CC BY
15
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 61
И.О. Панчук, А.А. Борунова, Д.В. Табаков, А.В. Пономарев, Н.В. Пащенко1, В.Б. Мирза1, В.И. Дмитриев2, М.Г. Фролов2 О. В. Короткова, Т. Н. Заботина РЕЗУЛЬТАТ ПРИМЕНЕНИЯ ИЗБИРАТЕЛЬНОЙ АНАЛИЗ ГРАНУЛОЦИТАРНЫХ ХРОНОФОТОТЕРАПИИ У ПАЦИЕНТКИ С ТРИЖДЫ И ПРОМИЕЛОЦИТАРНЫХ МИЕЛОИДНЫХ НЕГАТИВНЫМ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ СУПРЕССОРНЫХ КЛЕТОК В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ Центр избирательной хронофототерапии, реабилитации КРОВИ У ОНКОЛОГИЧЕСКИХ ПАЦИЕНТОВ и иммунокоррекции, Москва, Россия; ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, 2ГБУЗ МО «Раменская ЦРБ», Раменское, Московская Москва, Россия область, Россия Введение. Миелоидные супрессорные клетки (МСК) Введение. Трижды негативный рак молочной железы представляют собой гетерогенную популяцию клеток кост- (ТНРМЖ) является одним из самых неблагоприятных ного мозга, содержащую предшественников гранулоцитов, по течению видов рака молочной железы (РМЖ). Он ха-макрофагов и дендритных клеток, которые осуществляют рактеризуется отрицательными показателями уровня ре-угнетение иммунного ответа. Она включает в себя моно- цепторов эстрогенов, прогестина и гена Her2 в ткани опу-цитарные, гранулоцитарные (Г-МСК) и промиелоцитар- холи. Медина общей выживаемости (ОВ) у данных ные (ПМ-МСК) клетки с фенотипом Lin-/low HLA- пациенток составляет 6—13 мес, медиана выживаемости DR-/lowCD14+, CD15+CD33+CD11b+Lin-/low без прогрессирования —3—4 мес. На данный момент не су-CD16-/lowHLA-DR- /low и CD33+CD11b+Lin-/lowHLA- ществует единого стандарта терапии ТНРМЖ. DR- соответственно. Повышение уровня МСК наблюда- Цель исследования — оценить ОВ у пациентки с ТНР-ется практически при всех видах злокачественных образо- МЖ на фоне избирательной хронофототерапии (ИХФТ) ваний, включая немелкоклеточный рак легких (НМРЛ) в сочетании с полихимиотерапией (ПХТ). и меланому. В настоящий момент в мире ведутся исследо- Материалы и методы. Больная Д., 1950 года рождения. вания о возможности применения МСК в качестве про- Диагноз (дата постановки февраль 2014 г.): РМЖ Т4№М0. гностического фактора ответа на проводимую терапию. Метастазы в надпочечники. Гистология: аденокарцинома. Цель исследования — оценить фенотип гранулоцитар- ИГХ: экспрессия РЭ — 0, РП — 0, Her2—0. С февраля ных и проимиелоцитарных МСК и определить их количе- 2014 г. проведены 3 линии ПХТ по схемам: адриамицин + ство в периферической крови доноров и онкологических цисплатин; паклитаксел + карбоплатин; навельбин + ка-пациентов (с меланомой и НМРЛ) до начала лечения. пецитабин. В настоящее время проводится 6-й курс ХТ Материалы и методы. Изучен фенотип МСК перефе- гемцитабином 1000 мг/м2 на 1, 8, 15-й дни. Эффект — ча-рической крови 5 доноров и 19 пациентов (11 — с НМРЛ стичная регрессия. С февраля 2014 г. начата терапия ИХФТ: и 8 — с меланомой) до начала лечения. Для идентифика- проводится введение хлорина Е6 с последующим локаль-ции клеток проведено многопараметровое исследование ном воздействием света длиной волны 660—670 нм. с использованием моноклональных антител: Lin-/low, Результаты. После проведения ИХФТ в сочетании HLA-DR, CD11b, CD15, CD16, CD33, конъюгированных с ПХТ у пациентки не наблюдалось случаев лейкопении флюорохромами FITC, PE, APC, Per-Cy5, Pacify Blue. Ана- и нейтропении, что позволило полностью соблюдать дозо-лиз проводили методом проточной цитофлуометрии с по- вый и интервальный режим введения цитотоксических следовательным каскадным гейтированием [BD FACS препаратов. Итогом совместной терапии является выжи-Canto™ II (BD Biosciences, USA)]. ваемость 27 мес, предел которой еще не достигнут. Больная Результаты. Исследованы Г-МСК и ПМ-МСК с фено- продолжает лечение. типом Lin-/lowCD15+CD33+CD11b+HLA — DR-/low Заключение. ИХФТ способствует поддержанию нор-CD16-/low и Lin-/lowCD33+CD11b+HLA — DR-/low у до- мальных уровней белого ростка крови, что дает возможность норов и пациентов. У доноров количество Г-МСК и ПМ- соблюдать дозовый и интервальный режим ПХТ, это приво-МСК составило 1,0 ± 1,1 % (0,1—1,8 %) и 0,4 ± 0,3 % (0,2— дит к достижению максимального противоопухолевого эф-0,76 %) соответственно. У онкологических пациентов фекта от ПХТ и увеличению ОВ больных при ТНРМЖ. с диагнозом НМРЛ количество Г-МСК и ПМ-МСК составило 1,3 ± 1,0 % (0,02-2,6 %) и 2,3 ± 3,4 % (0,02-11,0 %) Э.Р. Переверзева1, В.А. Голибродо1, М.И. Трещалин1, соответственно, у пациентов с меланомой количество Г- Н.В. Еремкин1, Е.В. Возняковская1, Т.Б. Переверзева1, МСК и ПМ-МСК — 5,2 ± 5,4 % (0,3-14,4 %) и 4,4 ± 3,0 % С.А. Цуркан2, И.Д. Трещалин1 (0,1-7,8 %) соответственно. Выявлено, что у онкологиче- ИЗУЧЕНИЕ ХРОНИЧЕСКОЙ ТОКСИЧНОСТИ ских пациентов количество Г-МСК и ПМ-МСК выше, ПРЕПАРАТА АИМПИЛА НА КРОЛИКАХ чем у доноров; у пациентов с меланомой количество Г- ФГБНУ«НИИНА им. Г.Ф. Гаузе», Москва, Россия; МСК и ПМ-МСК выше, чем у пациентов с диагнозом 2ООО «ФНЦ«ФАРМАКСЕСС», Москва, Россия НМРЛ. Введение. Одним из современных направлений поиска Заключение. Таким образом, показано, что у доноров противоопухолевых средств с улучшенными химиотерапев-количество Г-МСК и ПМ-МСК ниже, чем у онкологиче- тическими свойствами является создание композиций, вклю-ских больных. У пациентов с различными нозологиями чающих белковый вектор и активный агент. Препарат аим-количество Г-МСК и ПМ-МСК может различаться. пила (А) представляет собой композицию экзогенного а-фетопротеина (АФП), нековалентно связанного с атракти-лозидом — соединением, индуцирующим апоптоз опухолевых клеток путем прямого воздействия на их митохондриаль-
Спецвыпуск/ том 16 / 2017 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
62
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
ную функцию. Изучение его токсикологического профиля необходимо для дальнейшего продвижения препарата.
Цель исследования — оценить токсические свойства препарата А в хроническом эксперименте на кроликах.
Материалы и методы. В эксперименте использованы 60 кроликов породы «Советская шиншилла», самцов и самок. Для изучения хронической токсичности выбраны разовые дозы 0,05 и 0,5 мг/кг, эквивалентные 1 и 10 терапевтическим дозам (ТД). ТД для кроликов рассчитана исходя из эффективной ТД для мышей с использованием коэффициента поверхности тела. Кишечнорастворимые капсулы, содержащие лекарственную форму препарата, вводили перорально ежедневно в течение 30 дней. Токсические реакции оценивали во время введения препарата и в течение 30 дней после курса. Параметры исследования: изменение массы тела, массовые коэффициенты внутренних органов, ЭКГ, клинический и биохимический анализ крови, суточный диурез, клинический анализ мочи, патоморфологическое исследование органов и тканей.
Результаты. Установлено, что введение А в 1 ТД не оказывает влияния на клинические показатели и структуру органов и тканей животных. При 10-кратном превышении ТД были найдены обратимые морфологические изменения в сердечной мышце кроликов. Гепатотоксичность А клинически выразилась в повышении активности АСТ и подтвердилась патоморфологическими исследованиями. Влияние препарата на структуру и функцию печени обнаружено по окончании курса введений и являлось обратимым. Нефротоксичность клинически выражалась в появлении уробилиногена и кетоновых телец в моче. Повышение этих показателей выявлено сразу после курса и сохранялось в течение месяца. При морфологическом исследовании признаки повреждения канальцев зарегистрированы во всех зонах почки, изменения клубочков — в юкстамедуллярной зоне. У отдельных кроликов в юкстамедуллярной и мозговой зонах к концу эксперимента сформировались очаги фиброза или кисты. Токсические свойства препарата А не зависели от пола животных.
Заключение. Применение препарата А в 1 ТД не оказывало влияния на структуру и функцию основных органов и систем организма кроликов. При значительном превышении ТД есть вероятность проявления кардио-, гепато- и не-фротоксичности. Выявленные токсические эффекты зависели от дозы А, что позволяет проводить дальнейшие исследования препарата.
Р.А. Петров1, С.А. Петров1, Э.Ю. Ямансаров1, И.В. Салтыкова1, Е.Э. Ондар1, И.В. Кисляков1, Е.К. Белоглазкина1, Н.В. Зык1, А.Г. Мажуга12 НОВЫЕ КОНЪЮГАТЫ ЛИГАНДОВ ASGP-РЕЦЕПТОРА С ПРОТИВООПУХОЛЕВЫМИ ПРЕПАРАТАМИ: СИНТЕЗ И БИОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
1МГУ им. М.В. Ломоносова, химический факультет, Москва, Россия;
2Национальный исследовательский технологический университет «МИСиС», Москва, Россия
Введение. Гепатоцеллюлярная карцинома — 5-е по распространенности и 3-е по смертности онкологическое заболевание. Ежегодно в мире диагностируют более 600000
случаев заболевания этим недугом. Перспективным направлением увеличения эффективности химиотерапии является адресная доставка лекарств в клетки печени при помощи ASGP-рецептора гепатоцитов, распознающего производные галактозы. Данный рецептор расположен только на поверхности клеток печени и селективно связывается с гидроксильными группами в 3-м и 4-м положении галактозы. Внемембранная часть белка состоит из 3 субъединиц, каждая из которых связывается с галактозой.
Цель исследования — получить конъюгаты противоопухолевых лекарственных препаратов с тканеспецифиче-скими лигандами для направленной доставки препарата непосредственно в опухоль печени и их биологическое тестирование.
Материалы и методы. Все исходные реактивы являются коммерчески доступными соединениями. Полученные соединения охарактеризованы при помощи методов 1H и 13С ЯМР-спектроскопии и ВЭЖХ/МС. Цитотоксич-ность определяли MTS-тестом.
Результаты. На данный момент нами получены 8 новых конъюгатов, которые исследованы на предмет связывания с рецептором. Проведены исследования цитоксич-ности соединений на клетках рака печени (HepG2) и клетках сравнения (LnCap). Выявлены соединения-лидеры, для которых планируется проведение дальнейших исследований in vitro и in vivo.
Заключение. Таким образом, нами предложен перспективный метод оптимизации противоопухолевых соединений за счет их конъюгирования с высокоселективным лигандом ASGP-рецептора. В результате работы оптимизированы синтетические подходы к созданию конъюгатов противоопухолевых препаратов с лигандами ASGP-рецеп-тора на основе производных N-ацетилгалактозамина. На базе полученных данных об активности исследуемых соединений установлена зависимость «структура — активность». Выявлено соединение-лидер. Разработана процедура, позволяющая в экспериментах in vitro исследовать новые лиганды асиалогликопротеинового рецептора и конъюгаты на их основе.
Работа выполнена при поддержке РНФ (грант № 14-34-00017) и программы развития «Умник» (№ 8879ГУ/2015).
Е. С. Плеханова1, И.А. Чернигина1, В.В. Чернов2, Т.Г. Щербатюк1
ВЛИЯНИЕ НИЗКОИНТЕНСИВНОГО СВЕТОДИОДНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ НА КРОВЬ И ОПУХОЛЬ IN VITRO
ФГБОУ ВО НижГМА Минздрава России, Нижний Новгород, Россия;
2ИПФ РАН, Нижний Новгород, Россия
Введение. Исследование действия низкоинтенсивного светодиодного и лазерного излучения (НИЛИ) представляет интерес в связи с тем, что несмотря на широкий круг применения действие излучения на опухолевый рост до сих пор остается неясным. Исследования в этой области, начатые еще в 1970 годах, противоречивы. Показаны как положительные эффекты применения НИЛИ, так и отрицательные. Выявить причину такого противоречия
Спецвыпуск / том 16 / 2017
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
