CC BY
8
УДК: 616.31: 616.311: 613
DOI: 10.15587/2313-8416.2015.57352
захисна Д1Я нового ппешчного ЗАСОБУ НА СЛИЗОВУ ОБОЛОНКУ ПОРОЖНИНИ РОТА ПРИ ПРОМЕНЕВОМУ СТОМАТИТ1
© Ю. В. 1евлева
В експериментi на 42 б1лих щурах з променевим стоматитом показано вгдновлення стану слизово! оболон-ки порожнини рота за рахунок лiквiдацii проявiв оксидативного стресу опромiнення i нормалгзацИ актив-ностi антиоксидантних ферментiв. Гель оказував захисну дiю на переб^ ерозивно-виразкового променево-го стоматиту i сприяв ранозагоюванню та репараци СОПР
Ключовi слова: променеве опромтення, слизова оболонка, запалення, антиоксидантна активтсть, репа-ращя
The radial stomatitis development is the one of the main problems in patients who underwent radial therapy of the malignant tumors in head and neck region that impedes the effective antitumor treatment. The means of prophylaxis and local treatment of radial injuries are not always effective.
Aim of research. The determination of effectiveness of the new hygienic means based on antimatters on the state of oral mucous tunic at the radial stomatitis.
Materials and methods of research. Experiments were carried out on 42 white rats that were irradiated using AG-AT-R-1 set with dose 7,5 gr. There were studied the picture of radial stomatitis in animals and an effect of the new hygienic mean on biochemical parameters of inflammation, peroxidation, antioxidant activity of the oral mucous tunic.
Results. At the local effect on the oral cavity tissue at radial stomatitis in rats the new hygienic mean ensures the elimination of manifestation of oxidative stress of irradiation and normalized an activity of antioxidant enzymes by 1,5 times faster than treatment in the control group. In the conditions of experiment the new gel had a local protective effect on the clinical course of erosive and ulcerous radial stomatitis and favored the healing of the oral mucous tunic wounds.
Conclusions. The received results indicate an availability of using new mean for the oral cavity care at the treatment of erosive and ulcerous element of OCMT radial injury
Keywords: radial irradiation, mucous tunic, inflammation, antioxidant activity, reparation
1. Вступ
Сучасна променева терашя з використанням високоенергетичних джерел випромшення у хворих з новоутвореннями в дшянщ голови i ши! поряд з шдвищенням числа клжчних одужань приводить до росту променевих реакцш та ускладнень в рото-вш порожниш. Питанню профшактики виникнення та лшування променевих реакцш як результату ди юшзуючого опромшення на тканини та органи порожнини рота не придшяеться достатньо! уваги [1, 2].
2. Обгрунтування дослщження
Засоби профшактики i лшування променевих реакцш та ускладнень слизово! оболонки порожнини рота (СОПР), як включають антисептичш, аналге-тичш, репарацшш препарати, не завжди демонстру-ють достатньо ефективну дш [3, 4].
Зпдно статистичних даних пздбним комплексом ди до атгелю е солкосерш, але в експерименп, який проводили з остантм, вш показав менш ефективну дш. Тому тдтвердженням бшьш виразно! радюпро-текторно!, ранозагоювально! та протизапально! ди атгелю в профшактиц i лтувант променевих реакцш та ускладнень слизово! оболонки порожнини рота (СОПР) стало дослщження препарату та його комплексно! за-хисно! ди при променевому стоматип [2, 3].
У зв'язку з цим виникае необхщшсть пошуку та розробки ефективних засобiв з радюпротекторни-ми, ранозагоювальними та протизапальними власти-востями.
3. Мета дослщження
Визначення ди нового розробленого ппешчного засобу на основi ашречовин на стан СОПР при променевому стоматита
4. Матерiал та методи дослщження
Експерименти проведет на 42 бших щурах ма-сою 180-200 г. Ращацшне опромтення проводили за допомогою установки АГАТ-Р-1 росшського виробни-цтва. Загальна опромiнювальна доза в обласл голови щурiв складала 7,5 Гр. Тварин вах дослщжуваних груп опромшювали одночасно, тсля чого утримували в умовах, що i неопромшених контрольно! групи. Спо-стереження за тваринами вели кожного дня впродовж 30 дiб тсля опромшення, отнюючи загальний стан, рухливу активтсть, динашку маси тша, стан СОПР.
При оцшщ уражень СОПР опромшених тварин реестрували колiр, волопсть, наявнiсть набряку, ерозiй та виразок.
Ул тварини були розподiленi на 3 групи по 14 щурiв в кожнiй:
- перша група була бюлопчним контролем, до не! ввднесеш тварини, яких не опромшювали;
- друга група включала тварин, яких опромь нювали дозою 7,5 Гр (контрольна);
- третя група включала тварин, яких опромь нювали дозою 7,5 Гр i лшували, застосовуючи мю-цево ашгель.
Тваринам дослвдно! третьо! групи з першого дня шсля опромiнення впродовж 10 днiв щоденно по 2 рази на день експозищею 10 хв на уражеш дшян-ки СОПР накладали ватний тампон з лшувальним гелем, до складу якого входили бюлопчно активш речовини продуктiв бджiльництва (прополiс i вiск iз забрусу), амарантова олiя, лiзоцим та iншi [5].
На 10, 15, 20 день експерименту по 5 щурiв на 10 та 15 день з кожно! групи та 4 щура на 20 день), виводили з до^ду шляхом тотального кровопус-кання з серця шд тюпенталовим наркозом (40 мг/кг). Ввдокремлювали слизову щоки, гомогешзати яко! отримували, центрифугуванням на РС-6 при 3000 об/ хв. Впродовж 15 хв при t+4°C. В гомогенатах слизово! оболонки визначали рiвень бiохiмiчних маркерiв запалення: концентращю малонового дiальдегiду (МДА) тiобарбiтуровим методом, актившсть кисло! фосфатази (КФ) за методом Bessay et а1, в модифшацп А. П. Левицького. Стан фiзiологiчноl антиоксидант-но! системи (ФАС) ощнювали по активностi каталази (К) [6] та супероксиддисмутази (СОД) [7].
Результати експеримента обробляли статис-тично з використанням критерпв вiрогiдностi розхо-джень за Ст'юдентом.
5. Результати дослщження
Експериментальнi дослiдження показали, що у щурiв, якi отримали опромшення у дозi 7,5 Гр, вже
на 1 добу визначалася картина променевого стоматиту. Загальний стан тварин був пригшчений. Ом щурiв були малорухомi i вiдказувалися вiд прийому 1ж1 (табл. 1). При оглядi порожнини рота ввдзначала-ся дифузна гiперемiя зубоясенного краю бiля рiзцiв нижньо! шелепи.
На 3 добу пригнiчення рухомо! активностi поширилося на бiльшу кшьысть тварин (70 %) щу-рiв. На слизовiй оболонцi порожнини рота у 30 % тварин утворилися ерози i виразки. До 5-о! доби ерозивно-виразковi ураження СОПР виявлялися у 80-100 % тварин.
Клшчна картина виразного ерозивно-виразко-вого стоматиту зберталася у 60 % тварин до 15-о! доби тсля опромшення. Виразтсть клшчно! картини про-меневого стоматиту стала зменшуватися на 18-19 добу тсля опромшення, помiчалося вщновлення цiлiсностi епiтелiю слизово! оболонки, И кольору (блщо-рожево-го) i вологосп. Покращення загального стану, збшь-шення маси тiла тварин наступало к 20 добг
З даних табл. 1 видно, що тварини, яких мюце-во лшували новим ашгелем, переносили променеве ураження легше, вщновлення стану слизових обо-лонок порожнини рота вщбувалося швидше, апетит з'являвся в них рашше, що приводило до засвоюван-ня поживних речовин i пiдвищенню маси тiла, забез-печуючи бiльшу виживаeмiсть тварин.
Як видно з табл. 2 застосування атгелю зни-жувало важкiсть променевого стоматиту, попереджа-ло появу найбшьш виразних виразково-некротичних уражень в ротовш порожнинi та прискорювало !х загоювання. У лшованих тварин не фшсувалося злив-них петехiй (в контрольнш групi на 5-10 доби - 4060 %), значно рщше розвивалися вогнищнi та зливнi ерози i виразки слизово! оболонки порожнини рота.
Таблиця 1
Клiнiчнi ознаки загального стану експериментальних тварин тсля опромшення
Кттчш ознаки Групи тварин Строки тсля опромшення, доби
1-3 6-10 11-14 16-21
Загальний стан 1 Нормальна рухливють
2 Пригнчення, млявгсть Пригтчення, адшамш Пригнчення, адiнамiя Пригтчення, мала рухливють
3 Пршшчення Мала рухливiсть Без значних змiн Нормальна рухливiсть
Стан слизових оболонок ротово! порожнини 1 Рожевi волоп
2 Блiдо-рожевi з крововиливами, набрякл^ ерози, зливш петехл Очищення ерозiй, вiдторгнення плгвок
3 Блiдо-рожевi зi вогнищевими петехшми Плгвчатий еттелит Вщновлення поверхт
Харчова збудливють 1 Нормальний апетит
2 Пригнiчення апетиту з 1 доби до 10 доби, у частки тварин з 11 доби вдаовлення апетиту
3 Пригнiчення апетиту з 1 доби тсля опромшення, нормалiзацiя у бшьшоста тварин на 5-6 добу
Маса тварин 1 Позитивна динамжа маси
2 Щури утрачають вагу, негативна динамжа маси Маса досягла вихщного рiвня
3 Зниження маси тша Нормалiзацiя маси Позитивна динамжа маси
Примтки: 1 - група товарин бiологiчного контролю; 2 - контрольна група; 3 - група тварин, що лжувалися
Якщо у контрольних щурiв (друга група) (перша група була бюлопчним контролем; друга група включала тварин, яких опромшювали дозою 7,5 Гр (контрольна); на 10-15 добу шсля опромшен-ня СОПР була блвдою, сухою, набряклою, зi злив-ними ерозiями та плiвчастим епiтелiiтом, то в щ строки у тварин, що лiкувалися явища вогнищного ештелпту спостерiгалися в середньому у 15-25 %.
Вплив ашгелю на стушнь ураж
До 15 доби в груш щурiв, що лiкувалися стан СОПР нормалiзувався, тодi як в опромшеному контролi у цей час продовжувалося ввдторгнення плiвок та очищення ерозiй, що свiдчило лише про початок процеав вiдновлення.
Опромiнення щурiв приводило до змiн бюхь мiчних показникiв в слизовiй оболонцi порожнини рота (табл. 3).
Таблиця 2
ш СОПР у опромiнених щурiв
Групи тварин Променевi ураження СОПР, %
катаральнi геморрапчш гнiйнi виразковi виразково-некротичнi
Контрольна n=10 7,30±0,81 8,80±0,43 42,80±2,20 28,50±1,90 14,20±1,30
Лiкованi n=10 38,20±1,70 29,10±1,10 28,50±1,90 14,20±1,30 -
р <0,05 <0,05 <0,05 <0,05 <0,05
Примтка: р - вiрогiднiсть мiж групами тварин
Таблиця 3
Вплив л^вального гелю на 6ioxiMi4Hi показники слизово! оболонки щоки щурiв при променевому стомагитi
Показники Групи До опромшення Пiсля опромшення (дiб)
тварин 10 15 20
МДА мкмоль/г
Р1 Контроль п=8 24,80±4,80 39,60±5,60 <0,05 34,20±3,80 >0,05 33,40±4,10 >0,05
Р2 лжування п=8 25,10±5,00 32,30±4,20 >0,05 >0,05 29,00±5,10 >0,05 >0,05 27,60±3,20 >0,05 >0,05
Активнiсть КФ нмоль/с. г
Р1 Контроль п=8 1,54±0,38 4,87±1,06 <0,05 4,40±0,62 <0,05 4,20±1,22 <0,05
Р2 лжування п=8 1,48±0,24 3,02±0,71 >0,05 >0,05 2,48±0,68 >0,05 <0,05 2,16±0,72 >0,05 >0,05
Активнiсть СОД у. е. Р1
Контроль п=8 1,04±0,67 0,66±0,32 >0,05 0,70±0,40 >0,05 0,82±0,50 >0,05
Р2 лжування п=6 1,12±0,58 0,88±0,47 >0,05 >0,05 0,98±0,52 >0,05 >0,05 1,08±0,60 >0,05 >0,05
Активнiсть
каталази мккат/г
Р1 Контроль п=8 41,20±3,08 26,40±2,98 >0,05 28,24±3,00 <0,05 31,60±2,80 <0,05
Р2 лжування п=6 38,60±2,82 30,40±2,66 >0,05 >0,05 32,60±3,04 >0,05 >0,05 37,40±2,54 >0,05 >0,05
АП1 Контроль лжування 16,6 15,0 6,6 9,4 8,2 11,2 9,4 13,5
Примтки: Р1 - показник вiрогiдностi до опромтення; Р2 - показник вiрогiдностi мiж нелжованими та лжованими тва-ринами
6. Обговорення результат
Застосування нового гелю, певно, забезпечую-чи лшввдащю проявiв оксидативного стресу у опро-мiнених тварин, як наслiдок, стало одним i3 факторiв сприяння швидкому перебiгу процесiв постпромене-во! репараци i менш уразливих проявiв променевого стоматиту. Найбшьш виразн змiни СОПР у виглядi ерозiй i виразок у 50 % тварин спостериалися через 10 дiб пiсля опромшення. Ерозивт змiни в СОПР мали менш виразний характер у тварин, яким ро-били аплшаци апiгелем, нiж у контрольних. На 1215 добу експерименту у лшованих тварин вiдзначено повне вшновлення структури СОПР, тодi як у тварин ко тварин вшзначено повне вшновлення структури СОПР, тодi як у тварин контрольно! групи збериали-ся явища променевого ураження до 19-20 дiб.
Ефективнiсть мюцевого застосування апiгелю проявлялася при порiвняльнiй оцiнцi мiсцевих про-явiв променевого стоматиту. При опромшент у тварин виникали променевi стоматити (катаральш, гемо-рагiчнi, гнiйнi, виразковi або виразково-некротичш).
Як видно, опромiнення викликало значш змiни показникiв вiльно радикального окислення i анти-оксидантно! активности вмiст МДА пiдвищився в 1,65 рази, а актившсть ферменлв в АОЗ (антиокси-дантному захисту)_(каталази i СОД) знизилася бшьш нiж в 1,5 рази (табл. 3) В цих умовах застосування ашгелю сприяло нормалiзацiï показниыв ПОЛ i ак-тивацiï системи АОЗ (табл. 3).
Актившсть маркерного ферменту запалення -кисло! фосфатази у щурiв з променевим стоматитом шдвищувалася в середньому в 3 рази, при лшуванш виявлялося менш виразне ïï шдвищення, що свшчи-ло про бшьш значш запальш явища у нелшованих тварин.
7. Висновки
1. Результати дослшжень свiдчать про те, що новий ппешчний засiб виявляе стимулюючу дш на процеси регенерацiï уражених дшянок СОПР при променевому стоматитi, скорочуючи термiн 1'х за-гоювання, що можливо, пов'язано i з пригнченням перешсного окислення лiпiдiв i активашею анти-оксидантного захисту.
2. При променевому стоматип у щурiв новий гiгiенiчний зааб на основi апiречовин при локальнш д^' на тканини ротово1' порожнини швидше забезпе-чував вiдновлення стану СОПР за рахунок лiквiдацiï проявiв оксидативного стресу опромiнення i норма-лiзацiï активностi антиоксидантних ферментiв.
3. Новий ашгель оказував захисну дш на пе-ребiг ерозивно-виразкового променевого стоматиту i сприяв ранозагоюванню та репараци СОПР.
4. Отримаш результати вказують на перспек-тившсть подальшого вивчення властивостей нового засобу з визначенням застосування при лшуванш ерозивно-виразкових елеменпв променевого ураження СОПР, що сприятиме ефективносп прове-дення променевоï терапiï в дiлянцi голови i шш у онкохворих, шдвищенню якостi ix життя.
Лiтература
1. Галонский, В. Г. Радиоэпителииты слизистой оболочки полости рта при лучевой терапии злокачественных новообразований челюстно-лицевой области [Текст] / В. Г. Галонский, А. А. Радкевич, Т. В. Казанцева // Сибирское медицинское обозрение. - 2012. - Т. 76, Вып. 4. - С. 4-8.
2. Данилевський, И. Ф. Заболевания слизистой оболочки полости рта [Текст] / Н. Ф. Данилевский, В. К. Леонтьев, А. Ф. Несин, Ж. И. Разний. - Москва, 2001. - 271 с.
3. Иорданишвили, А. К. Оптимизация лечения заболеваний СОПР, возникающих в результате комбинированного лечения злокачественных опухолей орофарингеальной зоны у людей старших возрастных групп [Текст] / А. К. Иор-данишвили, Е. В. Филиппова, Д. В. Либих, В. В. Лобейко // Стоматология. - 2012. - Т. 13, Вып. 2. - С. 1054-1065.
4. Дурново, Е. А. Влияние радиоволнового воздействия на интенсивность местных процессов свободно-радикального окисления в тканях операционного поля полости рта в эксперименте [Текст] / Е. А. Дурново, Н. Я. Янова, К. Н. Конторщикова // Стоматология. - 2009. - № 3. - С. 17-21.
5. Патент Украши .№94885 МПК А61К31/19. Гель для лжування променевих реакцш слизово! оболонки порожнини рота на променеву терашю [Текст] / Кравченко Л. С., Солоденко Г. М. - патентовласник Одеський нацюнальний медичний утверситет. - заяв. №u201404694 вщ 05.05.2014; опубл. 10.12.2014, бюл. 23.
6. Питаева, А. Н. Физико-химические методы исследования смешанной слюны в клинической и экспериментальной стоматологии [Текст] / А. Н. Питаева, В. Г. Сунцов, В. А. Дистель. - Омск, 2001. - 121 с.
7. Левицкий, А.П. Антиоксидантно-прооксидантний шдекс сироватки кровi щургв з експериментальним стоматитом i його корекцш зубними елжсирами [Текст] / А. П. Ле-вицький, В. М. Почтар, О. А. Макаренко, Л. I. Гридша // Одеський мед. журн. - 2006. - № 1. - С. 22-25.
8. Перспективи застосування нового гелю «Атдент» при лжувант захворювань слизово! оболонки [Текст]. -«Аттератя Укра!ни», 2015. - 212 с.
9. Кравченко, Л. С. Ефективтсть застосування «Ат-гелю» для лжування променевих реакцш слизово! оболонки порожнини рота тсля опромшення злояюсних пухлин у дшянщ голови i ши! [Текст] / Л. С. Кравченко, А. О. Бас, О. Л. Заградська // Укра!нський стоматолопчний альманах. - 2014. - № 2.
10. Кравченко, Л. С. Стоматолопчна допомога хво-рим тсля променево! терапи новоутвореннь в областа голови i ши! [Текст] / Л. С. Кравченк, О. В. Пасечнж. - «Аттератя Укра!ни», 2015. - 202 с.
11. Кравченко, Л. С. Вплив продукпв бджшьництва на клшчт прояви променевих реакцiй слизово! оболонки порожнини рота у хворих тсля гамма-опромшення новоутвореннь в областа голови i ши! [Текст] / Л. С. Кравченко, Ю. М. Солоденко, Н. О. Бас. - «Ашгератя Укра!ни», 2015. - 221 с.
References
1. Galonskij, V. G., Radkevich, A. A., Kazanceva, T. V. (2012). Radiojepiteliity slizistoj obolochki polosti rta pri luchev-oj terapii zlokachestvennyh novoobrazovanij cheljustno-licevoj oblasti. Sibirskoe medicinskoe obozrenie, 76 (4), 4-8.
2. Danilevs'kij, I. F., Leont'ev, V. K., Nesin, A. F., Raznij, Zh. I. (2001). Zabolevanija slizistoj obolochki polosti rta. Moscow, 271.
3. Iordanishvili, A. K., Filippova, E. V., Libih, D. V., Lobejko, V. V. (2012). Optimizacija lechenija zabolevanij SOPR, voznikajushhih v rezul'tate kombinirovannogo lechenija zlok-achestvennyh opuholej orofaringeal'noj zony u ljudej starshih vozrastnyh grupp. Stomatologija, 13 (2), 1054-1065.
4. Durnovo, E. A., Janova, N. Ja., Kontorshhikova, K. N. (2009). Vlijanie radiovolnovogo vozdejstvija na intensivnost' mestnyh processov svobodno-radikal'nogo okislenija v tkanjah operacionnogo polja polosti rta v jeksperimente. Stomatologija, 3, 17-21.
5. Kravchenko L. S., Solodenko G. M. (2014). Patent Ukrai'ny №94885 MPK A61K31/19. Gel' dlja likuvannja promenevyh reakcij slyzovoi' obolonky porozhnyny rota na promenevu terapiju. Patentovlasnyk Odes'kyj nacional'nyj me-dychnyj universytet. declared №u201404694 (05.05.2014); published 10.12.2014, bjul. 23.
6. Pitaeva, A. N., Suncov, V. G., Distel', V. A. (2001). Fiziko-himicheskie metody issledovanija smeshannoj sljuny v klinicheskoj i jeksperimental'noj stomatologii. Omsk, 121.
7. Levyckyj, A. P., Pochtar, V. M., Makarenko, O. A., Grydina, L. I. (2006). Antyoksydantno-prooksydantnyj in-deks syrovatky krovi shhuriv z eksperymental'nym stoma-tytom i jogo korekcija zubnymy eliksyramy. Odes'kyj med. zhurn., 1, 22-25.
8. Perspektyvy zastosuvannja novogo gelju «Apident» pry likuvanni zahvorjuvan' slyzovoi' obolonky (2015). «Apiter-apija Ukrai'ny», 212.
9. Kravchenko, L. S., Bas, A. O., Zagrads'ka, O. L. (2014). Efektyvnist' zastosuvannja «Apigelju» dlja likuvannja prome-nevyh reakcij slyzovoi' obolonky porozhnyny rota pislja opromi-nennja zlojakisnyh puhlyn u diljanci golovy i shyi'. Ukrai'ns'kyj stomatologichnyj al'manah, 2.
10. Kravchenko, L. S., Pasechnik, O. V. (2015). Sto-matologichna dopomoga hvorym pislja promenevoi' terapii' novoutvorenn' v oblasti golovy i shyi'. «Apiterapija Ukrai'ny», 202.
11. Kravchenko, L. S., Solodenko, Ju. M., Bas, N. O. (2015). Vplyv produktiv bdzhil'nyctva na klinichni projavy promenevyh reakcij slyzovoi' obolonky porozhnyny rota u hvo-ryh pislja gamma-oprominennja novoutvorenn' v oblasti golovy i shyi'. «Apiterapija Ukrai'ny», 221.
Рекомендовано до публкацИ' д-р мед. наук Дорошенко С. I.
Дата надходження рукопису 12.11.2015
1евлева Юлiя Валеривна, асистент, кафедра ортопедично! стомaтологiï та ортодонтп, ПВНЗ "Кшвський медичний yнiверситет yAHM", вул. Л. Толстого, 9, м. Кшв, Украша, 01004 E-mail: [email protected]
