CC BY
25
2012, Т. 2, № 1-2
Современное лабораторное обеспечение.
ний в общих анализах крови, мочи и скрининговом ультразвуковом исследовании внутренних половых органов. Молекулярно-генетическая диагностика (ПЦР) позволила исключить среди обследованных лиц присутствие хламидийной, микоплазменной и уреаплазменной инфекций. Посевы инкубировали в аэробных и анаэробных условиях (10% СО2, 10% Н2, 80% N2) в течение 2—4 суток. При посевах отделяемого цервикального канала отмечалась 100% контаминация. Во всех пробах обнаруживались ассоциации микроорганизмов, которые состояли из пяти культур и более. Микрофлора цервикально-го канала женщин чаще всего содержала анаэробные грамположительные палочки рода Lactobacillus spp., — 97,7% (29), Peptostreptococcus spp. — 40% (12), Bifidobacterium spp. — 36,7% (11) и Bacteroides spp. — 16,7% (5). У большинства женщин были обнаружены грибы рода Candida spр. — 93% (28) и E. coli в следующих вариациях: нормоферментативная — 36,7% (11), низкоферментативная — 20% (6) и гемолитическая — 13% (4). Из аэробных микроорганизмов чаще выделялась грамположительная микрофлора, которая была представлена КОС (коагулазоотрицатель-ными стафилококками), энтерококками и штаммами Corynebacterium spp. — 10% (3). Среди КОС были выделены S. saprophyticus — 53,3% (16), S. albus — 13,3% (4), S. haemolyticus — 10,0% (3), S. epidermidis — 13,3% (4). Из рода энтерококков идентифицированы E. faecium — 23,3% (7), E. faecalis — 20,0% (6). В единичных случаях были выделены Proteus mirabilis, S. aureus, Klebsiella oxytoca, Citrobacter diversus. Наиболее частыми были ассоциации микроорганизмов: Lactobacillus spp. + Bifidobacterium spp. + КОС + E. coli + Candida spp.; Lactobacillus spp. + Enterococcus spp. + КОС + E. coli + Candida spp. Общее колонизационное число микробиоты цервикального канала составило 105—108 КОЕ/мл. Наибольшее микробное число отмечалось у бактерий рода Lactobacillus spp. — 105—107 КОЕ/мл и Bifidobacterium spp. — 105-106 КОЕ/ мл. Микробное число других микроорганизмов не превышало 103—104 КОЕ/мл. Таким образом, у здоровых сексуально активных молодых женщин в норме в цервикальном канале обнаруживаются аэробно-анаэробные ассоциации, имеющие по всей вероятности сложные меж- и внутривидовые взаимоотношения компонентов данного микробного биотопа.
ВЫДЕЛЕНИЕ СТРЕПТОКОККОВ ГРУППЫ А В ДЕТСКОЙ БОЛЬНИЦЕ г. КОЛПИНО
О.Е. Пунченко1, С.Е. Морозова2
'ГБОУВПО «Северо-Западный государственный медицинский университет имени И.И. Мечникова», Санкт-Петербург; 2Детская городская больница № 22, Санкт-Петербург
В настоящее время ежегодно регистрируется 6—8 млн случаев респираторных стрептококковых инфекций. Чаще всего этиологическим фактором являются стрептококки серологической группы А. Но только заболевания, вызванные Streptococcus pyogenes, характеризуются развитием постстрептококковых аутоиммунных (ревматизм, гломеру-лонефрит) и токсико-септических (некротические фасциит и миозит, синдром токсического шока, метатонзиллярный и перитонзиллярный абсцессы) осложнений. Поэтому своевременная дифференциация S. pyogenes от других видов стрептококков, обладающих антигеном группы А, чрезвычайно важна для профилактики отдаленных последствий.
За 2011 год в бактериологическую лабораторию ДГБ № 22 поступило 817 образцов материала для исследования на S. pyogenes от детей в возрасте от 0,5 до 17 лет, находящихся на лечении в стационаре. Материал забирали и транспортировали в соответствии с МУ 4.2.2039-05, МУ 3.1.1885-04. Для диагностики стрептококковой инфекции использовали схему, предложенную Американской Академией Педиатрии. В качестве экспресс-метода использовали латекс агглютинацию PathoDx Strep A Kit (Oxoid, UK) для выявления стрептококков группы А. Первичный посев материала проводили на кровяной агар для оценки гемолитической активности. Культуры микроорганизмов с ß-гемолитической активностью исследовали для определения серо-группы, а также определяли у них чувствительность к бацитрацину (диск 0,04 ЕД) и наличие фермента L-пиродонилариламидазы (PYR диск).
Стрептококки были выделены из 86 (10,5%) образцов. При этом стрептококки группы А составили 81% (70 образцов), группы В — 17% (15 образцов). Чаще всего при обнаружении стрептококков группы А детям ставился первичный диагноз «ОРЗ» (40%). У 40% детей, проходящих лечение в хирургическом и инфекционном отделениях, было выявлено но-сительство в титрах более 105 КОЕ. Пик заболеваний зарегистрирован в октябре — 31 случай (44%). При дифференциации стрептококков внутри серологической группы S. pyogenes был подтвержден в 40 случаях, что составило 57% от стрептококков группы А и 46,5% от всех выделенных стрептококков.
Таким образом, экспресс-метод идентификации стрептококков группы А имеет ориентировочное значение и не заменяет посев материала на плотные среды и дальнейшую дифференцировку внутри группы.
МЕТИОНИН-ГАММА-ЛИАЗА - ПОТЕНЦИАЛЬНАЯ МИШЕНЬ ДЛЯ АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫХ СРЕДСТВ НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ
С.В. Ревтович1, Е.А. Морозова1, Н.В. Ануфриева1, М.И. Котлов2, Т.В. Демидкина1, Ю.Ф. Белый2
1ФГБУ «Институт молекулярной биологии
им. В.А. Энгельгардта» РАН, Москва; 2ФГБУ«НИИЭМ
им. Н.Ф. Гамалеи» Минздравсоцразвития РФ, Москва
Метионин-гамма-лиаза (КФ 4,4.1,11, МГЛ) принимает участие в метаболизме серосодержащих аминокислот у многих патогенных бактерий. В связи с тем, что данный фермент отсутствует у млекопитающих, МГЛ может служить мишенью для новых антибактериальных средств, созданных на основе его ингибиторов и/или суицидальных субстратов. Нами был проведен поиск и анализ аминокислотных последовательностей, аннотированных как «МГЛ» в базах данных бактерий, вызывающих инфекционные заболевания человека. Для дальнейшей работы была выбрана предполагаемые МГЛ Clostridium difficile (возбудитель антибиотико-ассоциированных диарей и псевдомембранозного колита), C. tetani (возбудитель столбняка), Brucella melitensis (возбудитель бруцеллеза), Porphyromonas gingivalis (возбудитель агрессивного пародонти-та) и C. sporogenes (возбудитель газовой гангрены). Гены указанных белков были клонированы и экс-прессированы в клетках Escherichia coli, получены гомогенные препараты ферментов, проверена их реакционная специфичность и определены кинетические свойства. Показано, что лишь фермен-
