CC BY
54
УДК 581.143: 547. 917
Р. П. Закирова, М. А. Агзамова, И. М. Исаев
Фитохимическое исследование Astragalus babatagi и введение растения в культуру in vitro
Институт химии растительных веществ им. акад. С.Ю. Юнусова АН РУз, г. Ташкент, Республика Узбекистан
Аннотация. Растения Astragalus семейства Fabaceae являются источниками циклоартановых соединений. Широкий спектр физиологической активности этих веществ открывает большие перспективы для практического использования в качестве лекарственных средств. Для сохранения ценных лекарственных растений, продуцентов биологически активных веществ, используются методы культуры клеток растений. Целью настоящей работы было изучение химического состава Astragalus babatagi и введение растения в культуру in vitro. Для выделения и идентификации гликозидов воздушно-сухие корни A. babatagi исчерпывающе экстрагировали метанолом при комнатной температуре. После упаривания растворителя сумму экстрактивных веществ хроматографировали в различных системах растворителей. Обнаружено три соединения тритерпеноидной природы: циклосиверсиозид А, циклосиверсиозид В и циклосиверсиозид С. Все соединения идентифицировали как известные гликозиды. Для получения каллусных тканей семядоли стерильных проростков разделяли на небольшие фрагменты и помещали в питательную среду Мурасиге и Скуга с добавлением 100 мг/л инозита, тиамина в НС1 - 4 мг/г, сахарозы - 30 г/л, агара - 0,7 %. Для индукции каллусогенеза были использованы НУК и БАП в концентрациях 0,5 мг/л и 0,2 мг/л соответственно. На 14-16-й день наблюдалось образование каллуса. Первичная каллусная ткань имела плотную консистенцию светло-коричневого цвета. Каллусы характеризовались очень низким ростом. При дальнейшем пассировании ростовая активность повышалась, но к концу 4 недели каллусы приобретали темно-коричневый цвет. После 3 недели культивирования каллусы темнели, замедлялся их рост, кроме того, к концу 4-й недели питательная среда вокруг каллусов приобретала
ЗАКИРОВА Рано Пулатовна - к. б. н., с. н. с., зав лабораторией фитотоксикологии Института химии растительных веществ им. акад. С.Ю. Юнусова АН РУз, г. Ташкент, Республика Узбекистан.
E-mail: [email protected]
ZAKIROVA Rano Pulatovna - Candidate of Biological Sciences, Senior Researcher, Head of Phytotoxicology Laboratory, S.Yu. Yunusov Institute of the Chemistry of Plant Substances, Academy of Sciences of Uzbekistan, Tashkent, Republic of Uzbekistan.
АГЗАМОВА Манзура Адхамовна - к. х. н., с. н. с., зав. лабораторией химии гликозидов Института химии растительных веществ им. акад. С.Ю. Юнусова АН РУз, г. Ташкент, Республика Узбекистан.
E-mail: [email protected]
AGZAMOVA Manzura Adhamovna - Ph.D., Senior Researcher, Head of the Department. Laboratory of the Chemistry of Glycosides, S.Yu. Yunusov Institute of the Chemistry of Plant Substances, Academy of Sciences of Uzbekistan, Tashkent, Republic of Uzbekistan.
ИСАЕВ Иса Магомед оглы - м. н. с. лаборатории химии гликозидов Института химии растительных веществ им. акад. С.Ю. Юнусова АН РУз, г. Ташкент, Республика Узбекистан.
E-mail: [email protected]
ISAEV Isa Magomed oglu - Laboratory of Chemistry of Glycosides, S.Yu. Yunusov Institute of the Chemistry of Plant Substances, Academy of Sciences of Uzbekistan, Tashkent, Republic of Uzbekistan.
коричневатый цвет, что говорило о выделении и накоплении полифенольных соединений в среде, в результате чего на 30-35-й день каллусы гибли. При сокращении периода пассирования до 15-20 дней наблюдалось увеличение срока жизни каллусов A. babatagi. В дальнейшем намечается проведение оптимизации питательной среды.
Ключевые слова: Astragalus babatagi, циклоартаны, тритерпеноиды, Циклосиверсиозиды А, В и С, колоночная хроматография, тонкослойная хроматография, каллусные ткани, а-нафтилуксусная кислота, 6-бензиламинопурин, полифенольные соединения.
DOI 10.25587/SVFU.2018.64.12128
R. P. Zakirova, M. A. Agzamova, I. M. Isaev
Phytochemical Study of Astragalus Babatagi and Introduction of the Plant Into In Vitro Culture
S.Yu. Yunusov Institute of the Chemistry of Plant Substances, Academy of Sciences of Uzbekistan,
Tashkent, Republic of Uzbekistan
Abstract. Plants Astragalus of the family Fabaceae are sources of cycloartane compounds. Wide range of physiological activity of these substances opens great prospects for their practical use as drugs. To preserve valuable medicinal plants, producers of biologically active substances, and methods of plant cell culture are used. The purpose of this work was to study the chemical composition of Astragalus babatagi and introduction of the plant into in vitro culture. In order to isolate and identify glycosides, the air-dried roots of A. babatagi were exhaustively extracted with methanol at room temperature. After evaporation of the solvent, the mixure of the extractives was chromatographed in various solvent systems. Three compounds of the triterpenoid nature were found: cyclosieversioside A, cyclosieversioside B and cyclosieversioside C. All compounds were identified as known glycosides. To obtain callus tissues, the cotyledons of sterile shoots were divided into small fragments and placed on the Murasige and Skoog nutrient medium with addition of inositol 100 mg / l, thiamine HCl-4 mg / g, sucrose-30 g / l, agar - 0.7%. For induction of callusogenesis, NAA and BAP were used at concentrations of 0.5 mg / L and 0.2 mg / L, respectively. On the 14-16th days, callus formation was observed. Primary callus tissue, had a dense consistency, and light brown in color. Calluses were characterized by very low growth. With further passaging, the growth activity increased, but by the end of the 4 weeks the calli acquired a dark brown color. After 3 weeks of cultivation, the calli became darker, their growth slowed down, and by the end of the 4th weeks the nutrient medium around the calli acquired a brownish color, which indicated the release and accumulation of polyphenolic compounds in the medium, as a result of which the calluses died on day 30-35. When the passaging period was reduced to 15-20 days, the callus of A. babatagi lifetime increased. In the future, optimization of the nutrient medium is planned.
Keywords: Astragalus babatagi, сycloartanes, triterpenoids, Cyclosiversicosides A, B and С, column chromatography, thin-layer chromatography, callus tissues, а-naphthylacetic acid, 6-benzylaminopurine, polyphenol compounds.
Введение
Растения рода Astragalus L. семейства Fabaceae представляют большой интерес как источники различных биологически активных веществ [1]. На основе некоторых видов разработаны препараты, которые применяются в научной медицине.
В Институте химии растительных веществ АН РУз впервые в растениях этого рода были обнаружены циклоартановые соединения [2]. Циклоартановые генины и их гликозиды обладают гипохолестеринемической, гипотензивной, кардиотонической активностями. Вещества ингибируют процессы окисления липидов, а также проявляют седативную и
Рис. 1. Гербарий вида растения Astragalus babatagi (M. Pop) (гербарный фонд Института ботаники АН РУз)
противовоспалительную активности. Разнообразный спектр физиологической активности тритерпеновых гликозидов открывает большие перспективы для их практического использования в качестве лекарственных средств [3, 4].
Род Astragalus L. семейства Fabaceae - крупнейший род цветковых растений, насчитывающий более 2500 видов мировой флоры [5]. Данный род также является одним из самых крупных во флоре Центральной Азии. На территории Республики Узбекистан произрастает 254 вида этого растения [6].
Исследования растений рода Astragalus как в химическом, так и в биологическом аспекте продолжаются [7-9].
В последнее время вследствие усиленной промышленной заготовки резко сократились природные запасы многих дикорастущих лекарственных растений. Для сохранения ценных видов, продуцентов биологически активных веществ, используются различные методы: интродукция растений, создание плантаций. Для растений с ограниченным ареалом большой научный и практический интерес представляет разработка клеточных технологий [10].
Целью нашей работы было изучение химического состава и получение каллусных тканей растения Astragalus babatagi M. Pop.
Методы исследований
Astragalus babatagi растет на склонах низкогорий Бабатага на территории Сурхандарьинской области Республики Узбекистан (рис. 1). Горы являются отрогами Гиссарского хребта. Общее распространение вида Южный Памиро-Алай. Цветет в мае-июне, плодоносит в июне-июле.
Так как надземная часть растения А. babatagi не содержит искомых веществ, объектом исследования служили корни. Растительный материал был собран в июле 2014 г.
Экстракцию корней растения проводили метиловым спиртом при комнатной температуре. Растворитель - метанол - предварительно очищали путем перегонки,
заливали в емкость с измельченным сухим растительным сырьем, экстрагировали при комнатной температуре пятикратно и извлекали сумму экстрактивных веществ.
Для тонкослойной хроматографии (ТСХ) использовали пластинки Silufol. Колоночную хроматографию проводили на силикагеле марки КСК, размер зерен 50-100 мкм. Вещества на ТСХ обнаруживали опрыскиванием 20%-ным раствором фосфорновольфрамовой кислоты в этаноле с последующим нагреванием при температуре 100-110 °С в течение 5-7 мин.
Для получения каллусной ткани семена А. babatagi обрабатывали 70%-ым этанолом 3-5 сек., затем помещали в раствор 0,1 % диоцида на 15-20 минут, после чего промывали стерильной дистиллированной водой 4-5 раз. Стерильные семена высаживали в питательную среду Мурасиге и Скуга с добавлением сахарозы 30 г/л, мезо-инозита - 100 мг/л, тиамина - НС1 - 0.4 мг/л. агар-агара - 0,75 %, без внесения регуляторов роста, РН - 5,7. Экспланты высаживали в среду с различным соотношением а-нафтилуксусной кислоты (а-НУК) и 6-бензиламинопурина (БАП). Ткани выращивали при температуре 26 °С в темноте.
Фитохимические исследования
Мы анализировали корни растения Astragalus babatagi на содержание тритерпеновых гликозидов. Измельченные воздушно-сухие корни (100 гр) исчерпывающе экстрагировали метанолом. После упаривания растворителя сумму экстрактивных веществ хроматографировали на ТСХ в различных системах растворителей и обнаружили три соединения изопреноидной природы, обозначенные по мере увеличения их полярностей веществами 1-3. Обработав сумму экстрактивных веществ по методу [11], получили 8 г очищенной суммы.
Путем колоночной хроматографии с силикагелем элюировали последовательно хлороформом, системой хлороформ-метанол (20:1). Затем продолжили промывание колонки системой хлороформ-метанол-вода (70:12:1), выделили фракцию, содержащую соединение гликозидной природы, которую рехроматографировали в системе этилацетат-метанол (15:1), и получили 0,013 г соединения 1 и идентифицировали с известным гликозидом циклоартанового ряда - циклосиверсиозидом А (рис. 2) [2, 12].
НО
н
он
но
Рис. 2. Структура циклосиверсиозида А (1)
НО
но
-и
Рис. 3. Структуры циклосиверсиозидов В (2) и С (3)
Проведя рехроматографирование следующей за ней фракции в системе хлороформ-метанол-вода (70:12:1), выделили основное по содержанию вещество суммы - соединение 2 с выходом 63 мг, которое отождествили с циклосиверсиозидом В (рис. 3) [12,13]. Наиболее полярная фракция содержала соединение 3 в количестве 31 мг. Вещество 3 было идентифицировано как известный гликозид - циклосиверсиозид С (рис. 3) [2, 12].
Анализ литературных данных показал, что соединения в отдельности встречаются во многих видах данного рода, но все три полученных соединения - циклосиверсиозид А, циклосиверсиозид В и циклосиверсиозид С - были ранее обнаружены в растениях A. basineri [13], A. exUis [17], A. schachirudensis [24] и A. sieversianus [26, 2, 27] (табл.1).
Таблица 1
Виды растений рода Astragalus, продуцирующие циклосиверсиозиды А, В и С
Растения Циклосиверсиозиды Литература
A B С
Astragalus babatagi + + + [12]
Astragalus basineri + + + [13]
Astragalus alexandrinus + [14]
Astragalus baibutensis + [15]
Astragalus brachypterus + [16]
Astragalus exilis + + + [17]
Astragalus icmadophilus + [18]
Astragalus kahiricus + + [19]
Astragalus melanophrurius + + [20]
Astragalus membranaceus + [21]
Astragalus prusianus + [22]
Astragalus ptilodes + [23]
Astragalus schachirudensis + + + [24]
Astragalus siculus + + [25]
Astragalus sieversianus + + + [26], [2], [27]
Astragalus uninodus + + [28]
Таблица 2
Влияние регуляторов роста на ростовые характеристики каллусной ткани Astragalus babatagi
Регулятор роста (мг/л) Сырой вес каллусной ткани 1-го пассажа, г характеристика каллуса 1-го пассажа Сырой вес каллусной ткани 3-го пассажа, г характеристика каллуса 3-го пассажа
Ауксин Цитокинин
НУК 0,5 БАП 0,2 0,390 плотная 0,590 средней плотности
НУК 1,0 БАП 0,5 0,460 плотная 0,610 рыхлая, обводненная
Для циклосиверсиозида А установлена высокая биологическая активность. В опытах на крысах выявлено, что соединение, выделенное из корней A. Sieversianus Pall, повышает энергетический потенциал миокарда, способствует ингибированию процессов перекисного окисления липидов, стабилизирует антиоксидантную и NO-эргическую системы [29].
Получение каллусной ткани Astragalus babatagi
Для введения растения Astragalus babatagi в условия in vitro были использованы семена дикорастущего растения. Семядоли стерильных проростков разрезали и высевали в питательную среду, содержащую НУК-0,5 мг/л и БАП-0,2 мг/л. На 16-18-й день наблюдалось формирование каллусов, которые имели плотную консистенцию светло-коричневого цвета. На 35-й день первичный каллус высаживали в два варианта сред: 1) НУК-0,5 мг/л и БАП-0,2мг/л; 2) НУК-1,0 мг/л и БАП- 0,5 мг/л.
В среде, содержащей НУК-0,5 мг/л и БАП-0,2 мг/л, сырой вес на 30-й день культивирования составлял 0,390 г (табл. 2). Выход биомассы в среде с повышенным содержанием регуляторов роста (НУК-1,0 мг/л и БАП- 0,5 мг/л) был чуть выше 0,460 г.
При дальнейшем пассировании ростовая активность повысилась незначительно. Каллусы третьего пассажа к концу 4-й недели приобретали коричнево-красный цвет, что говорило о синтезе и накоплении клеточной культурой полифенольных соединений, они становились сильно обводненными, замедлялся их рост.
Кроме того, в результате диффузии продуктов фенольного окисления питательная среда вокруг каллусов приобретала коричневатый цвет. На 35-й день наблюдалась гибель клеточной культуры. Сокращение периода пассирования до 15-20 дней привело к увеличению срока жизни ткани. В дальнейшем планируется проведение оптимизации питательной среды с целью повышения жизнеспособности и выхода биомассы.
Заключение
Изучен химический состав растения Astragalus babatagi М. Pop., собранного на территории Республики Узбекистан. Методом колоночной хроматографии из корней растения было выделено и идентифицировано три соединения: циклосиверсиозид А, циклосиверсиозид В и циклосиверсиозид С. Данные вещества ранее были выявлены в других видах рода Astragalus.
Впервые A. babatagi введено в культуру in vitro. Каллусная ткань получена из семядолей стерильных проростков и индуцирована в среде, содержащей НУК-0,5 мг/л и БАП-0,2 мг/л. Культура характеризовалась слабой ростовой активностью. Вследствие синтеза каллусами полифенольных соединений для сохранения жизнеспособности культуры клеток требовалась пересадка каллусов в свежие питательные среды через 2-3 недели культивирования. Предполагается проведение оптимизации питательной среды.
Л и т е р а т у р а
1. Танганова Е. А. Автореферат диссертации Фармакогностическое изучение и стандартизация травы Astragalus membranaceus (Fisch.) Bunge, произрастающего в Бурятии. - Улан-Удэ, 2007.
2. Свечникова А. Н., Умарова Р. У., Абдуллаев Н. Д., Горовиц М. Б., Абубакиров Н. К. Тритерпено-вые гликозиды Astragalus и их генины. VII. Строение циклосиверсиозидов А и С // Химия природных соединений. - 1982. - № 5. -629 с.
3. Хушбактова З. А., Агзамова М. А., Сыров В. Н., Мирсалихова Н. М., Умарова Ф. Т., Исаев М. И. Влияние циклоартанов растений рода Astragalus и их синтетических аналогов на сократительную функцию миокарда и активность Na, K-АТФазы // Химия природных соединений, 1994. - №4. - С. 510-514.
4. Царук А. В., Хушбактова З. А, Сыров В. Н., Агзамова М. А., Касимова Г. М. Фармакокоррекция нарушений липидного обмена у кроликов с атеросклерозом циклоартановым гликозидом -циклосиверсиозидом F // Фармацевтический журнал. - 2008. - №1. - С. 72-78.
5. Гончаров Н. Ф., Борисова А. Г., Горшкова С. Г., Попов М. Г, Васильченко И. Т. Род 809. Астрагал — Astragalus L. Флора СССР. В 30 т. Гл. ред. акад. В. Л. Комаров; Ред. тома Б. К. Шишкин. - М.-Л.: Изд-во АН СССР, 1946. - Т.Х11. - 915 с.
6. Камелин Р. В. Astragalus L. - Астрагал. Определитель растений Средней Азии. Ташкент: Изд-во «Фан» - УзССР, 1981. - Т. 6. - 211 с.
7. Закирова Р. П., Агзамова М. А. Зависимость химического состава растений Astragallus ptero-cephalus Bge. от места произрастания. Сборник статей VII Международной научной конференции «Приоритетные направления в области науки и технологии в XXI веке». - Ташкент: издательство «CHINOR ENK», 2014. - Том 2. - С. 169-179.
8. Агзамова М. А., Исаев И. М., Закирова Р. П. Анатомо-морфологическое строение надземных органов растения Astragalus orbiculatus Lеdеb. // Узбекский биологический журнал. - 2017. - № 2. - С. 16-18.
9. Агзамова М. А., Исаев И. М., Ибрагимов Т. Ф. Циклоартановые гликозиды Astragalus leiosemius // Химия природных соединений. - 2014. - № 5. - С. 27-28.
10. Носов А. М. Культура клеток высших растений - уникальная система, модель, инструмент // Физиология растений. 1999. - Т. 46, № 6. - С. 837-844.
11. Исаев М. И., Горовиц М. Б., Абдуллаев Н. Д., Ягудаев М. Р., Абубакиров Н. К. Тритерпеновые гликозиды Astragalus и их генины. III. Циклоасгенин А из Astragalus taschkendicus // Химия природных соединений, 1981. - № 5. - С. 572-581
12. Исаев М. И., Горовиц М. Б., Абубакиров Н. К. Тритерпеновые гликозиды Astragalus и их генины. ХХУШ. Циклоартаны Astragalus babatagi // Химия природных соединений. - 1988. - № 6. - С. 880-882.
13. Умарова Р. У., Свечникова А. Н., Абдуллаев Н. Д., Горовиц М. Б., Абубакиров Н. К. Тритерпеновые гликозиды Astragalus и их генины. ХУ. Циклосиверсиозиды В и D из Astragalus basineri // Химия природных соединений, 1984. - № 2. - С. 188-191.
14. Orsini F. et al. Cycloartane triterpene glycosides from Astragalus alexandrinus // Phytochemistry. -1994. - Т. 35, №. 3. - С. 745-749.
15. Qali§ I. et al. Antitrypanosomal cycloartane glycosides from Astragalus baibutensis // Chemistry & biodiversity. - 2006. - Т. 3. - № 8. - С. 923-929.
16. Bedir E. et al. Cycloartane triterpene glycosides from the roots of Astragalus brachypterus and Astragalus microcephalus //Journal of natural products. - 1998. - Т. 61, №. 12. - С. 1469-1472.
17. Мамедова Р. П., Агзамова М. А., Исаев М. И. Тритерпеновые гликозиды Astragalus и их генины. LXVII. Структура циклоэксозидаe B // Химия природных соединений. - 2002. - Т. 38, № 6. - С. 579-582.
18. Horo I. et al. Triterpene glycosides from Astragalus icmadophilus // Phytochemistry. - 2010. - Т. 71, № 8. - С. 956-963.
19. Allam R. M. et al. Hepatoprotective effects of Astragalus kahiricus root extract against ethanol-induced liver apoptosis in rats // Chinese journal of natural medicines. - 2013. - Т. 11, №. 4. - С. 354-361.
20. Calis I., Yuruker A., Tazdemir D. et, al. Cycloartane triterpene glycosides from the roots of Astragalus melanophrurius //Planta medica. 1997. - Т. 63. - С. 183-186.
21. Kitagawa I. et al. Saponin and sapogenol. XXXV. Chemical constituents of astragali radix, the root of Astragalus membranaceus Bunge.(2). Astragalosides I, II and IV, acetylastragaloside I and isoastragalosides I and II // Chemical and pharmaceutical bulletin. - 1983. - Т. 31, №. 2. - С. 698-708.
22. Bedir E. et al. Two novel cycloartane-type triterpene glycosides from the roots of Astragalus prusianus //Tetrahedron. - 2001. - Т. 57. - №. 28. - С. 5961-5966.
23. Linnek J. et al. Cycloartane glycosides from three species of Astragalus (Fabaceae) //Helvetica Chim-ica Acta. - 2011. - Т. 94. - №. 2. - С. 230-237.
24. Исаев М. И., Горовиц М. Б., Абубакиров Н. К. Тритерпеновые гликозиды астрагалов и их генины. XXVI. Циклоартаны и стеролы Astragalus schachirudensis // Химия природных соединений. -1988. - Т. 24, №. 1. - С. 123-124.
25. Baratta M. T., Ruberto G. Cycloartane triterpene glycosides from Astragalus siculus //Planta medica. - 1997. - Т. 63, № 03. - С. 280-282.
26. Li-Xian C., Xlao-Bing H., Yu-Qun C. The structures of thirteen astrasieversianins from Astragalus sieversianus//Phytochemistry. - 1986. - Т. 25, № 10. - С. 2389-2393.
27. Искандеров Д. А., Кенешов В. А., Исаев М. И. Тритерпеновые гликозиды из Astragalus и их генины. LXXVI. Гликозиды из A. sieversianus //Химия природных соединений. - 2008. - Т. 44, № 3. - С. 319-323.
28. Имомназаров Б. А., Исаев М. И. Тритерпеновые гликозиды Astragalus и их генины. XXXVI. Циклоартаны Astragalus uninodus //Химия природных соединений. - 1991. - Т. 27, № 3. - С. 381-381.
29. Царук А. В., Искендеров Д. А., Агзамова М. А., Хушбактова З. А., Сыров В. Н., Исаев М. И. Выделение и изучение влияния циклоартановых гликозидов циклоорбикозида G и циклосиверсиозида А на метаболические процессы в миокарде крыс // Химико-фармацевтический журнал. - Москва. -2010. - №1. - С.12-15.
R e f e r e n c e s
1. Tanganova E. A. Avtoreferat dissertatsii Farmakognosticheskoe izuchenie i standartizatsiia travy Astragalus membranaceus (Fisch.) Bunge, proizrastaiushchego v Buriatii. - Ulan-Ude, 2007.
2. Svechnikova A. N., Umarova R. U., Abdullaev N. D., Gorovits M. B., Abubakirov N. K. Triterpenovye glikozidy Astragalus i ikh geniny. VII. Stroenie tsiklosiversiozidov A i S // Khimiia prirodnykh soedinenii. -1982. - № 5. -629 s.
3. Khushbaktova Z. A., Agzamova M. A., Syrov V. N., Mirsalikhova N. M., Umarova F. T., Isaev M. I. Vliianie tsikloartanov rastenii roda Astragalus i ikh sinteticheskikh analogov na sokratitel'nuiu funktsiiu miokarda i aktivnost' Na, K- ATFazy // Khimiia prirodnykh soedinenii, 1994. - №4. - S. 510-514.
4. Tsaruk A. V., Khushbaktova Z. A, Syrov V. N., Agzamova M. A., Kasimova G. M. Farmakokorrektsiia narushenii lipidnogo obmena u krolikov s aterosklerozom tsikloartanovym glikozidom - tsiklosiversiozidom F // Farmatsevticheskii zhurnal. - 2008. - №1. - S. 72-78.
5. Goncharov N. F., Borisova A. G., Gorshkova S. G., Popov M. G, Vasil'chenko I. T. Rod 809. Astragal —Astragalus L. Flora SSSR. V 30 t. Gl. red. akad. V. L. Komarov; Red. toma B. K. Shishkin. - M.-L.: Izd-vo AN SSSR, 1946. - T.XII. - 915 s.
6. Kamelin R. V. Astragalus L. - Astragal. Opredelitel' rastenii Srednei Azii. Tashkent: Izd-vo «Fan» -UzSSR, 1981. - T. 6. - 211 s.
7. Zakirova R. P., Agzamova M. A. Zavisimost' khimicheskogo sostava rastenii Astragallus pterocephalus Bge. ot mesta proizrastaniia. Sbornik statei VII Mezhdunarodnoi nauchnoi konferentsii
«Prioritetnye napravleniia v oblasti nauki i tekhnologii v XXI veke». - Tashkent: izdatel'stvo «CHINOR ENK», 2014. - Tom 2. - S. 169-179.
8. Agzamova M. A., Isaev I. M., Zakirova R. P. Anatomo-morfologicheskoe stroenie nadzemnykh orga-nov rasteniia Astragalus orbiculatus Ledeb. // Uzbekskii biologicheskii zhurnal. - 2017. - № 2. - S. 16-18.
9. Agzamova M. A., Isaev I. M., Ibragimov T. F. Tsikloartanovye glikozidy Astragalus leiosemius // Khimiia prirodnykh soedinenii. - 2014. - № 5. - S. 27-28.
10. Nosov A. M. Kul'tura kletok vysshikh rastenii - unikal'naia sistema, model', instrument // Fiziologiia rastenii. 1999. - T. 46, № 6. - S. 837-844.
11. Isaev M. I., Gorovits M. B., Abdullaev N. D., Iagudaev M. R., Abubakirov N. K. Triterpenovye glikozidy Astragalus i ikh geniny. III. Tsikloasgenin A iz Astragalus taschkendicus // Khimiia prirodnykh soedinenii, 1981. - № 5. - S. 572-581
12. Isaev M. I., Gorovits M. B., Abubakirov N. K. Triterpenovye glikozidy Astragalus i ikh geniny. KhX-VIII. Tsikloartany Astragalus babatagi // Khimiia prirodnykh soedinenii. - 1988. - № 6. - S. 880-882.
13. Umarova R. U., Svechnikova A. N., Abdullaev N. D., Gorovits M. B., Abubakirov N. K. Triterpenovye glikozidy Astragalus i ikh geniny. KhV. Tsiklosiversiozidy V i D iz Astragalus basineri // Khimiia prirodnykh soedinenii, 1984. - № 2. - S. 188-191.
14. Orsini F. et al. Cycloartane triterpene glycosides from Astragalus alexandrinus // Phytochemistry. -1994. - T. 35, №. 3. - S. 745-749.
15. Qali§ I. et al. Antitrypanosomal cycloartane glycosides from Astragalus baibutensis // Chemistry & biodiversity. - 2006. - T. 3. - № 8. - S. 923-929.
16. Bedir E. et al. Cycloartane triterpene glycosides from the roots of Astragalus brachypterus and Astragalus microcephalus // Journal of natural products. - 1998. - T. 61, №. 12. - S. 1469-1472.
17. Mamedova R. P., Agzamova M. A., Isaev M. I. Triterpenovye glikozidy Astragalus i ikh geniny. LXVII. Struktura tsikloeksozidae B // Khimiia prirodnykh soedinenii. - 2002. - T. 38, № 6. - S. 579-582.
18. Horo I. et al. Triterpene glycosides from Astragalus icmadophilus // Phytochemistry. - 2010. - T. 71, № 8. - S. 956-963.
19. Allam R. M. et al. Hepatoprotective effects of Astragalus kahiricus root extract against ethanol-induced liver apoptosis in rats // Chinese journal of natural medicines. - 2013. - T. 11, №. 4. - S. 354-361.
20. Calis I., Yuruker A., Tazdemir D. et, al. Cycloartane triterpene glycosides from the roots of Astragalus melanophrurius // Planta medica. 1997. - T. 63. - S. 183-186.
21. Kitagawa I. et al. Saponin and sapogenol. XXXV. Chemical constituents of astragali radix, the root of Astragalus membranaceus Bunge.(2). Astragalosides I, II and IV, acetylastragaloside I and isoastraga-losides I and II // Chemical and pharmaceutical bulletin. - 1983. - T. 31, №. 2. - S. 698-708.
22. Bedir E. et al. Two novel cycloartane-type triterpene glycosides from the roots of Astragalus prusianus // Tetrahedron. - 2001. - T. 57. - №. 28. - S. 5961-5966.
23. Linnek J. et al. Cycloartane glycosides from three species of Astragalus (Fabaceae) // Helvetica Chimica Acta. - 2011. - T. 94. - №. 2. - S. 230-237.
24. Isaev M. I., Gorovits M. B., Abubakirov N. K. Triterpenovye glikozidy astragalov i ikh geniny. XXVI. Tsikloartany i steroly Astragalus schachirudensis // Khimiia prirodnykh soedinenii. - 1988. - T. 24, №. 1.
- S. 123-124.
25. Baratta M. T., Ruberto G. Cycloartane triterpene glycosides from Astragalus siculus // Planta medica.
- 1997. - T. 63, № 03. - S. 280-282.
26. Li-Xian C., Xlao-Bing H., Yu-Qun C. The structures of thirteen astrasieversianins from Astragalus sieversianus // Phytochemistry. - 1986. - T. 25, № 10. - S. 2389-2393.
27. Iskanderov D. A., Keneshov V. A., Isaev M. I. Triterpenovye glikozidy iz Astragalus i ikh geniny. LXXVI. Glikozidy iz A. sieversianus // Khimiia prirodnykh soedinenii. - 2008. - T. 44, № 3. - S. 319-323.
28. Imomnazarov B. A., Isaev M. I. Triterpenovye glikozidy Astragalus i ikh geniny. XXXVI. Tsikloartany Astragalus uninodus // Khimiia prirodnykh soedinenii. - 1991. - T. 27, № 3. - S. 381-381.
29. Tsaruk A. V., Iskenderov D. A., Agzamova M. A., Khushbaktova Z. A., Syrov V. N., Isaev M. I. Vydelenie i izuchenie vliianiia tsikloartanovykh glikozidov tsikloorbikozida G i tsiklosiversiozida A na metabolicheskie protsessy v miokarde krys // Khimiko-farmatsevticheskii zhurnal. - Moskva. - 2010. - №1.
- S.12-15.
