Материалы II Национального конгресса бактериологов
Инфекция и иммунитет
ИННОВАЦИИ В ОРГАНИЗАЦИИ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ В ПОЛЕВЫХ УСЛОВИЯХ
B.В. Малышев1, Т.А. Змеева1, В.Б. Сбойчаков1,
C.С. Котов2, Т.В. Носкова1
1 Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова, Санкт-Петербург
2 ФГКУ985Центр государственного санитарно-эпидемиологического надзора Минобороны России, Санкт-Петербург
В структуре заболеваемости населения острые кишечные инфекции (ОКИ) занимают одно из ведущих ранговых мест. Значительная часть заболеваний связана с контаминацией факторов передачи, кишечными бактериями и вирусами. Установление этиологии ОКИ в современных условиях в базовых лабораториях медицинских учреждений Минздрава, МО РФ, в лабораториях Роспотребнадзора и других проводится с учетом единых требований Санитарного законодательства Российской Федерации, с использованием современных методов диагностики, включая бактериологический метод, метод иммуноферментного анализа и метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени, с использованием современных мультиплексных диагностических тест-систем. Особенности географического положения регионов, климатические условиями, отсутствие эффективной логистики доставки проб и др. влечет за собой избирательный характер применения имеющихся сил и средств медицинской службы при проведении микробиологической диагностики в полевых условиях. В последние годы для этих целей внедряются устройства, укладки, диагностикумы и тест-системы, изготовленные в России, некоторые из них проходят тестирование в настоящее время.
Цель работы состояла в оценке возможности и диагностической ценности, имеющихся у отечественного производителя средств пробоподготовки и детекции кишечных бактерий и вирусов. При этом, основной задачей было совершенствование пробо-подготовки и отбор специфических микробиологических методов диагностики ОКИ бактериальной и вирусной этиологии в полевых условиях и чрезвычайных ситуациях.
Нами при проведении полевых исследований максимально использовались современные мембранные технологии для пробоподготовки, при этом, за счет концентрирования кишечных патогенов стандартными и экспериментальными мембранами, было уменьшено количество лож-ноотрицательных результатов при расшифровке структуры возбудителей ОКИ в пробах из объектов внешней среды. Использование новых подходов к пробоподготовке при оценке образцов из объектов внешней среды экспериментальными мембранами, мембранами с наведенным зарядом, мембранами из инновационных материалов, значительно повысило результативность, кроме того, возможность применять простые экспресс-тесты, такие как иммунохроматографический метод, реакция агглютинации латекса, метод иммунофлюо-ресценции. В работе был применен метод мембранной фильтрации в тангенциальном потоке, что позволило увеличить количество детектируемых патогенов. В настоящее время отечественной промышленностью выпускается комплект мобильной
лаборатории ПЦР для работы в полевых условиях, который был нами так же использован в наших исследованиях. Нами использовалась укладка дот-ИФА (точечный иммуноферментный анализ), предназначенная для детекции бактериальных и вирусных маркеров в готовой жидкой пробе в полевых условиях, где в качестве твердой фазы используется пористая микрофильтрационная аце-татцеллюлозная мембрана.
Мы протестировали иммунохроматографичес-кие тесты, выпускаемые отечественной промышленностью, и были получены репрезентативные результаты, подтвержденные методом ПЦР.
Таким образом, была оценена возможность использования реакции агглютинации латекса (РАЛ) для обнаружения ротавирусов, аденовирусов и др. в объектах окружающей среды. Были получены положительные результаты в элюатах воды. Кроме того, нами были апробированы отдельные элементы разрабатываемой авторской укладки универсальной для пробоподготовки и детекции кишечных патогенов бактериальной и вирусной природы, позволяющей работать в эстремальных условиях при отсутствии электричества, средств стерилизации и наличия других неудобств. Для оперативной оценки эпидемиологической безопасности водных объектов окружающей среды, питьевой воды, продовольствия и другого материала, а также для установления этиологии ОКИ в полевых условиях требуется внедрение перспективных, простых, специфических методов пробоподготовки и детекции с применением отечественных устройств, средств, способов, универсальных укладок и реагентов.