CC BY
132
рода заболеваниями, существенно отражаются на продолжительности хозяйственного использования коров. К аналогичным выводам пришли также многие исследователи, занимающиеся проблемой повышения хозяйственного долголетия животных (В.М. Кузнецов, 1990; Л.С. Жебровский, А.А. Барышев, 1992; Р. Кер-тиев, 1996 и др.).
Таким образом, продолжительное использование коров является одним из важнейших условий эффек-
тивной селекционной работы в молочном скотоводстве. Темпы генетического прогресса в популяции определяются сроком хозяйственного долголетия коров, воспроизводящих племенной молодняк. Генетическая обусловленность данного признака и его большая внутрипородная вариабельность дает возможность вести селекцию животных на их продуктивное долголетие.
УДК 59
ВЫДЕЛЕНИЕ И ИССЛЕДОВАНИЕ
микрофлоры пищеварительного канала
HIRudo MEDICINALES
Е.В. Рассадина, Е.М. Романова, А.В.Ионова,
О.М. Климина, ФГОУ ВПО «Ульяновская ГСХА»
В последние годы на фоне усиленного внимания к лечению природными средствами повышается интерес и к гирудотерапии. В естественной среде медицинских пиявок остается все меньше, этот вид занесен в Международную Красную книгу. Для искусственного разведения необходимо знание их биологии и экологии. По вопросам бактериальной микрофлоры пиявки сведений в научной литературе практически нет.
Материалы и методы
Целью данной работы было исследование эндогенной микрофлоры, обитающей в кишечнике медицинской пиявки.
Для исследования использовались 30 медицинских пиявок, которые к моменту проведения эксперимента находились в состоянии голода в течение месяца. У них брались пробы содержимого кишечника. Исследования проводились на базе двух кафедр: биологии, ветеринарной генетики, паразитологии и экологии и микробиологии, эпизоотологии, вирусологии и ВСЭ Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии.
Анализировался характер роста колоний микроорганизмов, выделенных из кишечника пиявок, на твердой и жидкой средах. Для видовой идентификации микроорганизмов использовались диагностические тесты.
Результаты и обсуждение
В пробах из кишечника пиявок были обнаружены A. hydrophila и Proteus mirabilis. A. hydrophila представляет собой при микроскопировании подвижные грамотрицательные палочки. Это бактерия-симбионт, постоянно обитающая в кишечном канале пиявки. Симбиотические взаимоотношения этих организмов объясняются отсутствием у пиявки эндогенных ферментов, участвующих в переваривании белков и углеводов.
A. hydrophila встречается не только в кишечном
тракте медицинской пиявки, данный вид бактерий широко распространен в водной среде и является патогенным для рыб, амфибий и млекопитающих, может вызывать заболевание аэромоноз (Сидоров М.А., Скородумов Д.И., Федотов В.Б., 1995).
Механизмы процесса пищеварения у пиявки остаются практически неизученными. Известно, что в переваривании крови участвуют экзопептидазы, секретируемые стенкой кишечника, и эндопептидазы, продуцируемые микрофлорой пищеварительного канала пиявки. Известно также, что микрофлора медицинской пиявки включает бактерию-симбионта А. hydrophila или, по другим данным, А. veronii, которая играет основную роль в переваривании белков, жиров и углеводов. Микроорганизмы компенсируют отсутствие у пиявок эндогенных ферментов, таких, как эндопептидазы, липазы и амилазы. Исследование свойств бактерии - симбионта медицинской пиявки показало, что она является носителем антисвертывающей активности. Есть гипотеза, что выделяемое бактерией антикоагулирующее вещество, наряду с секретом слюнных желез, участвует в поддержании жидкого состояния насосанной крови (Никонов Г.И., 1998).
Микрофлора кишечника пиявки препятствует загниванию крови благодаря своим бактериостатиче-ским свойствам. Бактерицидное и бактериостатиче-ское действие содержимого пищеварительного канала пиявки также проявляется в способности патогенных организмов сохранять жизнеспособность при заражении ими пиявок: возбудители брюшного тифа охраняются в организме пиявки в течение 30 дней, паратифа В - 4 месяцев, сибирской язвы - 14-17 дней, туберкулеза - 28 дней, золотистый стафилококк сохраняет жизнеспособность в организме медицинской пиявки 3-10 дней, гемолитический стрептококк - 1 месяц (Шишкина И.Д., 1953).
1. П-:-ТСч]ч таилор ф^ХОГкПЯСКИХИ^» Н«И«С№ХГфНЗЖКОЕ A ityärepit&
Тнст XSC СТfcТр-Jт Пр оЕхж
1 2 3 4 5 G 7 3 P 10
Поллам пасть hl H H H H H hl hl H H
ÜlflEEtDDD Гр ELUТ - - - - - - - - -
F'iежп.вл ВГ.ЩПЗТ ы d M hl d d hl M
ГПОІШТ hl H lbl lbl Ibl lbl hl hl H H
raiLTmf hl H H H H H hl hl H H
лпаилт hl H - - lbl lbl hl hl d d
лпгътеззт hl H d d H H hl - H
тратппзт hl H H H H lbl - - H
hl Іь1 lbl lbl H lbl hl hl H H
■UIJUBL hl H H H H H hl hl H H
¿жі-чтшпт hl H lbl H H lbl hl - H
итшшт L L L L L L L hl Ibl H
мот erran f - - - - - - hl - -
L[1 EX1, .'J EVI hl - - - - hl - - -
CT П Л] П □ [D П hl M M hl hl hl hl 14 hl M
Утіпвапіл патлата - - - - - - - -
rfiflCBD hl H H H H hl hl - H
Фапз: — ГТ [DO. DT ^ID - - - - M H - - -
ГТ[■ .итч□ їв■: : — Ll-I Lili штилі лісп оашніпіьои^ ' 'd " — [і- 'í!?Й штилі ли і опо:іітопь □ ы і,
М" — 7Й-И1І штплілшз аапін imuiut, ■■" — QÛ-1 Ш"Й шішілаї аапа-і втоіиіис
d целим можно скнкпь. что хотя и существует возможность передачи пиявками возбудителей от одного животного другому, но только в том случае, если пиявка после зараженного животного немедленно приставлялась к здоровому. При суточном перерыве между кормлениями на больном и здоровом животных возбудитель не передается (Андреев П.Н., 1923).
A. hydrophila бактерия-симбионт, постоянно обитающая в кишечном канале пиявки и обеспечивающая процессы пищеварения и бактерицидное действие пиявочного секрета (постоянная бактериофлора играет важную превентивную роль против поселения в кишечном тракте других бактерий).
Выделенные нами штаммы бактерий A. hydrophila хорошо росли на простых питательных средах: МПА, МПБ, среде Эндо.
При посеве на МПА культуры образовывали выпуклые, округлые, блестящие, полупрозрачные с беловато-желтым оттенком колонии. На МПБ вызывали равномерное помутнение с образованием сероватосеребристой поверхностной пленки и хлопьевидного серого осадка.
Изучение ферментативных свойств бактерий рода Aeromonas способствовало установлению их видовой принадлежности. Все выделенные нами штаммы принадлежали к виду A. hydrophila, они не разжижали желатину, выделяли сероводород, ферментировали сахарозу, глюкозу, лактозу и маннит. Результаты изучения биохимических свойств штаммов аэромоноса
представлены в таилице і.
Имеются многочисленные данные о присутствии A. hydrophila в продуктах животноводства, питьевой воде и продуктах моря.
Присутствие A. hydrophila в пищеварительном канале медицинской пиявки обусловливает риск заражения пациентов при гирудотерапии.
В целях профилактики аэромоноза при гирудоте-рапии предложена обработка места укуса антибиотиками, а также профилактическая антибиотикотерапия пациентов.
Кроме данного вида бактерий в кишечниках всех пиявок был также обнаружен P. mirabilis. Это грамотрицатель-ные подвижные аэробные палочки, способные вызывать заболевания у человека и животных только в тех случаях, когда выходят за пределы своего нормального места обитания (кишечный тракт). Протеи нередко обнаруживают при хронических инфекциях мочевыводящих путей, а также при сепсисе, пневмониях и очаговых поражениях у ослабленных больных.
Выделенные нами штаммы бактерий P. mirabilis хорошо росли на простых питательных средах: МПА, среде Эндо.
При посеве на МПА культуры быстро покрывали (в течение 18-24 часов) всю поверхность агара. На среде Эндо через 12 - 18 часов бактерии группы протея росли в виде бесцветных наложений с характерным запахом сероводорода. На полужидком агаре культуры давали обильное помутнение серовато-белого цвета с наличием на дне пробирки осадка, легко разбиваю-
TüüniLQü 2. По™ іатехі™ op фо ж атестата и (и^тиичмчта признак™ Л .нсго&й^г, хшдоха-тогоиэ тііют-іига ледр^ци^^АпипЕЖ
Тест гаи страт Ірм Ьш
1 î 3 4 5 ç 7 Б S 10
Подшвсп + + + + + + + + + +
□i^UlAZt Гр-їіу - - - - - - - - - -
Рьлтгпт тл- G-HWZV PI Р1 [+1 [+1 [+1 Р1 П ГІ [+1
паїюзу - - - - - - - - - -
ТТ. ТТм ту і і і - - - 1 1 і -
T.h 1 ■ ■ L ■ - - - 4 - 4 - - - 4
T.hTTWY. ïy і - - - - - - 4 - -
ЕШ'71/ + + + + + + + + + +
ШЕШ - - - - - - - - - -
T.hTATPiy ЕЧ ЕЧ [+1 + + + + [1 [1 [+1
дццду н н [+] н [+] [+] н [і [і [+]
сиро ж. Д'р:-Д н н [+] [+] [+] т [і [і [+]
Рьизца с жьішр'їож - - і 4 - - і - - 4
Фоте - TTj.-.ñT.y р.*. і - - - 4 4 - - - і
ГТ [■ .и тч □ ев і : ■|-'1 — Ll-І Lili штилі.'jeu аапіміїчгьпи^ ' У11 — Ї [i- "i15"ü шталілпз m п □ :« ■ таї ь □ ы і,
■' |l]m — "Jü-Hili шTnлш□ з аапін ітаїиис,11 L" — VÚ- І Líllí штплілшз оіпіі ішиис
ідеї о с я при встряхивании. гс 'Ллы;иы изучения иио-химических свойств штаммов протея представлены в таблице 2.
Изучение ферментативных свойств бактерий рода Proteus способствовало установлению их видовой принадлежности. Все выделенные нами штаммы принадлежали к виду P. mirabilis, они разжижали желатину, выделяли сероводород, ферментировали сахарозу, практически не ферментировали глюкозу, лактозу и маннит.
Выводы
1. В пробах крови из кишечника H. medicinalis были
оинаружены иактерии родив легошопаь ( вид м.. hydrophila) и Proteus (вид Р. mirabilis) из семейства Enterobacteriaceae.
2. A. hydrophila - постоянный обитатель кишечного тракта пиявки, находящийся с ней в симбиотических отношениях.
3. В целях профилактики аэромоноза при гирудоте-рапии необходимо обрабатывать места укуса антибиотиками, а также проводить профилактическую антибиотикотерапию пациентов.
Литература
1. Андреев П.Н. О сохраняемости микроорганизмов и иммунных тел в пищеварительном канале пиявки и о роли последних в распространении заразных заболеваний// Архив научно-практической ветеринарии, 1923. - №1. - С. 54-59.
2. Никонов Г.И. Медицинская пиявка. Основы гирудотерапии. - СПб.: СДС, 1998. - 294 с.
3. Определитель бактерий Берджи. Т.1.: Пер. с англ./Под ред. Дж. Хоулта и других - М.: Мир, 1997. - 257 с.
4. Покровский В.И. Медицинская микробиология - М., 1999. - 350 с.
5. Сидоров М.А., Скородумов Д.И., Федотов В.Б. Определитель зоопатогенных микроорганизмов - М.: Колос, 1995. - 250 с.
6. Шишкина И.Д. Влияние медицинских пиявок на микроорганизмы и на организм человека: автореф. дис. ... канд.
