ECOLOGICAL ASPECTS OF THE VACCINE POLIOVIRUSES
AT MODERN PERIOD
Bondarenko V.I., Demchishina I.V., Zadorozhna V.I., Zubkova N.L., Vedmedenko V.V.
EKnnnriHHi AcnEKTH bakuhhhux nomoBipyciB
y CyMACHHH HEPiOfl
БОНДАРЕНКО В.1., ДЕМЧИШИНА 1.В., ЗАДОРОЖНА В.1., ЗУБКОВА Н.Л., ВЕДМЕДЕНКО В.В. 1нститут етдемюлогп та iнфекцiйних хвороб iM. Л.В. Громашевського АМН Укра'ши
УДК 578.4+615.371:578.835.15
ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ВАКЦИННЫХ ПОЛИОВИРУСОВ В СОВРЕМЕННЫЙ ПЕРИОД Бондаренко В.И., Демчишина И.В., Задорожная В.И., Зубкова Н.Л., Ведмеденко В.В. Представлены результаты изучения выделения полиовирусов из объектов окружающей среды (сточных вод, поверхностных водоемов, питьевой воды, почвы, продуктов питания, предметов обихода) в Украине за 1998-2004 годы. Показана целесообразность исключения из объектов вирусологического мониторинга исследований на полиовирусы проб питьевой воды, почвы, продуктов питания, предметов обихода в связи с низкой результативностью.
1988 роц Асамблея ВООЗ прийняла ршення щодо глобально! лквщацп полiомieлiту до 2000 року. TepMiH "лквща-щя" полiомieлiту, зпдно з виз-наченням ВООЗ, передбачае припинення циркуляцií "дикого" полiовiрусу та пов'язаних з ним паралiтичних форм полю-мieлiту. Однак оптимютичш прогнози було спростовано реeстрацieю у CBiTi у 2000 роц близько 2000 випадкiв парали тичного полiомieлiту. Строки лiквiдацií було перенесено спочатку на 2005 рк, потiм — на 2008 р.
Нинi три репони ВООЗ сер-тифiковано як територп, на яких припинено циркуляцiю "дикого" полiовiрусу. Це Аме-риканський, Захщно-Тихооке-анський та бвропейський реп-они. Останшй отримав статус територií, втьно! вiд полiомie-лiту, 21 червня 2002 року.
До територй де продовжу-eться циркуляцiя "диких" поли овiрусiв, належить Африкан-ський, Схщно-Середземно-морський регiони та ^вденно-Схщна Азiя [6, 8].
Останнiми роками на фон рiзкого зниження циркуляцп "диких" полiовiрусiв реeстру-ються спалахи полiомieлiту, спричиненi полiовiрусами вакцинного походження зi змЫе-ними властивостями [3, 7, 8].
Це свщчить про можливють продовження циркупяцп вак-цинних полiовiрусiв та íхнiх де-риватiв (полiовiрусiв вакцинного походження, що мають 1% i бтьше вiдмiнностей у нуклео-тидних послщовностях геному VP1) пiсля припинення циркуляцп "диких" полiовiрусiв [7]. Нав^ь у краíнах з високим рiв-нем охоплення щепленнями проти полiомieлiту можливе ут-ворення дериватiв вакцинних полiовiрусiв [3]. Вакциннi поли овiруси зi змiненими властивостями можуть циркулювати в об'eктах довкiлля деюлька ро-кiв до моменту |'х визначення [5]. Раннe виявлення полiовiру-сiв вакцинного походження, що циркулюють серед насе-лення та у довктл^ e запору-кою своeчасностi заходiв щодо припинення íх подальшого поширення.
Вiрусологiчному монiторингу об'eктiв довкiлля належить провщна роль у визначеннi де-риватiв вакцинних полiовiрусiв, що, у свою чергу, e передумо-вою належного функцюнуван-ня органiзацiйно-виконавчоí пщсистеми епiдемiологiчного нагляду за полiомieлiтом.
Метою роботи було визначення еколопчних особливос-тей вакцинних полiовiрусiв в умовах припинення циркуляци "диких" полiовiрусiв.
Таблиця 1
Обсяг санiтарно-вiрусологiчних дослщжень (кiлькiсть проб)
Р1к Об^кти досл1дження
Змиви з предмет1в вжитку Грунт Питна вода С"пчна вода Вода вщкритих водоймищ Продукти харчування
1998 883 286 5 325 2 538 3 036 2 059
1999 20 94 2 788 1 230 2 127 2 274
2000 122 150 5 430 2 765 2 845 1 047
2001 100 131 4 961 3 011 2 435 0
2002 320 144 4 033 3 398 2 470 588
2003 133 86 3 019 2 298 1 602 365
2004 20 96 3 780 2 693 1 581 319
Разом 1 598 987 29 336 17 933 16 096 6 652
57*Е&Н
О
ECOLOGICAL ASPECTS OF THE VACCINE POLIOVIRUSES AT MODERN PERIOD
Bondarenko V.I., Demchishina I.V., Zadorozhna V.I., Zubkova N.L., Vedmedenko V.V.
The results of studding of polioviruses isolation from environment (sewages, superficial water reservoirs, drinking water, soil, foodstuffs, subjects of the everyday life) for 1998-2004 in Ukraine are presented. Practicability of the exception from object of the virological monitoring the study on polioviruses tests of drinking water, ground, foodstuffs, subject of the everyday life in connection with low effectiveness is Shown.
Матерiали та методи. Проведено анал™чну обробку результат вiрусологiчного до-слщження на полiовiруси проб з об'ек^в довкшля за перюд 1998-2004 рр. (табл. 1). Дослщ-ження з виявлення iзолятiв bí-руав провадили у вiрусолопч-них лабораторiях Центрально! СЕС АР Крим, обласних СЕС та СЕС мют Киева i Севастополя.
Пщтверджуючу щентифка-цю отриманих штамiв вiрусiв здiйснювали у Центральна ре-ференс-лабораторií з дiагнос-тики полiомiелiту.
При виконаннi роботи засто-совували епiдемiологiчний, bí-русолопчний, молекулярно-генетичний (ПЛР), iмунофер-ментний (1ФА) та статистичний методи.
Визначення полiовiрусiв здй снювали у перещеплювальнм культурi клiтин HEp-2 (Epidermoid carcinoma, larynx, human) за загальновживаною методикою [1]. Частку дослщжень провадили з паралельним ви-користанням 2-х лшш пере-щеплювальних кттинних культур НЕр-2 та RD (Rabdomiosar-coma, embrional, human) [2].
Пюля вiдповiдноí обробки дослiдженого матерiалу заражали 24-годинний моношар клiтинноí культури у пробiрках. За необхiдностi провадили два додаткових пасажi матерiалу. Облiк здiйснювали за цитопа-тогенною дiею вiрусного агента
при в1дпов1дност1 контрол1в ОЧ1-куваним результатам (контроль культури кттин, поживного се-редовища, стерильнiсть щодо мiкробноí контамiнацií дослщ-женоТ проби). Пщтверджуючу щентифкацю здiйснювали з використанням дiагностичних полiовiрусних кролячих iмунних сироваток з гомолопчними титрами 1:40960 до полiовiрусу типу 1, 1:1163840 — до полiовiру-су типу 2, 1:40960 — до полюви русу типу 3 виробництва RIVM (Нщерланди), рекомендованих ВООЗ.
238 штамiв полiовiрусiв, що видiленi на територп УкраТни протягом перiоду спостере-ження, пройшли внутршньоти-пову диференцiацiю у рефе-ренс-лабораторií ВООЗ на базi 1нституту полiомieлiту та вiрус-них енцефалтв iм. М.П. Чумакова РАМН iз застосуванням методу 1ФА та ПЛР.
Результати та Тх обговорен-ня. У рамках саытарно^русо-логiчного монiторингу циркуля-цií ентеровiрусiв за перiод спос-тереження дослщжено 72602 проби, вiдiбранi з об'ек^в дов-кiлля. 1зольовано 238 штамiв по-лiовiрусiв, що становило 0,3% вщ кiлькостi дослiджених проб. Не було видтено жодного шта-му полiовiрусу з питноТ води, Грунту, продук^в харчування та змивiв з рiзних об'eктiв вжитку, хоча на них припадало 53% до-слщжених проб (38573 проби).
Рисунок 1
Питома вага полiовiрусiв рiзних тишв, видiлених з проб води вщкритих водоймищ в Укра'Гш у 1998-2004 рр.
При дослiдженнi 16096 проб води вщкритих водоймищ iзо-льовано 13 штамiв полiовiрусiв (0,08% вщ кiлькостi дослiдже-них проб).
Не було iзольовано полiовiру-сiв у 2000 та 2002 роках. Най-бiльша кшькють позитивних знахiдок припадае на 1999 рк. Серед видiлених полiовiрусiв переважали вiруси типу 2 (6 штамiв — 46%). Питома вага полiовiрусу типу 1 i 3 вщповщно становила 23% та 31% (рис. 1).
Протягом 1998-2004 рр. було дослщжено 17933 проби с^чноТ води. Тх щорiчна кшькють коливалася вiд 3398 до 1230. Полiовiруси видiлено на територií 12 областей УкраТни. Визначаеться ч^ка сезоннють видтення полiовiрусiв з проб с^чноТ' води — весняно-осiння, з характерним пщвищенням частоти видiлення у березш (0,16%) та серпнi (0,17%). По-чинаючи з серпня показник ви-дiлення знижуеться з 0,17% до
0.07% у листопадi з подаль-шим його пiдвищенням майже вдвiчi у груднi (0,12%) (рис. 2).
Загальна кшькють iзольова-них полiовiрусiв склала 225 штамiв, тобто 3% вщ кiлькостi дослiджених проб. Максимальна частота видшення спостери галася у 1999 р. (2,4%), мЫи мальна — у 2000 р. (0,87%). Найбшьшу кiлькiсть штамiв по-лiовiрусiв (50) iзольовано у 2002 р., найменшу (20) — у 1998 р. Територiями, на яких видiлено найбшьшу кiлькiсть штамiв полiовiрусiв, були Хар-кiвська, Херсонська та Донець-ка область Питома вага видше-них полiовiрусiв була близькою до ^еТ, що визначена при ана-лiзi результатiв дослiдження води вiдкритих водойм (рис. 3). 27% серед видшених шта-мiв становили полiовiруси типу
1, 41% — типу 2, 32% — типу 3. Спостертаеться циктчнють в
Ытенсивност циркуляцií поли овiрусiв кожного серотипу
Рисунок 2 Сезоннють видтення полiовiрусiв iз слчно'Г води в УкраГш у 1998-2004 рр.
Е&Н*58
-О-
(рис. 4). У 1998 р. переважна бтьшють визначених у стiчнiй водi штамiв полiовiрусiв належала до типу 1, у 1999 р. — до типу 3, у 2000 р. ктьюсть шта-míb полiовiрусiв типiв 2 та 3 бу-ла однаковою. Протягом 20012003 рокiв серед Ыших типiв переважав полiовiрус типу 2. У 2004 роц знов зростае Ытен-сивнiсть циркуляцií полiовiрусу типу 3 (рис. 4).
Полiовiруси типу 2 мали бiльш широке географiчне по-ширення у с^чшй водi на тери-торií УкраУни, нiж полiовiруси типiв 1 та 3. Спостеркалося збiльшення частоти видУпення полiовiрусiв у постсертифка-цiйний перюд (пiсля 2002 р.) майже вдвiчi, порiвняно з 19982001 роками. Це пов'язано з покращанням роботи вiрусоло-гiчних лабораторiй у зв'язку з впровадженням бiльш чутливих культур кштин (RD та L20b), застосуванням мкрометоду при iдентифiкацií видiлених ви русних агентiв з використан-ням для типування дiагностич-них сироваток RIVM (Нщерлан-ди), рекомендованих ВООЗ.
За результатами аналiзу нук-леотидноУ послщовност дУпян-ки геному VP1 ус штами полю-вiрусiв, iзольованих в Украíнi з об'ектiв довктля, вiднесено до вакцинних.
Висновки
В УкраУш протягом 1998-2004 рокiв з об'ектiв довкiлля iзольо-вано 238 штамiв полiовiрусiв, серед яких переважали полюви руси типу 2. Ус штами полюви русiв за результатами внутрш-ньотиповоУ диференцiацií належали до вакцинних. Дерива^в вакцинних полiовiрусiв не вияв-лено. З проб питноУ води, про-дуктiв харчування, змивiв з предметiв вжитку 38573 проб (53% вiд загальноí ктькост проб) полiовiруси iзольованi не були.
Питна вода, Грунт, продукти харчування, змиви з предме^в вжитку доцтьно виключити з об'ектiв вiрусологiчного мош-торингу у зв'язку з низькою ре-зультативнiстю, що робить ц дослiдження економiчно не обГрунтованими.
Проби води вщкритих во-дойм повинш пiдлягати дослщ-женню за умов попршення ет-демiчноí ситуацií з полiомiелi-ту/ентеровiрУсних iнфекцiй.
Серед об'ек^в довкiлля, що пiдлягають вiрусологiчному мошторингу у системi епщеми ологiчного нагляду за ентерови русними iнфекцiями, у тому чист полiомiелiтом, провiдна роль повинна належати с^ч-
Б1ОЛОГ1ЧН1 ФАКТОРИ ДОВК1ЛЛЯ =
3. У Домшкансьюй Республiцi проводять вакцинацiю проти полiомiелiту // Вакцини. Укра-íнський дайджест "См^Кляйн Бiчем Бюлоджикалз". — 2000.
— № 12 (20). — С. 7.
4. Ford D.J., Ropka S.L., Collins G.H., Jubelt B. The neuropathology observed in wild-type mice inoculated with human poliovirus mirrors human paralytic poliomyelitis // J. Microb. Pathog. — 2002. — № 33 (3). — P. 97-107.
5. Horie H., Yoshida H., Matsu-ura K. et al. Isolation of vaccine-derived type 1 polioviruses displaying similar properties to virulent wild strain Mahoney from sewage in Japan // J. Med. Virol.
— 2002. — № 68 (3). — P. 445451.
6. Jevremovic I., Antonijevic B., Loncarevic G. Active epidemiologic surveillance in the poliomyelitis eradication program in Serbia // J. Vojnosanit Pregl. — 2002. — № 59 (5). — Р. 557-562.
7. Public Health Dispatch: Outbreak of Poliomyelitis — Dominican Republic and Haiti, 2000 // MMWR. — 2000. — № 49 (48).
— Р. 1094-1103.
8. Sosa-Diaz R., Mas-Lago P. et al. Genetic changes in strains of poliovirus type 2 isolated from patients with vaccine-associated paralytic poliomyelitis // J. Revista de Neurologia. — 2003. — № 36 (9). — P. 812-816.
Рисунок 4
Ктьюсть полiовiрусiв, видтених Í3 ctÍ4hoi' води в УкраУш
(за типами)
ним водам, осктьки результа-ти Ух дослщження е найбтьш шформативними. 94,5% шта-м1в полюв1рус1в, видтених з об'ект1в довктля протягом 1998-2004 рр., 1зольовано з проб ст1чноУ води. Враховуючи той факт, що в УкраУш продов-жуеться застосування живоУ пол1ом1ел1тноУ вакцини, таю дослщження продовжують за-лишатися перспективними.
Л1ТЕРАТУРА
1. Ворошилова М.К., Жеван-дрова В.И., Балаян М.С. Методы лабораторной диагностики энтеровирусных инфекций. — М.: Медицина, 1964. — 152 с.
2. Руководство по лабораторным исследованиям полиомиелита. — Женева: ВОЗ. — 2005.
Рисунок 3 Питома вага полiовiрусiв рiзних тишв, видтених
iз проб слчно'Г води в УкраГш у 1998-2004 рр.
1998
1999
2000
2001
2002
2003
2004
!К-ть P 1+2+3 ^P 1 E5DP 2ШP 3 —Л1н1йний (к-ть P 1+2+3)
59*Е&Н
О