CC BY
36
УДК 619:616.98:578.828.11 Л ЗАВИСИМОСТЬ РАЗВИТИЯ ЛЕЙКОЗНОГО ПРОЦЕССА ОТ ГЕНОТИПА BLV У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА П.Н. Смирнов, д. вет. н., проф., Н.В. Батенёва, к. биол. н., Т.В. Гарматарова, аспирант Новосибирский государственный аграрный университет
Целенаправленные исследования крупного рогатого скота, районированного в ряде крупных племенных хозяйств Западной Сибири, Краснодарского и Ставропольского краев, скомпрометированного в отношении инфекций BLV, позволили установить следующее: BLV (вирус лейкоза крупного рогатого скота) не является однородным. Были выявлены I, IV, VI... генотипы провируса на территории Новосибирской области. Установлено, что BLV I генотипа обладает сравнительно большей степенью агрессивности («вирулентности»), что подтверждалось более коротким интервалом между инфицированием и развитием гематологической стадии лейкоз-ного процесса. В противоположность I генотипу, BLV- провирус VI генотипа обладает значительно меньшей степенью агрессивности. Автор обращает внимание на хронизацию лейкозной инфекции и в целом лейкозного процесса, на формирование некоего «равновесия» между макро - и микроорганизмом. Ключевые слова: вирус лейкоза крупного рогатого скота, инфици-рованность, провирус, генотип,
УДК 619:616.98:578.828.11 Л DEPENDENCE OF THE DEVELOPMENT OF LEUKEMIC PROCESS FROM THE GENOTYPE BLV IN CATTLE
Smirnov P.N., Dr. Vet. Sci., Prof., Bateneva N.V., Cand.Biol.Sci., Garmatarova T.V., post graduate student
Novosibirsk State Agrarian University
Targeted studies of cattle, zoned in several large breeding farms in Western Siberia, Krasnodar and Stavropol regions, compromised against infections BLV, allowed to find the following: BLV (leukemia virus of cattle) is not homogeneous. There were identified the Ist, IVth, VItk ... genotypes of provirus in Novosibirsk region. It is established that BLV of the Ist genotype has a relatively greater degree of aggressiveness ("virulence"), which was confirmed by a shorter interval between infection and the development of hematologic leukemic stage process. In contrast to genotype I, BLV- provirus of the VIth genotype has a significantly lesser degree of aggressiveness. The author gives attention to chronization of leukemic infection and the whole Leukemia process, the formation of a "balance" between the macro - and microorganisms.
Key words: leukemia virus in cattle, infection, provirus genotype, histological diagnosis, hematology
гистологическая диагностика, research гематологическое исследование
Итак, наша концепция «агрессивности BLV» вызвала необходимость накопления новых научных знаний в пользу подтверждения данного феномена.
Цель исследований. Провести комплексное морфологическое исследование биоматериала (крови и кроветворных органов) крупного рогатого скота, больного лейкозом, при одновременном генотипировании BLV- провируса от этих же животных, на предмет возможного выявления взаимосвязи между этими процессами - вирусоносительством и неоплазией.
Материалы и методы исследований
Дизайн опыта был предельно прост. При массовом клинико-гематологическом исследовании оздоравливаемых от лейкоза стад было отобрано около трёх десятков коров, у которых провели с помощью ПЦР -и ПДРФ - анализов определение генотипа BLV-провируса, в результате чего для дальнейших исследований использовали биоматериал от трёх коров - носителей BLV первого и трёх коров - носителей VI генотипа.
Гематологическое исследование всех 6-ти коров было проведено с использованием общепринятых в гематологии методик - определение абсолютного содержания лимфоцитов и других популяций лейкоцитов, микроскопия мазков крови.
Для гистологического исследования, после комиссионного убоя коров, были отобраны кусочки селезенки, лимфатических узлов, костного мозга и других органов. Анализ гистологических препаратов (срезов, окрашенных гемтоксилин-эозином) был проведен к.в.н. В.В.Смирновой, за что мы ей приносим огромную благодарность.
Результаты исследований
Прежде чем приступить к анализу результатов собственных исследований, связанных с особенностями развития лейкозного процесса, с целью понимания сути проблемы, обратимся к первоисточникам. В начале 80-х годов прошлого столетия при широкомасштабных клинико-гематологических исследованиях крупного рогатого скота на лейкоз [5], при одновременной гистологической диагностике [6], была разработана современная классификация гемобластозов крупного рогатого скота. Согласно последней все гемобластозы дифференцируются на две большие группы - системные и опухолевые. Причем, по мнению автора, группа системных гемобластозов включает несколько большее число животных, регистрируемых с неоплазией. Так, чаще всего регистрируется лимфоидный лейкоз (42,9%), на втором месте лимфосаркома - 27,3%, третье место за ретикулосаркомой - 8,6%, далее -недифференцируемый лейкоз (острая форма) - 6,7%. С такой же частотой регистрируется лимфогранулематоз. Несколько реже (тоже
острая форма) встречается системный гистиоцитоз - 3,3%.
В группе лимфоидного лейкоза довольно часто регистрируется лимфобластный вариант (острая форма).
Следует отметить, что у крупного рогатого скота, в отличие от человека, лимфоидный тип кроветворения [6]. В этой связи и частота развития лимфоидного лейкоза и лимфосаркомы у животных преобладают.
При гематологическом исследовании шести коров с диагнозом «лейкоз» было установлено, что лимфобластный лимфолейкоз сопровождался повышенными показателями периферической крови. Так, абсолютное содержание лимфоцитов и лейкоцитов было сравнительно ниже, чем у коров с хроническими формами гемобластоза - хронический лимфолейкоз и лимфогранулематоз. Следует отметить, что наиболее трудно диагностируемыми при гематологическом исследовании являются лимфогранулематоз и ретикулосаркома [7].
Со всей очевидностью нами было установлено, что наиболее характерные количественные изменения лимфоидных клеток крови были выявлены у инфицированных BLV I генотипа ^п^.
Далее мы имели возможность получить дополнительные подтверждения «агрессивности» BLV- I. Гистологически было установлено, что у коров, инфицированных BLV именно этого генотипа, развивался пролимфоцитарный ( в одном случае) и лимфобластный (в двух случаях) лейкоз. У коров с инфекцией вLv шестого генотипа в двух случаях диагностирован хронический лимфолейкоз и в одном -лимфогранулематоз.
Остановимся кратко на патоморофологических изменениях, которые были характерны для хронического лимфолейкоза. При послеубойном осмотре туш отмечали поражение селезенки и лимфатических узлов. Незначительное увеличение селезенки, консистенция плотная, края округлые, на разрезе красно-коричневого цвета, с буроватым оттенком.
Лимфатические узлы подвижны, капсула снимается легко, гладкая, блестящая. На разрезе ткань светло-серого цвета, без выраженных границ коркового и мозгового слоев.
Печень, почки были слегка увеличены.
Гистологически в селезенке у животных (BLV-носителей I генотипа) отмечали обогащенные периферической зоны фолликулы лимфоидными клетками, последние выглядели увеличенными в размере. Имело место и увеличение числа фолликулов. В одном случае, что соответствовало более поздней стадии заболевания, происходило замещение ткани красной пульпы и синусов лимфоидными элементами, среди которых было много молодых форм, а селезенка постепенно приобретала однофазный вид.
В лимфоидных узлах лейкемические поражения начинались с мякотных тяжей и лимфатических фолликулов. В этих стадиях
происходило незначительное расширение светлых центров и обогащение межфолликулярных участков лимфоидными элементами. В результате фолликулы выглядели увеличенными и постепенно соединялись друг с другом. Синусы и светлые центры заполнялись клетками лимфоидного ряда. Структура строения органа нарушалась. Ткань, так же, как и в селезенке, приобретала однообразный вид. В клеточном составе преобладали пролимфоциты, которые были несколько крупнее, чем малый лимфоцит, с мелкоглыбчатым распределением хроматина и узким ободком цитоплазмы. Вот почему подобную морфологическую картину расценивали как пролимфоцитарный вариант лимфоидного лейкоза.
Преобладания в пораженной ткани более крупных клеток со светлым ядром и 1-3 ядрышками позволяли морфологически квалифицировать как лимфобластный вариант лимфолейкоза.
Изменения в костном мозге обнаруживали лишь в более поздние стадии патогенетического процесса, которые характеризовались появлением небольших скоплений или диффузных полей из лимфоидных элементов. Для патолого-анатомической картины лимфогранулематоза было характерно закономерное вовлечение в патологический процесс лимфатических узлов. В основном они поражали симметрично, и степень увеличения и изменения их была выражена по-разному. Лимфоузлы были обычно плотные, сочные, саловидные на разрезе, серо-желтого или серовато-белого цвета.
Селезенка незначительно увеличена, плотная, с пестрым рисунком на разрезе вследствие рассеянных в пульпе очажков серо-желтого цвета.
Для лимфогранулематоза характерным признаком являлось обнаружение в лимфатических узлах, в кортикальной зоне, скоплений из лимфоидных клеток, плазматических гистиоцитов, нейтрофилов и единичных клеток Березовского-Штернберга. Кроме того, имела место пролиферация эндотелия и клеточных элементов периваскулярного пространства. Стенки сосудов разрыхлены, склеротические изменения.
Выводы:
1. Феномен «агрессивности» BLV первого генотипа (по env гену) проявляется развитием острых форм гемобластозов (пролимфоцитарный и лимфобластный лимфолейкоз). В противоположность ему онковирусная инфекция BLV шестого генотипа ассоциирована с хроническим лимфолейкозом и лимфогранулематозом.
2. Инфекция BLV-провируса первого генотипа ассоциирована с более высокими показателями лимфоидных клеток в единице объема крови, сопровождается более активным лейкопоэзом.
Литература
1. Грачева, Н.В. Генотипическое разнообразие BLV по GAG и ENV генам у крупного рогатого скота разных пород: автореф. дисс.... канд. биол. наук /Н.В. Грачева. -Новосибирск, 2010. - 18 с.
2. Дробот, Е.В. Результаты изучения генотипического разнообразия вируса лейкоза крупного рогатого скота и особенности эпизоотологического и гематологического проявления: автореф. дисс.. канд. биол. наук / Е.В. Дробот - Новосибирск, 2007. - 18 с.
3. Смирнов, П.Н. Динамика Т- и В-лимфоцитов периферической крови здоровых телят, экспериментально инфицированных онкорнавирусом и родившихся от больных лимфолейкозом коров /П.Н.Смирнов // Теоретические и практические вопросы ветеринарии. - Тарту. - 1983. - С.203-211.
4. Смирнов, П.Н. Сравнительные биохимические показатели крови коров айрширов в связи с их продуктивностью и неблагополучием по инфекции BLV /П.Н.Смирнов, Н.В.Батенёва, Т.В.Гарматарова, И.В. Тюньков // Международный науч-иссл. журнал №9 (16). - Екатеринбург. - 2013.- С.64 -66.
5. Смирнова, В.В. Вопросы классификации и патоморфологическая характеристика гемобластозов крупного рогатого скота /В.В.Смирнова, Т.П. Кудрявцева //Науч.-тех. Бюл. ВАСХНИЛ. Сиб. отделение Новосибирск. - 1985. - вып. 25 - 13-17.
6. Смирнова, В.В. Патоморфология, эпизоотология и вопросы иммунологии гемобластозов крупного рогатого скота в Западной Сибири: автореф. дисс. ...канд. вет.наук /
B.В. Смирнова. - М., 1984.- 24с.
7. Чичинина, С.В. Роль аллельной вариабельности генов цитокинов в формировании резистентности крупного рогатого скота к лейкозу: автореф. дисс. ... канд. биол. наук/
C.В. Чичинина.- Новосибирск, 2005. - 24с.
