CC BY
13
УДК 616.314.17-002.2:616.316-008.8-073.537
ИНТЕНСИВНОСТЬ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ В РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ У ПАЦИЕНТОВ С ПАТОЛОГИЕЙ ПАРОДОНТА
Севостьянов И.А., Уварова А.Г., Швец О.В.
ФГБОУ ВО «Кубанский государственный медицинский университет», г. Краснодар, Российская Федерация Аннотация. В статье представлены результаты исследования интенсивности свободнорадикальных процессов в ротовой жидкости пациентов с патологией пародонта. Были изучены параметры максимума вспышки и площади хемилюминесценции и содержание продуктов окислительной модификации биомолекул. Показано, что уже при развитии хронического генерализованного пародонтита легкой степени тяжести показатели максимума вспышки и площади хемилюминесценции возрастают на 36-40% и достигают 180-200% от значений контрольной группы при тяжелом течении. Несколько медленнее нарастает концентрация продуктов, взаимодействующих с тиобар-битуровой кислотой и остатков битирозина. Полученные результаты указывают на перспективность уже на ранних стадиях развития заболеваний пародонта применять лечебные и профилактические средства антиоксидант-ной направленности действия.
Ключевые слова: ротовая жидкость, свободнорадикальное окисление, хемилюминесценция, окислительные модификации.
Введение. Заболевания пародонта в настоящее время имеют высокую распространенность, с тенденцией к дальнейшему росту, ведут к развитию серьезных осложнений и имеют существенное влияние на качество жизни пациентов. Болезни паро-донта, наряду с кариесом, занимают одно из ведущих мест в структуре стоматологической патологии, а по своим деструктивным последствиям для зубочелюстной системы доминируют над всеми остальными заболеваниями полости рта. Важными факторами в развитии заболеваний пародонта являются процессы, ведущие к интенсификации сво-боднорадикального окисления в ротовой жидкости. Дисбаланс антиоксидантно-прооксидантной системы с превалированием прооксидантных факторов - один из ключевых факторов в развитии и течение воспалительной реакции, вне зависимости от ее этиологии, локализации и распространенности [1]. Сдерживающим действием в отношении активизации окислительных процессов в организме обладает система антиоксидантной защиты (АОЗ). Однако, при многих, особенно длительно текущих хронических заболеваниях отмечается снижение ее протективного потенциала. Одним из таких заболе-
ваний является хронический генерализованный па-родонтит (ХГП). Ротовая полость требует слаженного функционирования ферментного и неферментного звеньев системы АОЗ в связи с повышенным риском образования свободных радикалов из-за тесного непосредственного контакта с кислородом воздуха, поэтому изучение активности окислительных процессов в ротовой жидкости у больных со стоматологической патологией является актуальной проблемой [2].
Целью настоящего исследования являлось изучение интенсивности свободнорадикальных процессов в ротовой жидкости больных с хроническим генерализованным пародонтитом различной степени тяжести по данным показателей хемилюми-несценции, содержания продуктов реакции с тиоб-арбитуровой кислотой и продукта окислительной модификации белков - битирозина.
Материалы и методы. Объектом исследования была ротовая жидкость больных с ХГП, наблюдавшихся в Стоматологической поликлинике ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России (г. Краснодар). Исследуемые пациенты были разделены на несколько групп: контрольную группу (группа К) составили
—--—
Журнал включен в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК
18 человек без патологии пародонта (средний возраст 38,5±3,9 лет). Группу 2 составили 19 пациентов с ХГП легкой степени тяжести (средний возраст 42,0±4,5 года). Группу 3 сформировали 16 пациентов с ХГП средней степени тяжести (средний возраст 42,5±5,0 года). Группу 4 составили 18 пациентов с ХГП тяжелой формы.
Ротовую жидкость пациентов собирали до проведения каких-либо коррегирующих мероприятий, в утреннее время методом сплевывания в чистую сухую градуированную стеклянную пробирку. Далее свежая биожидкость в максимально короткий срок подвергалась центрифугированию при 3000 об. /мин в течение 15 минут. Дальнейшим лабораторным биохимическим и биофизическим исследованиям подвергалась чистая, без признаков присутствия крови надосадочная жидкость. Определяли содержание ТБК-реактивных продуктов - продуктов окислительной модификации биомолекул, прежде всего липидной природы, взаимодействующих с 2-тиобарбитуровой кислотой по методике [3]. Содержание остатков битирозина, как продукта окислительной модификации белков, определяли
250,000
спектрофлуориметрическим методом [4]. Параметры хемилюминесценции, интегрально отражающие интенсивность свободнорадикальных процессов в биожидкости, определяли по методике Н2О2-индуцированной люминол-зависимой хемилюминесценции на люминотестере LT-01 [5]. Осуществляли регистрацию максимума вспышки и площади хемилюминесценции (МВХЛ и ПХЛ).
Статистический анализ полученных данных проводили с помощью системы анализа R (Development Core Team, Австрия, 2008). Достоверными считали различия показателей между группами при p<0,05.
Результаты и обсуждение. В ходе проведенных исследований было установлено постепенное и неуклонное прогрессирование увеличения интенсивности свободнорадикальных процессов в ротовой жидкости исследуемых групп пациентов, что отражалось как в возрастании показателей хе-милюминесценции, так и в параметрах, связанных с окислительными модификациями биологических молекул (рис. 1).
МВХЛ
ПХЛ
ТБКРП
Битирозин
0 Группа К И Группа 2 0 Группа 3 Н группа 4 Рис. 1. Показатели активности свободнорадикальных процессов в ротовой жидкости больных хроническим генерализованным пародонтитом различной степени тяжести
(M±m)
Примечание: * - р<0,05 при сравнении с группой 1.
Наиболее выраженные и быстро развивающиеся изменения были характерны для показателей МВХЛ и ПХЛ, которые возрастали на 36-40% в группе 2 и увеличивались в 1,8-2,1 раза в группе 4 в сравнении со значениями контрольной группы. Причем ПХЛ возрастала, как правило, несколько более выраженно, чем МВХЛ, что более объек-
тивно показывало состояние окислительного метаболизма, так как суммарная площадь хемилюми-несценции зависит от более длительной генерации свободных радикалов, включая образование вторичных и третичных радикалов, развитие цепи сво-боднорадикального окисления. С небольшой задержкой возрастали продукты окислительной модификации биомолекул - ТБКРП и битирозин. Так в группе 2 достоверных различий содержания этих
веществ в сравнении с контрольной группой не наблюдалось, что вероятно связано с более длительным процессом накопления и в более агрессивных условиях. В группе 3 наблюдалось увеличение концентрации ТБКРП на 22% и остатков битиро-зина - на 39%. В группе 4 концентрации ТБКРП и битирозина продолжали нарастать, достигая величин превышающих контрольные значения на 40% и 64% соответственно. Более значительное накопление остатков битирозина может быть связно с тем, что они медленно выводятся и, самое главное, что такие повреждения не репарируются.
Выводы. Полученные результаты демонстрируют выраженность интенсификации свободнора-дикальных процессов у больных ХГП различной степени тяжести. Показано, что существенное возрастание продукции прооксидантных факторов происходит уже у пациентов с легкой формой заболевания, при дальнейшем прогрессировании происходит постепенное накопление продуктов окислительных модификаций белков и липидов. Представленные данные указывают на перспективность уже на ранних стадиях развития заболеваний паро-донта применять лечебные и профилактические
средства антиоксидантной направленности действия.
ЛИТЕРАТУРА
1. Bykova N., Basov A., Melkonyan K., Alekseenko E., Popov K., Bykov I. Non-invasive monitoring for local immune and antioxidant resistance in patients with ischemic heart disease and type 2 diabetes // Медицинский вестник Северного Кавказа. 2016. Т. 11. № 2. С. 147-149.
2. Быков И.М., Алексеенко Е.А., Попов К.А., Быкова Н.И., Овсянникова А.А., Егорова И.А., Есауленко Е.Е., Еремина Т.В. Перспективы изучения ротовой жидкости в лабораторной диагностике нарушений окислительного метаболизма // Кубанский научный медицинский вестник. 2016. № 4. С. 16-20.
3. Камышников В.С. Справочник по клинико-биохи-мическим исследованиям и лабораторной диагностике. М.: МЕДпресс-информ. 2004. 920 с.
4. Davies K.J. Protein damage and degradation by oxygen radicals. I. General aspects // J. Biol. Chem. 1987. Vol. 262, № 20. Р. 9895 - 9901.
5. Басов А.А., Павлюченко И.И., Плаксин А.М., Федосов С.Р. Использование аналогово-цифрового преобразователя в составе системы сбора и обработки информации с хе-милюминитестером LT-01 // Вестник новых медицинских технологий. 2003. Т. 10, № 4. С. 67-68.
INTENSITY OF FREE RADICAL OXIDATION IN ORAL FLUID OF PATIENTS WITH PERIODONTAL DISEASES
Sevostianov I.A., Uvarova A.G., Shvets O.V.
Kuban state medical university, Krasnodar, Russian Federation
Annotation. In the article the results of the research in intensity of the free-radical processes in the oral liquid of patients suffering from the parodentium pathology have been presented. The maximum characteristics of the flash and the area of chemoluminescence as well as the content of products of the oxidative modification in the biomolecules have been studied. It has been shown that even by the development of the chronic generalized periodontitis of the slight severity the maximum characteristics of the flash and the area of chemoluminescence increase by 36-40% and reach 180-200% in comparison to the control group indices in the advanced form. The concentration of products which react with the thio-barbituric acid and of the bityrosine remains increases a bit slower. The received data manifest the usage availability of the healing and the preventive remedies with the antioxidative effect already on the early stage of parodentium diseases.
Key words: oral fluid, free radical oxidation, chemiluminescence, oxidative modification.
REFERENCES
1. Bykova N., Basov A., Melkonyan K., Alekseenko E., Popov K., Bykov I. Non-invasive monitoring for local immune and antioxidant resistance in patients with ischemic heart disease and type 2 diabetes // Медицинский вестник Северного Кавказа. 2016. Т. 11. № 2. С. 147-149.
2. Bykov I.M., Alekseenko E.A., Popov K.A., Bykova N.I., Ovsjannikova A.A., Egorova I.A., Esaulenko E.E., Er-emina T.V. Perspektivy izuchenija rotovoj zhidkosti v laborator-noj diagnostike narushenij okislitel'nogo metabolizma // Ku-banskij nauchnyj medicinskij vestnik. 2016. № 4. S. 16-20.
3. Kamyshnikov V.S. Spravochnik po kliniko-biohimich-eskim issledovanijam i laboratornoj diagnostike. M.: «MEDpress-inform»; 2004. 920 p.
4. Davies K.J. Protein damage and degradation by oxygen radicals. I. General aspects // J. Biol. Chem. 1987. Vol. 262, № 20. P. 9895 - 9901.
5. Basov A.A., Pavljuchenko I.I., Plaksin A.M., Fedosov S.R. Ispol'zovanie analogovo-cifrovogo preobrazovatelja v sostave sistemy sbora i obrabotki informacii s hemilju-minitesterom LT-01 // Vestnik novyh medicinskih tehnologij. 2003. T. 10, № 4. S. 67-68.
