© Костюк С. С.
УДК 616-092. 9+599. 323. 4:615. 849 Костюк С. С.
вплив у -ОПРОМШЕННЯ НА КШЬКЮТЬ ЛEЙКОЦИTiB, ЕРИТРОЦИ^В ТА КОНЦEНTРАЦiЮ ГEМОГЛОБiНУ У КРОBi БiЛИX ЩУРiB ЗА ДЙ"
тридоксину
Науково-дослiдний iнститут фiзiологмта е^мунологм тварин i птицi ЛНУВМ ТА БТ iменi С. З. Гжицького (м. Львiв)
Представлена робота е фрагментом НДР ка-федри нормально! та патолопчно'| фiзiологiI Львiв-ського нацюнального унiверситету ветеринарно'| медицини та бютехнолопй iменi С. З. Гжицького «Дослщити структурно-функцiональнi особливостi формування iмунноI реактивностi органiзму тварин i птиц за дИ у -опромiнення, та розробити ефектив-нi способи профтактики !х негативного впливу на здоров'я, продуктивнють i якiсть продукцiI», № держ. реестраци 0111и009815.
Вступ. Дослiдження показали, що в першi 30 хвилин пюля опромiнення чiтко зменшуеться юль-кiсть еритроцитiв. В перифермнм кровi в цей перiод у 26 iз 55 собак виявлено лейкоцитоз з пщвищенням вихiдних цифр на 1500-500 в мкл кровi [1,6].
Доведено високу чутливiсть мембран еритро-цитiв до дИ малих доз юызуючого випромЫюван-ня i стресу [2,5]. Методом кислотних еритрограм у щурiв вивчали вплив зовншнього у-опромшення за доз 0,5; 1,0 та 2,0 Гр i внутршнього 137Св (600 i 1 200 Бк на добу протягом мюяця) на стан мембран ери-троци^в i перерозподiл еритроцитiв за стмюстю. Визначена висока чутливiсть мембран еритроци^в до дИ малих доз юызуючого випромiнювання. Вста-новлене пошкодження структури мембран погiршуе функцiональний стан еритроци^в, здiйснюючих транспорт кисню, i сприяе розвитку ппоксп тканин. Стан протешазночнпбггорного комплексу кровi за-безпечуе в тм чи iнший мiрi захист тканин оргаызму вiд розвитку деструктивних процесiв при порушеннi гомеостазу.
ЗмЫи кiлькостi лейкоцитiв являються досить характерною ознакою на дiю променево! радiацií [1]. При опромiненнi у-променями в середньоле-тальних дозах i вищих, вже у першi хвилини, го-дини спостерiгаеться короткочасне зменшення лейкоци^в - I фаза [4]. В цей перюд вiдмiчаеться змiна кольорово! люмiнесцентноí реакцií лейкоцитiв з акридиновим оранжем, що говорить про раны по-рушення нукле!нового обмiну в кттинах [3]. За ко-роткочасним зниженням ктькост лейкоцитiв, через 6-8 годин спостер^аеться !х збiльшення на 10-15 % вщ вихiдного рiвня - II фаза. До юнця доби кiлькiсть лейкоцитiв знижуеться i утримуеться в низькому рiвнi довший час - III фаза [4].
Метою роботи було провести гематолопчы доотдження пiд впливом iонiзуючою радiацií за дм пiридоксину.
Об'ект I методи дослщжень. Дослiдження про-водилося на 10-ти бiлих щурах - самцях лЫп Вiстар, вагою 150-200 г. Утримання тварин та експерименти проводилися вщповщно до положень «6вропейсько'| конвенци про захист хребетних тварин, як вико-ристовуються для експеримен^в та iнших науко-вих цтей» (Страсбург, 1985), «Загальних етичних принцитв експериментiв на тваринах», ухвалених Першим нацюнальним конгресом з бiоетики (Ки'в, 2001).
Тварини були роздiленi на двi групi. Перша група - контрольна, друга дослщна, якiй тиждень перед i кожний день пюля опромшення вводили внутрiшньом'язово пiридоксина монохлорид в дозi 600 мг на кг маси тта.
Щурiв опромЫювали рентгенiвськими променя-ми 01_ = 50, яю складали 500 рентгеыв -190 кв, А -20 тА, фокусна вiдцаль - 62 см, фтьтри Си - 0,5, А1 - 1 мм., потужнють 20 Р /хв. З метою фтьтрацм м'яких променiв застосовувались алюм^евий та мiдний фiльтри. Опромiнювання було тотальним та одномоментним.
Ктьюсть форменних елемен^в кровi - еритро-ци^в, лейкоцитiв -визначали приладом «РБ-4» Пкоскель. Його робота базуеться на пщрахунку електричних iмпульсiв, викликаних дослiджуваними частинками
Результати дослщжень та Тх обговорен-ня. В таблиц! представлена ктьюсть лейкоци-^в кровi бiлих щурiв. Аналiз таблиц! показуе, що y-випромiнення викликае зменшення кiлькостi бiлих кров'яних ттець як у контрольноí, так i дослiдноí групи, однак у дослщнм групi, якiй вводили три-доксин, зменшення було невiрогiдним. Так, якщо до опромiнення кiлькiсть лейкоцитiв у кровi контрольноí групи щурiв становила 10,0 ± 5,4 тис/мкл, то через два тижн пiсля опромЫення вiрогiдно зменшилася до 6,0 ± 6,6 тис/мкл. Через мiсяць пюля опромЫення збiльшилася до 6,5 ± 4,6 тис/мкл, через два мюяц -до 7,0 ± 6,3 тис/мкл. У кровi дослiдноí групи щурiв, яким вводили вiтамiн В6, зменшення кiлькостi бiлих кров'яних ттець пщ впливом у-випромiнення було невiрогiдним. Так, якщо до опромiнення юльюсть лейкоцитiв становила 10,2 ± 5,4 тис/мкл, то через
Примпжа: *- P < 0,05.
два тижн1 п1сля опром1нення зменши-лася лише до 8,0 ± 4,8 тис/мкл, а через мюяць зросла до 8,6 ± 7.2 тис/мкл, а через два мюяц1 - до 9,2 ± 4.6 тис/мкл. Слщ в1дм1тити, що пюля опром1нення протягом всього досл1дження вста-новлена достов1рна р1зниця у ктькост б1лих кров'яних т1лець м1ж контрольною I дослщною групами (Р < 0,05).
Отриман1 дан1 дозволяють зробити висновок, що на фон1 дИ п1ридоксину у-рад1ац1я менш негативно впливае на вм1ст б1лих кров'яних ттець у кров1 п1ддосл1дних щур1в.
В таблицi представлена ктькють еритроцит1в кров1 б1лих щур1в. Анал1з даних таблицi показуе, що у-випромшення викликае зменшення к1лькост1 чер-воних кров'яних ттець як у контрольно!, так I дослщно! групи, однак у дослщнм груп1, як1й вводили п1-ридоксин зменшення, було не в1рогщним. Так, якщо до опромшення к1льк1сть еритроцит1в у кров1 контрольно! групи становила 8,0 ± 0,4 тис/мкл, то через два тижн1 п1сля опром1нення зменшилась до 5,8 ± 0,6 тис/мкл, а через мюяць - до 5,6 ± 0,7 тис/мкл, а через два дещо збтьшилась до 6,0 ± 0,43 тис/мкл. Якщо у кров1 досл1дно! групи щур1в, яким вводили п1-ридоксин, ктькють червоних кл1тин кров1 становила до опром1нення 8,4 ± 0,4 тис/мкл, то через два тижн1 пюля опромшення зменшилася лише до 7,4 ± 0,5 тис/мкл, а через мюяць - до7,2 ± 0,6 тис/мкл. Через два мюяц1 пюля опромшення встановлено збть-шення ктькост1 еритроцит1в у кров1 досл1дно! групи щур1в до 7,8 ± 0,5 тис/мкл.
Слщ вщм1тити, що р1зниця в к1лькост1 червоних кров'яних ттець м1ж контрольною I досл1дною групами через два тижн1 I через мюяць пюля опромшення була в1рогщною (Р < 0,05).
Також в таблиц представлена ктькють гемоглобшу у кров1 бтих щур1в. Анал1з отриманих даних свщчить, що у-опромшення викликае зменшення ктькост1 гемоглоб1ну як у контрольно!, так I дослщ-но! групи, однак у дослщнм груп1, як1й вводили п1-ридоксин, зменшення було нев1рогщним. Так, якщо к1льк1сть гемоглоб1ну у кров1 контрольно! групи щур1в
Таблиця
Ктькють лейкоци^в, еритроцитiв, концентрацiя гемо-глобiну у KpoBi бiлих щурiв M+m, n = 10
Показники кровi Гру-пи норма два тижш пюля опромшення Мюяць тсля опромшення Два мюя^ тсля опромшення
Лейкоци-ти,тис/ мкл К 10,0 ± 5,4 6,0 ± 6,6 6,5 ± 4,6 7,0 ± 6,3
Д 10,2 ± 5,4 8,0±4,8- 8. 6±7,2- 9,2±4,6-
Еритро-цити,тис/ мкл К 8. 0±0.4 5. 8 ± 0. 6 5,6 ±0. 7 6,0±0,43
Д 8. 4±0.4 7,4±0,5- 7,2±0,6- 7,8 ± 0,5
Гемоглобш, г/л К 90,30 ± 4,05 84,80 ±2,06 80,25± 2,16 78,05 ±2,60
Д 100,60±3,06- 95,40 ±3,04- 90,00 ±3,45- 94,64 ±2,05-
до опром1нення становила 130 ± 6,6 г/л, то через два тижн1 пюля опромшення зменшилася до 94 ± 5,6 г/л, через мюяць - до 93 ± 7,2 г/л, а через два мюяц1 - до 92 ± 6,0 г/л. До опромшення ктькють гемоглобшу у кров1 дослщно! групи щур1в, як1й вводили в1там1н В6, становила 134 ± 5,8 г/л. Через два тижн1 п1сля опромшення вона зростала до 110 ± 7,4 г/л, через м1сяць - до 120 ± 5,7 г/л, а через два мюяц1 - до 124 ± 5,6 г/л. Слщ вщм1тити, що п1сля опромшення протягом всього дослщження встановлена достов1рна р1зниця у к1лькост1 гемоглоб1ну м1ж контрольною I досл1дною групами (Р < 0,05).
Висновки.
1. у-рад1ац1я викликае зменшення в кров1 щур1в к1лькост1 еритроцит1в, лейкоцит1в I концентрацп гемоглоб1ну.
2. У кров1 дослщно! групи щур1в, як1й вводили екзогенний п1ридоксин, на в1дм1ну в1д контрольно!, зменшення ктькост1 еритроцит1в, лейкоцит1в I гемоглобшу було не в1рогщним.
3. В1тамш позитивно впливае на гематолопчн1 показники кров1 щур1в при дм рад1ац1!.
Перспективи подальших дослiджень поля-гають у вивченн1 впливу довготривалих низьких доз рад1аци в р1зних постчорнобильських зонах на орган1зм р1зних вид1в тварин та тваринниць-ку продукц1ю з використанням п1ридоксину як радюпротектора.
Л1тература
1. Белоусова О. Н. Радиация и система крови / Белоусова О. Н., Горизонтов Т. Д., Федотова М. И. - М.: Атомиздат, 1990126 с.
2. Божок О. В. Повреждение внешней мембраны эритроцитов при раздельном и сочетанном действии малых доз внешнего и внутреннего облучения, стресса и их коррекции / О. В. Божок // Ill съезд по радиац. исследованиям. -М.: Пущино, 1997. - Т. 1. - С. 348-349.
3. Гольберг Е. Д. Лейкозы и радиация / Е. Д. Гольберг. - Томск,1999. - 153 с.
4. Диковенко Е. А. Динамика лейкоцитарных реакций у кроликов при острой лучевой болезни / Е. А. Диковенко // Патофизиология и экспериментальная терапия. - 1990. - Т. 4, № 1. - С. 20-24.
5. Galutzor B. ATP-dwpendent modification of gamma irradiation effects on red blood celis / B. Galutzor, S. Ivanov, M. Ratheva-Kantcheva // Stud. Biophys. - 1987. - Vol. 119, № 1-3. - P. 225 - 228.
6. Medical Effects of Ionizing Radiation. Course developed and presented by the Armed Forces Radiobiology Research Institute (AFRRI) // Bethesda. - 2002. - Vol. 17, J. VaL. - P. 3-11.
УДК 616-092. 9+599. 323. 4:615. 849
вплив у-ОПРОМШЕННЯ НА КШЬКЮТЬ ЛЕЙКОЦИ^В, EPИTPОЦИTiB ТА КОHЦEHTPAЦiЮ ГЕМОГЛОБШУ У KPOBi БiЛИX ЩУРiВ ЗА ДМ ПiРИДОКCИНУ
Костюк С. С.
Резюме. У po6oTi дослiджувалися ктьюсть еритроцитiв, лейкоцитiв i концентрацiя гемоглобЫу в KpoBi бiлих щурiв пщ впливом y-випромiнювань i при застосуванн пiридоксину гiдрохлориду. y-випромiнювання викликало зменшення кiлькостi еритроцитiв, лейкоцитiв i концентрацп гемоглобiну в кровi бiлих щурiв. Застосування пiридоксину гiдрохлориду з метою профтактики та лiкування наслiдкiв у -опромшення привело до нормалiзацiI кiлькостi формених елементiв i концентраци гемоглобiну в кровi белах щурiв.
Отриманi експериментальнi результати дозволяють зробити висновок, що застосування пiридоксину як радюпротектора сприятливо вплинуло на юль формених елементiв i концентрацiю гемоглобЫу в кровi дослiдноI групи бтих щурiв.
Ключовi слова: y-випромiнення, 6mi щурi, еритроцити, лейкоцити, гемоглобiн, втамш В6.
УДК 616-092. 9+599. 323. 4:615. 849
ВЛИЯНИЕ у-ОБЛУЧЕНИЯ НА КОЛИЧЕСТВО ЛЕЙКОЦИТОВ, ЭРИТРОЦИТОВ И КОНЦЕНТРАЦИЮ ГЕМОГЛОБИНА В КРОВИ БЕЛЫХ КРЫС ЗА ДЕЙСТВИЯ ПИРИДОКСИНА
Костюк С. С.
Резюме. В работе исследовались количество эритроцитов, лейкоцитов и концентрация гемоглобина в крови белых крыс под влиянием у - излучений и при применении пиридоксина гидрохлорида. у -излучение вызвало уменьшение количества эритроцитов, лейкоцитов и концентрации гемоглобина в крови белых крыс. Применение пиридоксина гидрохлорида с целью профилактики и лечения последствий у-облучения привело к нормализации количества форменных элементов и концентрации гемоглобина в крови белых крыс.
Данные, полученные в результате экспериментов, позволяют сделать вывод, что применение пиридоксина как радиопротектора благоприятно повлияло на количество форменных элементов и концентрацию гемоглобина в крови опытной группы белых крыс.
Ключевые слова: кролики, у - излучение, эритроциты, пиридоксин.
UDC 616-092. 9+599. 323. 4:615. 849
Effect of Gamma Irradiation on the Number of White Blood Cells, Red Blood Cells and Hemoglobin Concentration in the Blood of Rats under the Influence of Pyridoxine
Kostiuk S. S.
Abstract. Proved the high sensitivity of erythrocyte membranes to low dose ionizing radiation and stress. The method erytrohram acid in rats studied the effect of external gamma irradiation at doses of 0.5; 1.0 and 2.0 Gy and internal 137Cs (600 and 1 200 Bq per day for a month) the state of erythrocyte membranes of erythrocytes and redistribution for stability. Identified high sensitivity of erythrocyte membranes to low dose ionizing radiation. Installed damage to the structure of membranes of red blood cells impairs functional status, making transport of oxygen and promotes tissue hypoxia. State proteinazno-inhibitor complex blood provides, in one way or another, protect body tissues from the development of destructive processes in violation of homeostasis.
Changes in the number of white blood cells is quite characteristic feature of the effect of and higher radiation radiation. When irradiated with gamma rays at the average lethal doses in the first minutes, hours observed transient reduction of leukocytes (I phase). During this period marked change cauliflower fluorescent reaction of acridine orange leukocyte, indicating that early abuse nucleinic exchange acid in the cells. For short-tion a decrease leukocyte 6-8 hours there is an increase of 10-15 % of the original levels (Phase II). By the end of the day quantity of leukocytes reduced and maintained at low levels longer phase III.
In this study we investigated the number of erythrocytes, leukocytes and hemoglobin concentration in the blood of white rats under the influence of gamma radiation and the application of pyridoxine hydrochloride. The gamma radiation has caused the decrease of erythrocytes and leukocytes in the blood hemoglobin concentration in the blood of rats. The blood of the experimental group, which was administered exogenous pyridoxine, unlike control to reduce the number of red blood cells, white blood cells and hemoglobin was unlikely.
Vitamin positive effect on hematological parameters of blood in rats when exposed to radiation. Thus, if the normal amount of leukocytes was 10,0 ± 5,4 thous /ml, then two weeks after irradiation decreased in numbers to 6,0 ± 6,6 thous /ml. In the next increased to 6,5 ± 4,6 thous /ml in a month and to 7,0 ± 6,3 thous /ml in two months after exposure. The erythrocyte count was normal 8,0 ± 0,4 mln /ml, and in two weeks after irradiation decreased in numbers to 5,8 ± 0,6 mln / ml in a month - to 5,6 ± 0,7 mln /ml. After two months, the number of red blood cells in rats several increased to 6,0 ± 0,43 mln /ml. Concentration of the hemoglobin in normal was 90,30 ± 4,05 g / l, has decreased in two weeks to 84,80 ± 2,16 g / l, a month - up to 80,25 ± 2,16 g / l, and two month - to 78. 05 ± 2,60 g / l.
Application pyridoxine hydrochloride purpose prevention and treat the effects of gamma irradiation resulted in normalization of blood cell and concentration of hemoglobin blood of the rats. So if the number of leukocytes in two weeks after irradiation was in the blood of rats 6,0 ± 6,6 thous/ml, and in the experimental group 8,0 ± 4,8 thous/ ml, respectively, in a month 6,5 ± 4,6 thous/ml and 8,6 ± 7,2 thous / ml, after two months - 7,0 ± 6,3 thous/ml and 9,2 ± 4,6 thous/ml. It should be noted the difference between the control and experimental groups was significant. Difference between the number of red cells in the blood of rats between the control and experimental groups was significant in two weeks and a month after irradiation, and hemoglobin concentration in all periods of the study was significant, namely in two weeks, one month and two months after exposure.
The experimental results allow us to make a conclusion, that the use of pyridoxine as radioprotective favorably influenced the amount of formed elements and the concentration of hemoglobin in the blood test group of white
Keywords: rabbits, gamma radiation, erythrocytes, pyridoxine.
Рецензент - проф. Костенко В. О.
Стаття надшшла 16. 12. 2014 р.