПК G09B 23/28. Спойб моделювання черепно-мозковог травми / В.Д. Лук 'янчук, О.В. Шевчук, О.В. Бадшов. — № u200509483; Заявл. 10.10.05; Опубл. 17.04.06, Бюл. № 4. — 8с.
7. Петри А., Сэбин К. Наглядная статистика в медицине: Пер. с англ. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2003. — 143 с.
8. Садова ВА. Особенности реакции системы ПОЛ-АОС при осложненном течении черепно-мозговой травмы //Вестник ЮжноУральского государственного университета. Серия «Образование, здравоохранение, физическая культура». — 2012. — № 28. — С. 12-16.
9. Травматология: национальное руководство / Под ред. Г.П. Котельникова, С.П. Миронова. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. — 808 с. (Серия «Национальныеруководства»).
10.Чубарова А.С., Курченко В.П. Характеристика антиок-сидантной активности субстанции силимарина в составе гепа-топротекторных лекарственных препаратов // Медицинские новости. — 2013. — № 3. — C. 64-66.
Отримано 01.07.14 ■
Лукьянчук В.Д.1, Полищук Е.М.1, Суйфуллина И.И.3, Постернак Г.И.2, Кравец Д.С.1, Рисухина Н.В.1, Марцинко Е.Е.3
''Кафедра фармакологии, ФПО ГУ «Луганский государственный медицинский университет» 2Кафедра анестезиологии, реаниматологии и неотложных состояний ФПО ГУ «Луганский государственный медицинский университет» 3Кафедра общей химии и полимеров, Одесский национальный университет имени И.И. Мечникова
КОМПЛЕКСНАЯ БИОХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНАЯ ОЦЕНКА ЦЕРЕБРОПРОТЕКТОРНОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЦЕРЕБРОГЕРМА НА МОДЕЛИ ЗАКРЫТОЙ ЧЕРЕПНО-МОЗГОВОЙ ТРАВМЫ
Резюме. Известно, что гиперинициация свободнорадикаль-ного окисления фосфолипидов мембран церебральных нейронов в месте первичного повреждения в условиях закрытой черепно-мозговой травмы играет ключевую роль в патогенезе этого экстремального состояния. Поэтому для прерывания данного цепного механизма вторичного повреждения мембран нейронов принципиальное значение имеет способность потенциальных церебропротекторных средств реализовывать антирадикальную защиту головного мозга, что будет определять характер течения и последствия закрытой черепно-мозговой травмы.
Ранее проведенными нами скрининговыми исследованиями на модели закрытой черепно-мозговой травмы установлена высокая лечебная эффективность впервые синтезированного координационного соединения феррум бис(цитрато) германат (цереброгерм).
Целью исследования было провести в динамике биохеми-люминесцентный анализ фармакотерапевтического действия цереброгерма в условиях закрытой черепно-мозговой травмы.
Экспериментально доказано, что исследуемое оригинальное координационное соединение реализует высокую антирадикальную активность, на что указывает изменение всех параметров биохемилюминесцентного свечения на модели закрытой черепно-мозговой травмы. Более того, цереброгерм способен эффективно способствовать сохранению пула эндогенных антиоксидантов, за счет чего частота обрывов свобод-норадикальных реакций преобладает над частотой его разветвлений и, как результат, процесс липидного переокисления, инициированный в условиях травматического повреждения головного мозга, подвергается резкому торможению.
Ключевые слова: координационные соединения германия, церебропротекторы, биохемилюминесценция, закрытая черепно-мозговая травма.
Lukjanchuk V.D.1, Polishchuk Yu.M.1, Seifullina I.I.3, Posternak G.I.2, Kravets D.S.1, Rysukhina N.V.1, MartsinkoYe.Ye.3
1Chair of Pharmacology, FPE SI «Lugansk State Medical University»
Chair of Anesthesiology, Critical and Emergency Medicine of FPE SI «Lugansk State Medical University»>
3Chair of General Chemistry and Polymers, Odessa National University named after I.I. Mechnikov, Ukraine
COMPLEX BIOCHEMILUMINESCENCE ASSESSMENT OF CEREBROPROTECTIVE EFFICIENCY OF CEREBROGERM ON THE MODEL OF CLOSED TRAUMATIC BRAIN INJURY
Summary. Initiation of membranes phospholipids peroxidation in the primary site of injury under conditions of closed traumatic brain injury plays a key role in the pathogenesis of this extreme condition. So, in order to interrupt the chain mechanism of secondary damage of the neuronal membranes the antiradical properties of the potential cerebroprotective remedies have particular importance that will determine the nature of the course and consequences of closed intracranial injury.
Our previous screening researches found a high therapeutic efficacy of the originally synthesized coordination compound of fer-rum bis(citrate)germanate (cerebrogerm) under the conditions of closed intracranial injury.
The aim ofthe research was to study the influence of cerebrogerm on the course of the of free radical reactions in the blood serum in dynamics.
Experimentally it was proven that the studied original coordination compound showed a high antiradical activity, as confirmed by the change in all biochemiluminescence parameters on the model of closed intracranial injury. Moreover, Cerebrogerm is able to preserve pool of endogenous antioxidants, whereby the frequency of free radical reactions discontinuation dominates over the frequency of its ramifications and as a result, the process lipids peroxidation initiated under conditions of traumatic brain injury, is slammed a brake.
Key words: coordination compounds of germanium, cerebropro-tector, biochemiluminescence, closed intracranial injury.
