CC BY
17
ОРИГИНАЛЬНЫЕ РАБОТЫ
© Л. С. Агаджанова, Т. А. Румянцева, 2011 г. УДК 616.33-089.85]-092.4
Л. С. Агаджанова, Т. А. Румянцева
ВЛИЯНИЕ ВАГОТОМИИ НА АКТИВНОСТЬ NADPH-ДИАФОРАЗЫ В НЕЙРОЦИТАХ ИНТРАМУРАЛЬНЫХ ГАНГЛИЕВ РАЗНЫХ ОТДЕЛОВ ЖЕЛУДКА КРЫС
Кафедра анатомии человека Ярославской государственной медицинской академии
Среди физиологических функций NO в пищеварительной системе наиболее важными являются регуляция сосудистого тонуса, участие в передаче нервных импульсов, а также обеспечение моторной функции [4, 6, 7]. NO-синтезирующие нейроциты распределены широко в мышечном и подслизистом нервных сплетениях у морских свинок, у крыс и у человека [1, 2, 4]. Учитывая сложность организации перистальтики желудка [3, 5], выраженные различия строения стенки его отделов, представляется актуальным установление топологических особенностей активности NADPH-диа-форазы - маркера NO-синтазы - в нейроцитах интра-муральных ганглиев различных отделов желудка в норме и при ваготомии.
Работа выполнена на 70 крысах-самцах Вистар (90150 сут.). Материалом исследования служили участки различных отделов желудка. Активность NADPH-d выявляли на криостатных срезах методом В. Т. Hope и S. R. Vin-sent. Экспериментальным животным проводили под-диафрагмальную перерезку вентрального вагального ствола. Крыс выводили из эксперимента на 3-и, 5-е, 7-е, 14-е, 30-е, 60-е сутки после операции путем передозировки эфирного наркоза. Для обработки данных использовали MS Office Excel, ImageJ.
Во всех отделах желудка в интра-муральных ганглиях интактных крыс выявлены NADPH-d-позитивные нейроциты (табл. 1). Наименьшее количество клеток содержится в ганглиях вентральной и дорсальной стенок пищеводного отдела, наибольшее -в ганглиях вентральной стенки тела и малой кривизны желудка. Активность NADPH-d имеет топологические особенности (табл. 2). Наименьшая активность определяется в пилоричес-ком отделе, наибольшая - в дорсальной стенке кардиального отдела.
В кардиальном отделе желудка после ваготомии отмечается уменьшение
количества нейроцитов - на 3-и сутки в вентральной стенке 48 %, в дорсальной стенке - 13 %, на 5-е сутки - 51 и 31 %, и на 60-е сутки - 63 и 45 % соответственно. Активность фермента в цитоплазме нейроцитов снижается, особенно в вентральной стенке, на 60-е сутки.
В пищеводном отделе количество нейроцитов уменьшается на 34-46 % в зависимости от срока наблюдения (табл. 1). Различия между вентральной и дорсальной стенками отдела недостоверны. Активность диафоразы в нейроцитах ганглиев стенки пищеводного отдела с 3 по 30-е сутки не отличалась от контроля, только на 60-е сутки в вентральной стенке уменьшалась.
Тело желудка крыс отличается максимальным количеством нейроцитов в интрамуральных ганглиях. После ваготомии на 3-и сутки количество нейроцитов снижается в 2 и более раза, к концу наблюдения - ниже контроля на 63 % в вентральной стенке, на 52 % в дорсальной стенке, на 64 % на малой и на 54 % на большой кривизне. В стенке тела желудка активность во всех исследованных зонах изменялась однотипно - снижение на 3-и и 5-е сутки, на 7-е и 14-е сутки подъем, превышающий контроль, с последующим снижением на 30-е сутки. На 60-е сутки активность диафоразы в нейроцитах ганглиев вентральной и дорсальной стенок, а также малой кривизны достоверно не отличается от контроля, сниженной остается активность на большой кривизне (40,6± 1,49).
В пилорическом отделе после ваготомии отмечается резкое снижение количества нейроцитов в ганглиях. На 3-и сутки после операции в вентральной стенке привратника убыль составляет 47 %, в дорсальной - 57 % и сохраняется без изменений до 60 суток. На фоне убыли количества нейроцитов активность фермента с 3 по 30-е сутки после ваготомии повышена. К концу наблюдения активность фермента достоверно от контроля не отличалась.
Установлено, что при ваготомии число КАВРН-ё-нейроцитов резко снижается, особенно в зонах высокой плотности нейроцитов, и не зависит от близости
Таблица 1
Среднее количество NADPH-d-пoзитивныx нейроцитов в интрамуральных ганглиев желудка крыс в норме и при ваготомии
Показатель Норма Сутки после ваготомии
3 5 30 60
Пищеводный отдел, вентральная 4±0,35 3±0,25 2±0,21 2±0,18 3±0,18
стенка
Пищеводный отдел, дорсальная 5±0,47 4±0,25 * 3±0,24 * 3±0,16 * 3±0,22
стенка
Кардиальный отдел, вентральная 8±0,56 * 5±0,31 * 4±0,45 * 3±0,15 # 3±0,22
стенка
Кардиальный отдел, дорсальная 6±0,52 * 5±0,39 * 4±0,33 * 3±0,18 *# 3±0,26
стенка
Тело, вентральная стенка 10±0,61 * 4±0,29 * 4±0,39 3±0,19 # 4±0,27
Тело, дорсальная стенка 7±0,49 5±0,33 4±0,41 3±0,25 # 3±0,17
Малая кривизна 10±0,54 5±0,45 4±0,34 2±0,26 # 4±0,23
Большая кривизна 8±0,41 * 5±0,32 4±0,41 3±0,22 # 4±0,35 #
Пилорический отдел, вентральная 5±0,37 * 3±0,24 3±0,31 * 3±0,25 # 3±0,23 *
стенка
Пилорический отдел, дорсальная 8±1,49 * 3±0,34 3±0,35 3±0,20 # 4±0,20 *
стенка
Примечание: * различия достоверны по отношению к другим отделам, р<0,05; различия достоверны по отношению к предыдущим срокам, р<0,05.
УЧЕНЫЕ ЗАПИСКИ СПбГМУ ИМ. АКАД. И. П. ПАВЛОВА • ТОМ XVIII • №-2 • 2011
Таблица
Активность NADPH-d в нейроцитах интрамуральных ганглиев желудка крыс в норме и при ваготомии
Показатель Норма Сутки после ваготомии
3 5 30 60
Пищеводный отдел, 56,6±4,02 51,9±1,36 54,7±2,71 # 55,1±1,99 # 46,1±2,08
вентральная стенка
Пищеводный отдел, 52,4±2,18 53,9±1,24 * 55,5±2,07 # 55,1±2,09 48,1±2,54
дорсальная стенка
Кардиальный отдел, 53,5±2,82 * 49,2±1,26 * 46,1±2,39*# 48,8±1,95 * 42,2±2,05 *
вентральная стенка
Кардиальный отдел, 53,5±2,82 * 51,6±1,29 46,1±1,97 # 54,3±1,01 * 51,2±1,87 *
дорсальная стенка
Тело, вентральная 54,6±2,62 * 50,1±1,44 * 47,7±2,56 # 42,2±2,33 *# 51,2±2,06 #
стенка
Тело, дорсальная 53,5±1,75 49,2±2,05 50,8±1,86*# 50,4±2,74 *# 54,3±3,06 *
стенка
Малая кривизна 51,8±2,79 49,6±2,13 44,5±1,97*# 44,5±1,6 *# 47,7±1,91 *
Большая кривизна 52,4±3,31 48,1±1,24 51,9±2,83 # 47,7±1,49 * 40,6±1,49 *#
Пилорический отдел, 44,2±3,12 50,4±1,46 * 47,6±1,83 *# 54,4±2,70 # 41,4±1,97
вентральная стенка
Пилорический отдел, 45,7±2,77 53,5±1,83 * 47,3±3,30 # 60,5±0,53 *# 50,4±2,08 *
дорсальная стенка
Примечание: * различия достоверны по отношению к другим отделам, р<0,05; # различия достоверны по отношению к предыдущим срокам, р<0,05.
оперативного вмешательства, изменения активности фермента имеют региональные особенности. Анализ изменений по отделам желудка показал, что в целом реакция вентральной и дорсальной стенок во всех отделах была однотипной, т. е. каждый отдел желудка реагировал на ваготомию как единая подсистема, несмотря на то, что был поврежден вагальный ствол, который содержит преимущественно преганглионарные волокна, связанные с ганглиями вентральной стенки желудка.
Таким образом, NO-позитивная часть нервного аппарата желудка обладает высокой степенью автономности и способна координировать реакции функционально различных отделов, организуя целостную органную реакцию.
ЛИТЕРАТУРА
1. Дмитриева, О. А. Гистохимия NADPH-диафоразы репродуктивной системы самцов в норме и при воздействии неблагоприятных факторов / О. А. Дмитриева [и др.] // Успехи современного естествознания. Биолог. науки. - 2003. - № 6. - С. 18-22.
2. Belai, A. Colocalization of nitric oxide synthase and NADPH diaphorase in the myenteric plexus of the rat gut / A. Belai [et al] // Neurosci. Lett. - 1992. - Vol. 143. - P. 60-64.
3. Krantis, A. A method for simultaneous recording and assessment of gut contractions and relaxations in vivo / A. Krantis [et al] // Can. J. Physiol. Pharmacol. - 1996. - Vol. 74. - P. 894-903.
4. Modlin, I. M. Evidence for cholinergic dependence of pancreatic polypeptide (PP) release by bombesin - a possible application / I. M. Modlin [et al] // Surgery. - 1980. - № 88. - P. 75-84.
5. Nishizaki, K. Induction of neuronal nitric oxide synthase by sympathetic denervation is mediated via alpha 2-adrenoceptors in the jejunal myenteric plexus / K. Nishizaki [et al] // Brain Res. - 2003. - № 65 (1-2). - P. 121-129.
6. Rand, M. J. Nitric oxide as a neurotransmitter in peripheral nerves : nature of transmitter and mechanism of transmission / M. J. Rand, C. G. Li // Ann. Rev. Physiol. - 1995. - № 57. - P. 659-682.
7. Takahashi, T. Pathophysiological significance of neuronal nitric oxide synthase in the gastrointestinal tract / T. Takahashi // PJ Gastroenterol. - 2003. - № 38 (5). - P. 421-430.
РЕЗЮМЕ
Л. С. Агаджанова, Т. А. Румянцева
Влияние ваготомии на активность NADPH-диафоразы в нейроцитах интрамуральных ганглиев разных отделов желудка крыс
После поддиафрагмальной вентральной ваготомии в интрамуральных ганглиях различных отделов желудка отмечается снижение количества NADPH-d-позитивных нейроцитов и разнонаправленные изменения активности диафоразы. Анализ изменений по отделам желудка показал, что в целом реакция вентральной и дорсальной стенок во всех отделах была однотипной, т. е. каждый отдел желудка реагировал на ваготомию как единая подсистема, несмотря на то, что был поврежден вагальный ствол, который содержит преимущественно преганглионарные волокна, связанные с ганглиями вентральной стенки желудка.
Ключевые слова: ваготомия, NADPH-диафораза, желудок, крыса.
SUMMARY
L. S. Agadzhanova, T. A. Rumyanceva
Effect of vagotomy on the activity of NADPH-diaphorase in intramural ganglia neurocytes in different parts of the stomach in rats
Subdiaphragmatic ventral vagotomy leads to a decrease in the number of NADPH-d positive neurocytes in the intramural ganglia of different parts of the stomach and to changes in diaphorase activity. Analysis of the changes of the stomach showed that in general the response of the ventral and dorsal walls of all parts had the same type, ie each division of the stomach responded to vagotomy as a single subsystem despite the fact that the vagal trunk which contained predominantly preganglionic fibers associated with the ventral ganglia of the stomach wall had been damaged.
Key words: vagotomy, NADPH-diaphorase, stomach, rat.
