УДК 616.314.17-002.2:616.316-008.8-074
АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТНОГО ЗВЕНА АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЫ СМЕШАННОЙ СЛЮНЫ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ГЕНЕРАЛИЗОВАННОМ ПАРОДОНТИТЕ
Виниченко Е.Л., Уварова А.Г., Ловлин В.Н.
ФГБОУ ВО «Кубанский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Краснодар, Российская Федерация
Аннотация. Представленные результаты демонстрируют изменение функционирования ферментов антиокси-дантной защиты при хроническом течении генерализованного пародонтита. При патологии легкой степени тяжести наблюдаются изменения компенсаторного характера, отражающиеся преимущественно в увеличении активности ферментов. Наиболее выраженный рост активности отмечался для глутатионредуктазы - на 24%. При дальнейшем прогрессировании заболевания происходит срыв резервных возможностей, отражающийся снижением активности каталазы, супероксиддисмутазы, глутатионпероксидазы и глутатионредуктазы на 37-53%. Данные исследования указывают на перспективность поиска методов антиоксидантной коррекции метаболических нарушений у данной категории больных.
Ключевые слова: слюна, заболевания пародонта, антиоксидантная система, каталаза.
Введение. Хронический генерализованный пародонтит (ХГП) - заболевание пародонта воспалительно-деструктивного характера, является одной из самых актуальных проблем современной стоматологии. ХГП сопровождается снижением потенциала различных звеньев системы неспецифической резистентности организма - ан-тиоксидантно-прооксидантной системы, иммунологической реактивности, функциональной системы детоксикации, сопровождается развитием нарушений минерального обмена, дисбак-териоза и др. Развитие метаболических нарушений распространяется на системный уровень, что отражается в изменении биохимических показателей крови [1]. Однако, чаще всего для лабораторной диагностики достаточно использования смешанной слюны (ротовой жидкости) [2, 3]. В большом количестве работ показана перспектива использования ее диагностического потенциала, как при стоматологических, так и при соматических патологиях [4, 5].
В последнее время внимание исследовательских коллективов направлено на изучение энергетического обмена и его нарушений в тканях при пародонтите. Известно, что побочными продуктами энергетического метаболизма являются активные формы кислорода, другие свободные радикалы и активные молекулы. При ХГП в тканях пародонта развивается гипоксия с интенсификацией свободнорадикальных процессов, как правило, на фоне подавления антиоксидантной системы (АОС) биологических тканей и жидкостей полости рта.
Целью настоящего исследования являлось изучение активности ферментативного звена ан-тиоксидантной системы у больных хроническим генерализованным пародонтитом разной степени тяжести.
Материалы и методы. Объектом исследования была смешанная слюна пациентов с ХГП, наблюдавшихся в Стоматологической поликлинике ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России (г. Краснодар). Всего было обследовано 95 пациентов, разделенных на 4 группы. Контрольную группу
—---
'Журнал включен в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК
~ 127 ~
(группа 1) составили 25 человек без патологии па-родонта. Вторую группу составили 30 пациентов, страдающих патологией пародонта легкой степени тяжести. Третья группа была представлена 22 пациентами с патологией пародонта средней степени тяжести. Четвертую группу составили 18 пациентов с патологией пародонта тяжелой степени тяжести. Все группы были сопоставимы друг с другом по полу и возрасту пациентов.
При стоматологическом обследовании для оценки нуждаемости в лечении заболеваний паро-донта проводили оценку индекса СРТШ. Изучение распространенности и интенсивности поражения тканей пародонта проводили с учетом индекса Р1 по Russel (1956). С помощью папиллярно-маргинально-альвеолярного индекса (РМА) определяли выраженность воспаления десен.
Смешанную слюну собирали в утреннее время методом сплевывания в пробирку. Исследование биохимических параметров проводилось в надоса-дочной жидкости. Определение активности супе-роксиддисмутазы (СОД) проводили по методике, основанной на подавлении восстановления нитро-синего тетразолия в системе с ксантиноксидазой. Активность каталазы определяли по скорости утилизации Н2О2 в реакционной смеси. Активность глутатионпероксидазы (ГПО) определяли по уровню израсходованного в результате реакции окисления, восстановленного глутатиона. Активность фермента ГР измеряли по степени окисления
140,000
3 120,000 я
| 100,000
НАДФН в ходе реакции восстановления, окисленного глутатиона на длине волны 340 нм. Расчет ферментативной активности вели в пересчете на грамм белка [6].
Статистическую обработку полученных экспериментальных данных проводили с использованием программного обеспечения, находящегося в свободном доступе (R Development Core Team, Австрия, 2008). Достоверными считали различия между группами при p<0,05.
Результаты и обсуждение. Исследование клинических индексов состояния тканей пародонта продемонстрировало закономерные эффекты усугубления состояния полости рта при более тяжелом течении ХГП. У пациентов с ХГП легкой степени тяжести определялись значения индексов CPTIN, PMA и PI на уровне 2,03 балла, 33,86% и 1,55 баллов соответственно. У пациентов со средней степенью хронического генерализованного пародонтита наблюдались увеличенные индексы CPTIN - на 12,8%, PMA - на 15,4% и PI - практически в 2 раза. Более значительно отличались показатели 3 и 4 групп. В 4-й группе наблюдалось дальнейшее увеличение индексов CPTIN, PMA и PI на 56,3%, 43,2% и 65,4% в сравнении с группой пациентов с ХГП средней степени тяжести. Анализ данных клинических исследований имел вспомогательную роль, но он необходим в контексте сравнения данных с результатами определения лабораторных показателей.
80,000
я à60,000
л '
! 40,000
S
о 20,000
я '
О 0,000
СОД
КАТ □ Группа 1
ГПО И Группа 2
ГР
Рис. 1. Показатели активности ферментов антиоксидантной защиты в смешанной слюне пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом (М±т)
Примечание: * - p<0,05 при сравнении с группой 1.
—--—
Изучение показателей активности ферментов антирадикальной защиты показало наличие дисбаланса в функционировании основных компонентов АОС при развитии ХГП (рис. 1). В группе 2 наблюдалось небольшое увеличение активности СОД на 19,2% на фоне статистически незначимо сниженной каталазной активности и возрастание активности ферментов тиолового метаболизма: ГПО - на 13% и ГР - на 24%. В 3-й группе уже наблюдалось падение активностей всех энзимов, что вероятно связано с декомпенсацией резервных возможностей системы гуморального гомеостаза ротовой жидкости. В 4-й группе, на фоне тяжелого течения ХГП, закономерно наблюдалось наиболее существенное снижение активностей СОД и КАТ - на 43,1% и 34,3% соответственно. Активности ферментов системы глутатиона также снижались: ГПО - на 53% и ГР - на 37%.
Выводы. Таким образом, полученные результаты демонстрируют изменение функционирования ферментного звена АОС при ХГП. При патологии легкой степени тяжести наблюдаются изменения компенсаторного характера, отражающиеся в преимущественно возрастании активностей ферментов. При дальнейшем прогрессиро-вании заболевания происходит срыв адаптивных возможностей с нарастанием дисбаланса в функционировании системы про-/антиоксиданты. Данные исследования показывают на актуаль-
ность поиска способов ангиоксвдангаой коррекции метаболических нарушений в ротовой полости у больных ХГП, особенно средней и тяжелой степени тяжести.
ЛИТЕРАТУРА
1. Алексеенко Е.А., Попов К.А., Быков И.М., Се-пиашвили Р.И. Метаболические изменения биохимических показателей на местном и системном уровнях у пациентов с аллергическими заболеваниями // Аллергология и иммунология. 2016. Т. 17. № 2. С. 93-97.
2. Bykova N., Basov A., Melkonyan K., Alekseenko E., Popov K., Bykov I. Non-invasive monitoring for local immune and antioxidant resistance in patients with ischemic heart disease and type 2 diabetes // Медицинский вестник Северного Кавказа. 2016. Т. 11. № 2. С. 147149.
3. Basov A.A., Akopova V.A., Bykov I.M. Changing the parameters of prooxidant-antioxidant system in blood and oral fluid of patients with ischemic heart disease and type 2 diabetes mellitus // International journal on immunorehabilitation. 2013. Vol. 15. № 2. Р. 84-86.
4. Перспективы изучения ротовой жидкости в лабораторной диагностике нарушений окислительного метаболизма / И.М. Быков, Е.А. Алексеенко, К. А. Попов [и др.] // Кубанский научный медицинский вестник. 2016. № 4. С. 16-20.
5. Литвинова М.Г., Басов А.А., Быков И.М. Показатели свободнорадикального окисления в крови и ротовой жидкости у больных при ишемической болезни сердца и сахарном диабете 2-го типа // Кубанский научный медицинский вестник. 2012. № 3. С. 94-98.
6. Карпищенко А.И. Медицинские лабораторные технологии. Справочник. - СПб.: Интермедика. 2002.
ACTIVITY OF SALIVA ANTIOXIDANT ENZYMES IN CHRONIC GENERALIZED PERIODONTITIS
Vinichenko E.L., Uvarova A.G., Lovlin V.N.
Kuban state medical university, Krasnodar, Russian Federation
Annotation. Results of this study demonstrate the changes in the functioning of antioxidant enzymes in chronic generalized periodontitis. There are changes of the compensatory nature, affecting predominantly on increase of enzyme activity in pathology of low severity. Strongly increase in enzyme activity for glutathionereductase was noted - on 24%. Further disease progression conduct to failure of reserve possibilities what decrease of the activity of catalase, superoxide dis-mutase, glutathione peroxidase and glutathionereductase on 37-53%. These studies point to the prospect of search of the antioxidant correction methods of metabolic disorders in these patients.
Key words: oral fluid, periodontal diseases, antioxidant system, catalase.
REFERENCES
1. Alekseenko E.A., Popov K.A., Bykov I.M., Sepi-ashvili R.I. Metabolicheskie izmenenija biohimicheskih pokazatelej na mestnom i sistemnom urovnjah u pa-cientov s allergicheskimi zabolevanijami // Allergologija i immunologija. 2016. Vol. 17. № 2. pp. 93-97.
2. Bykova N., Basov A., Melkonyan K., Alekseenko E., Popov K., Bykov I. Non-invasive monitoring for local immune and antioxidant resistance in patients with is-chemic heart disease and type 2 diabetes // Medicinskij vestnik Severnogo Kavkaza. 2016. Vol. 11. № 2. pp. 147149.
3. Basov A.A., Akopova V.A., Bykov I.M. Changing the parameters of prooxidant-antioxidant system in blood
and oral fluid of patients with ischemic heart disease and type 2 diabetes mellitus // International journal on immunorehabilitation. 2013. Vol. 15. № 2. pp. 84-86.
4. Perspektivy izuchenija rotovoj zhidkosti v labora-tornoj diagnostike narushenij okislitel'nogo metabolizma / I.M. Bykov, E.A. Alekseenko, K.A. Popov [et al.] // Ku-banskij nauchnyj medicinskij vestnik. 2016. № 4. pp. 1620.
5. Litvinova M.G., Basov A.A., Bykov I.M. Poka-zateli svobodnoradikal'nogo okislenija v krovi i rotovoj zhidkosti u bol'nyh pri ishemicheskoj bolezni serdca i sa-harnom diabete 2-go tipa // Kubanskij nauchnyj medicinskij vestnik. 2012. № 3. pp. 94-98.
6. Karpishhenko A.I. Medicinskie laboratornye tehnologii. Spravochnik. - SPb.: Intermedika. 2002.