CC BY
53
УДК 636.52/.58.083.37:636.52/.58.087.8
ВЛИЯНИЕ ВРЕМЕНИ И ДОЗИРОВКИ НАТРИЯ НУКЛЕИНАТА ПРИ ИММУНИЗАЦИИ НА ГЕМОГРАММУ МОЛОДНЯКА КУР-НЕСУШЕК
Е.В. Крапивина, А.И. Василенко
Изучение влияния времени выпаивания натрия нуклеината и его дозировки относительно иммунизации молодняка кур-несушек на их гемограмму показало, что применение препарата до вакцинации или после нее обусловило активизацию эритропоэза. Отсутствие у птиц опытных групп через 21 сутки после вакцинации достоверного повышения в крови числа нейтрофилов (суммы всех ядерных форм), отмеченное у контрольной птицы, указывает на снижение потребности птиц, получавших натрия нуклеинат, в микрофагах, то есть, о более благополучном состоянии их организма. Пониженное, через 21 сутки после вакцинации, содержание эозинофилов в крови у птиц, получивших препарат одновременно с ней, свидетельствует об увеличении силы чрезвычайных факторов и прострессорном действии препарата, введенного в это время. Значительные колебания уровня моноцитов в крови у птиц, получивших натрия нуклеинат за 3 суток до вакцинации, указывают на более выраженные процессы иммуногенеза по сравнению с птицами других групп.
Ключевые слова: молодняк кур-несушек, вакцинация, натрия нуклеинат, гемограмма.
Любые сдвиги гемограммы (как повышение, так и снижение ее показателей) в подавляющем большинстве случаев свидетельствует о степени и характере активации полноценной иммунной системы в процессе борьбы с чужеродным [1].
Натрия нуклеинат (№^п nucleinas)-иммуномодулятор, представляет собой низкомолекулярные фрагменты натриевой соли дрожжевой рибонуклеиновой кислоты, получаемые из грибов Saccharomyces cerevisiae. В медицинской практике натрия нуклеинат рекомендован для лечения лейкопений, агранулоцитоза, нарушений фосфорного обмена, вирусного гепатита и других хронических патологий, сопровождающихся вторичной иммунологической недостаточностью [2, с.58-63]. Экспериментально установлено, что
внутримышечное введение натрия нуклеината повышает эффективность вакцинации против сальмонеллеза телят [3, с.3-7].
Целью исследования являлось изучение влияния времени выпаивания натрия нуклеината и его дозировки относительно иммунизации молодняка кур-несушек на их гемограмму.
Методы исследования. Научно - производственный был проведен в условиях ОАО “Птицефабрика Снежка”. Объектом исследования являлся молодняк кур-несушек кросса “Иза -Браун” со средней живой массой 1390 грамм. По принципу аналогов было сформировано 5 групп по 50 голов в каждой (первая - контрольная, вторая, третья, четвертая и пятая - опытные). Препарат натрия нуклеината в дозе 0,004 г на 1 кг живой массы выпаивали птице опытных групп по следующей схеме: курам второй опытной группы препарат выпаивали одновременно с иммунизацией (ревакцинация против болезни Ньюкасла, инфекционного бронхита кур и вакцинация против синдрома снижения яйценоскости проводилась в возрасте 105 суток); - третьей опытной группы вводили препарат за трое суток до вакцинации; - четвертой группы выпаивание проведено через трое суток после вакцинации; - пятой опытной группы вводили препарат двукратно в половинной дозировке за шесть и за трое суток до вакцинации (в дозе 0,002 г на 1 кг живой массы). Профилактическая вакцинация против болезни Ньюкасла осуществлялась в возрасте 15, 45 и 75 суток, против инфекционного бронхита кур в 1, 35, 80 суток. В 90-суточном возрасте поголовье было иммунизировано против ларинготрахеита. Условия клеточного содержания птицы соответствовали ветеринарно-санитарным требованиям. Кормление кур осуществляли согласно общепринятым нормам [4]. Пробы крови брали из подкрыловой вены за 7 суток перед вакцинацией, через 7 и 21 сутки после неё. Количество лейкоцитов и эритроцитов в крови подсчитывали в камере Горяева, лейкоцитарную формулу - в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимза (на трех стеклах, по 600 клеток на каждом, используя трехпольный метод Филипченко), концентрацию гемоглобина - гемиглобинцианидным методом [5]. Для выявления статистически значимых различий использован критерий Стьюдента по Н.А. Плохинскому [6]. В качестве значений физиологической нормы принимали интервалы соответствующих показателей, приведенные в литературе [5, 7, 8].
Результаты исследований и их обсуждение. Анализ полученных результатов (таблица 1) показал, что содержание эритроцитов в крови у 95-суточных кур-несушек подопытных групп было ниже нормативных значений с тенденцией к повышению в следующие периоды
исследования. При этом в крови у птиц 3, 4 и 5 групп через 21 сутки после вакцинации количество эритроцитов достоверно повышалось по сравнению с начальным периодом на 21,50, 21,03 и 13,55% соответственно. Это указывает на активизацию эритропоэза у птиц под влиянием натрия нуклеината, введенного до или после вакцинации. Уровень гемоглобина в крови у кур-несушек подопытных групп во все периоды исследования соответствовал наименьшим значениям нормы без существенных межгрупповых различий.
Содержание лейкоцитов в крови у кур-несушек подопытных групп во все периоды исследования соответствовало наиболее высоким нормативным значениям без существенных межгрупповых различий.
Таблица 1
Морфо-биохимическая характеристика крови молодняка кур-несушек_____________
Показатель Перед началом опыта, п=5 Группы, п=5 Через 7 сут. после вакцинации Через 21 сут. после вакцинации
Эритроциты, 1012/л 2,14±0,05 1, п=5 2,42±0,16 2,30±0,09
2, п=5 2,32±0,16 2,53±0,15
3, п=5 2,28±0,07 2,60±0,08 0А
4, п=5 2,27±0,12 2,59±0,12а
5, п=5 2,40±0,15 2,43±0,08а
Гемоглобин, г/л 88,00±2,61 1, п=5 88,00±2,45 85,60±3,66
2, п=5 88,80±2,06 86,00±3,95
3, п=5 91,00±2,76 88,40±1,17
4, п=5 88,00±2,28 82,00±1,26
5, п=5 91,40±3,09 83,20±2,58
Лейкоциты, 109/л 39,40±5,40 1, п=5 27,20±2,50 42,65±10,35
2, п=5 32,26±4,04 42,00±8,80
3, п=5 37,00±4,97 35,25±3,35
4, п=5 26,85±2,42 37,03±3,83
5, п=5 26,60±2,80 43,33±5,96
Палочкоядерные нейтрофилы, % 0,00±0,00 1, п=5 0,15±0,08 0,08±0,08
2, п=5 0,07±0,07 0,01±0,01
3, п=5 0,07±0,03 0,01±0,01
4, п=5 0,03±0,03 0,01±0,01
5, п=5 0,01±0,01 0,00±0,00
Сегментоядерные нейтрофилы, % 12,73±3,38 1, п=5 8,82±1,58 13,03±1,68
2, п=5 8,65±1,36 12,49±1,28
3, п=5 12,97±1,29 11,44±2,30
4, п=5 10,60±2,71 13,87±2,49
5, п=5 12,10±1,07 14,27±3,57
Сумма нейтрофилов, % 12,73±3,38 1, п=5 8,97±1,60 13,11±1,72
2, п=5 8,71±1,36 12,5±1,27
3, п=5 13,04±1,29 11,45±2,30
4, п=5 10,64±2,74 13,88±2,49
5, п=5 12,11±1,07 14,27±3,57
Сумма нейтрофилов, 109/л 4,91±1,31 1, п=5 2,40±0,36 5,27±0,97 0
2, п=5 2,94±0,81 5,21±1,21
3, п=5 4,97±1,05 3,83±0,71
4, п=5 3,03±0,99 5,34±1,36
5, п=5 3,14±0,24 5,76±1,59
Эозинофилы, % 0,89±0,19 1, п=5 1,27±0,14 2,70±0,52 0
2, п=5 1,44±0,24 0,89±0,12*
3, п=5 1,56±0,31 2,10±0,66
4, п=5 1,33±0,30 1,28±0,15
5, п=5 1,19±0,15 1,62±0,31
Эозинофилы, 109/л 0,35±0,09 1, п=5 0,33±0,02 1,26±0,50 0
2, п=5 0,45±0,08 0,39±0,10*
3, п=5 0,52±0,04 0,69±0,20
4, п=5 0,37±0,11 0,47±0,07
5, п=5 0,31±0,05 0,63±0,05 0
Базофилы, % 2,26±0,79 і, n=5 3,66±0,60 2,30±0,33
2, n=5 2,09±0,24 2,68±0,40
3, n=5 2,92±0,47 3,і7±0,53
4, n=5 4,3і±0,7і 2,98±0,25
5, n=5 3,і8±0,53 і,89±0,24
Моноциты, % 0,5і±0,і0 і, n=5 0,85±0,і3 0,69±0,04
2, n=5 0,72±0,09 0,52±0,06
3, n=5 0,86±0,06 в 0,5і±0,03 в
4, n=5 0,80±0,іі 0,5і±0,05
5, n=5 0,8і±0,09 0,70±0,07
Лимфоциты, % 83,69±4,27 і, n=5 85,30±і,49 8і,26±і,22
2, n=5 87,06±і,52 83,42±і,і9
3, n=5 8і,66±і,20 82,78±3,і3
4, n=5 82,98±2,95 8і,37±2,і9
5, n=5 82,7і±і,04 8і,52±3,62
Примечания: здесь и далее -* р<0,05 по сравнению с контролем, 0 - р<0,05 по сравнению с предыдущим периодом исследовании, ▲ - р<0,05 по сравнению с начальным значением.
Палочкоядерные нейтрофилы в крови у 95-суточных кур-несушек подопытных групп не обнаруживались. Через 7 суток после вакцинации эти клетки в наибольшем количестве регистрировались в крови у кур 1 группы, у птиц 2, 3, 4 и 5 групп их было меньше, чем у контрольных на 53,33, 53,33, 80,00 и 93,33% (р>0,05) соответственно. Через 21 сутки после вакцинации количество палочкоядерных нейтрофилов в крови у птиц 1, 2, 3 и 4 групп снизилось на 46,67, 85,71, 85,71, и 66,67% (р>0,05) соответственно по сравнению с предыдущим исследованием, а в мазках крови птиц 5 группы эти клетки не обнаруживались. Относительное количество сегментоядерных нейтрофилов и суммы нейтрофилов всех ядерных форм в крови у кур-несушек подопытных групп во все периоды исследования было значительно ниже нормативных значений без существенных межгрупповых различий. При этом достоверное увеличение абсолютного количества нейтрофилов было отмечено через 21 сутки после вакцинации только у птиц контрольной группы. Это свидетельствует о снижении потребности организма птиц, получавших натрия нуклеинат в микрофагах, то есть, о более благополучном состоянии организма птиц, получавших препарат.
Уровень эозинофилов в крови у 95-суточных кур был ниже нормативных значений, что косвенно указывает на высокую активность коры надпочечников [9, с.36-38, 10]. Через 7 суток после вакцинации достоверно значимых изменений относительного количества этих клеток в крови у птиц подопытных групп не отмечено, но установлена тенденция к повышению относительного количества эозинофилов в крови, наиболее выраженная у птиц 3 группы (на 75,28%). Это указывает на ослабление стрессорной реакции организма у кур через 7 суток после вакцинации, особенно у птиц, которым за 3 суток до неё ввели натрия нуклеинат. Через 21 сутки после вакцинации тенденция к повышению относительного количества эозинофилов в крови и, следовательно, к снижению выраженности стрессорной реакции сохранилась у птиц 1, 3, и 5 групп. При этом у птиц 2 группы количество этих клеток в крови было достоверно ниже, чем у контрольных (на 67,03%), что указывает на неблагоприятный эффект введения натрия нуклеината одновременно с вакцинацией и антистрессорное действие этого препарата, введенного до вакцинации.
Относительное количество базофилов в крови у кур-несушек подопытных групп во все периоды исследования существенно не различалось и было близко к наиболее высоким нормативным значениям, что косвенно указывает на невысокую активность щитовидной железы [10, 11, 12].
Уровень моноцитов в крови у 95-суточного молодняка кур-несушек был существенно ниже нормативных значений, что, видимо, связано с большим числом вакцинаций, последняя из которых была проведена в 90-суточном возрасте (против ларинготрахеита) и переходом моноцитов из крови в ткани с превращением их в макрофаги для участия в выработке специфических антител. Динамика изменений уровня моноцитов в крови кур-несушек 1, 2, 3, 4 и 5 групп в исследуемые периоды была одинакова: тенденция к повышению их числа через 7 суток после вакцинации на 66,67, 41,18, 68,63 (р<0,05), 56,86 и 58,82% соответственно и снижение их количества через к 21 сутки после вакцинации на 18,82, 27,78, 27,78, 40,70 (р<0,05), 36,25 и 13,58% соответственно. Эти тенденции, видимо, отражают степень напряженности иммунных реакций и активность костного мозга по продукции моноцитов, так как они не имеют костномозгового депо.
При этом изменения уровня моноцитов в крови кур 3 группы были достоверно значимы, что говорит о более выраженных процессах иммуногенеза при выпаивании препарата за 3 суток до вакцинации.
Уровень лимфоцитов в крови 95-суточных кур-несушек превышал нормативные значения, что при сниженном количестве нейтрофилов свидетельствует о развитии реакции переактивации адаптационного синдрома, по энергетическим затратам аналогичной стрессорной [13], что обусловлено, видимо, частыми вакцинациями. Существенных различий содержания в крови лимфоцитов у кур подопытных групп в исследованные периоды времени не отмечено.
Таким образом, выпаивание молодняку кур-несушек натрия нуклеината до вакцинации (за 3 суток или в половинной дозе за 3 и 6 суток), а также через 3 суток после нее обусловило активизацию эритропоэза. При этом у птиц, получивших препарат одновременно с вакцинацией, количество эозинофилов в крови было достоверно ниже, чем у контрольных (на 67,03%), что указывает на неблагоприятный эффект введения натрия нуклеината одновременно с вакцинацией и антистрессорное действие этого препарата, введенного до вакцинации. Более выраженные процессы иммуногенеза отмечены у птиц, которым выпаивали препарат за 3 суток до вакцинации.
The study of effect of time of watering nucleinate sodium and its dose on immunization of young hens on their hemogram showed that the use of the preparation before or after vaccination caused the activation of erythropoiesis. The absence of the birds of the experimental group 21 days after vaccination significant increase in the number of neutrophils in the blood (the sum of all nuclear forms) was used by the control birds, indicates a decrease needs of birds treated with sodium nukleinat in macrophages, that is, the more prosperous the condition of their body . Reduced, 21 days after vaccination, eosinophils in the blood of birds who have received preparation at the same time with it, marking an increase power of extraordinary factors and prostress effect of preparate introduced at this time. Significant fluctuations in the level of monocytes in the blood of birds that received sodium nukleinat to 3 days before vaccination, point to a more pronounced immunogenesis processes compared to other groups of birds.
The key words: young hens, vaccination, sodium nucleinate, haemogram.
Список литературы
1. Лебедев, К.А. Иммунограмма в клинической практике. / К.А. Лебедев, И.Д. Понякина. М.: Наука, 1990. 224 с.
2. Земсков, В.М. Иммуномодулирующая активность мононуклеотидов РНК / Земсков, В.М., Родионов С.В., Храмцов А.В. // Микробиология, эпидеиология и иммунобиология.1988. №2.
3. Красников, Г.А. Влияние иммуномодулирующих средств на Т- и В-системы иммунитета у телят и устойчивость их к неонатальным диареям / Красников Г.А.; Цымбал А.М.; Кленина Н.В.; Конаржевский К.Е.; Тертышник В.И.; Журавлев В.М.; Соса Н.Н.; Лебедева Е.П.; Антонов В.С.; Сербиненко Т.Н. // Ветеринария. К.: Урожай, 1986. Вып. 61.
4. Нормы и рационы кормления сельскохозяйственных животных. Справочное пособие. / Под ред. А.П. Калашникова, В.И. Фисинина, В.В.Щеглова, Н.И. Клейменова: 3-е изд. перераб. и доп. М.: Агропромиздат, 2003. 456 с.
5. Методы ветеринарно-клинической лабораторной диагностики: Справочник / И.П. Кондрахин, А.В. Архипов, В.И. Левченко и др.; Под ред. И.П. Кондрахина. М.: КолосС., 2004. 520 с.
6. Плохинский, Н.А. Биометрия. - Из-во Сибирского отделения АН СССР, Новосибирск, 1961. 362 с.
7. Карпуть, И.М. Гематологический атлас сельскохозяйственных животных // Минск: Ураджай, 1986. 183 с.
8. Чумаченко В.Е., Высоцкий A.M., Сердюк Н.А., Чумаченко В.В. Определение естественной резистентности и обмена веществ у сельскохозяйственных животных. Киев: Урожай, 1990. 136 с.
9. Бузлама, В.С. Общая резистентность животных при стрессе и ее регуляция адаптогенами. / В.С. Бузлама. // Доклады Россельхозакадемии, 1996. № 1.
10. Исследование системы крови в клинической практике. / Под ред. Г.И.Козинца и В.А. Макарова. М.: Триада-Х, 1998. 480 с.
11. Кудрявцев, А.А. Клиническая гематология животных. / А.А. Кудрявцев, Л.А. Кудрявцева. М.: Колос, 1974. 399 с.
12. Мышкин, К.И. Базофильные лейкоциты / К.И. Мышкин. Саратов, 1979. 125 с.
13. Гаркави, Л.Х. Повышение сопротивляемости организма с помощью адаптационных реакций тренировки и активации на разных уровнях реактивности организма (Активационная
терапия). // Методические рекомендации. / Л.Х. Гаркави, Е.Б. Квакина, М.А.Уколова и др. Ростовский научно-исслед. онкологический институт. Ростов-на-Дону, 1982. 14 с.
Об авторах
Крапивина Е. В.- доктор биологических наук, профессор Брянской ГСХА, Krapivina_e_v@ mail.ru
Василенко А. И.- аспирант кафедры нормальной и патологической морфологии и физиологии животных Брянской ГСХА, Sane4ka@mail.ru
EFFECT OF TIME AND DOSAGE OF SODIUM nukleinat IN IMMUNIZATION on hemogram OF YOUNG hens
EV Krapivina, AI Vasilenko Bryansk Agricultural Academy
Об авторах
Крапивина Елена Владимировна, доктор биологических наук, профессор Брянской
ГСХА.
Дом. адрес - 423365, Брянская обл., Выгоничский р-н, с. Кокино, ул. Советская, д. 5, кв. 14. Телефон - 89532712716
Адрес электронной почты - Кгаршга_е_у@ mail.ru
Василенко Александра Ивановна, аспирант кафедры нормальной и патологической морфологии и физиологии животных Брянской ГСХА.
Дом. адрес - 241019, г. Брянск, ул. Смоленская, д. 1.
Телефон - 89206055875
Адрес электронной почты - Sane4ka@mail.ru
