CC BY
56
«Вестник хирургии»^2009
ОБЗОРЫ
© Коллектив авторов, 2009 УДК 616.37-002-036.11-092
Д.Ю.Семенов, А.ГТоноян, И.А.Степнов, М.В.Горчакова, Л.Г.Шапкина
ЗНАЧЕНИЕ МЕЛАТОНИНА И ЕГО РЕЦЕПТОРОВ В ПАТОГЕНЕЗЕ ОСТРОГО ПАНКРЕАТИТА
Кафедра общей хирургии (зав. — проф. Д.Ю.Семенов) Санкт-Петербургского государственного медицинского университета им. акад. И.П.Павлова
Ключевые слова: мелатонин, рецепторы мелатони-на, острый панкреатит, прогноз тяжести.
Несмотря на постоянное совершенствование методов диагностики и лечения, сохраняется тенденция к росту заболеваемости и летальности при остром панкреатите. В разных регионах острым панкреатитом заболевают от 5 до 80 человек на 100 тыс. населения [33, 45].
Даже с использованием всех достижений современной интенсивной терапии в 15-20% наблюдений развитие острого панкреатита приобретает деструктивный характер. По данным большинства авторов [23, 33, 39], при панкреонекро-зе у 40-70% больных происходит инфицирование очагов некротической деструкции, что является главной причиной высокой летальности пациентов, которая в последние годы остается стабильно высокой и в различных медицинских учреждениях варьирует от 10 до 70%. В то же время при неосложненных отечных формах панкреатита летальность не превышает 1% [33].
C. Rettally и соавт. [42] доказали, что прогнозирование тяжелого течения острого панкреатита на момент поступления пациента в стационар приводит к достоверному снижению летальности вследствие своевременного проведения комплексной интенсивной терапии, ранней анти-биотикопрофилактики, энтерального питания и выполнения любых других необходимых лечебных мероприятий. Недостаточность стандартных клинических и лабораторных показателей для оценки тяжести заболевания привела к использованию более объективных интегральных систем. Наиболее часто при остром панкреатите применяются шкалы Ranson, Glasgow и APACHE II. Существенным недостатком этих систем является их громоздкость и невозможность предсказать тяжесть панкреатита ранее, чем через 48 ч с момента поступления [14].
В связи с этим предпринимаются попытки выявления и применения множества качественных и количественных критериев некроза и инфицирования ткани поджелудочной железы, таких как повышение уровня С-реактивного белка [7], интерлейкина-6 (ИЛ-6) [14], ИЛ-8 [40], ИЛ-10, ИЛ-18 [50], глюкозы, кальция, карбоксипептидазы В [43], прокальцитонина [4], фосфолипазы А2 [5], амилоида А в плазме крови [32], повышение трипсиногена в моче [43], снижение уровня глутатионпероксидазы и селена в моче [50]. Чувствительность, специфичность и достоверность этих показателей являются предметом постоянных исследований. К примеру, один из наиболее доступных и распространенных
маркёров — С-реактивный белок — значительно уступает в чувствительности и достоверности ИЛ-6 [14] и амилоиду А [32]. Кроме того, повышение уровня С-реактивного белка происходит лишь на 2-е сутки с момента поступления. В связи с этим по клинической значимости он сопоставим с вышеперечисленными шкалами оценки тяжести острого панкреатита. Уровень прокальцитонина в плазме отражает степень нарушений барьерной функции желудочно-кишечного тракта и вероятность транслокации бактерий из просвета кишечника в некротизированную ткань поджелудочной железы [4]. Следовательно, прокальцитонин, а также ИЛ-8, являются маркёрами инфицированных форм заболевания, чувствительность и специфичность которых сопоставимы с чрескожной тонкоигольной пункцией поджелудочной железы [15].
Необходимо отметить, что с помощью всех вышеперечисленных маркёров, как правило, удается лишь диагностировать уже наступившие изменения в поджелудочной железе. В настоящее время не существует диагностических критериев, позволяющих прогнозировать развитие у пациентов некротических и инфицированных форм острого панкреатита.
Возможным следствием проблем диагностики и прогноза являются еще более многочисленные вопросы, связанные с хирургическим лечением больных с острым панкреатитом, которые на протяжении многих лет остаются предметом серьезных дискуссий во всем мире.
Столь большое количество существующих разногласий в вопросах диагностики, прогнозирования тяжести и тактике лечения острого панкреатита может отчасти объясняться значительным разнообразием форм и проявлений заболевания. Течение острого панкреатита при схожей выраженности начальных клинических и лабораторных признаков может варьировать от быстрого купирования всех проявлений до стремительного некротизирования ткани поджелудочной железы, развития парапанкреатита и присоединения бактериальной инфекции. Причина такой неоднородности в тяжести течения острого панкреатита может заключаться не только в комплексе экзо- и эндогенных факторов, вызвавших заболевание, но и в индивидуальной эффективности механизмов противодействия воспалению в поджелудочной железе.
Патогенез острого панкреатита продолжает активно изучаться. Большинство исследований свидетельствуют о том, что продукты перекисного окисления липидов играют немаловажную роль в механизме повреждения ткани поджелудочной железы во время острого воспаления [16-18]. При остром панкреатите снижение кровотока в поджелудочной
железе приводит к аккумуляции активированных макрофагов и повышению концентрации свободных радикалов в области ацинарных клеток поджелудочной железы [18]. Перекис-ное окисление липидов клеточных мембран, разрушение цитоструктуры и внутриклеточных компонентов свободными радикалами приводит к нарушению транспорта лизосомаль-ных и пищеварительных ферментов внутри ацинарных клеток и их разрушению [17, 29]. Ферменты и свободные радикалы панкреатических клеток попадают в межклеточное пространство и в капиллярное русло, вызывая повреждение сосудистой стенки, повышение ее проницаемости, нарастание отека ткани поджелудочной железы и дальнейший некроз клеток [24].
Выраженность деструкции ткани поджелудочной железы при остром панкреатите напрямую зависит от баланса между цитотоксическими воспалительными факторами (свободные радикалы, эндотоксины, провоспалительные цитокины), с одной стороны, и противовоспалительными механизмами организма больного (простагландины, эндогенная окись азота), активация которых, с другой стороны, повышает устойчивость поджелудочной железы к повреждению [1618].
Одним из факторов, препятствующих развитию деструкции поджелудочной железы, является мелатонин, принимающий важнейшее участие в происходящих в железе противовоспалительных процессах [26].
Мелатонин (5-метокси-М-ацетил-триптамин) был открыт в 1958 г. американским дерматологом А. Лернером из Йельского университета как пинеальная субстанция, обладающая просветляющим свойств на меланофоры кожи лягушки. Этот биогенный амин является производным серотонина (5-гидрокситриптамина), образующегося из поступающей с пищей аминокислоты триптофана. Мелатонин долгое время считался вырабатывающимся в эпифизе (шишковидной железе) медиатором циркадных ритмов [22]. В дальнейшем мелатонин был обнаружен в энтерохромаф-финных клетках (ДРиЭ) желудочно-кишечного тракта при помощи иммуногистохимии с применением специфических антител к данному гормону и его предшественникам: серо-тонину, М-ацетилсеротонину и мексамину [31]. Позднее этот факт получил подтверждение и в других исследованиях, основанных на том, что ключевой фермент синтеза мела-тонина — гидроксииндол-О-метилтрансфераза обнаружен в кишечнике. Это открытие указывает также на то, что желудочно-кишечный тракт является органом, синтезирующим мелатонин, а не аккумулирующим продукцию эпифиза [9].
После выяснения того, что в желудочно-кишечном тракте содержится более 95% эндогенного серотонина — основного источника мелатонина, было подтверждено, что ДРИЭ-клетками пищеварительной системы вырабатывается в 400 раз больше мелатонина, чем клетками шишковидной железы [25]. Кроме желудочно-кишечного тракта и эпифиза источником мелатонина также являются печень, желчный пузырь, поджелудочная железа, почки, надпочечники, яичники, эндометрий, плацента, воздухоносные пути, некоторые клетки крови [2, 3].
На сегодняшний день достоверно известно, что роль мелатонина в гомеостазе организма человека и млекопитающих не ограничивается лишь регуляцией циркадных ритмов. Данный гормон дает выраженный антидепрессивный эффект [47], оказывает антиапоптотическое действие [12, 28], стимулирует регенеративные процессы [19, 22], регулирует репродуктивную функцию и половое созревание [6], модулирует деятельность антиноцицептивной системы [36], является онкостатиком [46] и иммуномодулятором [13]. Кроме того,
защищая нейроны головного мозга от различных повреждений, он предотвращает развитие нейродегенеративных заболеваний, таких как болезни Паркинсона и Альцгей-мера [34, 38]. Благодаря данному эффекту считается, что мелатонин препятствует процессу старения организма млекопитающих [44].
Разнообразие вариантов воздействия мелатонина на различные ткани и органы объясняется его химическими свойствами. Во многих исследованиях подтверждается его способность захватывать и нейтрализовать свободные радикалы [37, 48], роль которых в патогенезе многих изученных заболеваний сложно переоценить. Свободные радикалы являются продуктами аэробного метаболизма в клетках и обнаруживаются во многих тканях и органах. Способность защищать различные клеточные структуры от оксидатив-ного стресса мелатонина значительно превышает таковую у глутатиона и витамина Е [1], являющимися одними из самых мощных природных антиоксидантов.
Помимо высокой антиоксидантной активности самого мелатонина, в экспериментах (in vitro) было выявлено, что его метаболит 6-гидроксимелатонин, образующийся в печени, обладает значительно более выраженным антиокси-дантным свойством, чем мелатонин [1].
В экспериментах на животных была отмечена высокая эффективность мелатонина в отношении защиты от оксида-тивного стресса, вызываемого липополисахаридами бактерий [35].
Кроме того, помимо способности самой молекулы мелатонина нейтрализовать свободно-радикальные остатки, доказано, что этот гормон оказывает выраженное активизирующее свойство на собственные антиоксидантные ферменты: глутатионпероксидазу и каталазу [11, 49], и стимулирует экспрессию генов, отвечающих за синтез супероксиддисму-тазы [1].
Воздействие мелатонина на клетку осуществляется двумя способами. Он может проникать внутрь клетки и связываться с ядерными рецепторами, относящимися к семейству ретиноидных рецепторов RZR/ROR [8]. А также три типа высокоаффинных мембранных рецептора к мела-тонину, два из которых (МТ1 и МТ2) были обнаружены у млекопитающих [21]. Эти рецепторы были обнаружены во многих органах и тканях, в том числе и в пищеварительной системе [21, 30, 41].
Существенный интерес представляет серия экспериментов, выполненных J. Jaworek и соавт. [26, 27], по изучению роли мелатонина в патогенезе острого панкреатита. Первым этапом было выявлено, что у животных с искусственно вызванным панкреатитом введение мелатонина приводит к отчетливому уменьшению повреждения поджелудочной железы за счет снижения перекисного окисления липидов и увеличения синтеза окиси азота. В следующих экспериментах с такой же моделью острого панкреатита животным вводился специфический блокатор МТ2-рецепторов. У животных контролировали уровень амилазы, липазы и TNFa в плазме, определяли содержание маалонового диальдегида, 4-гид-роксиноненала (продукты перекисного окисления липидов) и кровоток в панкреатической ткани, а также выполняли гистологическое исследование поджелудочной железы. На основании изученных параметров было установлено, что блокирование МТ2-рецепторов приводит к значительному повышению тяжести острого панкреатита посредством снижения регионарного кровотока, увеличения концентрации продуктов перекисного окисления липидов в ткани поджелудочной железы и нарастания в плазме такого про-воспалительного цитокина, как TNFa. Таким образом было
Том 168 • № 3
Мелатонин в патогенезе острого панкреатита
доказано, что при взаимодействии мелатонина с рецепторами второго типа запускается каскад биохимических реакций, обеспечивающих противовоспалительный механизм в поджелудочной железе, за счет вазодилатации и улучшения кровотока и повышения устойчивости клеточной стенки к продуктам перекисного окисления липидов. В то же время появились данные о том, что при связывании мела-тонина с рецепторами первого типа происходит ухудшение регионарного кровотока, вызываемое выраженным сосудосуживающим действием [10, 20].
Результаты этих исследований позволяют сделать предположение о том, что рецептор-опосредованная противовоспалительная активность мелатонина может оказаться ключевым или одним из наиболее важных факторов, определяющих тяжесть течения острого панкреатита. Следовательно, различные исходы острого панкреатита при схожих начальных проявлениях и принципиально одинаковой тактике лечения могут быть патогенетически обусловлены качеством и количеством рецепторов первого и второго типа, их соотношением и активацией эндогенным мелатонином.
Таким образом, разработка методов определения количества и соотношения МТ1 и МТ2 в различных тканях организма человека обретает бесспорную научно-практическую важность и предоставляет обширные возможности в изучении роли мелатонина и его рецепторов в патогенезе острого панкреатита. Понимание участия мелатонина в механизмах противодействия воспалению в ткани поджелудочной железы, осуществляемого опосредованно через рецепторный аппарат на поверхности клеток, может внести значимый вклад в дальнейшую разработку принципиально новых прогностических, диагностических и лечебных подходов в гастроэнтерологии и хирургии поджелудочной железы.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1. Анисимов В.Н., Кветной И.М., Комаров Ф.И. и др. Мелатонин в физиологии и патологии желудочно-кишечного тракта.—М.: Советский спорт, 2000.
2. Осадчук М.А., Киричук В.Ф., Кветной И.М. Диффузная ней-роэндокринная система: общебиологические и гастроэнтерологические аспекты.—Саратов: Изд-во Саратовск. мед. ун-та, 1996.—128 с.
3. Райхлин Н.Т., Кветной И.М., Осадчук М.А. APUD-система: общепатологические и онкокардиологические аспекты.— Обнинск: Изд-во МРНЦ РАМН, 1993.
4. Ammori B.J., Becker K.L., Kite P. et al. Calcitonin precursors in the prediction of severity of acute pancreatitis on the day of admission // Br. J. Surg.—2000.—Vol. 90.—P. 197-204.
5. Aufenanger J., Samman M., Quintel M. et al. Pancreatic phos-pholipase A2 activity in acute pancreatitis: a prognostic marker for early identification of patients at risk // Clin. Chem. Lab. Med.—2002.—Vol. 40.—P. 293-297.
6. Balik A., Kretschmannova K., Mazna P. et al. Melatonin action in neonatal gonadotrophs // Physiol. Res.—2004.—Vol. 53, Suppl. 1.—P. S153-66.
7. Barauskas G., Svagzdys S., Maleckas A. et al. C-reactive protein in early prediction of pancreatic necrosis // Medicina (Kaunas).— 2004.—Vol. 40.—P. 135-140.
8. Becker-Andre M., Wiesenberg I., Schaeren-Wiemers N. et al. Pineal gland hormone melatonin binds and activates an orphan of the nuclear receptor superfamily // J. Biol. Chem., Nov.—1994.— Vol. 269.—P. 28531-28534.
9. Bubenik G.A. Localization, physiological significance and possible clinical implication of gastrointestinal melatonin // Biol. Signals Recept.—2001.—Vol. 10, № 6.—P. 350-366.
10. Bucher B., Gauer F., Masson-Pevet M. et al. Vasoconstrictor effects of various melatonin analogs on the rat tail artery in the presence of phenylephrine // J. Cardiovsc. Pharmacol.—1999.— Vol. 33.—P. 316-322.
11. Cabeza J., Motilva V., Martin M.J. et al. Mechanisms involved in gastric protection of melatonin against oxidant stress by ischemia-reperfusion in rats // Life Sci.—2001.—Vol. 968.—P. 1405-1415.
12. Cabrera J., Quintana J., Reiter R.J. et al. Melatonin prevents apoptosis and enhances HSP27 mRNA expression induced by heat shock in HL-60 cells: possible involvement of the MT2 receptor // J. Pineal Res.—2003.—Vol. 35.—P. 231-238.
13. Carrillo-Vico A., Garcia-Perganeda A., Naji L. et al. Expression of membrane and nuclear melatonin receptor mRNA and protein in the mouse immune system // Cell Mol. Life. Sci.—2003.— Vol. 60.—P. 2272-2278.
14. Chen C.C. Serum markers in the early assessment of severity of acute pancreatitis: which is the most useful // J. Chin. Med. Assoc.—2004.—Vol. 67.—P. 439-441.
15. Chen C.C., Wang S.S., Lee F.Y et al. Proinflammatory cytokines in early assessment of the prognosis of acute pancreatitis // J. Gastroenterol.—1999.—Vol. 94.—P. 213-218.
16. Czako L., Takacs T., Varga I. et al. Involvement of oxygen-derived free radicals in L-arginine-induced acute pancreatitis // Dig. Dis. Sci.—1998.—Vol. 43.—P. 1770-1777.
17. Dabrowski A., Gabrielewicz A., Wereszcynska-Siemiatkowska U. et al. Oxygen-derived free radicals in caerulein-induced acute pancreatitis // Scand. J. Gastroenterol.—1988.—Vol. 23.— P. 1245-1249.
18. Dabrowski A., Konturek J.W., Gabrielewicz A. Role of oxidative stress in the pathogenesis of caerulein-induced acute pancreatitis // Eur. J. Pharmacol.—1999.—Vol. 377.—P. 1-11.
19. Danilova N., Krupnik V.E., Sugden D. et al. Melatonin stimulates cell proliferation in zebrafish embryo and accelerates its development // FASEB J.—2004.—Vol. 18.—P. 751-753.
20. Doolen S., Krause D.N., Dubocovich M.L. et al. Melatonin mediates two distinct responses in vascular smooth muscle // Eur. J. Pharmacol.—1998.—Vol. 345.—P. 67-69.
21. Dubocovich M.L. Melatonin receptors: are there multiple subtypes? // Trends Pharmacol. Sci.—1995.—Vol. 16.—P. 50-56.
22. Dubocovich M.L., Rivera-Bermudez M.A., Gerdin M.J. et al. Molecular pharmacology, regulation and function of mammalian melatonin receptors // Front. Biosci.—2003.—Vol. 8.—P. 10931108.
23. Floyd A., Pederson L., Nielsen G.L. et al. Secular trends in incidence and 30-day case fatality of acute pancreatitis in North Jutland County, Denmark: a register-based study from 1981-2000 // Scand. J.Gastroenterol.—2002.—Vol. 37, № 12.—P. 1461-1465.
24. Guice K.S., Oldham K.T., Johnson K.J. et al. Mechanisms of pancreatic capillary endothelial injury in acute pancreatittis // Surg. forum.—1987.—Vol. 28.—P. 145-149.
25. Huether G. Melatonin synthesis in the gastrointestinal tract and the impact of nutritional factors on circulating melatonin // Ann. N.Y Acad. Sci.—1994.—Vol. 719.—P. 146-158.
26. Jaworek J., Konturek J.S., Leja-Szpak A. et al. Role of endogenous melatonin and its MT2 receptor in the modulation of caerulin-induced pancreatitis in the rat // J. Physiol. Pharmacol.— 2002.—Vol. 534.—P. 791-804.
27. Jaworek J., Leja-Szpak A., Bonior J. et al. Protective effect of melatonin and its proecursor L-tryptophan on acute pancreatitis induced by caerulein overstimulation and ischemia/reperfusion // J. Pineal Res.—2002.—Vol. 33.—P. 1-13.
28. Jiao S., Wu M.M., Hu C.L. et al. Melatonin receptor agonist 2-iodomelatonin prevents apoptosis of cerebellar granule neurons via K (+) current inhibition // J. Pineal.Res.—2004.—'Vol. 36.— P. 109-116.
29. Jungerman J., Lerch M.M, Weidenbach H. et al. Disassembly of rat pancreatic acinar cell cytoskeleton during supramaximal secretagogue stimulation // Am. J. Physiol.—1995.—Vol. 268.— P. 328-338.
30. Lee P.P., Shiu S.Y, Chow P.H. et al. Regional and diurinal studies of melatonin and melatonin binding sites in the duck gastro-intestinal tract // Biol. Signals.—1995.—Vol. 4.—P. 212-224.
31. Lerner A.B., Case J.D., Takahashi Y et al. Isolation of melatonin, a pineal factor that lightenes melanocytes // J. Am. Soc.—1958.— Vol. 80.—P. 2587-2590.
32. Mayer J.M., Raraty M., Slavin J. et al. Serum amyloid A is a better early predictor of severity than C-reactive protein in acute pancreatitis // Br. J. Surg.—2002.—Vol. 89.—P. 163-171.
33. Mayerle J., Hlouschek V., Lerch M.M. Current management of acute pancreatitis // Nat. Clin. Pract. Gastroenterol. Hepatol.— 2005.—Vol. 2, № 10.—P. 473-483.
34. Montilla P., Tunez I., Munoz M.C. et al. Antioxidative effect of melatonin in rat brain oxidative stress induced by adriamycin // Rev. Esp. Physiol.—1997.—Vol. 53.—P. 301-305.
35. Nava F., Calapai G., Facciola G. et al. Melatonin effects on inhibition of thirst and fever induced by lipopolysaccharide in rat // Eur. J. Pharmacol.—1997.—Vol. 331.—P. 267-274.
36. Noseda R., Hernandez A., Valladares L. et al. Melatonin-induced inhibition of spinal cord synaptic potentiation in rats is MT2 receptor-dependent // Neurosci. Lett.—2004.—Vol. 360.—P. 41-44.
37. Okatani Y, Wakatsuku A., Shinohara K. et al. Melatonin protects against oxidative mitochondrial damage induced by rat placenta by ischemia and reperfusion // J. Pineal Res.—2001.—Vol. 31.— P. 173-178.
38. Pappola M.A., Simovich M.J., Bryant-Thomas T. et al. The neu-roprotective activities of melatonin against the Alzheimer betaprotein are not mediated by melatonin membrane receptor // J. Pineal Res.—2002.—Vol. 32.—P. 135-142.
39. Pitchumoni C.S., Patel N.M., Shah P. Factors influencing mortality in acute pancreatitis: can we alter them? // J. Clin. Gastroenterol.— 2005.—Vol. 39, № 9.—P. 798-814.
40. Rau B., Steinbach G., Gansauge F. et al. The potential role of pro-calcitonin and interleukin 8 in the prediction of infected necrosis in acute pancreatitis // Gut.—1997.—Vol. 41.—P. 832-840.
41. Reppert S.M., Godson C., Mahle C.D. et al. Molecular character-istion of a second melatonin receptor expressed in human retina and brain: The Mel 1b melatonin receptor // Proc. Natl. Acad Sci. USA.-1995.-Vol. 92.—P. 8734-8738.
42. Rettally C.A., Skarda S., Garza M.A. et al. The usefulness of laboratory tests in the early assessment of severity of acute pancreatitis // Crit. Rev. Clin. Lab. Sci.—2003.—Vol. 40.—P. 117-149.
43. Saez J., Martinez J., Trigo C. et al. A comparative study of the activation peptide of carboxypeptidase B and trypsinogen as early predictors of the severity of acute pancreatitis // Pancreas.— 2004.—Vol. 29.—P. 9-14.
44. Sekimoto M., Takada T., Kawarada Y et al. JPN Guidelines for the management of acute pancreatitis: epidemiology, etiology, natural history, and outcome predictors in acute pancreatitis // J. Hepatobiliary Pancreat. Surg.—2006.—Vol. 13, № 1.—P. 10-24.
45. Sharm M., Gupta YK. Effect of chronic treatment of melatonin on learning, memory and oxidative deficiencies induced by intra-cerebroventricular streptozocin in rats // Pharmacol. Biochem. Behav.—2001.—Vol. 70.—P. 325-331.
46. Shiu S.Y, Law I.C., Lau K.W. et al. Melatonin slowed the early biochemical progression of hormone-refractory prostate cancer in a patient whose prostate tumor tissue expressed MT1 receptor subtype // J. Pineal Res.—2003.—Vol. 35.—P. 177-182.
47. Sumaya I.C., Masana M.I., Dubocovich M.L. et al. The antidepres-sant-like effect of the melatonin receptor ligand luzindole in mice during forced swimming requires expression of MT2 but not MT1 melatonin receptors // J. Pineal Res.—2005.—Vol. 39.—P. 170177.
48. Tan D.X., Chen L.D., Poeggler B. et al. Melatonin: a potent endogenous hydroxyl radical scavenge // Endocrine J.—1993.— Vol. 1.—P. 57-60.
49. Urata Y, Homma S., Goto S. et al. Melatonin induces g-gluta-mylcyteine synthetase mediated by activator protein-1-human vascular endothelial cells // Free Radic. Biol. Med.—1999.— Vol. 27.—P. 838-847.
50. Wereszczynska-Siemiatkowska U., Mroczko B., Siemiatkowski A. et al. The importance of interleukin 18, glutathione peroxidase, and selenium concentration changes in acute pancreatitis // Dig. Dis. Sci.—2004.—Vol. 49.—P. 642-650.
Поступила в редакцию 24.09.2008 г.
