CC BY
29
Материалы III Санкт-Петербургского международного экологического форума
Инфекция и иммунитет
от IgG и IgM, играющих важную роль в защите от патогенов, не взаимодействует с комплементом и не убивает бактерии. Он выполняет другие функции, участвуя в создании биопленки, а также в контроле за поступлением бактерий через М-клетки. Важную роль играют также Т-регуляторные клетки, отвечающие за создание специфической толерантности к антигенам нормальной микробиоты. Таким образом, акцептивный иммунитет отличается от про-тективного по многим параметрам, включающих как запуск иммунного ответа, так и его реализацию, происходящую на уровне разных эффекторных молекул.
Т053 ИЗМЕНЕНИЕ СВОЙСТВ ШТАММОВ ESCHERICHIA COLI ПОД ДЕЙСТВИЕМ
5-ЭНДОТОКСИНОВ BACILLUS THURINGIENSIS
Е.Г. Климентова
ФГБОУВПО УлГУ, Ульяновск, Россия
Известно, что гены ряда белков (б-эндотоксинов) параспоральных кристаллов различных подвидов бактерии B. thuringiensis введены во многие растения для защиты их от вредных насекомых. Такие генно-модифицированные растения (Bt-растения) обладают способностью синтезировать во время вегетации большие количества б-эндотоксинов. Показано, что б-эндотоксины B. thuringiensis обладают выраженной биологической активностью и способны оказывать антибиотическое действие на микроорганизмы — симбионты желудочно-кишечного тракта позвоночных животных и человека. Важнейшее значение симбиотической микробиоты для многих сторон жизнедеятельности животных и человека неоспоримо доказано, поэтому изучение влияния
6-эндотоксинов на свойства бактерий-симбионтов желудочно-кишечного тракта имеет большое значимость, особенно — в связи с расширяющимся использованием трансгенных Bt-растений в питании.
Была изучение гетерогенность популяции 130 штаммов культуры Escherichia coli выделенных из прямого отдела толстой кишки лабораторных мышей с экспериментальным дисбактериозом, обусловленным длительным пероральным введением б-эндотоксинов B. thuringiensis (дозы 75—100мг/кг веса животного, которые могут быть получены из пищи, содержащей Bt-растения) по их персистент-ным и патогенным свойствам, и 49 штаммов, выделенных от интактных животных. С помощью общепринятых методик были изучены антилизоцимная, антикомплементарная и антиинтерфероновая активности, а также адгезивные свойства, гемолитическая и лактозонегативная активности.
Было установлено, что в микробиоценозе толстого кишечника животных при действии б-эндотоксинов B. thuringiensis происходят дисбио-тические изменения, при этом количество гемолитических и лактозонегативных штаммов E. rnli достоверно увеличивалось по сравнению с микро-биотой кишечника интактных животных. Наличие и частота факторов персистенции штаммов E. rnli, выделенных от животных с экспериментальным дисбактериозом, оказались намного больше, чем у штаммов, выделенных от животных контрольной группы, отличаясь на статистически значимую величину. Наблюдалось резкое нарастание частоты проявления этих показателей в группах лактозо-негативных и гемолитических штаммов вплоть до
массового абсолютного (100%) уровня по антили-зоцимной и антиинтерфероновой активности. Следует отметить, что особенно часто высокие показатели факторов персистенции проявляли штаммы E. coli, выделенные из сложных микробиоценозов в виде ди-, три-, тетра-ассоциантов и прочих вариантов, содержащих такие культуры, как Klebsiella spp., Enterococcus spp., Staphylococcus spp., Citrobacter spp., Morganella morganii, Yersinia enterocolitica, дрожжепо-добные грибы р. Candida, и прочие. В результате проведенных нами исследований также было установлено, что в сложных биоценотипических условиях, обусловленных влиянием б-эндотоксинов, штаммы эшерихий, обнаруживая персистентные качества, синхронно усиливали патогенность, в частности, адгезивные свойства.
Таким образом, действие высоких доз б-эндо-токсинов B. thuringiensis на популяцию культуры E. coli в условиях in vivo вызвало усиление факторов персистенции, особенно среди лактозонегативных и гемолитических штаммов. Это сопровождалось колонизацией биотопа кишечника макроорганизма-хозяина добавочными и транзиторными условно-патогенными видами бактерий и привело к снижению количества представителей нормальной микробио-ты. Увеличение содержания условно-патогенных микроорганизмов, в свою очередь, сопровождалось развитием дисбактериоза и подавлением основных гуморальных факторов естественной резистентности макроорганизма.
Т054 ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ ПРОБИОТИЧЕСКИХ ШТАММОВ БАКТЕРИЙ НА МИКРОБИОТУ КУШЕЧНИКА КРЫС ПРИ ДИСБИОЗЕ
К.М. Климина, А.Н. Суворов, Е.И. Ермоленко, А.В. Коровкина, С.А. Гладышев, В.Н. Даниленко
ИОГен РАН, Москва, Россия;
ФГБУ«НИИЭМ» СЗО РАМН, Санкт-Петербург, Россия
На данный момент особый интерес приобрел анализ микробиологических сообществ кишечника при дисбиозе или других заболеваниях. Один из существующих методов метагеномного анализа — анализ на основе гена 16S рРНК, который позволяет анализировать состав микробиологического сообщества.
В нашей работе основной задачей было исследование лекарственного средства на основе штаммов Bifidobacterium longum, Lactobacillus rhammsus, Enterococcus faecium. Проведена оценка влияния данных пробиотических бактерий отдельно и в виде смеси этих микроорганизмов на модели экспериментального дисбиоза кишечника у крыс. Созданы 6 групп крыс, которым вводились по-отдельности пробиотические штаммы B. longum, L.rhammsus, E. faecium, входящих в состав ЛС; их смесь, в соотношении 1:1:1; антибиотик и контрольная группа, которые получали воду. В ходе пробиотикотерапии дисбиоза выявлены тенденции к более быстрому восстановлению содержания основных представителей облигатной флоры кишечника: лактоба-цилл, бифидобактерий, энтерококков, эшерихий и «благоприятного маркерного» вида бактерий Faecalibacterium prausnitzii. Доказана способность комплекса пробиотических бактерий стимулировать продукцию регуляторного цитокина TGF-p1 и экспрессию противовоспалительного цитокина IL-10.
2014. Специальный выпуск
Материалы III Санкт-Петербургского международного экологического форума
У всех 6-ти групп крыс отбирались фекалии для их дальнейшего анализа, в частности мультилокус-ного секвенирования по участку гена 16S рРНК на приборе GS Junior, Roche. Была сделана выборка из 3-х фекалий каждой группы от одного эксперимента и 5 фекалий каждой группы от повторного эксперимента. В общей сложности на каждую группу приходилось по 8 образцов фекалий.
Мультилокусное секвенирование по участку гена 16S рРНК позволило выявить степень биологического разнообразия микробиоты кишечника крыс в зависимости от того, что вводилось той или иной группе крыс. Анализ данных секвенирования проводился по базе данных Ribosomal Database Project (RDP) http://rdp.cme.msu.edu/. Биологическое разнообразие микробиоты кишечника крыс анализировалось по видовому и родовому составу бактериальных сообществ.
Т055 ЗАБОЛЕВАЕМОСТЬ ТУБЕРКУЛЕЗОМ НАСЕЛЕНИЯ ЕВРЕЙСКОЙ АВТОНОМНОЙ ОБЛАСТИ
Е.О. Клинская
ФГБОУ ВПО «Приамурский государственный университет имени Шолом-Алейхема, г. Биробиджан, Россия
Туберкулез — это заболевание мирового и глобального масштабов. В РФ самый низкий показатель заболеваемости туберкулезом был отмечен в 1990 г. — 34 случая на 100 тыс. населения в год. В настоящее время в Европе заболеваемость 54 случая, а в Израиле, Германии, Италии 5—6 на 100 тыс. населения в год. Наибольшая заболеваемость туберкулезом регистрируется в Индии, КНР и России. На протяжении последних лет Еврейская автономная область (ЕАО) занимает 2-е место в РФ по уровню заболеваемости туберкулезом.
В конце 20-го и начале 21-го столетий, с ростом уровня безработицы, увеличением количества лиц без определенного места жительства, снижением качества медицинского обслуживания в ЕАО выросла заболеваемость населения туберкулезом почти до 200 случаев на 100 тыс. населения в год. В 2012 г. этот показатель в РФ составил чуть больше 68,1 случаев, в то время как в ЕАО он был почти в 2,5 раза выше (171,3). В ДВФО, по данным за 2010 год, заболеваемость была 139,5, в Приморье — 200, в Хабаровском крае — 126, в Амурской области — 145, в ЕАО — 173 случаев на 100 тыс. населения в год.
Сегодня во всех регионах РФ просматривается тенденция к снижению показателей по данному заболеванию. Однако в ЕАО они остаются достаточно высокими (средний показатель за последние 10 лет — 128,3 случаев на 100 тыс. населения в год), а область постоянно входит в пятерку территорий, имеющих наибольший уровень заболеваемости населения туберкулезом. Высок уровень инфицированности населения.
Заболеваемость туберкулезом у мужчин в автономии в 2 раза выше, чем у женщин, что связано с ведением нездорового образа жизни, наличием вредных привычек и большей, в отличие от женщин, подверженности стрессам. Преимущественно поражаются туберкулезом органы дыхания.
Анализ заболеваемости населения туберкулезом по муниципальным образованиям автономии показал, что особенно она высока в сельскохозяйственных районах — Биробиджанском, Ленинском и Смидовичском и превышает среднеобластной по-
казатель более чем на 50%. Связано это с низким уровнем медицинского обслуживания, санитарной культуры населения, отсутствием профилактической работы, фельдшерских пунктов в некоторых отдаленных поселениях, налаженного регулярного автобусного сообщения. И как следствие, население отдаленных мест не имеет возможности вовремя выехать в административный центр, диагностировать и начать лечение данного заболевания. Больные уклоняются от лечения и болеют целыми семьями. По нашим данным, 70—75% больных (включая инвалидов) из сельской местности, не работают, имеют низкое качество жилья, неполноценное питание (преобладание хлеба и картофеля, ниже среднероссийского показателя потребление молока, мяса и яиц), живут в условиях стресса.
Как известно, риск заболеть возрастает, когда имеются сопутствующие заболевания — диабет, язвенная болезнь желудка, бронхит, гепатит и др. Фактором риска также могут быть и прием различных препаратов, снижающих иммунитет, мутация самой туберкулезной палочки и формирование к ней лекарственной устойчивости, миграция населения.
В настоящее время в автономии необходимо приобрести современное компьютерное лабораторное оборудование, которое сократит срок диагностики (бактериологического анализа) с 4-х месяцев до 3—4 недель.
Таким образом, на территории ЕАО проблема заболеваемости населения туберкулезом стоит достаточно остро и требует дополнительных исследований.
Материалы подготовлены при финансовой поддержке субсидии на выполнение государственного задания Минобрнауки России № 2014/422 ФГБОУ ВПО «ПГУ им. Шолом-Алейхема» по проекту № 485 «Влияние природных и неприродных факторов на состояние здоровья населения Еврейской автономной области».
Т056 РАЗРАБОТКА СИСТЕМЫ ФАГОТИПИРОВАНИЯ ЛИСТЕРИЙ
Е.Н. Ковалева, Д.А. Васильев, Е.В. Сульдина
ФГБОУ ВПО УГСХА им. П.А. Столыпина, Ульяновск, Россия
При возникновении вспышек листериозной инфекции связанных с потреблением пищевых продуктов, прежде всего, сыра, других молочных продуктов, салатов, фруктов в меньшей степени — мясных, куриных и рыбных изделий с высоким процентом летальных исходов, большое значение приобретает выявление источников инфекции и установление эпидемических связей. Решение этой задачи возможно методом типирования листерий, подтверждающим идентичность микроорганизмов, выделяемых у больных, носителей и объектов внешней среды. В настоящее время общепринятая международная схема типирования листерий признанна несовершенной.
Специфические бактериофаги являются точными индикаторами, определяющими видовую и типовую принадлежность бактерий. Использование наборов таких типоспецифических фагов позволит проводить фаготипирование исследуемых культур с целью эпидемиологического анализа листериозной инфекции: установления источника и путей ее передачи.
В настоящее время для фаготипировния листе-рий используется набор бактериофагов производ-
