CC BY
16
М1КРОБ1ОЛОГ1Я
© Вергун О. М., Воронкова О. С., ВЫшков А. I. УДК 578.76: 616-022.6
Вергун О. М., Воронкова О. С., Вiннiков А. I.
ЧАСТОТА ВИЯВЛЕННЯ Р1ЗНИХ ГЕНОТИП1В
В1РУСУ ГЕПАТИТУ С СЕРЕД ХВОРИХ У М. ДН1ПРО
Днiпропетровський нацiональний унiверситет iменi Олеся Гончара
(м. Днтро)
Робота виконана у рамках держбюджетно! теми № 1-294-15 «Структурно-функцюналын1 особливост1 природних м1кробюценоз1в та механ1зми б1олог1чно1 дИ антим1кробних препарат1в».
Вступ. В1русн1 гепатити з парентеральним меха-н1змом передач! збудниюв, одним з яких е гепатит С, е важливою проблемою сучасно! медично! науки I практично! охорони здоров'я ус1х кра!н св1ту. Це обумовлено широким розповсюдженням, високим р1внем захворюваност1, вираженим пол1морф1змом кл1н1чних прояв1в, численн1стю шлях1в та фактор1в передач! збудника, а також надзвичайно несприят-ливими наслщками, до яких може призвести гепатит - формуванню всього спектру хроычних уражень печ1нки, в тому числ1 цирозу I гепатоцелюлярно! кар-циноми [1,4].
В останн роки пом1тна тенденц1я до збтышення випадк1в хрон1чних форм захворювання. За оцшка-ми експерт1в ВООЗ на хроычний гепатит С страж-дае бтя 150 млн. ос1б, а 350 тис. щор1чно помирае внаслщок ураження печ1нки в1русом гепатиту С. За-хворюван1сты та леталын1сты внаслщок гепатиту С прогресивно збтышуетыся на планет! та, за даними експерт1в, подво!тыся до 2020 р. [8]. Вже зараз за-галына ктыкюты хворих на гепатити у свт у 14-15 раз1в перевищуе ктыкюты ВШчнфкованих [7].
За оц1ночними даними ВООЗ, 57% випадюв цирозу печшки I 78% випадк1в первинного раку печ1нки зумовлено впливом в1рус1в гепатиту В або С. Окр1м цыого, гепатит С мае багато позапечшкових прояв1в, що ускладнюе !х д1агностику та може перешкоджати призначенню в1дпов1дного л1кування [2,8].
За ступенем негативного впливу на здоров'я населення та масштабами захворюваност1 в1рус-н1 гепатити займаюты дом1нуюче м1сце в структур! ¡нфекцмно! патологи разом 1з грипом та гострими 1нфекц1йними захворюваннями верхн1х дихалыних шлях1в [7].
Укра!на належиты до кра!н 1з середым р1внем поширення в1русного гепатиту С - ¡нфковано при-близно 3% громадян, що складае ~ 1 170 000 ос1б.
За даними офщмно! статистики, р1вены захворю-ваност1 на гостр1 в1русн1 гепатити в Укра!н1 складае в середныому 23,5 на 100 тис. ос1б: серед донор1в кров1 в1дсоток виявлення складае 3,34-3,8%, серед
медичних прац1вниюв - 3,4-4,2%, серед дорослого населення в цтому - 1,7% [3].
Прогноз щодо ефективност1 л1кування багато у чому фунтуетыся на визначенн1 генотипу в1руса, що викликав ураження, тому визначення генотипу е важливим етапом розробки терапевтично! схеми [2,9,10].
Мета дослщження: визначити частоту виявлення р1зних генотип1в в1русу гепатиту С серед населення м. Дн1про.
Об'ект I методи досл1дження. Досл1дження ви-конано на баз1 лаборатор1! «Сшево» у м. Дн1про.
На наявнюты маркер1в в1русу гепатиту досл1джу-вали кров, отриману вщ ос1б (п=2510), що зверну-лися до лаборатори за спрямуванням л1каря або за власним бажанням при пщозр1 на гепатит.
Матер1алом для досл1джены слугувала венозна 616 хворих з встановленим хроычним в1русним гепатитом С. Ус1 пац1енти були спрямован1 на обсте-ження на гепатит С за кгмычними показаннями. В1к пац1ент1в становив в1д 21 до 57 роюв.
Досл1дження проводили методом пол1меразно! ланцюгово! реакц1! (ПЛР) у реалыному час1 з вико-ристанням набору реагент1в «Ампл1Сенс® HCV-генотип-РЬ» (ООО «ИнтерЛабСервис», РФ) [6], який дозволяе виявити ряд субтип1в в1русу (табл.).
Екстракц1ю РНК в1русу 1з ключного матер1а-лу проводили за допомогою набору «РИБО-сорб» (ООО «ИнтерЛабСервис», РФ) вщповщно до 1н-струкц1й виробника [5].
Результати дослщження та Ух обговорення. З загалыного контингенту обстежених (п=2510) за II
Таблиця.
Спектр молекулярно-генетичних маркерiв НОУ, якi можна визначити за допомогою
набору «АмплЮенс® НОУ-генотип-РЬ»
Генотип НСТ Субтипи НСТ
1 1а, 1Ь
2 2а, 2Ь, 2с, 21, 2к
3 3а
4 4а, 4с
5 5а
6 6а, 6Ь, 61, 6], 6т, 6п
Рис. Вiдсоткове спiввiдношення розподiлення генотишв гепатиту С.
пiврiччя 2016 року ураження на вiруснi гепатити було пщтверджено у 1163 осiб, що склало 46,3%. З них у 616 оЫб (53%) було встановлено хроычний вiрусний гепатит С.
З метою отримання Ыформаци про розповсю-дження рiзних генотипiв HCV у м. Днтро було досл^ джено частоту виявлення цих збудникiв як моно- та мкстчнфекцм (рис.) серед оЫб, для яких було пщ-тверджене хронiчне носiйство.
При обстеженн 616 зразкiв плазми найчастiше зустрiчалися генотипи 1в - у 257 (41,7%) випадках i 3а - у 206 (33,4%) випадках. Генотипи 2 i 1а реестру-валися у 18 випадках (2,9%) та 43 (7%). Генотип 4 знайдено у 6 оЫб (1%), 5 i 6 генотипи не реестрували взагалг Серед мкст- генотитв найбтьша кiлькiсть випадкiв - 42 випадала на долю мкса 1в+3а (6,8%) та 1а+1в, що зареестровано в 38 випадках (6,2%), а мкст 1в+2 виявлений лише в 6 оЫб (1%).
1нформащя про генотип дуже важлива, оскiльки вона дозволяе прогнозувати вщповщь на лiкування, його тривалють i рекомендувати дозу обраного препарату. 1снуе мiнiмум 6 генотитв НСV i безлiч субти-пiв, що мають рiзну чутливють до штерферонотера-пп [9].
Отриман нами данi узгоджуються з даними лгге-ратури про те, що у нашмй краíнi найбiльш часто ви-являються генотипи 1, 2 та 3 з перевагою субтитв 1в i 3а [3]. Такий висновок, знову ж таки, засвщчуе той факт, що гепатит С дуже важко тддаеться лку-ванню порiвняно iз гепатитом В. З лтератури вщо-мо, що генотип 1в гiрше за iншi тддаеться лiкуванню сучасними препаратами. На вщмшу вiд генотипу 1в, позитивний результат вщ лiкування вiдомий для гепатиту С, викликаного генотипами 2 i 3, складае 80% [2,10].
^м того мае мiсце рiзниця i у тривалостi лку-вання залежно вщ виявленого генотипу [3,10]. Як правило, генотип 1 вимагае 48 тижыв лкування, тодi як генотипи 2 i 3 - ттьки 24 [10]. Що стосуеть-ся впливу генотипу на розвиток захворювання, то вiдомо, що при генотип 1в хвороба протiкае зна-чно важче i складнiше, ыж при генотипах 1а, 2 або 3, проте ц спостереження вимагають подальших до-слiджень [8,9,10].
Висновки
1. При обстеженн на базi лабораторií «Сiнево» у м. Днтро методом ПЛР бюлопчного матерiалу на наявнють генетичних маркерiв вiрусу гепатиту С ви-значено позитивну вщповщь у 616 випадках (53%) серед уЫх позитивних результа^в дослiдження на гепатит.
2. Домшуючими генотипами гепатиту С серед на-селення м. Днтро виявилися 1в i 3а (41,7% i 33,4% вiдповiдно). Мiкст-генотипи найчастше були пред-ставленi комбiнацiею 1в+3а (6,8%).
Перспективи подальших дослiджень. Поши-рення вiрусних гепатитiв становить значну медичну та сощальну проблему для Украши, зокрема це сто-суеться й гепатиту С. Важливим напрямом досл^ джень цiеí iнфекцií е встановлення генотитв вiрусiв, що дозволяе скоригувати терапевтичнi схеми для кожного конкретного патента. Дослiдження гено-титв вiрусу гепатиту С дозволяе визначити прогноз захворювання та дослщити варiанти його поширен-ня серед населення, що у перспективi дозволить розробити високоефективн профiлактичнi заходи.
Лiтература
1. Бабак О.В. Вирусные гепатиты и их осложнения / О.В. Бабак // Журнал практического врача. - 2010. - № 7. - С. 32-36.
2. Ведення хворих на гепатит С. КлЫчш практичш рекомендацп EASL (бвропейська асощащя з вивчення печшки) // Гепатолопя. - 2011. - № 2. - С. 4-44.
3. Вiрусний гепатит С: Адаптована клЫчна настанова, заснована на доказах (оновлена) - 2015 // Актуальна шфектолопя. -2015. - № 4 (9). - С 115-186.
4. Жданов К.В. Вирусные гепатиты / К.В. Жданов, О.Л. Пратт, М.М. Волков [и др.]. - СПб.: Фолиант, 2011. - 304 с.
5. Инструкция по применению комплекта реагентов для выделения РНК/ДНК из клинического материала «РИБО-сорб». -ИнтерЛабСервис. - 6 с.
6. Инструкция по применению набора реагентов для выявления и дифференциации генотипов вируса гепатита C (HCV) в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» «АмплиСенс® HCV-генотип-FL». - ИнтерЛабСервис. - 32 с.
7. Пименов Н.Н. Гепатит С в России: эпидемиологическая характеристика и пути совершенствования диагностики и надзора / Н.Н. Пименов, В.П. Чуланов, С.В. Комарова // Эпидемиол. и инфекц. болезни. - 2012. - № 3. - С. 4-10.
8. European Association for the Study of the Liver. EASL Clinical Practice Guidelines: management of hepatitis C virus infection // J Hepatol. — 2014. — 60. — Р. 392-420.
9. Rauch A. The recent breakthroughs in the understanding of host genomics in hepatitis С / A. Rauch, J. Rohrbach, P.Y Bochud // Eur. J. Clin. Invest. - 2010. - Vol. 40. - P. 950-959.
10. Vitelman A.E. Efficacy of combinate treatment of hepatitis C virus infection / A.E. Vitelman, D.M. Gress, F.N. Ashbert // N. Engl. J. Med. - 2015. - Vol. 367. - P. 212-224.
УДК 578.76: 616-022.6
ЧАСТОТА ВИЯВЛЕННЯ Р1ЗНИХ ГЕНОТИП1В В1РУСУ ГЕПАТИТУ С СЕРЕД ХВОРИХ У М. ДН1ПРО
Вергун О. М., Воронкова О. С., Вшшков А. I.
Резюме. При обстеженн методом ПЛР бюлопчного матерiалу на наявнiсть генетичних MapKepiB Bipycy гепатиту С вiд oci6 з пiдозрою на гепатит визначено позитивну вщповщь у 616 випадках (53%) серед ycix по-зитивних результа^в виявлення гепатитiв. Домiнуючими генотипами гепатиту С серед населення м. Дыпро е 1в i 3а (41,7% i 33,4% вiдповiдно). Мкст-генотипи найчастiше представленi комбiнацieю 1в+3а (6,8%).
Ключовi слова: гепатит С, ПЛР, генотипи.
УДК 578.76: 616-022.6
ЧАСТОТА ВЫЯВЛЕНИЯ РАЗНЫХ ГЕНОТИПОВ ВИРУСА ГЕПАТИТА С СРЕДИ БОЛЬНЫХ В Г. ДНЕПР
Вергун О. М., Воронкова О. С., Винников А. И.
Резюме. При обследовании методом ПЦР биологического материала на наличие генетических маркеров вируса гепатита С от лиц с подозрением на гепатит определен положительный ответ в 616 случаях (53%) среди всех положительных результатов выявления гепатитов. Доминирующими генотипами гепатита С среди населения г Днепр являются 1в и 3а (41,7% и 33,4% соответственно). Микст-генотипы чаще всего представлены комбинацией 1в+3а (6,8%).
Ключевые слова: гепатит С, ПЦР, генотипы.
UDC 578.76: 616-022.6
FREQUENCY OF DETECTION OF DIFFERENT GENOTYPES OF HEPATITIS C VIRUS AMONG PATIENTS IN DNIPRO CITY
Vergun O. M., Voronkov3 О. S., Vinnikov A. I.
Abstract. Viral hepatitis with parenteral mechanism of transmission of pathogens, one of which is hepatitis C, are an important problem of modern medical science and health practitioners around the world. This is due to the widespread, high morbidity, expressed polymorphism of clinical manifestations, the multiplicity of ways and factors of transmission and extremely adverse effects, which can cause hepatitis - forming the entire spectrum of chronic liver disease, including cirrhosis and hepatocellular carcinoma. In recent years a marked trend towards an increased incidence of chronic disease was fixed. According to data of WHO experts chronic hepatitis C affected about 150 mln. people and 350 thousand die each year as a result of liver disease hepatitis C virus incidence and mortality due to hepatitis C is increasing progressively in the world and, according to experts, will double till 2020. For the degree of negative impact on human health and the extent of the incidence of viral hepatitis dominant place in the structure of infectious diseases parallel with influenza and acute infectious diseases of the upper respiratory
The aim of research was to determine the incidence of different genotypes of HCV among the population of Dni-pro city. The research was made at the laboratory «Synevo» in Dnipro city. The presence of hepatitis B virus markers in obtained blood samples from individuals (n=2510), which applied to the laboratory by a doctor direction or at own will with suspected hepatitis. The material for the research was the samples of venous blood of 616 patients with manifestation of chronic hepatitis C. All patients were directed to screening for hepatitis C in clinical indications. The age of patients ranged from 21 to 57 years. The study was made by polymerase chain reaction (PCR) in real time using a kit «AmplySens® HCV-genotype-FL» (LLC «YnterLabServys», RF), which can detect a number of subtypes of virus. Extraction RNA from clinical material carried by a kit of «RIBO-sorb» (OOO «YnterLabServys», RF) according to the instructions. From total contingent of the patients (n=2510) obtained during the second half of 2016 presence of viral hepatitis was confirmed in 1163 persons (46.3%). Of these, for 616 people (53%) the chronic hepatitis C was confirmed. A study of 616 samples of plasma often met genotypes 1b - in 257 (41.7%) cases and 3a - in 206 (33.4%) cases. Genotype 1a and 2 were confirmed in 18 cases (2.9%) and 43 (7%) relatively. The genotype 4 found in 6 people (1%), 5 and 6 genotypes did not register at all. Among mixed genotypes largest number of cases - 42 fell to the lot mixed 3a+1c (6.8%) and 1a+1c, which is registered in 38 cases (6.2%), and mixed 1b+2 found only 6 people (1%). Information about genotype is very important because it allows you to predict the response to treatment duration and dose chosen to recommend the drug. There are at least 6 HCV genotypes and many subtypes that have different sensitivity to interferon. Hepatitis C is very difficult to treat compared with hepatitis B. From the literature it is known that genotype 1b better than others to treatment with modern drugs. In contrast, genotype 1b, a positive result from treatment known for hepatitis C caused by genotypes 2 and 3 is 80%.
Conclusions: study of samples on the basis of «Synevo» laboratory in Dnipro city of biological material by PCR for the presence of genetic markers identified HCV positive response in 616 cases (53%) of all positive results for hepatitis research; dominant genotypes of hepatitis C among population of Dnipro city were 1c and 3a (41.7% and 33.4% respectively). Mixed genotypes often presented combination 3a+1c (6.8%). Prospects for further research: the spread of viral hepatitis is a significant medical and social problem for Ukraine, especially for hepatitis C and important area of research is the establishment of infections virus genotypes, allowing correct therapeutic scheme for each individual patient. Research genotypes of HCV to determine prognosis and options research its distribution among the population, which in the future will develop highly effective preventive measures.
Keywords: hepatitis C, PCR, genotypes.
Рецензент — проф. Лобань Г. А.
Стаття надшшла 07.02.2017 року
